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补肾活血方对人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路的调控作用

宋朋飞;阚卫兵;赵婧;姜玉祥;谢殿洪;肖志峰

摘要: 目的:观察补肾活血方对人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路的调控作用.方法:采用GSK-3 β选择性抑制剂SB-216763作用于正常人滑膜细胞,然后提取和检测胞核蛋白β-catenin的表达,确定激活正常人滑膜细胞的Wnt/β-catenin信号通路的佳时间点,然后给予补肾活血方含药血清干预,采用Western Blot检测人滑膜细胞胞核蛋白β-catenin及其下游基因MMP-7和Cyclin D1的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测滑膜细胞上清液中MMP-7和Cyclin D1的表达.结果:Western Blot结果显示:成功激活正常人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路,与正常组比较,SB-216763干预组的人滑膜细胞核蛋白β-catenin、MMP-7和Cyclin D1的表达明显升高(P<0.05);补肾活血方含药血清干预后,滑膜细胞胞核蛋白β-catenin及其下游基因MMP-7和Cyclin D1有显著下调(P<0.05).ELISA结果显示:与正常组滑膜细胞比较,SB-216763干预的滑膜细胞上清液中MMP-7和Cyclin D1的表达明显升高(P<0.05).而补肾活血方干预后较SB-216763干预组明显下调(P<0.05).结论:补肾活血方具有调控人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路的作用,其结果有助于从单一通路阐释补肾活血法中药治疗膝骨关节炎的作用机制.

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