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羊膜移植与自体角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉疗效比较
目的 比较羊膜移植与自体角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉的临床疗效.方法 65例(71眼)翼状胬肉患者分为2组,分别采用羊膜移植术和自体角膜缘干细胞移植术治疗,术后随访3～18个月,观察两组的并发症及复发情况.结果 羊膜移植组8眼复发,复发率22.8%;角膜缘干细胞移植组1眼复发,复发率2.86%,两组比较差异有显著性意义(P＜0.05).结论 自体角膜干细胞移植治疗翼状胬肉效果优于羊膜移植,复发率低.
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人羊膜修复腱鞘缺损的实验研究
目的 探讨人羊膜修复鸡足趾腱鞘缺损后防止肌腱粘连的可行性和有效性.方法 取行剖腹产术产妇自愿捐赠的胎盘,制备大小为1.5 cm×1.0 cm的羊膜片.3～6月龄健康雄性来亨鸡40只,体重(1.86±0.04)kg,取双足第3趾制备肌腱、腱鞘损伤模型.“8”字缝合修复肌腱后,右足采用羊膜片修复缺损腱鞘(A组),左足缺损腱鞘不作处理(B组).术后1、2、4、6周各取10只实验动物行大体及组织学观察,并按照Tang等肌腱粘连大体观察分级标准进行分级,生物力学试验测定肌腱滑移度及总屈趾角度.结果 术后实验动物均存活至实验完成,切口均愈合良好.随术后时间延长,大体及组织学观察显示两组均有假鞘(新生腱鞘)形成,但A组假鞘较B组成熟、光滑.术后1、6周A组肌腱粘连分级均明显优于B组,差异有统计学意义(P＜ 0.05).生物力学试验测定示,术后1、2周两组肌腱滑移度比较,差异均无统计学意义(P＞ 0.05),4、6周时A组肌腱滑移度均较B组长(P＜0.05).术后1、2、4、6周A组总屈趾角度均小于B组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 采用人羊膜修复鸡腱鞘缺损能有效预防肌腱粘连,利于肌腱滑动功能的恢复.
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两种阴道成形术式的临床应用比较
目的 对比两种阴道成形术的临床应用价值.方法 1996年1月～2005年3月,对37例应用羊膜移植阴道成形术和26例腹腔镜下改良Vecchitti阴道成形术进行对比,比较分析其治疗先天性无阴道的优缺点,并分别对两种术式应用的阴道模型进行了相应改进.结果 羊膜移植阴道成形术组37例均取得成功,术后随访35例,随访时间2个月～4年;发生羊膜感染3例,瘢痕挛缩2例,其中1例于术后13个月行瘢痕切开术获成功,另1例拒绝再次手术.腹腔镜下改良Vecchitti阴道成形术组手术26例均取得成功,术后均获随访,随访时间2个月～2.5年,无阴道感染及瘢痕挛缩.两种术式成形的阴道宽敞,黏膜呈粉红色,有皱壁、润滑、弹性好,外阴外观无改变,性生活满意.两种术式中的改进之处均取得了良好的临床应用效果.结论 腹腔镜下改良Vecchitti阴道成形术与羊膜移植阴道成形术比较具有明显优势,有推广价值.
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新鲜羊膜移植在结膜囊成形术中的应用
目的探讨新鲜人羊膜移植治疗结膜囊狭窄临床应用的可行性及疗效. 方法 2001年3月～2003年3月,用新鲜羊膜对30例(30只眼)结膜囊狭窄患者行羊膜移植结膜囊成形术.术前在无菌条件下切取羊膜组织,将其上皮面向上平铺于手术粘贴纸上,剪成5 cm×8 cm大小数块,放入含庆大霉素(4×106 U/ml)生理盐水的密封湿房中,4℃冰箱保存12小时.术中充分分离球结膜与筋膜组织达眶缘,游离并剪除结膜下粘连的瘢痕组织,修剪羊膜组织使其稍大于结膜缺损区约10 mm,其上皮面向上置于结膜缺损区,用7/0尼龙线将其连续缝合于结膜游离创缘上;同时行下穹窿加深成形术,部分患者行羟基磷灰石义眼座二期植入术和/或外伤性上睑下垂矫正术. 结果 30例(30只眼)均于术后10、14天拆除羊膜移植缝线及下穹窿加深成形术缝线,所有移植羊膜均成活,结膜囊下穹窿充分加深,配戴义眼效果满意.术后随访3～18个月,未发现植片感染、挛缩,以及免疫排斥反应和羊膜溶解,手术获得成功. 结论新鲜人羊膜移植部分结膜囊成形术是一种取材简便、疗效肯定的手术方法.
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羊膜移植治疗眼烧伤疗效的观察
目的评价羊膜移植治疗眼部烧伤的疗效. 方法 2000年10月～2002年5月,对20例患者(28眼)采用羊膜移植治疗眼烧伤,其中碱烧伤6例(10眼),酸烧伤8例(10眼),热烧伤6例(8眼).年龄8～45岁,平均28.6岁.烧伤部位包括角膜、结膜.受伤至手术时间1～21天,平均10天. 结果 28眼术后3～7天眼部炎症控制,角、结膜均未见继续溶解,无穿孔,无虹膜萎缩,视力有不同程度提高; 16眼角膜恢复透明,4眼角膜白斑,8眼全角膜浑浊.全部患者均保存了眼球,眼表稳定,无免疫排斥反应及继发感染发生. 结论羊膜移植可以减轻炎性反应,减少新生血管的生成,抑制纤维组织增生,对重建眼表功能及保存眼球有较高的价值,可有效地用于眼部烧伤的治疗,烧伤后手术愈早效果愈好.
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人羊膜活性皮肤替代物修复巨痣切除术后创面的可行性及疗效研究
目的 探讨临床应用以人羊膜为基质的活性皮肤替代物(amniotic membrane-living skin equivalent,AM-LSE)修复皮肤缺损的可行性.方法 2016年7月收治1例5岁颈肩背部先天性巨痣患儿.首先取其正常皮肤分离扩增表皮角化细胞和真皮成纤维细胞,再以自愿捐赠的人去上皮AM为基质,经气液面培养10d构建含有真皮基质和重层分化表皮的AM-LSE.对AM-LSE行大体及组织学观察.手术切除巨痣至深筋膜层,遗留创面面积为20 cm×15 cm;覆盖胶原蛋白海绵人工真皮,2周后改用AM-LSE贴敷于肉芽创面,之后常规换药.术后观察AM-LSE成活以及创面修复效果.结果 气液面培养10d后,成功构建具有真皮层以及重层分化良好的表皮层的AM-LSE.临床修复术后见AM-LSE贴敷良好,逐渐扩大融合,至术后6个月其色泽接近正常皮肤,质地柔软,皮片间隙为淡红色瘢痕.组织学观察,可见呈柱状紧凑排列的基底层细胞,以及分化的棘细胞层、颗粒层以及角质层.真皮层内分布大量成纤维细胞以及血管,未见明显炎性细胞浸润.结论 采用自体皮肤细胞构建的AM-LSE移植修复创面可行,术后能长期存活,且无排斥反应.
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两种生物衍生材料修复兔角膜浅层缺损的初步实验研究
目的比较脱细胞冻干羊膜与脱细胞冻干牛角膜基质在修复兔角膜浅层缺损后的机体反应,以寻找适合的组织工程角膜支架.方法新鲜健康人胎盘羊膜按罗静聪等制备方法处理,冻干后消毒备用.牛角膜经0.25%胰蛋白酶消化,生理盐水漂洗后,冻干,消毒备用.雌性日本大耳白兔20只,随机分为A、B组,每组10只.常规麻醉消毒后,采用7.5 mm直径环钻造出约1/3角膜厚度的缺损.A组采用复水后的脱细胞冻干羊膜修复;B组采用脱细胞冻干牛角膜基质修复.术后裂隙灯显微镜下观察植片和新生血管状况,并于术后2、4、8周取标本,HE染色,组织学观察.结果术后两组植片无溶解、脱落,于8周降解完全,角膜中央缺损区域大部分恢复透明.两组均有新生血管长入角膜,两组新生血管长入范围比较,差异无统计学意义(P>0.05).组织学观察2周时两组均有较重的炎性反应,成纤维细胞增生,胶原排列紊乱;4周时炎性反应均减轻,植片区域可以见到新生血管长入;8周时均有较多的成纤维细胞存在,并有少量瘢痕形成.结论脱细胞冻干羊膜与脱细胞冻干牛角膜基质修复角膜浅层缺损,仍能引起一定程度的排斥反应,需要进一步的改进.
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羊膜的基础和临床应用研究进展
目的总结近年来羊膜的基础及临床应用研究进展. 方法广泛查阅国内外有关羊膜的基础和临床应用研究文献,总结其研究成果. 结果羊膜来源广泛、价格便宜、对细胞相容性好、抗原性低,羊膜上皮层含有羊膜上皮细胞及多种生长因子,基底膜含有Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型胶原,纤维连接蛋白及糖蛋白,这些独特的结构使其对多种细胞生长有促进作用,羊膜已在眼科临床中得到广泛应用. 结论使用羊膜不违背伦理,随着对羊膜的进一步深入研究,以及组织工程、生物工程对材料需求的进一步加大,其应用会更加广泛.
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前置血管的病因、诊断及处理
正常情况下,脐带直接附着于胎盘中心或偏心部位.大约有1%的单胎妊娠,脐带附着在胎盘旁的胎膜上,部分脐血管穿行于胎膜和羊膜之间,即为脐带帆状附着.与正常脐血管不同,帆状附着的脐血管表面缺乏华通氏胶,仅包裹着一层羊膜,又得不到胎盘的保护,因此容易受压或破裂.
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脐带的正常解剖结构和先天异常
脐带(umbilical cord)是连于胚胎脐部与胎盘间的条索状结构.脐带外被羊膜,内含体蒂分化的粘液性结缔组织.结缔组织内除有闭锁的卵黄囊蒂和尿囊外,还有脐动脉和脐静脉.脐带是胎儿从母体获取营养和排泄废物的重要途径.
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足月妊娠胎盘绒毛膜血管瘤合并羊水过多1例
1 病例报告患者27岁,因孕39周,自觉胎动减少2天,于2003年11月20日入院.4年前有剖宫产史,术中术后均未见异常.体格检查:T 36.8 ℃,P 72/min,BP 120/80 mmHg,心肺无异常,双下肢水肿(+).产科检查:宫高36 cm,腹围106 cm,胎方位LOA,胎心率140次/min,先露头浮;宫口未开,胎膜完整.入院后行胎儿彩超检查:胎盘内见8.6 cm× 6.8 cm 不均质低回声包块,内见血流信号,边界清,向羊膜内突起;羊水大深度约8.5 cm,羊水指数23.
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兔羊膜成体干细胞培养及体外定向诱导神经细胞分化
目的 观察体外分离、培养的兔羊膜成体干细胞(ADSC)定向诱导神经细胞的分化结果.方法 新西兰雌兔羊膜分离、培养ADSC.实时定量聚合酶链反应(PCR)检测羊膜ADSC的纤连蛋白(Fibronectin)、巢蛋白(Nestin)、波形蛋白(Vimentin) mRNA的表达水平.单克隆形成实验证实羊膜ADSC是否具有自我复制能力.培养成功的ADSC中加入神经分化诱导培养基诱导神经细胞分化.诱导分化5d后,免疫荧光染色检测β-微管蛋白(tubulin)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果 培养的ADSC在24 h后逐渐从羊膜组织中移行出；72 h可见明显的多角形细胞富集在羊膜组织周边；120 h后多角形细胞致密地分布于羊膜四周.分裂后的子代细胞形态同父代细胞.单克隆形成实验结果证实羊膜ADSC具有自我复制能力.实时定量PCR检测结果显示,羊膜ADSC的Nestin、Vimentin、Fibronectin mRNA分别是脾脏细胞同种分子表达量的15.79、1.91、7.65倍,两者差异有统计学意义(Z=-5.243、-3.972、-2.524,P＜0.05).免疫荧光染色结果显示,β-tubulin在大部分细胞的胞质中表达；GFAP在部分细胞的细胞质中表达.结论 羊膜ADSC具有自我复制能力,在合适条件下能够分化成神经元和神经胶质细胞.
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羊膜匀浆治疗实验性孔源性视网膜脱离
目的 观察和探讨羊膜匀浆在封闭视网膜裂孔中的作用及其机制.方法 40只新西兰白兔随机分为A、B、C、D 4组,其中A、C为治疗组,B、D为对照组,每组各10只兔.每只兔随机取1只眼进行实验.经扁平部玻璃体切割,视网膜造孔,人为造成视网膜脱离,气液交换.治疗组裂孔表面滴加0.1 ml羊膜匀浆,而对照组滴加0.1 ml磷酸盐缓冲液(PBS);术毕视网膜复位,20%SFs眼内填充.A、B组于手术后14 d处死动物,C、D组于手术后28 d处死动物,进行光学显微镜、电子显微镜和免疫组织化学染色检查.结果 手术后14 d,A组视网膜复位6只眼,占60%,B组视网膜复位2只眼,占20%(P=0.021).手术后28 d,C组视网膜复位8只眼,占80%,D组视网膜复位3只眼,占30%(P=0.046).各组之间视网膜复位的比例比较,差异有统计学意义(P<0.05).治疗组手术后出现轻度前节炎症反应,经局部应用糖皮质激素后炎症于3～5 d消退.光学显微镜检查结果 显示,治疗组应用羊膜后在视网膜裂孔边缘有多层成纤维细胞样细胞增生,与其下脉络膜和视网膜色素上皮细胞发生粘连.对照组视网膜裂孔边缘细胞增生明显减少,视网膜不能和脉络膜形成粘连.电子显微镜检查与光学显微镜检查结果 一致.成纤维细胞样细胞免疫组织化学染色显示胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性,提示裂孔边缘增生细胞主要是视网膜胶质细胞.结论 羊膜匀浆有助于封闭视网膜裂孔,通过刺激裂孔边缘视网膜胶质细胞增生,促进视网膜脱离复位.
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羊膜细胞培养液对体外培养视网膜组织中一氧化氮及合成酶的影响
目的观察羊膜细胞培养液对成年家兔体外培养视网膜组织的一氧化氮(NO)及一氧化氮合成酶(NOS)的影响,旨在为视网膜移植提供抗氧化的保护方法.方法健康成年家兔30只,30只眼(取右眼),分成3组:Ⅰ(新鲜视网膜组)、Ⅱ(常规培养液组),Ⅲ(羊膜细胞培养液组);将Ⅱ、Ⅲ组视网膜组织块放入相应培养基中培养1周.3组视网膜取材后进行NO、NOS含量的测定.结果与Ⅰ组相比,Ⅱ组NO、NOS值显著性增高(t=3.821、3.854,P＜0.001);Ⅲ组与Ⅰ组NO值、NOS含量的差异比较无统计学意义(t=1.657、1.745,P＞0.05).结论羊膜细胞培养液有清除自由基、增强抗氧化能力的作用.
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羊膜上皮细胞的生物学特性和骨向分化
人羊膜上皮细胞(hAEC)位于羊膜内层,外侧包绕人羊膜间质细胞(hAMC)和细胞外基质.hAEC具有典型的上皮细胞样形态和超微结构,而hAMC表现出上皮-间质混合超微结构特征.这些来自于羊膜的特殊干细胞群可表达八聚体4、关键蛋白、氧化还原调节器1和Y染色体性别决定区相关高速泳动族蛋白盒2等干细胞标志物,可能较成体干细胞具有更高的多向分化潜力.体外骨诱导培养均可促进hAEC和hAMC的碱性磷酸酶水平增高,1型胶原和骨钙蛋白等成骨标志物表达,细胞外矿化组织增加.近的研究显示,将羊膜上皮细胞植入动物骨缺损后,可观察到细胞快速广泛地成骨分化,且细胞可在移植部位存活45 d并持续形成新生骨.作为一类处于胚胎干细胞和成体干细胞过渡阶段的特殊干细胞样细胞,hAEC在颌面部骨组织再生方面具有潜在的研究和应用价值,值得国内外同行共同探索研究.
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羊膜代阴道成形术11例临床分析
先天性无阴道手术治疗方法较多,1935年Brindean采用新鲜羊膜作为覆盖人工阴道腔穴的材料后,此方法被广泛采用.我院自2003年1月至2008年1月共收治先天性无阴道患者11例,均成功实施羊膜代阴道成形术,收到满意效果.
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羊膜束带综合征合并胎儿多发性畸形1例
患者,女,18岁,住院号15197,孕1产0,末次月经2003年2月15日.因下腹胀痛伴阴道少量流血3+小时于2003年9月26日晚急诊入院.入院诊断:①G1P07+月孕活胎先兆早产.②前置胎盘?即行保胎治疗.于第二天上午9点11分行B超检查,胎儿双顶径约71mm,在胎儿头顶部可见一混合性块影,大小约58mm×50mm,向外突起,该处颅骨光环缺损.
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脱细胞生物羊膜对甲床手术创面恢复的作用
目的 明确脱细胞生物羊膜应用于甲床二期愈合的甲外科手术中,是否有促进创面愈合的作用.方法 将行甲床手术后创面二期愈合的患者随机分配到治疗组(n=19)和对照组(n=19),甲床手术后第1天换药时,治疗组使用羊膜后覆盖凡士林纱布;对照组仅覆盖凡士林纱布.记录换药后1h、4h、8h、12 h、24 h、36 h、48 h、72 h患者疼痛评分;记录创面愈合时间、甲生长时间、患者和医生对外观的满意度.结果 两组患者基线一致,从换药后4h开始至换药后48 h,两组疼痛评分差异有统计学意义(P＜0.05).换药后24 h治疗组全部患者疼痛消失.创面愈合时间:对照组平均需要(17.68±2.86)d,治疗组则需要(12.37±2.48)d,两者差异有统计学意义(P＜o.05).甲床手术后第1天到甲完全生长所需时间:对照组平均需要(15.63±2.00)周,治疗组则需要(13.95±1.72)周,两者差异有统计学意义(P=0.016).甲完全生长后,甲单位外观满意度评分:对照组(7.58±1.18)分,治疗组(7.61±1.38)分,两组间差异无统计学意义(P=0.919).结论 脱细胞生物羊膜可以促进甲床手术创面愈合.
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人类羊膜细胞表达神经细胞和脂肪细胞表型
目的 探索羊膜组织来源的细胞向神经细胞分化的可能性,为神经移植探寻新的细胞来源.方法 采用组织块培养法培养羊膜细胞,酶消化法对细胞进行传代,应用免疫细胞化学的方法 对细胞进行鉴定.结果 从羊膜组织成功培养出细胞,细胞贴壁生长,在体外短期内可以稳定增殖和传代,传代细胞在神经干细胞的培养基中可以形成典型的球状结构,类似神经干细胞的神经球.细胞表达波形蛋白和巢蛋白两种神经干细胞的标志物,也表达神经元的标志物神经元特异性烯醇化酶和βⅢ管蛋白;大部分细胞表达多巴胺能神经元的标志物酪氨酸羟化酶.少数细胞表达星型胶质细胞的标志物胶质纤维酸性蛋白.部分细胞可以随机分化为平滑肌细胞,表达平滑肌肌动蛋白;在诱导条件下,羊膜细胞也可以分化为脂肪细胞.结论 羊膜组织来源的细胞可以表达神经细胞的标志物,能够分化为脂肪细胞和平滑肌细胞,这种细胞对于神经移植有潜在的应用前景.
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羊膜移植术和角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉的临床对比分析
目的:分析比较羊膜移植术和角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉的临床效果.方法:将61例翼状胬内患者随机分为两组,其中28例行羊膜移植术治疗,33例施行角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉,术后随访都为18个月.结果:羊膜移植组复发8例,复发率为28.57%.角膜缘干细胞移植治疗组复发3例,复发率为6.1%.两组比较有显著性差异(γ2=3.889,P＜0.05).同时角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉组角膜创面愈合时间4.3天,羊膜移植组角膜创面愈合时间5.2天左右.两组比较有显著性差异(P＜0.05).结论:角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉复发率较羊膜移植组低.同时角膜创面恢复快,简单易行,值得推广应用.
