首页 > 文献资料
-
大鼠心肌细胞粘着斑蛋白α-catenin表达的增龄变化
目的探讨大鼠心肌细胞发育过程中粘着斑蛋白α-catenin的表达分布方式以及增龄变化规律.方法应用S-P免疫组化方法分别对大鼠的胎儿、新生儿、幼年、青年、中年和老年大鼠的心肌细胞粘着斑蛋白α-catenin的表达进行检测.结果细胞粘着斑蛋白α-catenin在大鼠的心房、心室、乳头肌、室间隔等处均有表达.胎鼠心肌细胞中粘着斑蛋白α-catenin分散分布于细胞膜和胞浆中;新生大鼠心肌细胞的连接处见有α-catenin的免疫标记颗粒;幼年时期α-catenin的免疫标记颗粒大部分集中在心肌细胞末端的闰盘处;青年、中年和老年大鼠α-catenin的免疫标记典型的分布在心肌细胞末端的闰盘处.结论在大鼠心肌发育过程中,α-catenin的表达分布存在增龄变化;粘着斑蛋白α-catenin的分布方式与闰盘的发育是一致的.
-
高糖对人腹膜间皮细胞间粘合连接复合体的影响
目的:研究高糖对人腹膜间皮细胞(HPMC)间粘合连接复合体表达的影响,探讨腹膜透析(PD)中腹膜间皮层完整性损伤的机制.方法:采用人腹膜间皮细胞株HMrSV 5为研究对象.细胞分为3组:①正常对照组(含5.5 mmol/L D-葡萄糖);②高糖组(含140 mmol/L D-葡萄糖);③高渗组(含5.5 mmol/L D-葡萄糖及134.5mmoL/L甘露醇),各组分别于6、12、24、48 h进行实验.采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Westemblot及免疫荧光等方法检测粘合连接复合体主要成分E-Cadherin、β-Catenin基因及蛋白水平表达,采用免疫荧光技术观察高糖对细胞Actin微丝骨架的影响.结果:①高糖致细胞脱落呈时间依赖效应;②高糖引起E-Cadherin、β-CateninmRNA及蛋白表达下降,免疫荧光显示二者在HPMC细胞膜上的表达明显减低,呈不连续分布;③高糖使Actin微丝骨架解体;④高渗透压组未见上述效应.结论:高糖使HPMC E-Cadherin、β-Catenin基因及蛋白表达下降,微丝骨架解体,从而损害细胞间粘合连接复合体的形成,造成腹膜间皮完整性的损害.
-
出生前后大鼠心肌细胞钙粘蛋白的表达
目的探讨出生前后大鼠心肌细胞钙粘蛋白(cadherin)的表达和分布变化规律.方法应用S-P免疫组化方法分别检测孕16 d胎鼠、出生后2 d、5 d和10 d的新鲜大鼠心脏标本,观察心肌细胞cadherin的表达和分布.结果心肌细胞cadherin在大鼠的心房、心室、乳头肌、室间隔等处均有表达.胎鼠和出生后2 d大鼠心肌细胞中cadherin分散地分布于细胞表面和胞浆中;出生后5～10 d大鼠心肌细胞cadherin大部分分布在心肌细胞的闰盘处,少部分分布在细胞膜上和胞浆中.结论在大鼠心肌发育过程中,以cadherin介导的细胞间机械偶联经历了动态变化,与闰盘的发育相一致.
-
粘着斑蛋白α-catenin在大鼠心脏中的表达
目的探讨粘着斑蛋白α-catenin在大鼠心脏中的表达分布方式以及心肌细胞发育过程中增龄变化规律.方法应用S-P免疫组化方法分别对幼年、青年、中年和老年大鼠的心肌细胞粘着斑蛋白α-catenin的表达进行观测.结果细胞粘着斑蛋白α-catenin在大鼠的心房、心室、乳头肌、室间隔等处均有表达.幼年时期α-catenin的免疫标记颗粒大部分集中在心肌细胞末端的闰盘处,少量分散地分布于细胞表面和胞浆中;青年、中年和老年大鼠α-catenin的免疫标记典型分布在心肌细胞末端的闰盘处.结论在大鼠心肌发育过程中,α-catenin的表达分布存在增龄变化;粘着斑蛋白α-catenin的分布方式与闰盘的发育是一致的.
-
大鼠和人心肌细胞粘合连接的表达与其心脏发育的关系
心脏形态发生和发育需要以粘合分子cadherin介导的粘合连接,而粘合连接对细胞识别、生长分化信号应答的调节有至关重要的作用,其表达的异常,将导致心肌细胞肌纤维装配失控和心脏各功能器官畸形发育等各种心脏先天畸形,并诱发各种先天性心脏病.本研究采用免疫组化、免疫共聚焦显微镜观察和图像分析等方法,对不同发育时期大鼠和人心肌细胞中cadherin和α-catenin表达分布变化规律进行分析,探讨发育过程中AJ连接的变化规律以及对心脏发育的影响,为心脏的形态发生和闰盘的发育机制提供分子学基础,为心肌细胞的移植提供理论基础及临床应用.
-
人心肌细胞粘着斑蛋白α-catenin表达的增龄变化
目的探讨在人心脏发育过程中心肌细胞粘着斑蛋白α-catenin表达的增龄变化规律.方法应用S-P免疫组化方法分别对新生儿和成年人的心肌细胞α-catenin的表达进行检测.结果细胞粘着斑蛋白α-catenin在心房、心室、乳头肌、室间隔等处的心肌细胞中均有表达.新生儿时期大量的α-catenin呈斑块状聚集在心肌的端闰盘处,少量分布于心肌细胞的侧面连接处和胞浆中;成年人心肌细胞的α-catenin典型地分布于细胞末端的闰盘处.结论在人的心肌发育过程中,α-catenin的表达分布存在增龄变化;α-catenin的分布方式与闰盘的发育是一致的.
-
河豚毒素停搏液对心肌粘合连接的影响
目的:研究Na+通道阻滞剂河豚毒素(TTX)停搏液对离体大鼠心肌粘合连接的影响.方法: Wistar大鼠20只随机均分为TTX组和STH-2(St.Thomas-2)组,建立离体心脏Langendorff和Neely灌注模型,待搏动稳定,灌注30 min后停搏60 min,再灌注60 min,观察各组心脏停搏前后心率(HR)、冠状动脉流量(CAF)、左心室收缩末期压力(LVESP)以及压力变化速率(±dp/dt)的恢复率.采用免疫组化和WesternBlot检测大鼠心肌α肌动蛋白(α-actin)的分布和量的变化;免疫组化检测N型钙粘蛋白(N-cadherin)的分布及量的变化.结果: TTX组和STH-2组的停搏时间分别为(8.55α0.68)s和(9.49±0.49)s;复搏时间分别为(10.12±0.66)s和(10.88±0.61)s,与STH-2组比较,ITX组的停搏时间和复搏时间均明显缩短(P<0.01或P<0.05).复搏后,TTX组和STH-2组的HR,CAF,LVESP,+dp/dt及-dp/dt的恢复率分别为(85.65±1.98)%,(91.81±2.29)%,(85.03±0.91)%,(93.59±2.22)%,(92.87±2.59)%和(77.66±1.56)%,(88.28±1.81)%,(82.24±0.82)%,(90.25±3.31)%,(88.36±4.65)%,TTX组的各项血流动力学参数恢复率均优于STH-2组(P<0.01,P<0.05).免疫组化显示TTX组和STH-2组的N型钙粘蛋白和α肌动蛋白的表达量分别为0.06765±0.00027,0.07375±0.00049和0.02426±0.00025,0.03047±0.00017.Western Blot显示TTX组和STH-2组的α肌动蛋白的表达量分别为864.8±6.5,347.0±7.5.与TTX组比较,STH-2组分布紊乱,量明显减少(P<0.01).结论: 以TTX阻断Na+通道为特点的心脏停搏液对大鼠心肌缺血-再灌注损伤时的粘合连接及心功能的保护作用优于STH-2心脏停搏液.
