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联合检测血浆中BIRC5、MYC的自身抗体水平在宫颈癌诊断中价值分析
目的:探讨联合检测血浆中BIRC5、MYC的自身抗体水平在宫颈癌诊断中的价值,以期寻找早期诊断宫颈癌的新型肿瘤标志物.方法:选取2014年2月-2015年7月本院收治的宫颈癌患者91例作为宫颈癌组,另选取同期在本院体检的86例健康女性作为对照组.采用ELISA法检测两组外周血中BIRC5、MYC及BIRC5与MYC混合抗原的自身抗体水平,并进行组间比较.结果:宫颈癌组外周血中BIRC5、MYC自身抗体水平均高于对照组,比较差异均有统计学意义(P＜0.05):两组BIRC5与MYC混合抗原的自身抗体水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05);ROC分析结果显示,BIRC5自身抗体检测的曲线下面积(AUC)、特异性、敏感性、阳性预测值、阴性预测值依次为0.680、91.28％、21.05％、66.48％、52.49％;MYC自身抗体检测的AUC、特异性、敏感性、阳性预测值、阴性预测值依次为0.662、89.64％、8.14％、44.65％、49.52％;BIRC5与MYC混合抗原的自身抗体水平检测的AUC、特异性、敏感性、阳性预测值、阴性预测值依次为0.752、92.34％、28.43％、73.58％、55.50％.结论:BIRC5、MYC自身抗体均与宫颈癌具有一定的相关性,BIRC5与MYC混合抗原的自身抗体检测诊断宫颈癌的敏感性和特异性明显优于单一抗原自身抗体检测,联合检测可提高检测效率.
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重组HBcAg与HBsAg混合抗原的免疫效果
目的 观察重组HBcAg与HBsAg混合抗原免疫BALB/c小鼠后体液免疫与细胞免疫的效果.方法 配制含Al(OH)3佐剂与不含佐剂的混合抗原,分别免疫BALB/c小鼠,采用ELISA法测定抗体滴度和细胞因子水平;采用流式细胞仪分析T细胞亚群.结果 HBcAg与HBsAg混合抗原免疫小鼠产生的IFN-γ量明显高于二者单独免疫,CD3+和CD4+水平显著增高;含Al(OH)3佐剂的混合抗原CD8+水平明显高于阴性对照组;混合抗原免疫小鼠血清产生的抗-HBs抗体与2倍剂量的HBsAg单独免疫相比,差异无显著意义.含Al(OH)3佐剂与不含佐剂的疫苗免疫效果差异无显著意义.结论 重组HBcAg与HBsAg混合抗原表现出良好的体液免疫与细胞免疫效果,为治疗性乙肝疫苗的开发提供了依据.
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特异性T细胞免疫治疗脑胶质瘤模型的研究
目的 探讨特异性T细胞过继治疗脑胶质瘤的可行性及有效性.方法 将C57BL/6小鼠树突状细胞(DC)与GL261细胞抗原共育,再与T细胞共培养,检测T细胞体外杀伤作用.建立GL261-C57 BL/6小鼠脑胶质瘤模型,随机分两组,治疗组用上述T细胞进行免疫治疗,对照组注射磷酸盐缓冲液(PBS),检测小鼠外周血T细胞亚群,磁共振检测小鼠成瘤情况,观察生存期并解剖死亡小鼠观察成瘤情况.结果 体外实验效靶比为60∶1时,成熟DC组T细胞杀伤率为(62.67±2.52)％,未成熟DC组为(26.33±2.08)％ (P =0.000).T细胞治疗后小鼠外周血CD8a/CD4比值为1.18±0.31,对照组为0.28±0.05(P=0.047),治疗组磁共振未见肿瘤生长,对照组生存期为(22.63±2.38)d,治疗组死亡2只,其余均存活至实验结束(80 d)(P =0.001).解剖发现,对照组小鼠均可见肿瘤生长,治疗组在实验结束前死亡的2只可见肿瘤生长,存活至实验结束的小鼠未见肿瘤生长.结论 GL261细胞抗原诱导的特异性T细胞在动物实验中有抑制胶质瘤的作用.
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日本血吸虫混合DNA疫苗的构建
构建日本血吸虫混合DNA疫苗,为今后多抗原特异性DNA疫苗的研究打下基础.在克隆pBluescript-Sj23、pBluescript-Sj26、pBluescri pt-32的基础上,亚克隆构建了真核表达载体pBK-Sj23、pBK-Sj26、pBK-Sj32.经过酶切鉴定,PCR扩增鉴定及测序后,将此三种不同抗原质粒经不同组合后经肌肉注射免疫小鼠 ,3周后提取小鼠股四头肌DNA,特异性引物扩增获得目的基因.证实重组质粒转入了完整的日本血吸虫抗原23、26、32 kd基因.且混合质粒能在肌肉组织中稳定存在.建立了日本血吸虫混合抗原DNA疫苗,为以后的多特异性DNA疫苗进一步研究奠定了基础.
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硝酸纤维素膜微粒ELISA方法的建立
本文报道硝酸纤维素膜微粒ELISA(nitrocellulosemicroparticle ELISA ,NCMPE)方法,该法可用含表面活性剂的混合抗原定量测试针对其中某一组分的抗体,具体如下.
