首页 > 文献资料
-
PI3K/AKT信号通路参与AG1478对肺癌细胞中FOXO3a分子的上调及核转位
目的:探讨表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI) AG1478对非小细胞肺癌细胞(NSCLC)中叉头转录因子O3a (FOXO3a)表达及其在细胞核质分布的调控及分子机制.方法:Western blot法检测AG1478及EGFR下游信号通路抑制剂LY294002、U0126、AG490作用后A549细胞中FOXO3a的表达及其在细胞核质分布情况.瞬时转染AKT、FOXO3a小干扰RNA(siRNA),RT-PCR及Western blot检测转染效率及相关蛋白的表达改变.结果:AG1478呈时间依赖性诱导FOXO3a表达上调并促进其核转位.与U0126、AG490相比,PI3 K/AKT信号通路抑制剂LY294002呈时间依赖性抑制p-FOXO3a的表达,促进其核转位；沉默AKT后,p-AKT及p-FOXO3a分子的表达明显下调.结论:AG1478可能通过PI3 K/AKT信号通路上调FOXO3a的表达并促进其核转位,进而下调FOXM1及下游增殖蛋白的表达,抑制肺癌细胞的增殖,提示FOXO3a为肺癌治疗及药物开发的重要靶点.
-
苦参碱逆转人乳腺癌MCF-7/ADR细胞株耐药性及对PI3 K/AKT信号通路下游因子的影响
目的：探索苦参碱对人乳腺癌耐药株MCF-7/ADR多药耐药性逆转的作用机制及对PI3K/AKT信号通路下游因子的影响。方法：采用MTT法检测不同浓度苦参碱和MK2206作用MCF-7/ADR细胞24h后的生长抑制率，以抑制率为10%左右为检测标准；用荧光定量RT-PCR、Western blot检测不同浓度苦参碱作用MCF-7/ADR细胞24h后Bcl-2、Bax、Caspase-3、PARP、GSK-3β、p65六种基因mRNA和蛋白的相对表达量。结果：荧光定量RT-PCR结果显示0.6、1.2g/L的苦参碱处理组与空白对照组相比，随着苦参碱浓度的提高，PI3K/AKT信号通路下游作用因子Bcl-2基因和p65基因的相对表达量逐渐降低，Caspase-3基因的相对表达量变化不显著，而Bax基因、GSK-3β基因及PARP基因的相对表达量逐渐增高；相同抑制率的苦参碱组（0.6g/L）和MK2206组（0.05μmol/L）相比，两组降低基因表达量的差异不明显，苦参碱组更能增加Bax、PARP和GSK-3β基因的相对表达量并且能够明显减低p65基因的相对表达量。Western blot结果显示0.3、0.6、1.2g/L三组不同浓度苦参碱干预组与空白对照组相比，随着苦参碱浓度的提高Bcl-2和p65蛋白表达量逐渐降低，Bax、PARP和GSK-3β蛋白表达量逐渐增高，Caspase-3蛋白表达量变化不明显；相同抑制率的苦参碱组（0.6g/L）和MK2206组（0.05μmol/L）相比，苦参碱组更明显。结论：苦参碱可能是通过作用AKT靶基因启动PI3K/AKT信号转导通路中下游相关凋亡因子而发挥逆转乳腺癌多药耐药的作用。
-
淫羊藿素通过PI3K/AKT信号通路抑制非小细胞肺癌H460细胞增殖
目的：探讨淫羊藿素（icaritin）通过 PI3K/ AKT 信号通路对非小细胞肺癌 H460细胞增殖的影响。方法：采用 MTT 比色实验检测，不同浓度（0、5、10、20、40、80μmol/ L）淫羊藿素处理 H460细胞24、48、72h 后细胞增殖抑制率，流式细胞仪检测不同浓度淫羊藿素对 H460细胞凋亡的影响，Western blot 实验检测不同浓度淫羊藿素对 H460细胞中 PI3K、AKT、p - AKT、Cleaved - Caspase -9蛋白质表达水平的影响。结果：淫羊藿素可抑制非小细胞肺癌 H460细胞的增殖，并表现为剂量和时间依赖性（P <0.05）。0、5、10、20μmol/ L 淫羊藿素处理 H460细胞24 h 后，H460细胞凋亡率分别为（4.90±1.20）%、（13.5±2.32）%、（16.47±1.90）%和（27.43±3.15）%，P <0.05。淫羊藿素可下调 PI3K、AKT 的表达水平，降低 AKT 的磷酸化（p - AKT）水平，上调 Cleaved - Caspase -9表达水平（P <0.05）。结论：淫羊藿素可能通过抑制 PI3K/ AKT 信号通路激活，抑制 H460细胞增殖。
关键词： 淫羊藿素 非小细胞肺癌 PI3K/Akt信号通路 增殖 -
EGFR通过提高mTOR活性增强中枢神经元生长能力
目的:探寻EGFR对中枢神经元生长活性的影响及机制.方法:构建EGFR过表达(pLEGFP-EGFR)和RNAi干扰(vshRNA-EGFR)的慢病毒载体和质粒,作用于体外培养的神经元.Western-blot检测神经元不同EGFR表达水平下胞内微管蛋白(β-Tubulin)轴突蛋白(Tau)和神经丝蛋白(NF)的表达以及PI3K/Akt/mTOR的活化状态.利用mTOR体外抑制剂Rapamycin进一步观察EGFR的作用途径.结果:EGFR上调的同时观察到神经元中Tau、β-tubulin和NF蛋白表达水平和mTOR活性增加,同时PI3K/AKt通路活性在增强.用100μmol/L的Rapamycins处理24 h后,Tau、β-tubulin和NF表达水平明显下调,同时p-mTOR和p-Akt活性降低,神经元生长活性被抑制.结论:体外EGFR能通过PI3K/Akt信号通路激活,上调mTOR表达,从而促进神经元的生长活性.
-
4-HPR对瘢痕疙瘩成纤维细胞Procollagen Ⅰ、MMP-1及信号通路PI3K/Akt的影响
目的 探讨4-羟苯基维胺(4-hydroxyphenyl-retinamide,4-HPR)对瘢痕疙瘩成纤维细胞的作用及PI3K/Akt信号转导通路的影响.方法 通过免疫印迹方法检测人瘢痕疙瘩成纤维细胞中,4-HPR对Ⅰ型前胶原(type Ⅰ pro-collagen,Procollagen Ⅰ)和基质金属蛋白酶-1(matrix metallo-protein-1,MMP-1)蛋白表达水平,观察4-HPR联合TGF-β1、PD98059、SP600125、SB203580及LY294002对瘢痕疙瘩成纤维细胞中相关蛋白表达的影响.结果 瘢痕疙瘩成纤维细胞中,4-HPR使Procollagen Ⅰ蛋白表达水平明显减少,MMP-1蛋白表达水平明显增加,并且具有4-HPR浓度依赖性(P＜0.01).在瘢痕疙瘩成纤维细胞中,4-HPR+ TGF-β1组中Procollagen Ⅰ蛋白表达水平较TGF-β1组明显降低(P＜0.01),但P-Smad2和P-Smad3蛋白表达均无显著改变(P＞0.05).LY294002组中Procollagen Ⅰ蛋白水平与对照组相比显著降低,MMP-1显著升高(P＜0.01).但PD98059、SB203580及SP600125组中Procollagen Ⅰ和MMP-1蛋白水平与对照组相比未发生明显变化(P＞0.05),且4-HPR可有效抑制P-Akt蛋白表达水平(P＜0.01).结论 人瘢痕疙瘩成纤维细胞中,4-HPR可以抑制Ⅰ型前胶原蛋白的表达、上调MMP-1的表达,而这种调控作用可能与PI3K/Akt信号传导通路被削弱有关.
关键词： PI3K/Akt信号通路 4-羟苯基维胺 Ⅰ型前胶原 瘢痕疙瘩 -
miR-130b在人视网膜母细胞瘤中的表达及促癌机制研究
目的:检测miR-130b在人视网膜母细胞瘤(RB)中的表达并初步探究其促癌机制.方法:采用qRT-PCR检测miR-130b在人RB癌组织及癌旁组织、人RB细胞系(HXO-Rb44与Y79)中的表达;采用qRT-PCR、Western Blot及免疫荧光实验检测miR-130b过表达及干扰前后HXO-Rb44与Y79细胞中PTEN的表达水平;采用双荧光素酶报告基因试验验证miR-130b与PTEN的靶向关系;采用共转染实验考察PTEN与miR-130b影响RB细胞系PI3K/Akt信号通路表达的关系.结果:miR-130b在RB癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05).与ACBRI-181细胞比较,miR-130b在HXO-Rb44与Y79细胞中的表达水平显著增高(P<0.05).与RB癌组织比较,PTEN在其癌旁组织中的表达水平显著增高(P<0.05);miR-130b表达水平与PTEN表达水平呈负相关性(P<0.001).过表达miR-130b后的HXO-Rb44细胞PTEN mRNA与蛋白表达水平均显著降低,而干扰miR-130b后的Y79细胞PTEN mRNA与蛋白表达水平均显著升高(P<0.05).与miR-130b mimics+PTEN-NC组比较,miR-130b mimics+wt-PTEN组荧光素酶活性明显降低(P<0.05).共转染miR-130b mimics+PTEN-NC HXO-Rb44细胞p-Akt 308与p-Akt 473蛋白表达水平显著增高(P<0.05),PTEN蛋白表达水平显著降低(P<0.05);共转染miR-130b mimics+PTEN HXO-Rb44细胞中,以上三种蛋白表达水平均未发生明显改变.结论:miR-130b在RB组织及细胞系中呈高水平表达,PTEN为miR-130b的靶基因,miR-130b可能是经负向调控PTEN对PI3K/Akt信号通路的表达产生影响,终发挥促癌作用.
关键词： 人视网膜母细胞瘤 miR-130b PTEN PI3K/Akt信号通路 -
PI3K/Akt信号通路对血管内皮功能的影响及促红素干预
目的:研究P13K/Akt信号通路对心肌缺血后处理(I-PostC)大鼠血管内皮功能的影响及重组人促红细胞生成素注射液(rhEPO)的干预.方法:42只SD雄性大鼠随机分为7组:假手术组(Sham组),缺血/再灌注(I/R)组(IfR组),缺血后处理组(I-PostC组),渥漫青霉素+I-PostC组(Wort+I-PostC组),重组促红细胞生成素组(rhEPO组),Wort+rhEPO组,rhEPO+I-PostC组.结扎大鼠冠状动脉左前降支建立I/R模型.RT-PCT检测各组主动脉组织中Akt mRNA水平,取胸主动脉制成条片行离体器官灌流实验,测定其对去氧肾上腺素(PE)的收缩反应、对乙酰胆碱(Ach)的内皮依赖性舒张反应和对硝普钠(SNP)的非内皮依赖性舒张反应.结果:经I-PcostC和rhEPO的于预后,均能改善各组大鼠I/R损伤的血管内皮对乙酰胆碱的舒张反应,增加主动脉组织中Akt mRNA的表达,但两者的上述效应差异无统计学意义;PI3K阻滞剂Wort可削弱两者的上述效应;联合应用I-PcostC,rhEPO与两者单独应用相比较差异不显著.结论:I-PostC,rhEPO干预,可通过激活P13K-Akt信号通路发挥血管内皮保护作用.
关键词： 缺血/再灌注 缺血后处理 RHEPO 内皮功能 PI3K/Akt信号通路 -
Notch家族成员遗传学变异预示乳头状甲状腺癌高复发风险
目的 分析Notch家族成员在乳头状甲状腺癌(PTC)中的表达及预后的相关性,探讨其参与肿瘤复发的可能机制.方法 下载TCGA数据库中PTC患者的临床资料及mRNA Seq芯片数据,采用cBioPortal在线分析Notch家族成员在正常甲状腺组织及不同TNM分期PTC中的表达情况,其遗传变异与PTC无复发生存期的相关性,同时采用KEGG进行差异基因信号通路聚类分析.结果 在PTC组织标本中NOTCH1、NOTCH3、NOTCH4 mRNA较非甲状癌甲状腺组织表达上调,而NOTCH2表达无显著变化.将PTC标本组织根据TNM分期分组后,NOTCH1、NOTCH3、NOTCH4 mRNA表达呈现先升后降趋势,NOTCH2则相反.携带Notch家族成员遗传变异(包括基因扩增、删失、错义突变及mRNA表达异常)的PTC患者无病生存期较短.通过对差异基因进行信号通路聚类分析,发现Notch成员遗传学异常与包括PI3K/Akt及MAPK信号通路在内的多条肿瘤信号通路均存在交互作用.结论 Notch家族成员异常预示PTC高复发风险,相关机制可能与细胞代谢及PI3K/Akt、MAPK等信号通路活性异常有关.
-
PI3K抑制剂对四氯化碳刺激的肝星状细胞增殖和Ⅰ型胶原表达的影响
目的 探讨PI3K抑制剂对四氯化碳(CCl4)刺激的肝星状细胞(HSC)增殖和Ⅰ型胶原表达的影响,为肝纤维化的治疗提供理论基础.方法 将液氮保存下的HSC株,于37℃,50 mL/L CO2孵育箱中复苏传代培养,同步化后将细胞分为5组:空白对照组、CCl4组、CCl4+1 μmol/L PI103组、CCl4+2μmol/L PI103组、CCl4 +4 μmol/L PI103组,分别培养48 h.用透射电子显微镜初步观察了细胞形态改变；MTT比色法测定细胞增殖情况；免疫细胞化学测定细胞的Ⅰ型胶原表达情况.结果 CC14组与空白对照组比较,细胞生长旺盛,细胞数目增多,Ⅰ型胶原表达增多；透射电子显微镜下可见CCl4+4μmol/L PI103组比CCl4组凋亡细胞显著增多,细胞数目减少；MTT和免疫细胞化学实验结果显示,与CCl4组比较,CCl4+1μmol/L PI103组、CCl4 +2μmol/L PI103组、CCl4 +4μmol/L PI103组细胞的增殖和Ⅰ型胶原的表达均减少,随着PI103剂量加大,细胞的增殖和Ⅰ型胶原的表达均减少,但CCl4+4 μmol/L PI103组和CCl4+2μmol/L PI103组比较,细胞的增殖无明显变化.结论 PI3K抑制剂PI103可抑制活化的HSC的增殖,促进其凋亡以及减少其Ⅰ型胶原的表达.
关键词： PI3K抑制剂 肝星状细胞(HSC) 增殖 Ⅰ型胶原 肝纤维化 PI3K/Akt信号通路 -
PI3K/Akt信号通路与胰岛素抵抗相关疾病的关系
磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt信号通路是参与多重生命活动的关键的信号通路,参与调节细胞的分裂、分化、凋亡等活动.PI3K/Akt信号通路与胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)相关疾病如Ⅱ型糖尿病、心血管疾病、肥胖等关系密切.对PI3K/Akt通路的深入研究将为胰岛素抵抗相关疾病的防治提供新思路.
关键词： PI3K/Akt信号通路 胰岛素抵抗 Ⅱ型糖尿病 心血管疾病 -
PI3K/Akt信号通路通过影响血管平滑肌细胞的迁移参与动脉粥样硬化的形成
动脉粥样硬化是心脑血管疾病发生的主要病变基础。血管平滑肌细胞迁移是动脉粥样硬化发生发展过程中的主要特征之一，PI3K作为胞内有催化活性的信号蛋白，活化后可通过诱导细胞骨架蛋白重组，促进血管平滑肌细胞迁移。本文主要探讨PI3K/Akt信号通路通过影响血管平滑肌细胞的迁移参与动脉粥样硬化的形成与发展，为动脉粥样硬化的治疗提供理论依据和新思路。
关键词： PI3K/Akt信号通路 血管平滑肌细胞迁移 动脉粥样硬化 -
PI3K/Akt信号通路与肺纤维化
肺纤维化(pulmonary fibrosis)是进行性、致命性的疾病.其致病机制不明,治疗效果差.PI3K/Akt信号通路主要与细胞的生长、增殖、分化、凋亡及血管形成等有关.近年来,随着对PI3 K/Akt信号通路的深入研究,发现其活化后可激活下游中的一些因子参与肺纤维化,且与其他通路协同作用促进肺纤维化的形成.因此该通路有可能成为治疗肺纤维化的新靶点.将PI3K/Akt信号通路参与肺纤维化形成的研究进展作一综述.
关键词： PI3K/Akt信号通路 肺纤维化 上下游因子 -
缝隙连接影响氧化低密度脂蛋白诱导A7r5细胞增殖的机制
目的 探讨缝隙连接(GJ)是否通过PI3 K/Akt信号途径影响氧化低密度脂蛋白(OxLDL)诱导的大鼠胸大动脉平滑肌细胞(A7r5)增殖.方法 培养A7r5细胞株,将细胞分4组,即对照组、OxLDL组、OxLDL+二甲基亚砜(DMSO)组和OxLDL+ Akt抑制剂(MK-2206)组.用MTS法及流式细胞仪检测A7r5的增殖活性;流式细胞仪检测各组发绿色荧光的供体细胞(Q3)与双阴性受体细胞(Q4)的比值(Q3/Q4)变化,从而分析GJ功能改变;Western blot法检测细胞中Cx43、Akt、p-Akt蛋白表达.结果 与对照组比较,OxLDL组及OxLDL+ DMSO组A7r5细胞增殖活性增加,细胞周期S期细胞比率增高(P＜0.05);与OxLDL组比较,OxLDL+ MK-2206组两者均降低(P＜0.05).与对照组相比较,OxLDL组及OxLDL+ DMSO组A7r5细胞的Q3/Q4比值增大,GJ功能增强(P＜0.05);与OxLDL组比较,OxLDL+ MK-2206组Q3/Q4比值减小,GJ功能显著降低(P＜0.05).与对照组相比较,OxLDL组和OxLDL+ DMSO组A7r5细胞的Cx43、p-Akt蛋白表达增强(P＜0.05);与OxLDL组比较,OxLDL+MK-2206组Cx43、p-Akt蛋白表达减弱(P＜0.05).与对照组比较,OxLDL组、LDL+ DMSO组及OxLDL+ MK-2206组A7r5细胞的Akt蛋白均变化不明显.结论 GJ可以通过PI3K/Akt信号途径影响DxLDL诱导的A7r5细胞增殖.
关键词： 氧化低密度脂蛋白 缝隙连接 A7r5细胞 细胞增殖 PI3K/Akt信号通路 -
PI3K/AKT信号通路在中药治疗肝癌过程中的研究进展
PI3K/Akt信号途径作为一个新的肿瘤治疗靶点对于肿瘤的发生发展有着重要影响,在肝癌的临床治疗过程中取得了一定效果,我们通过研究发现,传统中药在治疗过程中与PI3K/AKT信号通路产生了一定联系.
关键词： PI3K/Akt信号通路 肝癌 研究进展 综述
