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  • CASP3和CASP7基因多态性与噪声性听力损失易感性关系

    作者:齐明键;高鹤;曹承建;邵玉仙;谭晓华;张进霞;吴茵茵;杨磊

    目的 探讨细胞凋亡通路相关基因CASP3和CASP7多态性与中国汉族人群噪声性听力损失(NINL)易感性之间的关联.方法 研究对象来自2014年杭州市1 549名噪声接触工人听力损失的横断面调查,采用1∶1配对病例对照研究,病例组为电测听双耳高频平均听阈>25 dB(A)的工人,对照组为性别、年龄、接噪工龄、工作岗位与病例匹配且双耳所有频段听阈均≤25 dB(A)的工人,共272对.PCR-LDR法检测2个SNP位点的基因型.采用多因素条件logistic回归模型分析SNP位点与NIHL的关联,并以叉生分析计算基因-环境交互作用.结果 x2检验分析发现,CASP3基因rs1049216等位基因(C、T)频率组间分布有统计学差异(OR=0.68,95% CI=0.50 ~0.93),而基因型频率组间差异无统计学意义(P >0.05);CASP7基因rs10787498等位基因及基因型频率组间分布均无统计学意义(P>0.05);多因素条件logistic回归显示,CASP3基因rs1049216中,与野生基因型CC相比,突变基因型(CT +TT)为NIHL的保护因素(调整OR =0.65,95% CI =0.43~0.97);叉生分析表明rs1049216位点与文化程度、睡眠时间存在交互作用(P≤0.001),NIHL的危险性降低(OR值变小).结论 CASP3基因rs1049216位点可能与中国汉族人群NIHL易感性有关,且可能与文化程度、睡眠时间存在交互作用.

  • 青藤碱抗肝癌作用机制研究

    作者:王高峰;张强;张利娟

    目的:探讨青藤碱对HepG2人肝癌细胞株的增生和转移能力的多靶向作用机制.方法:运用噻唑蓝还原法(MTT)来检测青藤碱对HepG2人肝癌细胞株的抗增殖作用,而同时运用Transwell 法来检测药物对于细胞转移能力的作用变化;间接荧光标记法测定经过不同浓度的青藤碱作用后,细胞内活性氧水平的变化;利用酶抑制动力学方法,研究青藤碱对逆转录酶的抑制作用;再通过逆转录聚合酶链式反应和蛋白质印迹的实验来检测HepG2细胞中凋亡蛋白水平的变化.结果:青藤碱对HepG2人肝癌细胞株具有抗侵袭及转移的治疗作用.MTT检测结果显示青藤碱对于HepG2人肝癌细胞抗增殖作用明显,半抑制浓度IC50为(15.35±2.43)μmol/L;而Transwell法的结果显示青藤碱对癌细胞有较好的抗转移能力;青藤碱是一种有效的逆转录酶抑制剂,IC50为(21.32±2.43)μmol/L;荧光标记法检测细胞内活性氧水平随青藤碱呈浓度依赖性升高;蛋白水平测定显示青藤碱上调HepG2人肝癌细胞CASP3、CASP9、CAV1和下调SOX2的表达. 结论:青藤碱可能是通过上调CASP3、CASP9、CAV1和下调SOX2的表达,进而抑制人肝癌细胞的增殖和转移,调节相关信号通路,终在分子水平证明青藤碱对HepG2人肝癌细胞的抑制作用.

  • 针刺、神经生长因子对脑瘫幼鼠智力及脑海马细胞凋亡基因的影响

    作者:林世坚;祁岩超;柴铁劬

    目的:观察针刺和神经生长因子(NGF)对脑瘫模型幼鼠智力恢复以及脑海马组织BCL-2、BAX、Casp3基因mRNA表达的影响.方法:采用缺血缺氧(HIBD)的方法制备幼鼠脑瘫的模型,幼鼠出生后7d称重、实验分组、造模.实验分为5组:正常组、假手术组、模型组、单纯针刺组、针刺+NGF组.术后3~ 15d按计划给予相应干预.术后18d取材,用荧光定量PCR(SYBRGreen Ⅰ染料法)检测其脑海马组织BCL-2、BAX、Casp3基因mRNA表达;用TUNEL法检测其脑皮质神经细胞凋亡情况.结果:与模型组相比,单纯针刺组和针刺+NGF组幼鼠的脑细胞抗凋亡BCL-2基因mRNA表达A值均数更高;BAX、Casp3基因mRNA表达A值均数更低;脑皮质组织细胞凋亡指数均数更低,且针刺+NGF组凋亡指数比单纯针刺组更低.结论:在抗脑神经细胞凋亡方面,针刺对HIBD幼鼠都有明显的治疗作用,加用NGF后效果更好.

  • CASP3与Cleaved-CASP3在肺癌中的表达及意义

    作者:黄健清;梁红玲;张绪超;谢至;刘海鹰;黄青

    目的:探讨凋亡信号分子CASP3、C-CASP3在肺癌与癌旁中的表达差异及其与临床参数的关系意义.方法:制备非小细胞肺癌患者的癌与癌旁组织石蜡标本的组织芯片.采用免疫组织化学方法检测分析CASP3、C-CASP3凋亡分子在组织中的蛋白表达水平.结果:非配对的癌(n=139)与癌旁组织(n=25)中凋亡相关分子表达水平:非参数秩和检验结果提示CASP3、C-CASP3两组间比较发现在癌组织均有显著性差异的升高表达(P<0.01);双变量相关分析显示CASP3与C-CASP3之间相关性存在统计学显著性意义.凋亡分子表达与临床病理、生存因素之间的关系:C-CASP3在非鳞癌中表达高于鳞癌(P<0.05);Kaplan Meir生存曲线法分析提示Ⅰ~Ⅱ期患者中CASP3表达水平与PFS存在负相关趋势(P=0.094).结论:肺癌组织较癌旁组织凋亡分子表达均上调,CASP3可能成为可进行药物干预的分子标志物和靶点.C-CASP3在非鳞癌中表达高于鳞癌,在非鳞癌组织类型亚群患者中CASP3更可能作为潜在的干预靶点激活为C-CASP3而促进肿瘤细胞凋亡.CASP3可能是PFS的独立预后因子.

  • 金钗石斛菲醌对人卵巢癌细胞增殖和转移的抑制作用

    作者:张晓文;程敏;王学军;冀玉良;周春生

    目的:观察金钗石斛菲醌对人卵巢浆液性囊腺癌细胞系HO-8910PM的增生和转移能力的影响,检测其对卵巢癌增生和转移相关基因CASP3,CASP9,CAV-1和SOX2的分子水平表达,从而研究金钗石斛菲醌在细胞和分子水平对卵巢癌的治疗作用以及其相关分子机制.方法:运用噻唑蓝还原法(MMT)方法来检测金钗石斛菲醌对人卵巢癌细胞HO-8910PM的抗增殖作用,而同时运用Transwell法来检测药物对于细胞的转移能力的作用变化.再通过逆转录聚合酶链式反应和蛋白质印迹的实验来检测HO-8910PM细胞中凋亡与转移相关基因的表达变化以及蛋白水平的变化.结果:实验结果证明金钗石斛菲醌对人卵巢癌细胞具有抗侵袭以及转移的治疗作用.MTT检测结果显示金钗石斛菲醌在3μmol/L和10 μmol/L对于卵巢癌细胞的抑增殖作用显著,而transwell法的结果也表明了其在3μmol/L和10μmol/L对癌细胞的抗转移能力.其治疗效果与阳性顺铂10 μmol/L治疗组在统计学意义上相近.而mRNA,蛋白水平测定,表明金钗石斛菲醌在3μmol/L对人卵巢癌细胞通过上调CASP3,CASP9,CAV1和下调SOX2的表达,从而调节相关信号通路,终在分子水平证明金钗石斛菲醌对人卵巢癌细胞增殖和转移的抑制作用.结论:金钗石斛菲醌通过上调CASP3,CASP9,CAV1和下调SOX2的表达,进而抑制人卵巢癌细胞的增殖和转移.

  • MGMT和CASP3基因多态性与胶质瘤易感性的关联研究

    作者:黄冠又;张欣;巫玉娟;曹楚南;蒲菊;明悦;杜永贵;甘鸿川

    目的 探讨MGMT和CASP3基因多态性与胶质瘤易感性的关系.方法 采用病例对照研究,应用多重单碱基SNP分型技术(SNaPshot)对组织病理学确诊胶质瘤患者90例和90名健康对照人群进行基因分型,MGMT rs12917和CASP3 rs4647601两种单核苷酸多态性进行检测及分析.结果 MGMT基因rs12917和CASP3基因rs4647601的基因型和等位基因频率在胶质瘤组和对照组中的分布差异均无统计学意义(P>0.05).结论 MGMT rs12917和CASP3 rs4647601位点基因多态性与胶质瘤的易感性无显著关联.

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