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胰岛ε细胞:一种新的胰岛细胞类型
胰岛是胰腺组织中重要的内分泌器官,经典的胰岛内分泌细胞包括a细胞、β细胞、δ细胞及PP细胞,分别产生胰升糖素、胰岛素、生长抑素及胰多肽(PP),其在成年胰岛内分别约占20%、75%、3%~5%及<2%.目前普遍认为胰腺内分泌和外分泌细胞均来源于共同的胰腺前体细胞(可能是导管细胞的一个亚群).胰岛的发育和分化过程涉及一个复杂而精细的分子调控网络体系,其中包括许多转录因子的参与,它们相互协调,在不同时期发挥着相应的作用.本文着重介绍胰岛ε细胞及其特点和生理学效应.
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唾液分泌相关的涎腺受体
所谓受体,是细胞膜上或细胞内能识别生物活性分子(激素、神经递质、生长因子、细胞因子、药物、毒物等)并与之特异结合,将生物活性分子产生的信息传递到效应器,引起各种生物学效应的生物大分子.受体的化学本质是蛋白质,在细胞膜表面的受体大多是糖蛋白.涎腺的腺泡细胞和导管细胞膜上都有大量的受体分布,但是由于腺泡细胞是液体和蛋白质分泌的主要细胞,所以大多数的受体研究都集中在腺泡细胞上.英国学者Garrett将分布在涎腺上的受体分为四大类[1]:经典的神经递质受体、非肾上腺素能和非胆碱能受体、其他潜在的神经递质受体以及涎腺上的其他因子受体.
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如何早期发现诊断胰腺癌
胰腺癌是一种较常见的恶性肿瘤,近年来发病率有明显增高的趋势.胰腺癌包括胰头癌、胰体尾部癌.90%的胰腺癌为导管细胞腺癌,少见黏液性囊腺癌和腺泡细胞癌.由于其特殊的解剖部位及本身生物学特性,80%以上胰腺癌被发现时即为晚期,失去了根治性手术切除的机会,预后较差.根据美国新资料显示,胰腺癌5年生存率仅为5%.
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胰腺囊腺癌的CT表现及临床应用价值
胰腺囊腺癌是胰腺导管细胞源性肿瘤的特殊类型,具有与胰腺癌不同的病理和CT表现特征,其发病率约占所有胰腺肿瘤的10%~15%,占胰腺恶性肿瘤的5%以上[1],本研究回顾性分析经手术病理证实的7例胰腺囊腺癌资料,并结合文献分析其CT表现,以提高对本病的认识和诊断水平.
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成人胰腺导管干细胞的体外分离、纯化、培养及鉴定
目的:建立人胰腺导管干细胞的体外分离、纯化、培养及鉴定的方法.方法:胶原酶分次消化剪切的人胰腺组织,经过Ficoll密度梯度离心后去除胰岛组织,培养于含,10%胎牛血清的CMRL1066培养液中,7-10天可行成单层细胞,用0.25%胰酶-EDTA消化并传代培养.取2-3代细胞利用免疫荧光染色和RT-PCR方法检测CK19、Pdx-1、Nestin、Insulin及Glucagon的表达.结果:经过胶原酶消化、Ficoll密度梯度离心及后续的培养,去除了胰岛组织及外分泌腺,可获得较纯化的鹅卵石样的胰腺导管细胞.免疫荧光结果示:胰腺导管细胞CK19、Pdx-1和Nestin染色呈阳性,阳性细胞率分别为(87.5±6.2)%、(77.5±8.6)%和(50.9±9.5)%,而Insulin染色为阴性.RT-PCR结果显示该细胞表达CK19、Pdx-1和Nestin基因,而未观察到Insulin及Glueagon基因的表达.结论:该方法可较好的分离纯化出人胰腺导管细胞,经鉴定获得细胞具有胰腺干细胞的特性.
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胎猪胰腺导管干细胞的体外分离、纯化、培养及鉴定
目的 建立胎猪胰腺导管干细胞的体外分离、纯化、培养及鉴定的方法.方法 采用胰酶和胶原酶Ⅳ、P消化法分离获得细胞,在含10%胎牛血清的M199培养基中行导管上皮细胞原代培养,而后将血清浓度提高到20%以上继续培养,3~4天后至每个小圆细胞形成一个集落;采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)的方法对获得的细胞检测CK19、Pdx-1、NeuroD/Beta2、insulin、Glut-2等基因的表达.结果 成功分离获得胎猪胰腺导管细胞,并证实该细胞为胎猪导管源胰腺干细胞.经检测,细胞表达CK19,Pdx-1,Ght-2,NeuroD/Beta2等胰腺干细胞的标志,而insulin、Neurogenin3阴性表达.结论 该方法可较好地分离纯化出胎猪胰腺导管细胞,经鉴定获得细胞具有胰腺干细胞的特性.
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胰腺神经内分泌癌的诊断及治疗
胰腺神经内分泌癌(NETs)非常罕见,在所有胰腺肿瘤中的比例不足5%[1].复习我院近20年的胰腺癌诊治临床资料,属于此类疾病者仅3例.传统认为胰腺NETs起源于胰腺胰岛细胞,而现在认为起源于具有多极分化能力的胰腺导管细胞.胰腺NETs与机体其他部位的神经内分泌癌具有相类似的特征.近年来随着免疫组化及电镜观察的广泛应用,对神经内分泌癌的认识有很大的进展,其类型不断增多,然而关于胰腺NETs研究的报道国内外仍然较少.
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胰腺干细胞
胰腺干细胞是胰腺存在和更新的基础,与许多胰腺疾病有着密切的联系.胰腺干细胞的研究对于深入了解胰腺疾病的发生机制及指导治疗有重要意义.胰岛干细胞移植是治疗糖尿病的一条新途径.本文对胰腺干细胞的来源、可能的胰腺干细胞及其标记物与疾病的关系作一简要概述.
关键词: 胰腺干细胞 导管细胞 胰岛 巢素 胰十二指肠同源异型盒基因 -
成年大鼠胰腺导管干细胞的体外分离、培养及鉴定
目的:建立成年大鼠胰腺导管干细胞的体外分离、培养及鉴定的方法.方法:V型胶原酶溶液灌注消化成年大鼠胰腺组织,并经过Ficoll密度梯度离心去除胰岛组织,培养于含10%胎牛血清的RPMI1640培养液,而后加入表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)继续培养,7天可形成单层细胞,用0.25%胰酶-EDTA消化并传代培养.取第2代细胞利用免疫荧光染色和RT-PCR方法检测CK19、Pdx-1、Nestin、insulin及glucagon的表达.结果:经胶原酶灌注消化胰腺导管上皮,再经过Ficoll密度梯度离心去除胰岛组织,可使胰腺导管细胞得到较好的纯化.免疫荧光结果示:胰腺导管细胞CK19、Pdx-1和Nestin染色呈阳性,阳性细胞率分别为(88.6±6.2)%、(84.6±8.6)%和(79.3±10.5)%,而insulin及glucagon染色为阴性.RT-PCR结果显示该细胞表达CK19、Pdx-1和Nestin基因.结论:该方法可较好的分离出胰腺导管细胞.经鉴定该法培养所获细胞具有胰腺干细胞的特性.
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胰腺导管腺癌细胞起源的探讨
胰腺导管腺癌形态学特征是由不同分化程度的导管样结构构成.近年研究发现胰腺内的导管细胞、腺泡细胞或胰岛细胞能够从一种细胞形态转分化(transdifferentiation)形成另一种细胞形态,因此提出了不同的观点,认为胰腺内导管、腺泡、胰岛或胰腺的前体干细胞都可能是进展成胰腺导管腺癌的起源细胞,使鉴定胰腺导管腺癌的细胞起源变得非常复杂.明确胰腺癌的细胞起源能够更好地认识肿瘤起始时的分子事件,有助于推动胰腺癌的早期诊断和治疗.
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颌下腺导管细胞体外培养的实验研究
目的探讨颌下腺(SMG)导管细胞的体外培养方法.方法将SMG导管细胞进行原代和传代培养,观察培养细胞的形态结构,了解细胞的生长特性.同时经噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力.结果导管细胞生长期间单层生长,呈多角形上皮细胞,可传代生长3~4代,存活3~4周.其中培养72 h后,原代、第2代细胞活性与第4代相比较差异有统计学意义(P<0.05).结论体外培养的原代及第2代细胞具有较高的增殖能力,可用于进一步研究.