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  • 番茄汁和葡萄汁联合作用对人前列腺癌细胞的影响

    作者:杨佳娟;罗琼;杨明亮;闫俊;王丽红;任世成

    植物化学物独立抗肿瘤的实验研究已渐近到基因和分子水平,然而大量研究发现,将这些纯化物质单独用于肿瘤预防,虽有一定的效果,但并不令人十分满意,由此,人们逐渐开始关注植物化学物之间的联合抗肿瘤作用[1].蔬菜水果中植物化学物如番茄红素,白藜芦醇的抗前列腺癌效果已得到证实[2-3],番茄汁、葡萄汁单独作用时,在适宜的剂量下分别比番茄红素、白藜芦醇具有更强的对人前列腺癌PC-3细胞生长抑制及诱导细胞凋亡的作用[4-5].番茄汁、葡萄汁的联合作用效果是否更优尚不清楚.本研究比较番茄汁和葡萄汁联合作用与单独作用对人前列腺癌细胞PC-3影响的效果.

  • 葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞的凋亡作用

    作者:罗琼;王丽红;杨明亮;崔晓燕;庞雅琴;阎俊

    目的 研究葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞的影响.方法 将低、中、高剂量(分别为16、32和64 μl/ml)的葡萄汁加入体外培养的人前列腺癌PC-3细胞,检测葡萄汁对PC-3细胞的毒性作用,用单细胞凝胶电泳测其对DNA损伤作用,流式细胞术测细胞凋亡,免疫组化法测凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达.结果 3种剂量的葡萄汁能抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖;DNA迁移长度与彗星细胞拖尾率逐渐增高,拖尾细胞率高为71%;能诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡,细胞凋亡率分别是14.5%、32.1%和40.5%,促凋亡基因Bax表达率分别是36.8%、50.4%和64.8%;抑凋亡基因Bcl-2表达率依次为39.1%、25.0%和12.4%.结论 葡萄汁可抑制人前列腺癌PC-3细胞增长,诱导其细胞凋亡,能上调促凋亡基因Bax的表达,下调抑凋亡基因Bcl-2的表达.

  • 蕃茄汁对人前列腺癌PC-3细胞增殖的影响

    作者:庞雅琴;罗琼;杨明亮;李卓能;闫俊;曾秀林;陈芳芳

    目的研究番茄汁对人前列腺癌PC-3细胞增殖的影响及其可能的机制.方法体外培养人前列腺癌PC-3细胞,分别加入不同浓度的番茄汁;用彗星试验测定经番茄汁处理的人前列腺癌PC-3细胞DNA链断裂情况,分析DNA的损伤作用;采用MTT法测定细胞的增殖情况.结果番茄汁对人前列腺癌PC-3细胞的DNA具有损伤作用,可使DNA链断裂,DNA的迁移长度与彗星细胞拖尾率显著增高,与对照组相比,差异有非常显著性;能抑制PC-3细胞的增殖,与对照组相比,各实验组的吸光度逐渐降低,差异有非常显著性,且随着浓度的增加抑制作用逐渐加强.结论番茄汁可诱导人前列腺癌PC-3细胞的DNA损伤,从而抑制其生长.

  • 枸杞多糖对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响

    作者:崔晓燕;罗琼;杨明亮;王丽红;闫俊;李卓能

    目的 研究枸杞多糖(LBP)对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响.方法 体外培养的人前列腺癌PC-3细胞经枸(LBP)处理后,采用MTT法测定细胞的增殖情况,流式细胞仪分析LBP对PC-3细胞周期和凋亡的影响,TUNEL法观察PC-3细胞凋亡的变化,用免疫组化法检测其Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 LBP可明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的生长,并能诱导PC-3细胞凋亡,凋亡率分别为8.5%、17.5%、29.5%、37.5%和41.5%,与对照组比较,差异有非常显著性(P<0.01);同时PC-3细胞Bcl-2/Bax蛋白比值显著下降,呈明显的剂量-效应关系.结论 LBP对人前列腺癌PC-3细胞DNA具有损伤作用,能诱导PC-3细胞的凋亡,凋节其相关基因的表达.

  • 番茄原汁对人前列腺癌PC-3细胞生长抑制作用的研究

    作者:罗琼;庞雅琴;李卓能;闫俊;杨明亮;曾秀林

    目的探讨番茄原汁对人前列腺癌PC-3细胞生长抑制作用及其可能机制.方法不同浓度的番茄原汁作用于人前列腺癌PC-3细胞48小时;采用噻唑蓝(MTT)法检测番茄原汁对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制作用,彗星试验检测PC-3细胞DNA损伤作用.结果番茄原汁能抑制人前列腺癌PC-3细胞生长,与对照组相比差异有极显著性;引起PC-3细胞DNA单链断裂,出现拖尾的彗星细胞,拖尾率与尾长随着番茄原汁浓度增大而增加,表现明显的剂量-反应关系.结论番茄原汁对PC-3细胞生长抑制作用的机理可能与其诱导人前列腺癌PC-3细胞DNA损伤的有关.

  • 紫草素诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡机制的探讨

    作者:陈永强;郑璐;刘军权;周燏;陈玲;曹希亮;周忠海;陈复兴

    目的:研究紫草素诱导人前列腺癌细胞(PC-3)凋亡及其作用机制.方法:以PC-3细胞为研究对象,以不同浓度的紫草素处理PC-3细胞,另设空白组,处理不同时间后,分别采用噻唑蓝(MTT)法检测紫草素对PC-3细胞增殖抑制情况;显微镜观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生;蛋白质免疫印迹(Westernblot)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和磷酸化-细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达.结果:不同浓度的紫草素对PC-3细胞的生长抑制呈时间和剂量依赖性;形态学观察结果显示紫草素作用PC-3细胞后可使细胞变圆,脱落,皱缩,细胞内出现空泡,周围出现凋亡小体;与空白组比较,不同浓度的紫草素明显升高Caspase-3和Bax蛋白的表达,明显降低Bcl-2蛋白的表达,不同浓度的紫草素作用细胞48 h后可诱导细胞产生ROS,ROS清除剂二硫苏糖醇(DTT)可以明显逆转紫草素诱导的PC-3细胞的生长抑制率,且0.2 mmol· L-DTT可以抑制由紫草素诱导的Caspase-3和ERK1/2的活化.结论:紫草素通过ROS/ERK1/2信号通路诱导人前列腺癌PC-3细胞发生凋亡.

  • siRNA沉默PRL-3基因对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的作用

    作者:李峰;杨森;周鹏飞;陈映鹤

    目的 探讨小于扰RNA沉默PRL-3基因对前列腺癌PC-3细胞侵袭及增殖的影响.方法 化学合成PRL-3基因的特异性siRNA,脂质体转染法转染PC-3细胞;24及48小时行real-time PCR和Western blotting验证其沉默效果;Transwell侵袭实验检测其体外侵袭力的改变;CCK8检测其增殖能力.结果 转染siRNA后,与对照组相比较,siRNA干扰组mRNA水平抑制率达60%以上,蛋白水平抑制率达90%以上,且在48h达到佳抑制效果(P <0.05,P<0.05);PC-3细胞穿过基膜数明显减少(P<0.05),但是对细胞生长抑制作用不明显.结论 应用RNA干扰技术沉默人前列腺癌PC-3细胞中的PRL-3基因,可以抑制PC-3细胞的侵袭能力,为进一步探讨前列腺癌的发病机制奠定一定的实验基础.

  • 葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响

    作者:罗琼;庞雅琴;杨明亮;阎俊;王丽红;崔晓燕

    目的: 探讨葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞生长抑制的作用及其机制.方法: 白藜芦醇及不同浓度葡萄汁作用于人前列腺癌PC-3细胞48h;采用生长曲线及噻唑蓝(MTT)法检测葡萄汁、白藜芦醇对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制作用,通过原位(缺口)末端标记法(TUNEL)观察凋亡细胞的形态结构变化,流式细胞仪检测细胞凋亡峰.结果: 葡萄汁、白藜芦醇能显著抑制人前列腺癌PC-3细胞生长;TUNEL方法检测呈阳性;流式细胞仪分析图上出现典型的凋亡细胞峰.以上各指标中,葡萄汁随着浓度增大作用加强;低剂量组的作用比白藜芦醇组差,中、高剂量组的白藜芦醇浓度低,但作用比白藜芦醇组强.结论: 葡萄汁对抗人前列腺癌PC-3细胞的作用,除白藜芦醇外,可能还存在其他抗癌成分的作用.葡萄汁、白藜芦醇对PC-3细胞生长抑制作用的机制可能与其诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡有关.

  • 苹果汁对PC-3细胞生长及其相关基因表达的影响

    作者:罗琼;杨佳娟;杨明亮;闫俊;任世成

    苹果为我国产量大的水果,资源十分丰富,有很好的营养价值和特殊的保健作用.苹果中的多酚能抑制癌细胞的增殖.其中,原花青素是苹果中主要的酚类成分.大量研究证实,原花青素可通过抗氧化,诱导凋亡,调控细胞周期等机制达到抗肿瘤的效果,对结肠癌,乳腺癌,前列腺癌均有较好的抗癌活性[1].本实验在原花青素抗前列腺癌的基础上,探讨富含原花青素及其他植物化学物的苹果汁对人前列腺癌PC-3细胞生长作用的影响及其分子机制.

  • 番茄汁对人前列腺癌细胞DNA损伤作用的影响

    作者:庞雅琴;罗琼;李卓能;陈芳芳;闫俊;杨明亮;曾秀林

    目的探讨番茄汁对人前列腺癌细胞株(PC-3)DNA损伤作用的影响.方法于人前列腺癌PC-3细胞的细胞培养液中分别加入番茄汁40,80,120μl/ml,培养48 h;用单细胞凝胶电泳(SCGE)检测番茄汁对人前列腺癌PC-3细胞DNA损伤程度.结果番茄汁可引起PC-3细胞DNA链断裂,细胞尾长与拖尾率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01).结论番茄汁能导致人前列腺癌PC-3细胞的DNA损伤.

  • saRNA上调人前列腺癌PC-3细胞中Numb基因表达的研究

    作者:陈金飚;颜醒愚

    目的 基于小激活RNA(saRNA)的肿瘤治疗策略,筛选具有激活Numb基因功能并相对高效的saRNA分子.方法 设计与合成针对Numb基因的3对候选小分子双链RNA(dsRNA)分子,对照组dsRNA(dsControl)设计成与人类基因组序列非同源.将dsRNA分子转染人前列腺癌细胞(PC-3细胞).采用RT-qPCR法检测转染后PC-3细胞中靶基因Numb的mR-NA表达水平.Western blot验证转染后PC-3细胞靶基因Numb的蛋白表达水平.结果 dsNumb-870、dsNumb-948均未能上调PC-3细胞中靶基因Numb mRNA和蛋白水平;而dsNumb-298能上调细胞内Numb mRNA和蛋白水平.结论 dsNumb-298具有特异性激活PC-3细胞中Numb基因表达的功能.

  • 蓝舌病毒湖北株对人前列腺癌PC-3细胞杀伤效应的研究

    作者:段刘剑;张杰;周晓光;程凯;王伟;许明伟

    目的 体外实验研究蓝舌病毒湖北株3(BTV-HbC3)对人前列腺癌PC-3细胞的杀伤效应并且初步探讨BTV-HbC3靶向性溶瘤的机制.方法 观察PC-3细胞感染BTV-HbC3后所致的病变效应(CPE)变化;透射电镜观察细胞感染病毒后超微结构的变化;CCK-8法研究病毒致细胞病变效应的特征;DNA Ladder分析病毒诱导细胞凋亡的情况;流式细胞仪检测病毒对PC-3细胞凋亡的影响.结果 BTV-HbC3感染PC-3细胞后可见到明显的细胞效应;透射电镜发现胞浆内有大量病毒颗粒和典型细胞凋亡的形态变化;CCK-8法检测到病毒明显抑制细胞生长;DNA Ladder分析见阶梯状条带;流式细胞仪检测到明显细胞凋亡的存在,可见明显的亚二倍体峰.结论 BTV-HbC3在体外可有效地杀伤PC-3细胞,并能诱导其凋亡.

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