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低硒对F344纯系大鼠子代神经行为发育和学习记忆能力的影响
目的建立F344纯系大鼠低硒动物模型,观察低硒对子代仔鼠神经行为发育和空间学习记忆能力的影响.方法以纯系F344大鼠为实验对象,采用人工半合成饲料(低硒组饲料硒含量＜0.01mg/kg,补硒对照组饲料中硒含量为0.1～0.3mg/kg)建立低硒大鼠模型,观测子一代仔鼠哺乳期的生长体重变化、生长发育生理学指标和神经反射指标,并采用开场实验、Morris水迷宫实验检测其行为活动和空间学习记忆能力.结果(1)低硒组大鼠尾血GSH-Px活性极其显著地低于对照组(P＜0.001).(2)低硒组仔鼠的出生体重和哺乳期神经发育不同时间点体重明显低于对照组.(3)仔鼠出生后第4天平面翻正和悬崖回避、第10天听觉惊愕反射实验中,低硒组评分均低于对照组(P＜0.05),但在第7天平面翻正、悬崖回避和第11天后的听觉惊愕反射实验以及第12、14天前肢悬挂、后肢行走能力实验中,两组仔鼠结果差异无统计学意义(P＞0.05).(4)开场实验中:低硒组雄仔鼠在中央格停留时间、穿行格数较对照组明显减少(P＜0.05).(5)Morris水迷宫实验:①低硒组仔鼠第4、5天的定位航行实验中,平均潜伏期比对照组明显延长(P＜0.05);在第6、9时间段的直线式搜索方式也较对照组减少(P＜0.05);②低硒组在空间探索实验中,原站台象限活动时间较对照组减少(P＜0.05).结论成功利用纯系F344大鼠建立了低硒动物模型,母代长期硒缺乏导致了子一代F344仔鼠出生体重减低、生后体格发育和神经行为发育的迟缓,雄性仔鼠对新异环境中的适应能力减弱,并且导致了子代仔鼠空间学习和记忆能力能力的减弱.
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3种品系大鼠对灯盏花素所致被动皮肤过敏差异性研究
目的:比较F344,SD,Wistar 3种品系大鼠对灯盏花素诱导的被动皮肤过敏(passive cutaneous anaphylaxis,PCA)反应的差异性.方法:取3种品系大鼠随机分为阴性对照组、天花粉组、灯盏花素组.采用sc给药方式,分别给予各组动物不同的药物,进行大鼠同种或大鼠.小鼠异种PCA试验,检测给予灯盏花素后动物皮肤蓝斑吸光度(A),比较药物对F344,SD,Wistar 3种品系大鼠的A变化率.结果:大鼠同种PCA试验显示:3种品系大鼠注射灯盏花素25 mg·kg-1致敏后,F344大鼠皮肤蓝斑A为0.064±0.005 7,明显升高(P<0.05),SD,Wistar大鼠PCA反应均为阴性.大鼠-小鼠异种PCA试验显示:注射F344大鼠抗血清后,小鼠异种PCA反应为阳性,A为0.10 ±0.01(P<0.05),注射SD,Wistar大鼠抗血清后,反应均为阴性.结论:2种试验方法结果均显示,3种品系大鼠对灯盏花素的敏感性存在差异,其中以F344大鼠为敏感.
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Fischer 344大鼠泌乳素腺瘤动物模型的建立
目的 建立Fischer 344(F344)大鼠泌乳素腺瘤动物模型.方法 采用F344雌性大鼠,行腹腔注射苯甲酸雌二醇或无菌生理盐水,用药50 d后行MRI扫描,观察大鼠生存状态,检测垂体重量、血清泌乳素(PRL)水平、病理与PRL免疫组织化学检测变化.结果 应用苯甲酸雌二醇50 d后,大鼠体重增长受抑,垂体重量与PRL水平显著升高,病理检查可见垂体肿瘤形成且PRL染色阳性,MRI可见肿瘤,成瘤率达100%.结论 利用F344大鼠建立的垂体瘤动物模型,成瘤周期短,简单易行,稳定可靠,符合泌乳素腺瘤的生物学特性.
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苯甲酸雌二醇与己烯雌酚诱导Fischer344大鼠泌乳素腺瘤的比较
目的 建立垂体腺瘤动物模型,比较常用雌激素药物苯甲酸雌二醇与己烯雌酚诱导Fischer344大鼠泌乳素腺瘤的差异.方法 采用F344雌性大鼠,随机分成腹腔注射己烯雌酚实验组和苯甲酸雌二醇实验组.用药50d后行MRI扫描,观察大鼠生存状态,检测垂体重量、血清催乳激素(PRL)水平、病理与PRL免疫组织化学改变. 结果 用药后两组大鼠体重增长均明显受抑,苯甲酸雌二醇实验组垂体重量与PRL水平显著升高,MRI可见增大垂体,病理可见垂体肿瘤形成且PRL染色阳性,成瘤率为100%;己烯雌酚实验组未见垂体腺瘤形成. 结论 苯甲酸雌二醇可短期稳定诱导F344大鼠形成垂体腺瘤,且符合泌乳素腺瘤的生物学特性,是建立垂体腺瘤动物模型的理想方法.
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F344大鼠血液学指标正常参考值范围探讨
目的 建立F344大鼠血液学指标的正常参考值.方法 采用血液分析仪对不同年龄、不同性别的F344大鼠的血液学指标进行测定,比较性别和年龄对F344大鼠血液学指标的影响,并按95%的可信限确定正常值范围.结果 在不同性别的F344大鼠间,RBC、红细胞分布宽度(RDW)、WBC、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、RET#和RET%等血液学指标均存在显著差异,而NE%、LY%、RBC、Hct和Hb受年龄因素影响较大.结论 不同性别和年龄F344大鼠多项血液学指标有统计学差异,不宜合并作统计学分析及制定参考值.
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二乙基亚硝胺诱导建立Apc基因突变大鼠与F344大鼠肝癌模型的比较
目的 采用二乙基亚硝胺(DEN)在F344大鼠、Kyoto Apc Delta(KAD)大鼠体内诱发制备肝癌模型,并比较其优劣.方法 KAD大鼠25只,随机法分组,阴性对照组(5只)给予正常饮水;DEN造模组(20只)前5周饮水中添加40 μg/mL DEN,6～20周给予正常饮水;定期解剖大鼠,肉眼观察肝脏病变并取病变组织及癌旁组织制作病理切片.25只F344大鼠采用相同方法进行实验.结果 F344大鼠和KAD大鼠均可成功诱发肝癌,且肝癌发生病理过程与人类相似.造模16周时KAD大鼠就可见灰白色病灶点,3/4大鼠成瘤,平均病灶数为1.00士0.82个;造模20周时,KAD大鼠全部(4/4)成瘤,病灶数为3.50±1.29个;而F344大鼠迟至20周时才可观察到类似病灶,3/4大鼠成瘤,病灶数为1.25±0.96个.KAD大鼠的诱导成瘤性显著高于亲代F344大鼠(P＜0.05).结论 与亲代F344大鼠相比,抑癌基因Apc突变的KAD大鼠经DEN诱导更易发生肝癌,且该模型具有肝癌诱发时间短、相同诱导时间肝癌发生率高、诱发病灶数多等优点,是化学诱发制备肝癌动物模型的良好模式动物.
关键词： KAD大鼠 F344大鼠 肝癌诱导 二乙基亚硝胺(DEN) -
9L/F344大鼠脑胶质瘤模型的建立和增强MRI对种植瘤生长的动态观察
目的 建立9L/F344大鼠颅内脑胶质瘤模型,用增强MRI动态观察肿瘤生长.方法 应用大鼠立体定向仪,在F344大鼠右侧尾状核区接种9L胶质瘤细胞1×105个；观察大鼠的生存状态、体重及活动等情况；分别于大鼠接种后第8、12、17、20、23天在小动物线圈下行大鼠头部强化MRI检查,动态观察肿瘤的生长情况；第20天,取肿瘤标本做组织病理学和神经胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组化检查.结果 大鼠平均生存期25d.大鼠成瘤率100％.增强MRI动态观察显示同一时期内大鼠的肿瘤体积均一,肿瘤的生长速度和形态符合胶质瘤生长特性；肿瘤组织病理学上接近人恶性脑胶质瘤的病理特点.结论 该方法建立的9L/F344大鼠脑胶质瘤动物模型稳定性好,移植瘤生长均一,适合用于胶质瘤的基础研究.
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条件恐惧训练对F344大鼠行为活动的影响
目的诱导焦虑反应模型,观察焦虑反应对大鼠行为活动的影响.方法条件恐惧训练,行为检测.结果连续4d的条件恐惧训练后,与对照组相比,F 344大鼠在木僵行为实验中木僵反应增多884%(P ＜0.001),小范围探究运动减少88%(P ＜0.001);在高架十字迷宫实验中,进入开放壁的次数和在开放壁停留时间分别减少75%(P ＜0.001)和86%(P ＜0.001);在开野实验中,踩格子数和在中央格停留时间分别减少47%(P ＜0.001)和60%(P ＜0.05).结论条件恐惧训练使大鼠焦虑反应增强,探究活动能力下降,它是一种诱导焦虑反应模型较理想的方法.
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DAPK基因启动子甲基化在云锡矿粉诱导F334大鼠肺癌中的作用
目的 探讨DAPK基因启动子甲基化在云锡矿粉诱导F344大鼠肺癌发生、发展过程中的作用.方法 将云锡矿粉诱导的F344大鼠肺癌石蜡标本连续切片,手工显微切割分离各阶段病变组织,甲基化特异性聚合酶链反应检测DAPK基因启动子甲基化状况.诱癌方法:近交系F344大鼠190只,随机分为4组:矿粉灌注组(100只)、呋喃甲醛组(30只)、生理氯化钠组(30只)、正常对照组(30只),前3组给予灌注,正常对照组不灌注.结果 经矿粉染毒的大鼠中,12例肺癌中有4例检测到DAPK基因启动子甲基化,3例原位癌中有1例检测到DAPK基因启动子甲基化,4例鳞状上皮非典型增生中有1例检测到DAPK基因启动子甲基化,23例不典型腺瘤样增生中有4例检测到DAPK基因启动子甲基化.结论 DAPK基因启动子甲基化在云锡矿粉诱发F344大鼠肺癌发展过程有一定作用.
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云锡矿工肺癌中FHIT基因外显子缺失及其蛋白表达
背景与目的:云南锡矿工人肺癌发生率极高.已有研究表明,脆性组氨酸三联体基因(fragile histidine triad,FHIT)异常与肺癌的发生、发展密切相关.本研究旨在探讨云锡矿工肺癌中FHIT外显子3、4、5、8缺失及其蛋白表达异常.方法:采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测30例云锡矿工肺癌组织、云锡矿工肺癌细胞株YTMCC及22例其他地区非矿工肺癌组织中FHIT外显子3、4、5、8的缺失.用免疫组化法检测90例人肺癌组织FHIT蛋白表达,并对43例云锡矿粉诱发的不同阶段F344大鼠肺癌肺组织进行FHIT蛋白检测.结果:FHIT基因异常在YTMLC细胞表现为FHIT基因3和8两个外显子的缺失,而矿工和非矿工肺癌组织可出现3、4、5、8中1个或几个外显子的杂合性缺失,云锡矿工肺鳞癌中FHIT基因外显子缺失及蛋白失表达率分别为68.2%及70.6%,矿工肺鳞癌和腺癌、非矿工肺鳞癌和腺癌FHIT基因杂合性缺失与正常肺组织相比差异均有显著性(P＜0.01).矿粉诱发F344大鼠肺癌变早期即有FHIT的失表达,在8例鳞状上皮非典型增生、原位癌及早期肺鳞癌FHIT蛋白失表达率达100%.结论:在矿工及非矿工肺癌中,FHIT基因外显子缺失及其蛋白表达异常均常见.肺癌早期及癌前病变即有很高的FHIT失表达率,对FHIT检测分析有可能作为肺癌早期筛查的指标之一.
关键词： 肺肿瘤 脆性组氨酸三联体基因 锡矿粉 F344大鼠 中国云南 -
3′-Me-DAB诱导大鼠肝癌发生过程中p53及相关基因mRNA的定量分析
背景与目的:有关肝癌中 p53基因突变及 p53蛋白表达异常已有报道 , 但其在 mRNA水平上的变化尚不清楚 . 为了解在肝癌发生、发展和预后过程中 p53、谷胱甘肽转硫酶 P( glutathione S-transferase P,GST-P) 、甲胎蛋白 ( α -fetoprotein,AFP) 和白蛋白 mRNA水平的变化 , 本研究定量分析癌前病变和癌灶中 GST-P、 AFP和白蛋白 mRNA的量 . 方法:在 3′ -甲基 -4-二甲胺偶氮苯 (3′ -methyl-4-dimethylaminoazobenzene,3′ -Me-DAB)诱发 F344大鼠肝癌过程中 , 用激光捕获显微取样仪 (LCM)准确获得大鼠肝脏中微小癌灶或癌前病变组织后 , 采用 LightCyclerTM V3 System 实时 (real-time)RT-PCR定量分析这些病灶组织中 mRNA水平 . 结果:在实验的第 6、 12和24周，癌前病变组织中p53mRNA量均显著高于正常组织(P≤0.001)。从第6周到第24周，癌前病变组织中p53mRNA逐渐降低(P<0.01)。癌组织中p53mRNA含量高于正常组织，低于同期癌前病变组织(P=0.028和0.0136)。第24周的癌前病变组织或癌组织中细胞核呈p53强染色。各实验期，癌前病变中GST-PmRNA量明显高于正常组织和癌组织(P<0.001)。癌组织中AFPmRNA的表达量显著高于癌前病变组织和正常组织(P<0.001)，白蛋白mRNA的表达量显著低于这两种组织(P<0.01)。GST-P和AFP分别在癌前病变组织和癌组织中呈灶状强表达。结论：GST-P和AFPmRNA分别在癌前病灶组织和癌组织中强表达，是这些病变组织的重要标志物。p53mRNA在早期肝癌前病变和癌灶中显示高水平的表达，而较晚期p53蛋白升高。
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不同品系大鼠对灯盏花素过敏反应差异性研究
目的:比较研究F344、BN、SD、Wistar四种品系大鼠对灯盏花素注射液被动皮肤过敏及其致敏血清中总IgE水平差异性.方法:四种品系大鼠分别随机分为正常对照组、OVA组、灯盏花素组.采用皮下注射给予不同药物致敏,观察各组大鼠被动皮肤过敏反应(PCA)皮肤蓝斑直径大小和阳性率,并检测致敏血清总IgE水平.结果:PCA结果显示,四种品系大鼠的正常组均无蓝斑出现;OVA组,F344、BN、SD、Wistar大鼠蓝斑直径(阳性率)分别为11.67±3.61(6/6)、47.33±5.72(6/6)、5.70±4.81(6/10)、17.90±3.84(10/10),与正常组相比均明显升高且具有显著统计学差异；血清总IgE水平检测结果显示,OVA组血清总IgE含量变化与PCA试验结果一致.对灯盏花素,F344、BN、SD、Wistar大鼠蓝斑直径(阳性率)分别为5.17±2.32(4/6)、2.00±1.79(0/6)、1.67±1.97(0/10)、0.00±0.00(0/10),与正常组相比仅F344大鼠显示出显著性差异；血清总IgE仅F344、BN大鼠血清明显升高,且以F344大鼠变化倍数更高.结论:四种不同品系大鼠对灯盏花素所致被动皮肤过敏反应敏感性及血清总IgE水平均存在一定差异,两者具有一定相关性,其中以F344大鼠为敏感.
