广西虎纹捕鸟蛛毒诱导U251胶质瘤细胞凋亡及Caspase-3的激活
摘要： 目的:探讨虎纹捕鸟蛛毒抑制体外脑胶质瘤细胞系U251生长并诱导其凋亡,激活半胱天冬酶-3(Caspase-3)的作用.方法:将U251细胞分为3组:空白组、顺铂组、加药组(虎纹捕鸟蛛毒素浓度为37.5,50,75,100,150 mg·L(-1)),毒素作用24,48 h后用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活性并与顺铂组、空白组做对比;流式细胞仪AnnexinV-FITC检测细胞凋亡率;Caspase-3分光光度法检测Caspase-3的相对活性.结果:虎纹捕鸟蛛毒素剂量为37.5,50,75,100,150 mg·L(-1)时,对U251细胞的增殖有显著性抑制作用(P<0.05或P<0.01),IC,.为53.48 mg·L(-1).虎纹捕鸟蛛毒素可诱导U251胶质瘤细胞凋亡并呈浓度依赖关系.在剂量为150 mg·L(-1)诱导48 h,细胞早期凋亡率84.1%,晚期凋亡率4.48%.用不同浓度分别处理细胞,Caspase-3活性于48 h,150 mg·L(-1)时达高峰,对细胞中的执行分子Caspase-3的激活速度快,活化程度为9.23,并存在剂量依赖关系和浓度依赖性的升高.结论:虎纹捕鸟蛛毒素明显抑制U251细胞生长并诱导其发生凋亡,凋亡过程中有Caspase-3的激活.
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当归芍药散对血脂异常大鼠抗氧化能力及动脉壁血管细胞黏附分子-1基因表达的影响
目的:观察当归芍药散(DSS)对血脂异常大鼠抗氧化能力及动脉壁血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)mRNA表达的影响.方法:采用高脂饲料喂养法复制血脂异常大鼠模型,同时给予治疗药物DSS(汤剂)高、低剂量及阳性对照药血脂康,连续8周,检测各组大鼠血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及氧化型低密度脂蛋白胆固醇(ox-LDL)、丙二醛(MDA)、超氢化物歧化酶(SOD)水平,并用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定大鼠主动脉VCAM-1mRNA的表达.结果:与模型组相比,DSS高、低剂量组和血脂康组均能明显降低大鼠血清TC、TG、LDL-C及ox-LDL、MDA水平(P＜0.01),均能明显升高HDL-C、SOD水平(P＜0.01).RT-PCR法显示DSS高、低剂量组和血脂康组均能显著降低大鼠主动脉组织中VCAM-1mRNA的表达(P＜0.01),其中DSS高剂量组降低趋势优于低剂量组和血脂康组.结论:DSS高、低剂量组均可较好地调节血脂异常大鼠脂质代谢,清除自由基、抗脂质过氧化损伤并下调动脉壁VCAM-1基因的表达,提示其具有保护血管内皮细胞功能的作用,可进一步阻抑动脉粥样硬化的发生发展.
关键词： 当归芍药散 血脂异常 脂质过氧化 血管细胞黏附分子-1mRNA 血管内皮细胞 -
癃闭消颗粒对大鼠的长期毒性实验研究
目的:观察癃闭消颗粒连续灌胃给药对大鼠的长期毒性,为拟定人体用药安全剂量提供依据.方法:采用5,20,40 g·kg-1d-13个剂量给大鼠连续ig 90 d,正常对照组给予相同容积的生理盐水灌胃.结果:各剂量组心、肝、睥、肺、肾等12种脏器组织形态学检查未见与用药有关的病理学改变.与对照组比较,低剂量组所测各项指标无明'显变化;中剂量组血浆球蛋白降低,T-CHO升高,其它无明显改变;高剂量组血浆球蛋白、TP、ALT、BUN降低,T-CHO升高,肝、脾重量指数升高,前列腺重量指数降低,但上述指标数值均未超过生理值范围.结论:癃闭消颗粒40 g·kg-1d-1(此剂量为临床等效剂量的52倍)为大鼠安全剂量范围.
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参龙健脑胶囊对脑缺血损伤大鼠海马区胆碱乙酰基转移酶表达的影响
目的:探讨参龙健脑胶囊对脑缺血损伤大鼠脑保护作用及对海马区胆碱乙酰基转移酶(ChAT)表达的影响.方法:采用结扎双侧颈总动脉制备脑缺血模型,参龙健脑胶囊低、高剂量组和吡拉西坦组剂量分别为0.4,1.2,0.45 g·kg-1,ig 1次/d.ig 28 d后观察神经功能并评分、脑病理组织切片并应用免疫组织化学染色法观察ChAT在缺血脑损伤大鼠海马区的表达.结果:模型组大鼠神经功能缺损明显(P＜0.05),海马区ChAT表达减少(P＜0.01)；与模型组相比,参龙健脑胶囊治疗组大鼠的神经功能缺损改善(P＜0.05),大鼠海马区ChAT表达显著增加(P＜0.01,P＜0.05).结论:参龙健脑胶囊对脑组织损伤的保护作用与其促进脑组织ChAT表达密切相关.
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疏肝健脾方药对NAFLD大鼠肝组织PPARαmRNA和TNF-α蛋白表达的影响
目的:观察疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病( non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator activated receptor alpha,PPARα)mRNA和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)蛋白表达的影响及作用机制.方法:高脂饲料喂养大鼠12周建立NAFLD模型后,造模组大鼠随机分为模型组、疏肝组、健脾组、综合组、三七脂肝丸组和自然恢复组.除模型组继续高脂饮食外,其余各组均以基础饲料喂养,治疗组分别给予相应药物ig,其他各组给予相应蒸馏水ig.治疗8周后,腹主动脉采血,全自动生化仪检测血脂、肝功能及肝脂；常规HE染色观察肝组织病理变化；RT-PCR法检测肝组织PPARα mRNA表达；免疫组化法检测肝组织TNF-α蛋白表达.结果:与模型组比较,药物治疗各组及自然恢复组肝脏脂变程度明显减轻；血脂、肝脂、肝功能指数明显降低(P＜0.01)；肝组织PPARα mRNA表达均有不同程度的上调(P＜0.05),以疏肝组、健脾组、综合组上调尤为明显(P ＜0.01)；TNF-α阳性细胞表达明显减少(P＜0.01),而以疏肝组、健脾组趋势为显著.结论:疏肝健脾方药对高脂饮食诱导的NAFLD大鼠有较好的治疗作用,其机制可能与其上调PPARαmRNA和下调TNF-α蛋白表达水平有关.
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麝香乌龙丸对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织病理形态及TNF-α,IL-6表达的影响
目的:观察麝香乌龙丸对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜组织病理形态及滑膜组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)表达的影响.方法:将40只雄性Wistar大鼠随机分为正常组(A)10只,造模组30只.造模组大鼠于右后足跖皮下注射完全弗氏佐剂(CFA)0.1 mL造成AA模型.将造模成功的造模组随机分为模型组(B)、麝香乌龙丸低、高剂量组(C,D,n=10),ig给予1.0,2.0 g·kg-1的麝香乌龙丸,每日1次；A,B组每日ig生理盐水2 mL/只.30 d后,取跖趾关节,HE染色观察滑膜组织病理形态,免疫组化法检测滑膜组织中TNF-α,IL-6的表达.结果:麝香乌龙丸低、高剂量组滑膜组织破坏程度较模型组明显减轻；TNF-α,IL-6在麝香乌龙丸低、高剂量组中表达均较模型组显著降低(P＜0.01或P＜0.05),麝香乌龙丸低、高剂量组比较无统计学意义.结论:麝香乌龙丸能改善AA大鼠滑膜组织病理损害,下调TNF-α,IL-6的表达.
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抗感解毒片对免疫功能的影响
抗感解毒片为山东济南中药厂中药研究所研制的经验方,处方药味由双花、连翘、薄荷、大青叶等14味药组成,具有疏风解表,清热解毒的功效,临床上用于防治感冒,增强人体免疫功能.为进一步验证本品作用,进行了抗感解毒片对免疫功能影响的药效研究.
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化瘀通络解毒法对肝纤维化大鼠血清超氧化物歧化酶、丙二醛和转化生长因子β1的影响
目的:观察化瘀通络解毒颗粒对肝纤维化大鼠血清超氧化物歧化酶(S0D)、丙二醛(MDA)和转化生长因子β1(TGF-β1)的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机制.方法:采用四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型,同时以化瘀通络解毒颗粒进行干预,造模8周后,检测大鼠血清中SOD,MDA和TGF-β1的变化.结果:经治疗后,用药组SOD活性明显上升,MDA和TGF-β1含量明显降低,与模型组相比均P＜0.01.结论:化瘀通络解毒颗粒具有抗肝纤维化的作用,其作用机制可能与抗脂质过氧化及拮抗TGF-β1的产生有关.
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杜仲降压方不同提取液药效学研究
目的:用药效学指标验证杜仲降压方不同提取工艺的科学性及合理性.方法:采用5种工艺对杜仲降压方药进行提取,以相同剂量的提取液及对照药品杜仲降压片对自发性高血压大鼠(SHR)的血压、心率、肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)、血浆中内皮素(ET)、一氧化氮(NO)的影响为指标,综合评判不同提取工艺的优劣.结果:杜仲降压方不同提取液及对照药品均可不同程度降低SHR的血压和心率,降低SHR血浆中肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮的含量,降低ET、升高NO.结论:杜仲降压方药半仿生提取工艺的药效学综合评判指标优于其他工艺.
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熟地、苍术及两者不同配伍比例保护大鼠残余肾和抑制转化生长因子的实验研究
目的:观察熟地、苍术及二者不同配伍比例保护大鼠残余肾和抑制转化生长因子β1的作用,并寻找熟地、苍术的佳配伍比例.方法:采用大鼠5/6肾切除动物模型,分为单味熟地组、熟地伍苍术(1∶1)组、熟地伍苍术(2∶1)组、熟地伍苍术(1∶2)组、单味苍术组、模型空白对照组、正常对照组,观察各组大鼠治疗前后一般状况、血红蛋白(Hb)、肾功能(血清肌酐,Scr)、转化生长因子β1(TGFβ1)的表达.结果:单味熟地组、熟地伍苍术(1∶1)组、熟地伍苍术(2∶1)组与模型组相比有较大差异(P＜0.05).组间比较:熟地伍苍术(1∶1)组与单味熟地、熟地伍苍术(1∶2)、熟地伍苍术(2∶1)、单味苍术组间有差异(P＜0.05).结论:单味熟地、熟地伍苍术(1∶1)、熟地伍苍术(2∶1)均有抗肾纤维化的作用,尤以熟地伍苍术(1∶1)疗效佳.
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人参二醇皂苷对急性血瘀模型大鼠血液流变性及PGF1a、TXB2的影响
目的:观察人参二醇皂苷(Panaxdiols Saponin,PDS)对急性血瘀模型大鼠血液流变性及PGF1a和TXB2的影响.方法:Wistar大鼠60只,随机分为6组:对照组;模型组;阳性对照组;PDS 5,10,20 mg·kg-13个剂量组.采用sc肾上腺素加冰水冷浴法制备大鼠急性血瘀模型,舌下iv给药,观察PDS对急性血瘀模型大鼠血液流变性及PGF1a和TXB2的影响.结果:PDS能降低急性血瘀模型大鼠全血黏度,增加心、肺组织中PGF1a含量,减少TXB2含量.结论:PDS对急性血瘀模型大鼠血液流变性异常有明显改善作用,能纠正PGF1a与TXB2之间的平衡失调.
