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海带多糖对小鼠H22实体瘤的抑制作用
海带多糖(Laminria Japonica polysaccharides)是海带中提取的一种具有生物活性的海藻多糖,本实验室已初步鉴定海带多糖具有抗突变活性[1],在此基础上,我们用抑瘤率及相关免疫学指标对海带多糖的生物活性进行了初步探讨.
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海带多糖对小鼠免疫功能的调节作用
海带多糖是海带的热水提取物,具有抗肿瘤、抗病毒等作用.据文献报道,大多数植物多糖具有免疫调节作用.为此我们对海带多糖的免疫活性进行了研究,为海带的综合开发利用提供了实验依据.
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超声波提取海带多糖及抗辐射作用研究
超声波细胞破碎仪对过40目筛的海带细粉破碎提取海带多糖,并与酸提取法进行比较.超声波处理20分钟得到的海带多糖量多.与酸提取法相比,超声波法得到的海带多糖总糖含量增高(分别为18.9%和27.3%,P<0.01).用提取得到的海带多糖配制成水溶液对经5Gy 60Co-r射线的小鼠经口自由饮水.结果:海带多糖水溶液为12mg/ml以上剂量时可以显著提高小鼠的平均体重(P<0.05),对增加外周血液中白细胞含量效果极其显著(P<0.01),说明海带多糖经口给药有辐射保护作用.
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海带多糖对放疗后颌下腺血管的影响
目的:探讨海带多糖(LJP)对放疗后颌下腺血管的影响.方法:70只Wistar大鼠随机分为正常对照组(N),放疗对照组(R),海带多糖高剂量(300mg/kg)+照射组(LRA),海带多糖低剂量(30mg/kg)+照射组(LRB).照射前后3d分别给予腹腔注射0.9％氯化钠溶液和海带多糖.R组,LRA组,LRB组的大鼠头颈部予以60Co γ射线15Gy一次性照射.透射电镜观察颌下腺血管内皮细胞超微结构改变,免疫组化法检测腺体微血管密度(MVD),RT-PCR检测血管内皮生长因子(VEGF),基质金属蛋白酶9(MMP-9)及其抑制剂(TIMP-1)的表达.结果:电镜观察LRA及LRB组血管内皮细胞损伤较轻;免疫组化结果显示,与R组相比,LRA及LRB组MVD较高(P＜ 0.05);RT-PCR检测VEGF、MMP-9在LRA及LRB组的表达高于R组(P＜0.05),TIMP-1在各组表达无差异.结论:LJP可减轻射线对颌下腺血管的损伤.
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海带多糖对2型糖尿病小鼠血清胰岛素和胰淀素水平的影响
目的:探讨海带多糖对实验性2型糖尿病小鼠的降血糖作用和可能的机制.方法:健康雄性昆明小鼠60只,高脂饲料喂养并腹腔注射四氧嘧啶制备2型糖尿病动物模型,海带多糖灌胃干预治疗.自动血糖仪测小鼠空腹血糖(FBG),免疫电化学发光法检测血清胰岛素(Insulin)水平,酶联免疫吸附法检血清胰淀素(Amylin)水平.结果:经海带多糖干预治疗后,高、中、低剂量组动物FBG水平较模型组显著降低(P＜0.05)；血清胰岛素水平和Amylin水平较模型组显著升高(P＜0.05)；各剂量组之间无明显差异.结论:海带多糖在2型糖尿病早期能促进胰岛细胞的分泌功能,提高血清胰岛素和胰淀素水平,发挥降糖作用.
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海参肽与海带多糖对小鼠血糖水平的影响
目的 探讨海参肽与海带多糖对小鼠血糖水平的影响.方法 观察海参肽与海带多糖对正常小鼠糖耐量水平的影响,以及二者对皮下注射肾上腺素所致应激性高血糖模型小鼠血糖水平的调节作用.结果 与模型组相比,海带多糖能显著降低正常小鼠糖耐量试验中30 min及60 mm的血糖值(P＜0.05),海参肽能显著降低正常小鼠糖耐量试验中60 min的血糖值(P＜0.05);两者均能显著降低肾上腺素所致小鼠高血糖90 min时的血糖值(P＜ 0.05-0.01),二者作用无显著性差异.结论 海参肽与海带多糖对小鼠血糖水平均具有显著的调节作用.
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海带多糖的研究进展
近年来,随着科技的发展和医药界的需求,多糖的研究越来越深入,海带多糖的研究也倍受关注.药理和临床研究表明,海带大部分生物活性与其主要成分多糖密切相关.笔者现就近年来海带多糖的成分、提取分离方法和生物功能研究等进行综述.
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海带多糖对光老化皮肤基质金属蛋白酶活性影响的实验研究
目的:探索海带多糖(laminaria polysaccharide,LP)对光老化皮肤基质金属蛋白酶活性的影响.方法:SPF级昆明小鼠背部剃毛,随机分为对照组、模型组、海带多糖低剂量组(LP-L,1mg·kg-1)、海带多糖高剂量组(LP-H,5mg·kg-1)、Vit E组(100 mg·kg-1),每日腹腔注射给药2次.除对照组外,每日紫外线照射1h,每周照射5次,UVB累积照射剂量为21.60 J·cm-2,UVA累积照射剂量为84.02 J·cm-2.8周后,取背部暴露皮肤,行HE染色测量真皮层厚度,化学比色法检测皮肤羟脯氨酸(Hyp)含量,ELISA法检测血清基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、金属蛋白酶组织抑制物(TIMP-1)的含量,Real-time PCR法分析皮肤MMP-1,TIMP-1 mRNA的相对含量.结果:与模型组比较,LP-H组可以显著增加真皮层厚度、皮肤Hyp含量及血清TIMP-1的水平,显著降低血清MMP-1水平及皮肤MMP-1 mRNA相对含量.结论:海带多糖可以通过调节基质金属蛋白酶活性来调节光老化皮肤胶原蛋白的代谢.
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海带多糖对受辐射损伤雄性大鼠睾丸组织的保护作用
目的 探讨海带多糖(LJP)对辐射导致的大鼠睾丸组织损伤的影响.方法 将Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组、阳性对照组、阴性对照组和LJP实验组,灌胃10 d后行一次性γ射线局部照射,照射剂量6.0 Gy/只,72 h后观察睾丸组织形态学改变,测定睾丸和附睾的脏器系数,计算精子数和精子活率,检测睾丸组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量.结果 海带多糖可使受损的睾丸组织形态有不同程度修复;能增加睾丸和附睾的脏器系数;提高精子数量和活力;增强大鼠睾丸组织SOD活性,降低MDA含量.结论 海带多糖对辐射造成的睾丸组织损伤具有明显的保护作用.
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海带多糖对多次小剂量电离辐射致大鼠睾丸组织损伤的影响
目的 探讨海带多糖(LJP)对多次小剂量电离辐射导致的大鼠睾丸组织氧化损伤的影响.方法 将Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组、辐射模型组和LJP干预组;LJP干预组给予LJP,其余各组以等量生理盐水灌胃;除对照组外,各组在适应性饲养7 d后进行~(60)Co γ射线局部照射,1次/d,4周20次,总剂量2.3 Gy/只;分别于停止照射后1、7和14 d处死大鼠,分离大鼠睾丸、附睾等组织;采用可见光分光光度计比色法检测睾丸丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性;光镜观察睾丸组织形态;统计其精子数量及存活率.结果 LJP各组与对应模型各组比较,睾丸中MDA含量减少(t=3.66-5.03,P<0.01),GSH含量增加,SOD、LDH和GSH-PX活性增强(t=2.77-25.52,P<0.05);睾丸组织损伤减轻;精子数量及存活率提高(t=3.11-23.08,P<0.01);停止辐射14 d后的各项指标更接近对照组.结论 LJP能促进多次小剂量局部电离辐射导致的睾丸组织氧化损伤恢复,对睾丸组织的修复及其生精功能亦有促进作用.
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海带多糖对实验性高脂血症鹌鹑血流变及微循环的影响
目的:研究海带多糖对实验性高脂血症鹌鹑血流变及微循环的影响.方法:采用高脂饲料诱导鹌鹑建立高脂血症模型,注射海带多糖(2,4,8 mg·kg-1,qd)2周后,测定血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)浓度,计算HDL/TC值;测定全血低切(LS)、全血中切(MS)、全血高切(HS)、纤维蛋白原(Fg)以及红细胞压积(HT);观察肠系膜毛细血管交点数、微动脉管径、血流速度.结果:海带多糖显著降低血清TC,TG和LDL浓度,显著升高HDL/TC比值;明显改善血流变及微循环各项指标,并具有剂量依赖性.结论:海带多糖具有降血脂,改善血流变,改善微循环的药理活性.
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海带多糖对超重环境微波辐射大鼠氧化损伤的抑制
为探讨海带多糖对超重环境下微波辐射大鼠氧化损伤的影响,将18只雄性Wistar大鼠随机分为3组,每组6只,制作大鼠6g超重环境下微波(200 mW/cm2,5 min)损伤模型(模型组),并灌胃给予20 mg/ml海带多糖(海带多糖组).结果显示,模型组大鼠血清一氧化氮(NO)、抗超氧阴离子活力、过氧化氢酶(CAT)、一氧化氮合酶(NOS)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)低于对照组,海带多糖组大鼠上述指标高于模型组;模型组大鼠肝匀浆中CAT、GSH-Px和GSH低于对照组,NOS高于对照组;海带多糖组大鼠肝匀浆中CAT高于模型组,NOS低于模型组,上述差异均有统计学意义(P＜0.05).提示海带多糖对超重环境下微波损伤的抑制作用可能与CAT、GSH-Px、GSH升高有关.
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海带多糖对睾丸受辐射雄性大鼠性功能的影响
目的 观察海带多糖(LJP)对辐射局部损伤雄性大鼠性功能的影响.方法 分组及构造大鼠辐射损伤模型,将Wistar大鼠随机分为正常对照组、阳性对照组、阴性对照组和LJP实验组,灌胃10 d后行一次性Y射线局部辐射,辐照剂量6.0 Gy/只,72 h后进行大鼠的交配试验及阴茎勃起试验,并测定附性腺器官脏器系数.计算精子数和精子活率.测定血清睾酮(testosterone,T)、垂体精子生成素(follicle stimulating hormone,FSH)、垂体间质细胞刺激素(1uteirtizing hormone,LH)、雌二醇(estradiol,E2)水平.结果 LIP实验组能明显缩短受局部辐射损伤大鼠的阴茎勃起潜伏期、爬高潜伏期,提高爬高动物百分率;提高其包皮腺、精囊腺-前列腺、提肛肌等脏器系数,提高精子数量及活力;提高血清性激素水平,与阴性对照组相比差异有显著性和非常显著性.结论 LIP可以改善和促进受局部辐射损伤大鼠的性功能.
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枸杞多糖与海带多糖联合对慢性腹部电离辐射雄性大鼠生殖损伤的影响
目的 探讨枸杞多糖(LBP)和海带多糖(LJP)联合干预对受慢性腹部电离辐射的雄性大鼠生殖系统损伤的协同效应.方法 将40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照、阴性对照、LBP,UP和LBP+LJP联合共5组;适应性灌胃7d后,除对照组外,其余各组进行连续4w(周末除外)的(60)Coy照射,每日1次,源靶距离80 cm,吸收剂量率为0.925Gy/min,照射总剂量每只2.3Gy.照射部位为下腹部,骼前上棘以上部分用3mm铅板档住.照射期间根据分组每日灌胃1次,灌胃体积相同.照射完毕7d后,计数精子数和精子活率、测定睾丸、附睾、精囊腺、前列腺的胜器系数、超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量,并观察睾丸组织切片的形态学改变.结果 与阴性对照组相比,LBP+LIP联合作用组辛丸脏器系数、精子数及精子活率增加,MDA含量明显降低,SOD活力升高,组织受损程度明显减轻,且效果优于LBP、LJP单独作用.结论 LBP+LJP联合作用对受慢性局部电离辐射大鼠的生殖损伤有一定的防护作用,联合作用功效从整体上优于LBP,LJP单独作用.
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海带多糖对慢性局部电离辐射致大鼠睾丸细胞损伤的干预效应研究
目的 探究海带多糖(Laminaria japonica polysaccharides,LJP)对慢性局部电离辐射致雄性大鼠睾丸细胞损伤的影响.方法 将适应饲养7 d的56只Wistar雄性大鼠随机分为正常对照1组、辐射模型3组和LJP干预3组,每组8只;UP干预3个组给予LJP的生理盐水溶液,其余各组以等量生理盐水灌胃;经灌胃处理7d后,除对照组外的其它6组,以60Coy射线进行局部照射,除周末两天不照射外,每天1次,每周连续5次,共20次,总刑量每只2.3Gy;分别在停止照射后1、7和14 d处死大鼠,分离睾丸;采用免疫组化、单细胞凝胶电泳、流式细胞术的方法研究海带多糖对电离辐射致大鼠睾丸组织caspase3蛋白表达量和睾丸细胞DNA损伤及其含量的影响.结果 停止辐射1d、7d、14d后LJP各组与对应模型组相比,睾丸组织形态好于对应模型组,睾丸组织caspase3蛋白表达量降低,其彗星拖尾率、尾长减少;HC峰内细胞占睾丸细胞百分比明显低于对应模型组,且UP 14d组1C、2C、4C峰内细胞占睾丸细胞百分比均显著高于模型14d组.结论 LJP可明显降低辐射所致大鼠睾丸组织caspase 3蛋白的异常表达和各睾丸细胞的DNA损伤,促进损伤细胞的修复.
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海带多糖对糖尿病小鼠血糖的调节作用
目的:研究海带多糖(Laminarina Japonica Polysaccharides LJPS)对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血糖的调节作用.方法:从小鼠尾静脉注射55mg/kg bw剂量的四氧嘧啶造成糖尿病小鼠模型,按125、250、500mg/kg bw剂量的海带多糖连续灌胃糖尿病小鼠3 w后,测定空腹血糖、尿素氮、血清钙、血清胰岛素含量等指标并做胰腺病理检查.结果:海带多糖能明显降低糖尿病小鼠血糖和尿素氮,其血糖降低率分别为34.96%,20.70%,26.82%,增加糖尿病小鼠的血清钙和血清胰岛素含量,对四氧嘧啶所致的胰岛损伤具有明显的恢复作用.结论:海带多糖对糖尿病小鼠有降血糖及保护胰岛细胞的功能.
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海带多糖的抗辐射作用与淋巴细胞凋亡关系研究
目的:探讨海带多糖(LJP)抗辐射作用与淋巴细胞凋亡的关系.方法:将Wistar雄性大鼠随机分为对照组,模型组和4个不同剂量LJP实验组(100、200、300、400mg/kg),每组6只.对照组,模型组每只给予2 ml生理盐水,实验组给予不同浓度等量LJP溶液.灌胃10d后模型组和实验组行一次性全身60Co γ射线照射,每只剂量9.0 Gy,18h后测定各组大鼠脾脏淋巴细胞增殖反应;腹腔巨噬细胞数目及吞噬功能;血清溶血素;迟发性变态反应及脾淋巴细胞凋亡率和凋亡相关基因Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果:LJP各实验组与模型组比较,能非常显著地对抗辐射对相关免疫指标的抑制作用(P＜0.01).TUNEL实验与流式细胞术均说明LJP对照射诱导的大鼠脾淋巴细胞凋亡具有一定的拮抗作用,并呈现浓度的依赖效应.免疫组化结果显示:随着LJP含量的增加,照射后脾淋巴细胞的Bcl-2蛋白表达增加而Bax蛋白表达下降,Bcl-2/Bax上升.结论:LJP抗辐射作用的可能机制之一是使凋亡抑制基因Bcl-2表达上调、促凋亡基因Bax蛋白表达下调,Bcl-2/Bax比值明显增大,防止脾淋巴细胞凋亡,促进免疫功能恢复.
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海带多糖降血糖、血脂作用的研究
海带多糖(Laminarina japonica polysaccharides,LJPS)是海带经水提、醇提而得的多糖物质,具有免疫调节,抑制肿瘤等多种保健的作用[1,2],鉴于植物多糖调节血糖的功能[3,4],本实验探讨LJPS调节糖尿病大鼠血糖、血脂的作用.
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海带多糖对心理应激大鼠血管舒张功能的保护作用
目的 探讨海带多糖对心理应激大鼠血管舒张功能的保护作用及相关机制.方法 采用愤怒心理应激的方法制备血管内皮损伤大鼠模型,实验分为对照组、模型组、海带多糖低和高剂量组及低分子肝素组.造模后取血,采用ELISA法检测血浆肾上腺素(Adr)水平、血管性血友病因子(vWF)水平,采用放射免疫化学法检测血浆皮质醇、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的水平,采用化学法检测血浆NO水平.取血后,制备大鼠血管环,观察各组大鼠血管环对累计浓度乙酰胆碱(Ach)的内皮依赖性舒张反应.结果 与对照组比较,模型组、海带多糖组和低分子肝素组血浆皮质醇和Adr水平明显升高(P＜0.05)；海带多糖高剂量组血浆vWF水平与模型组比较明显降低(P＜0.05)；海带多糖高剂量组血浆NO水平与模型组比较显著升高(P＜0.05)；海带多糖组血浆6-keto-PGF1α水平与模型组比较显著升高(P＜0.05);与模型组比较,海带多糖高剂量组血管舒张反应明显增强(P＜0.05).结论 海带多糖对心理应激大鼠血管舒张功能具有一定的保护作用.
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海带多糖对人鼻咽癌细胞及其裸鼠移植瘤的抑制作用
目的:通过观察海带多糖(laminaria japonica polysaccharides,LJP)在体内外对人鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞的抑制作用,探讨其可能的抗癌机制.方法:应用MTT法检测LJP对人NPC细胞株(HONE1和CNE2)增殖的抑制作用;运用PI加Annexin V双染法检测LJP对HONE1细胞凋亡的影响;以人NPC细胞株HONE1建立裸鼠皮下移植瘤模型及行体内抑瘤实验,并在透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)下观察移植瘤细胞超微结构.结果:MTT显示LJP对人NPC细胞(HONE1和CNE2)的增殖有抑制作用,且具有剂量相关性,320 mg/L的LJP作用72h的抑制率分别为58.27%(P<0.01)和55.00%(P<0.01);流式细胞仪检测结果显示,LJP具有诱导HONE1细胞凋亡的作用,凋亡率随着LJP浓度的增加而增高,320 mg/L的凋亡率为(49.51±1.89)%(P<0.01).体内实验中,LJP中、高剂量组抑瘤率分别为33.7%(P<0.05)和47.0%(P<0.01),具有明显抑制移植瘤的作用,而低剂量组的抑瘤率仅为16.4%(P>0.05).TEM结果提示癌细胞呈现凋亡特征的改变.结论:LJP具有抑制NPC细胞生长的作用,机制可能是通过诱导癌细胞凋亡而实现的.
