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血浆中CYP2E1酶活力的高效液相色谱测定法
目的 建立准确简便的测定血浆中细胞色素P4502E1(CYP2E1)酶活力的高效液相色谱方法.方法 β-葡萄糖苷酸酶水解血浆,乙醚提取,以乙腈:四氢呋喃:0.1 mol/L乙酸铵缓冲液(22.5∶5.5∶72.5)为流动相等度洗脱,内标法定量.结果 氯唑沙宗与6-羟基氯唑沙宗能在体内外作为CYP2E1酶的探针而反映其(动)的线性范围分别为0.59～17.70和0.54～16.17 μmol/L,相关系数分别为0.9980和0.9998,绝对回收率大于81%,相对标准偏差(RSD)小于5.0%.结论 方法简单,结果可靠,可用于血浆中氯唑沙宗与6-羟基氯唑沙宗的测定.
关键词： 氯唑沙宗 6-羟基氯唑沙宗 细胞色素P450CYP2E1 色谱法 高压液相 -
HPLC法测定大鼠肝微粒体中6-羟基氯唑沙宗的含量
目的:建立高效液相色谱法测定大鼠肝微粒体中6-羟基氯唑沙宗的含量.方法:采用Diamonsil C18柱(200 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-水-磷酸(45:55:0.1)为流动相,流速1.0 ml·min-1,检测波长为296 nm.结果:6-羟基氯唑沙宗浓度在0.5 ~ 25 μmol·L-1 范围内呈现良好的线性关系(r=0.999 1),方法回收率为92.57% ~ 98.72%,提取回收率为76.38%~82.25%,日内、日间精密度RSD<9%.结论:该方法可靠、准确、重复性好,可用于大鼠肝微粒体中6-羟基氯唑沙宗的含量测定及体外代谢研究.
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正交设计法优化大鼠肝细胞色素P450的孵育体系
目的:考察大鼠肝细胞色素P450 1A2,2A6,2C9,2E1,3A2 5种亚型的佳体外孵育条件.方法:通过正交试验,以对乙酰氨基酚、7-羟基香豆素、4-羟基甲苯磺丁脲、6-羟基氯唑沙宗、6-β羟基睾酮总含量为考察指标,优化大鼠肝细胞色素P450的体外孵育条件.结果:大鼠肝细胞色素P450佳体外孵育条件为温度37℃,孵育时间90 min,酶含量0.6mg· mL-1.结论:优选的体外孵育条件为研究经P450 1A2,2A6,2C9,2E1,3A2代谢的药物相互作用及其他物质对该酶的影响提供依据.
