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阿托伐他汀对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠体内IL-4表达的影响
目的 观察不同剂量阿托伐他汀对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)神经功能的保护作用,探讨其作用机制.方法 采用Wistar大鼠建立EAE模型,应用不同剂量的阿托伐他汀进行治疗,观察其对大鼠发病情况的影响及程度,并测定白细胞介素(IL)-4在体内的表达及含量变化.结果 大剂量(8mg/kg)治疗组的神经功能高评分均值和总和评分均值都显著低于EAE模型组[高评分均值:(1.8±0.2)vs(3.3±0.5),P＜0.05;总和评分均值:(22.2±14.4)vs(42.1±25.7),P＜0.05],因此,8mg/kg阿托伐他汀治疗可使EAE大鼠神经功能损伤明显减轻,明显改善EAE大鼠的临床症状.大剂量(8mg/kg)阿托伐他汀可明显增加机体内的血清IL-4含量[(0.48±0.35),vs(0.19±0.13)μg/L,P＜0.05].结论 阿托伐他汀通过增加体内IL-4的含量促进损伤修复,从而起到预防和缓解EAE的作用.
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急性冠状动脉综合征患者外周血T细胞Rho激酶活性检测的意义
目的 研究急性冠状动脉综合征(ACS)患者外周血T细胞中Rho激酶活化情况及其临床意义.方法 选择ACS患者270例,根据冠状动脉造影和临床诊断分为稳定性心绞痛(SAP)组85例、不稳定性心绞痛(UAP)组95例,急性心肌梗死(AMI)组90例和非冠心病患者(对照组)70例.冠状动脉病变程度采用冠状动脉Gensini积分量化.外周血采用RosettSep T细胞提取试剂盒.磷酸化肌球蛋白磷酸酶靶亚基1(MYPT1)蛋白表达来表示Rho激酶活性,磷酸化MYPT1蛋白检测采用免疫印迹法,细胞因子水平采用酶联免疫吸附试验检测.结果 UAP组和AMI组外周血T细胞Rho激酶活性明显高于SAP组和对照组(P<0.05).Rho激酶活性抑制剂Y27632对ACS患者T细胞白细胞介素6分泌有明显抑制作用(P<0.01),对白细胞介素10分泌无明显抑制作用.Gensini积分≥20分患者外周血T细胞Rho激酶活性明显高于Gensini积分<20分患者(P<0.05).结论 ACS患者T淋巴细胞存在Rho激酶活化异常,并且与ACS患者冠状动脉斑块的稳定性和病变严重程度有关.
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不同分期慢性肾脏疾病患者γ干扰素和白细胞介素4基因表达水平与功能变化
目的 通过观察慢性肾脏疾病患者外周血淋巴细胞细胞因子γ干扰素、白细胞介素4 mRNA合成及蛋白分泌水平,探讨慢性肾功能衰竭时免疫功能紊乱的发生机制.方法 入选慢性肾功能不全患者18例(慢性肾脏疾病3、4、5期各6例)和健康对照者4名,于肘静脉采血10ml,采用含有15％小牛血清(56℃水浴中灭活30 min)的RPMI 1640液培养淋巴细胞,应用TRIzon法提取总RNA,以RT-PCR法对γ干扰素和白细胞介素4mRNA进行扩增,琼脂糖凝胶进行电泳分离,双抗体夹心法检测γ干扰素和白细胞介素4蛋白浓度.结果 慢性肾脏疾病4、5期者外周血淋巴细胞培养上清液中γ干扰素浓度低于健康对照者和慢性肾脏疾病3期者,健康对照组、慢性肾脏疾病3、4、5期患者白细胞介素4浓度差异无统计学意义,慢性肾脏疾病4期者γ干扰素/白细胞介素4比值低;慢性肾脏疾病4、5期者γ干扰素mRNA的相对积分光密度低于健康对照组和慢性肾脏疾病3期者,慢性肾脏疾病5期者白细胞介素4 mRNA的积分光密度值高于健康对照组和慢性肾脏疾病3、4期者,慢性肾脏疾病4、5期者γ干扰素与白细胞介素4mRNA积分光密度的比值低于健康对照组和慢性肾脏疾病3期者.结论 慢性肾脏疾病患者确实存在T淋巴细胞功能异常.随着慢性肾脏疾病的进展,T淋巴细胞分泌细胞因子的功能呈下降趋势.在慢性肾脏疾病的发生和发展中,Th1/Th2平衡存在向TH2偏移的趋势.
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缺血后处理对肝硬化大鼠肝脏缺血-再灌注损伤保护作用的免疫机制
目的探讨缺血后处理（IPO）对肝硬化大鼠肝脏缺血-再灌注损伤（IRI）的保护作用及其免疫机制。方法按随机数字表法将30只肝硬化模型SD大鼠随机分为IPO组、IRI组和单纯肝切除组（肝切组），各10只。IPO组先切除40％肝脏，阻断第一肝门20 min，然后反复缺血-再灌注3次，后持续再灌注；IRI组，切除40％肝脏，阻断第一肝门20 min后持续再灌注；肝切组切除40％肝脏。分别于术后6、24 h抽取大鼠下腔静脉血，检测ALT、AST、分化群（CD）4+、CD8+、调节性T细胞（Treg）百分率、白细胞介素（IL）-4、IL-10水平。3组比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD-t检验。结果恢复灌注6 h后，IPO组的ALT、AST分别为（1623±378）、（1993±469）U/L， IRI组相应为（2690±549）、（3020±577）U/L，IPO组ALT、AST明显低于IRI组（LSD-t=-4.21，-3.72；P<0.05）。恢复灌注24 h后，IPO组的ALT、AST分别为（307±76）、（555±137）U/L，IRI组相应为（518±105）、（1050±355） U/L，IPO组ALT、AST亦明显低于IRI组（LSD-t=-4.06，-3.37；P<0.05）。恢复灌注6 h后，IPO组CD4+、CD8+、CD4+/ CD8+比值、Treg、IL-4、 IL-10分别为（57±5）%、（25±3）%、2.3±0.5、（8.9±0.4）%、（1.27±0.25）mg/L、（0.61±0.03）mg/L，IRI组相应为（52±6）%、（12±3）%、4.5±0.8、（7.3±0.3）%、（0.66±0.11）mg/L、（0.34±0.06）mg/L，IPO组CD8+、Treg、IL-4、IL-10较IRI组明显升高，CD4+/ CD8+比值明显降低（LSD-t=7.74，6.67，5.52，9.31，-6.69；P<0.05）。结论 IPO可能通过减轻免疫损伤发挥对肝硬化大鼠肝脏IRI的保护作用。
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玻璃化冷冻羊皮异种移植后血清白细胞介素-4和干扰素-γ表达的研究
目的 了解玻璃化冷冻羊皮异种移植到大鼠创面后,大鼠血清中白细胞介素4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)的表达特点.方法 80只大鼠背部设计制作4 cm×4 cm大小全层皮肤缺损创面,将玻璃化冷冻羊皮与大鼠自体微粒皮混合移植于大鼠创面上作为实验组,40只大鼠异体皮与自体微粒皮混合移植作为对照组,对比观察两组创面愈合情况,分别于术后1、2、3、4周末收集大鼠血清,检测IL-4和IFN-γ的值进行对比.结果 4周后对照组的微粒皮均扩展覆盖创面,而实验组大部分创面愈合,微粒皮虽有扩展但没有完全覆盖创面.大鼠血清中IL-4和IFN-γ的表达方面,实验组和对照组施行移植术后血清IFN-γ和IL-4均随时间逐渐增高,术后至2周末,两组血清IFN-γ和IL-4表达差异均无统计学意义(P>0.05),术后3周末,实验组血清IL-4和IFN-γ表达明显高于对照组,两组间差异有统计学意义(P<0.05).术后4周末,对照组创面基本愈合,实验组大部分创面已愈合,两组的羊皮均被完全排斥,实验组和对照组大鼠血清IL-4和IFN-γ的表达均下降,两组相比,差异无统计学意义(P>0.05).对比IFN-γ/IL-4的值在四周内两组间无统计学意义(P>0.05).结论 羊皮移植于大鼠体表创面后两周的时间内,冷冻羊皮与异体皮有相似的免疫排斥反应特点,其对微粒皮的保护与异体皮有相似的效果.
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HBV相关慢加急性肝功能衰竭患者血清IL-4和IL-10的表达及临床意义
目的 探讨乙型肝炎病毒相关慢加急性肝功能衰竭(HBV-ACLF)患者体内抗炎细胞因子白细胞介素(IL)-4和IL-10的表达及其临床意义.方法 收集兰州市第二人民医院2010 年10 月至2012年3月收治的HBV-ACLF患者共33例(HBV-ACLF组),同时选取同期住院的慢性乙型肝炎(CHB)患者42例(CHB组)和20例健康体检者(健康对照组)入组.采用ELISA法检测3组人群血清中IL-4和IL-10水平,同时检测各项临床指标.结果 HBV-ACLF组患者IL-4和IL-10水平均低于健康对照组,IL-10水平低于CHB组(P均＜ 0.05),治疗4周后复查IL-4和IL-10水平显著上升,较治疗前差异具有统计学意义(P均＜ 0.05);CHB组患者IL-4和IL-10水平低于健康对照组,治疗前后IL-4和IL-10水平差异无统计学意义(P均＞ 0.05).结论 HBV-ACLF患者IL-4和IL-10表达水平显著低下,监测其动态变化对预测HBV-ACLF患者的疾病进展和预后有重要的临床意义.
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白细胞介素4(C589T)基因多态性与胆石病的相关性研究
目的探讨白细胞介素4(IL-4)(C589T)基因多态性与胆石病发病例因素的相关性.方法采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)技术对中国南京地区81例胆囊结石患者和41例胆管结石患者进行IL-4(C589T)基因型分析.结果胆囊结石组与胆管结石组患者IL-4(C589T)基因型频率和等位基因频率有显著性差异(CC分别为11.1%和48.8%、CT分别为34.6%和36.6%、TT分别为54.3%和14.6%、C分别为28.4%和67.1%、T分别为71.6%和32.9%).结论 IL-4(C589T)基因多态性与胆管结石的形成存在相关性,与胆囊结石不存在相关性.
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胰腺癌患者外周血CD4-CD8-T细胞与IL-4、IFN-γ的关系
目的 研究胰腺癌患者外周血CD4-CD8-T细胞比例与IL-4、IFN-γ含量变化及其相互关系.方法 分别应用流式细胞仪及ELISA法检测25例胰腺癌患者和45名健康人外周血中CD4-CD8-T细胞比例和IL-4、IFN-γ的含量.结果 25例胰腺癌患者CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞的比例为(4.2±1.7)%,45名健康人CD4-CD8-T细胞占CD3+T细胞的比例为(6.3±2.6)%,两组之间差异有统计学意义(P＜0.01).胰腺癌患者外周血中IL-4含量为(86.3±23.3)fg/L,健康对照组外周血中IL-4含量为(56.2±9.2)fg/L,两组之间差异有统计学意义(P＜0.01).胰腺癌患者外周血中IFN-γ含量为(16.4±4.8)fg/L,健康对照组外周血中IFN-γ含量为(27.4±3.8)fg/L,两组之间差异有统计学意义(P＜0.01).胰腺癌患者手术后CD4-CD8-T细胞比例显著高于术前(P＜0.01).胰腺癌患者外周血CD4-CD8-T细胞比例与IL-4含量呈负相关,与IFN-γ含量呈正相关;胰腺癌患者CD4-CD8-T细胞比例、IL-4含量与肿瘤临床分期有关(P＜0.05),与肿瘤分化程度均无关(P＞0.05),IFN-γ含量与肿瘤临床分期和肿瘤分化程度均无关(P＞0.05).结论 CD4-CD8-T细胞在胰腺癌患者外周血中比例降低,CD4-CD8-T细胞可能通过影响IFN-γ的分泌参与胰腺癌的发生和发展.
关键词： 胰腺肿瘤 CD4-CD8-比值 白细胞介素4 干扰素Ⅱ型 -
休克期切痂对烫伤大鼠γ干扰素、白细胞介素4 mRNA表达的影响
目的探讨烫伤大鼠伤后不同时间切痂对Th1细胞因子γ干扰素(IFN-γ)和Th2细胞因子白细胞介素4(IL-4)循环水平的变化及其mRNA在脾脏T淋巴细胞表达的影响.方法 160只健康雄性Wistar大鼠背部30% Ⅲ°烫伤后,随机分为单纯烫伤对照组和伤后8 h、24 h、96 h切痂组,在伤后4、12、24、48、96、120、168 h活杀动物,采集血液和脾脏标本.ELISA法检测血浆内IFN-γ、IL-4浓度;Ficoll分离液法、贴壁法和尼龙毛柱吸附法提取纯化脾脏T淋巴细胞,一步法提取细胞总RNA、RT-PCR法扩增目的基因、琼脂糖凝胶电泳分析IFN-γ和IL-4 mRNA的表达.结果烫伤4 h大鼠循环内上述细胞因子的浓度大幅升高, 同时其mRNA表达迅速上调.Th1型细胞因子IFN-γ及其mRNA表达在烫伤后24 h达峰值,其后逐渐下降;Th2型细胞因子IL-4的循环浓度及mRNA表达进行性增加;伤后7 d出现明显偏向Th2型反应的现象.切痂组两个细胞因子浓度增加及其mRNA表达上调的变化幅度小于单纯烫伤对照组,其中8 h切痂组的变化小,24 h和96 h切痂组次之.结论休克期切痂有利于抑制严重烧伤后Th2型细胞因子的过度表达.
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黄芪对新生儿脐血Th1/Th2功能平衡的影响
目的观察新生儿脐血单个核细胞(CBMC)Th1/Th2的功能状态及黄芪(AM)对新生儿CBMC Th1/Th2功能平衡的影响. 方法对24例足月新生儿CBMC体外分别经植物血凝素(PHA-P)和PHA-P+AM刺激(分为新生儿PHA组和AM组各24例),培养48 h,用ELISA法检测培养上清液中白细胞介素4(IL-4)和γ干扰素(IFN-γ)含量.以15例正常儿童外周血单个核细胞(PBMC)为对照(分为儿童PHA组和AM组各15例). 结果新生儿PHA组IFN-γ、IL-4水平显著低于儿童PHA组(P均<0.01),IFN-γ/IL-4比值也明显低于儿童PHA组(P<0.05),与儿童比较呈现低水平的Th2相对优势状态.新生儿AM组IFN-γ、IL-4水平显著高于新生儿PHA组(P均<0.01),其中以IFN-γ变化明显,IFN-γ/IL-4比值明显高于PHA组(P<0.05).儿童AM组IFN-γ水平较儿童PHA组明显增高(P<0.01),IL-4水平较PHA组无明显变化(P>0.05).新生儿AM组IFN-γ和IL-4水平明显高于儿童PHA组(P均<0.01),IFN-γ/IL-4比值明显高于儿童PHA组(P<0.05).新生儿AM组IL-4水平明显高于儿童AM组(P<0.05),两组IFN-γ水平差异无显著性(P>0.05),IFN-γ/IL-4比值明显低于儿童AM组(P<0.01). 结论新生儿期代表Th1和Th2细胞功能水平的细胞因子IFN-γ和IL-4产生水平明显低下,IFN-γ/IL-4比值低于儿童组,呈现低水平的Th2相对优势状态.AM可显著提高新生儿CBMC产生IFN-γ和IL-4水平,尤以前者为著,提示AM在促进Th细胞功能成熟的同时上调Th1功能,改变新生儿Th1/Th2功能失衡状态.此对促进新生儿T淋巴细胞介导的特异性免疫活性,预防日后过敏性疾病的发生有重要意义.
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免疫细胞因子在妊娠高血压综合征发病中的作用
目的研究免疫细胞因子白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素1 β(IL-1 β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)在妊娠高血压综合征(简称妊高征)发病前后的变化,探讨免疫细胞因子在妊高征发病中的作用. 方法前瞻性研究550例孕妇,追踪到患有中、重度妊高征者25 例(妊高征组),随意选择30例正常健康孕妇作为对照组,分别取其孕12～16周和孕32～36周的血浆标本.用ELISA方法成批测定中孕期及晚孕期血浆中的IL-4、IL-1β、TNF-α水平.结果 (1)中孕期妊高征发病前血浆TNF-α水平,TNF-α/IL-4 和I L-1β/IL-4比值均高于对照组(妊高征组分别为27.66 ng/L,37.70,4.29;对照组分别为 17.80 ng/L,4.64,0.29)两组相比差异有显著性(P<0.05).(2)晚孕期妊高征发病后血浆TNF-α和 IL-1β水平均高于对照组(妊高征组分别为52.49 ng/L和29.46 ng/L; 对照组分别为35.51ng/L和7.93 ng/L)两组相比差异有显著性(P<0.05).TNF-α/I L-4及IL-1β/IL-4比值两组间差异无显著性(妊高征组分别为12.3及6.98;对照组分别为23.8及11.79). 结论妊高征发病前可能已存在着免疫细胞因子比例失衡,发病后细胞因子水平仍有明显变化,细胞因子免疫失衡可能与妊高征发病有关.
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静脉免疫球蛋白对新生儿脐血淋巴细胞干扰素γ和白细胞介素4分泌的影响
目的研究静脉免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)对新生儿淋巴细胞免疫功能的调节作用.方法分离8例新生儿的脐血单个核细胞和CD3+T细胞,并利用IVIG和植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)不同组合(即(1)对照组、(2)PHA刺激组、(3)IVIG先抑制组、(4)PHA先活化组和(5)PHA+IVIG组)对细胞进行刺激培养,然后利用ELISA法检测细胞干扰素(interferon,IFN)γ和白细胞介素(interleukin,IL)4的分泌,RT-CR法检测细胞IL-2 mRNA和IL-4mRNA表达,并与8例成人外周血单个核细胞做比较.结果加入IVIG后,PHA诱导的脐血单个核细胞和CD3+T细胞IFN-γ的分泌下降,其中以单个核细胞下降的程度更为明显;并且单个核细胞IFN-γ分泌下降与IVIG加入的先后顺序无关PHA刺激组(313.34±108.00)pg/ml,先抑制组(17.68±17.98)pg/ml,先活化组(170.72±38.25)pg/ml,PHA±IVIG组(11.10±8.92)pg/ml;但是CD3+T细胞IFN-γ的分泌下降只出现在先加入或同时加入IVIG时PHA刺激组(35.30±12.21)pg/ml,先抑制组(8.61±6.21)pg/ml,PHA±IVIG组(8.54±1.57)pg/ml.另外加入IVIG后,脐血单个核细胞IFN-γ分泌下降不如成人外周血单个核细胞明显,PHA刺激组(1121.11±344.58)pg/ml,先抑制组(29.08±11.20)pg/ml,先活化组(339.63±47.43)pg/ml,PHA±IVIG组(26.40±21.97)pg/ml.单独加入PHA后,脐血单个核细胞和CD3+T细胞IL-4的分泌无明显变化,但是经过PMA、PHA和rIL-2反复刺激后脐血单个核细胞却能表达IL-2 mRNA和IL-4 mRNA,并且加入IVIG后,脐血单个核细胞IL-2 mRNA和IL-4 mRNA表达明显下降.结论IVIG除了可以直接抑制脐血T细胞分泌IFN-γ外,还可能通过其他免疫细胞或分子间接地介导这种抑制作用.IVIG也可以抑制脐血单个核细胞IL-2 mRNA和IL-4 mRNA的表达.因此IVIG对脐血淋巴细胞增殖和B细胞免疫球蛋白释放的影响可能与这些抑制作用有关.
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儿童肺炎支原体肺炎血清细胞因子变化及临床意义
目的 探讨肺炎支原体肺炎(mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)患儿血清细胞因子水平的变化及临床意义.方法 选择2008年1月至2009年12月我院儿内科收治的MPP患儿239例为MPP组,根据病情的严重程度再分为轻症MPP组(n=152)和重症MPP组(n=87).选择同期收治的急性支气管肺炎患儿263例为非MPP组.选择同期在儿外科住院的疝气和包皮过长择期手术患儿共50例作为对照组.所有肺炎患儿均于入院第1天进行肺炎支原体抗体检测和细胞因子[肿瘤坏死因子(TNF)-α、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-1β、IL-4、IL-6]检测,患儿经治疗感染恢复期重新留取血清复查以上指标；对照组留取1次血清,检测细胞因子水平.结果 MPP组和非MPP组患儿血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平均高于对照组(P＜0.01)；而IFN-γ、IL-4水平3组间比较差异无统计学意义(P ＞0.05)；MPP组血清IFN-γ、IL-1β水平及IFN-γ/IL-4比值高于非MPP组(P＜0.01)；MPP组恢复期TNF-α、IL-1β、IL-6水平和IFN-γ/IL-4比值较急性期明显降低(P ＜0.001,P＜0.05)；重症MPP组血清TNF-a、IL-1β水平及IFN-γ、IL-4比值明显高于轻症MPP组(P＜0.01).结论 MPP患儿存在免疫功能紊乱,血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平及IFN-γ/IL-4比值与病情严重程度相关,可用来评估病情.
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IL-4基因修饰增强脑胶质瘤细胞毒性T淋巴细胞杀伤活性机制的探讨
目的进一步探讨白细胞介素4(IL-4)基因修饰瘤苗增强细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性的机制.方法通过逆转录病毒载体PL-IL-4-SN将人IL-4基因导入神经胶质瘤系SHG44细胞,以IL-4基因修饰瘤苗和野生型瘤细胞作刺激细胞诱导CTL反应,通过流式细胞仪检查瘤细胞表面分子的表达.结果 (1)IL-4基因修饰诱导瘤细胞表达MHC-Ⅱ类抗原、B7-1及ICAM-1等免疫刺激分子,对MHC-I类抗原表达无影响,其瘤苗诱导的CTL杀伤活性为野生型瘤细胞的7倍(P＜0.01).(2)加入抗IL-4单抗可完全阻断IL-4诱导的细胞表面分子的表达,IL-4基因修饰瘤苗诱导CTL反应时培养上清可检测到大量IL-2的产生.抗IL-4或抗细胞表面分子单抗可降低IL-2产生及抑制CTL反应.结论 IL-4基因修饰可能是通过诱导MHC-Ⅱ类抗原等表面分子表达,促进IL-2的产生从而增强CTL杀伤活性.
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白介素-4基因修饰对儿童肝母细胞瘤多药耐药的逆转及其机制研究
目的探讨白介素-4(IL-4)基因修饰对儿童实体瘤多药耐药(MDR)的逆转作用及可能机制.方法用逆转录病毒载体将人IL-4基因导入人肝母细胞瘤细胞系HepG2,采用MTT生物活性法检测瘤细胞对化疗药物的敏感性.间接免疫荧光分光光度分析瘤细胞P-糖蛋白(P-gp)的表达率.微量荧光分光光度法分析瘤细胞内阿霉素(ADM)聚集量.结果 IL-4基因修饰显著降低瘤细胞对种化疗药物的半数抑制浓度(IC50),表现出MDR逆转效应(耐药逆转倍数在6～32倍数间)及明显增加化疗药物在瘤细胞内聚集,同时IL-4基因修饰瘤细胞P-gp阳性表达率(5±0.6%)较野生型及空载体修饰细胞(98.5±0.5%、97.0±1.0%)明显减低.IL-4基因修饰对瘤细胞的MDR逆转作用可为PKC激活剂TPA所阻断.IL-4基因修饰瘤苗及其培养上清与野生型细胞共培养,也可使野生型瘤细胞产生MDR逆转效应.结论 IL-4 基因修饰瘤苗可通过自分泌、旁分泌形式逆转瘤细胞MDR,此作用可能与其抑制PKC活性及下调P-gp表达.
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IL-4对IL-1β和IFN-γ诱导的肺癌细胞A549分泌C3和B因子的影响
目的:探讨IL-4对IL-1β和IFN-γ诱导的人肺癌细胞株A549分泌C3及B因子的影响.方法:用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测A549细胞培养上清中C3及B因子的水平,用反转录聚合酶链反应(RTPCR)分析C3及B因子的mRNA表达.结果:未干预组C3及B因子的水平分别为19.80±11.72和10.40±5.77(ng/106cells),IL-1β、IFN-γ、IL-4干预组C3的水平分别为117.99±16.02、38.14士6.32、95.02±3.749(ng/106cells),B因子的水平分别为92.56±10.75、23.98±5.07、13.37±4.00(ng/106cells).IL-4诱导A549细胞分泌C3具有剂量依赖性,它显著增强IL-1β诱导的A549细胞分泌C3及其mRNA表达,减弱IL-1β、IFN-γC诱导A549细胞分泌B因子及其mRNA表达.结论:IL-1β、IFN γ、IL-4调节A549细胞分泌C3及B因子具有协同作用,可通过补体依赖性细胞毒活性途径杀伤肿瘤细胞.
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IFN-γ和IL-4对乳腺癌细胞MCF-7生长及雌激素受体亚型影响的观察
目的:探讨干扰素γ(IFN γ)和白细胞介素4(IL-4)对人乳腺癌细胞株MCF-7的生长特性及雌激素受体(ER)亚型表达的影响.方法:以不同浓度IFN-γ(50、100和150 μg/L)或IL-4(5、10和25 μg/L)分别作用MCF-7细胞24、48、72和96 h,MTT法检测细胞的增殖水平.选择100 μg/LIFN-γ或10μg/L IL-4作用细胞96h(M/IFN γ或M/IL-4),蛋白质印迹法检测ERα和ERβ的蛋白表达,流式细胞术分析细胞周期,RT-PCR检测凋亡抑制基因mRNA表达.结果:与对照组相比,IFN-γ作用96h后,细胞增殖活性受到抑制(100 μg/L组P=0.000,150 μg/L组P-0.003),G0～G1期细胞比例增多(P=0.003),S期减少(P=0.005),ERβ蛋白表达水平增加,P-0.038.IL-4作用96 h后,细胞增殖活性增强(10μg/L组P=0.006,25μg/L组P=0.002),Gn～Gt期细胞比例减少(P=0.008).S期增多(P=0.007),ERβ蛋白表达水平减少(P=0.021),凋亡抑制基因的表达水平增加,P值分别为0.002、0.000和0.004.结论:辅助性T淋巴细胞1型(Th1)类细胞因子IFN-γ和Th2类细胞因子IL-4可分别促进或抑制ERβ表达,进而抑制或促进肿瘤细胞生长；Th1/Th2偏移对乳腺癌细胞生长特性的作用,可能与改变ER亚型表达比例有关.
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卵巢上皮性恶性肿瘤患者手术前后外周血Th1/Th2细胞因子表达的临床研究
目的 探讨卵巢上皮性恶性肿瘤患者手术前后外周血Th1/Th2细胞因子的表达状况.方法 选取2015年1月至2016年3月间复旦大学附属中山医院青浦分院收治的30例卵巢上皮性恶性肿瘤患者为癌症组,选取同期30例卵巢上皮性良性肿瘤患者为囊肿组及30例健康体检者为对照组,分别收集癌症组与囊肿组术前术后和对照组人员空腹静脉血3ml,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定血清γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)水平.结果 术前癌症组患者IFN-γ水平低于囊肿组患者和对照组,IL-4水平高于囊肿组和对照组,Th1/Th2比值低于囊肿组和对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).术后癌症组患者IFN-γ水平比术前上升,IL-4水平下降,Th1/Th2比值增加,差异均有统计学意义(均P＜0.05);术前囊肿组患者与术后IFN-γ、IL-4水平及Th1/Th2比值相比,差异均无统计学意义(均P＞0.05).术后癌症组患者IFN-γ、IL-4水平及Th1/Th2比值与囊肿组患者相比,差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 卵巢上皮性恶性肿瘤患者Th1细胞因子水平降低,Th2细胞因子水平升高,手术后得到纠正.检测恶性肿瘤患者的IFN-γ及IL-4,有助于判断恶性肿瘤预后,为免疫治疗提供参考.
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链亲和素标记的白细胞介素4双功能融合蛋白锚定治疗小鼠浅表性膀胱癌
目的 探讨链亲和素标记的白细胞介素4( IL-4-SA)双功能融合蛋白治疗小鼠浅表性膀胱癌的效果.方法 制备IL-4-SA双功能融合蛋白,测定其体外生物学活性.建立小鼠浅表性膀胱癌模型,膀胱经生物素化后给予IL-4-SA灌注治疗,观察小鼠生存期,并以链亲和素标记的绿色荧光蛋白(GFP-SA)+ IL-4和磷酸盐缓冲液(PBS)作为对照组.检测各组小鼠脾细胞的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性和CD8+肿瘤浸润淋巴细胞.结果 IL-4-SA能够锚定于生物素化的膀胱表面达5d以上.在MB49细胞种植后的第80天,PBS组小鼠全部死亡,GFP-SA+ IL-4组小鼠存活2只,而IL-4-SA组小鼠存活5只.在肿瘤特异性杀伤实验中,在效靶比为1∶1、25∶1、50∶1时,PBS组小鼠的CTL杀伤率分别为(3.3±0.6)％、(7.3±0.6)％和(12.7±2.1)％,GFP-SA+ IL-4组小鼠的CTL杀伤率分别为(4.3±0.6)％、(9.0±1.0)％和(14.3±1.5)％,而IL-4-SA组小鼠的CTL杀伤率分别为(11.3±1.2)％、(22.7±1.5)％和(31.0±3.0)％,IL-4-SA组与PBS组和GFP-SA+ IL-4组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).CD8+淋巴细胞检测结果显示,PBS组和GFP-SA+ IL-4组的肿瘤组织内仅有少量的CD8+淋巴细胞浸润,而IL-4-SA组则有较多的CD8+淋巴细胞浸润.结论 IL-4 -SA锚定膀胱表面能够产生强烈、持久的免疫应答反应,有可能成为浅表性膀胱癌的一种新灌注治疗方法.
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大肠癌患者外周血Th1/Th2的检测及其临床意义
目的 检测大肠癌患者外周血CD+4细胞Th1、Th2细胞因子的表达水平,观察大肠癌患者Th1/Th2漂移的幅度,探讨Th1、Th2细胞因子与大肠癌发生、发展的关系.方法 采取实验对象的清晨空腹静脉血标本,用Th1、Th2细胞因子标记流式细胞技术检测Th1类细胞因子IFN-γ,Th2类细胞因子IL-4,计算Th1/Th2(IFNγ/IL-4),进行统计学分析.结果 大肠癌患者IFN-γ的表达率为(11.7±1.86)%,健康对照组IFN-γ的表达率为(16.4±6.07)%,大肠癌组比健康对照组明显减低,差异有统计学意义(P＜0.05).大肠癌患者IL-4的表达率为(2.8±0.32)%,健康对照组IL-4的表达率为(1.8±0.19)%,大肠癌组比健康对照组升高,差异有统计学意义(P＜0.05).大肠癌患者外周血IFN-γ/IL-4为4.2±0.94,健康对照组外周血IFN-γ/IL-4为9.7±1.11,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 大肠癌患者外周血CD+4细胞表达Th2型细胞因子占优势,Th1/Th2平衡失调,向Th2方向漂移,导致机体免疫功能低下,是大肠癌复发或转移的原因之一.
