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  • 转染IL-27基因的食管癌细胞在裸鼠体内的抗肿瘤作用

    作者:刘丽华;单保恩;邵丽丽;艾军;王士杰

    目的:将小鼠IL-27基因转染人食管癌细胞株,研究其在裸鼠体内的抗肿瘤活性.方法:以逆转录病毒为载体,将IL-27基因转染人食管癌细胞株Eca109,获得表达IL-27的阳性细胞克隆(Eca109/IL-27),用ELISA法检测细胞IL-27的分泌.将Eca109/IL-27移植裸鼠腹腔,观察瘤细胞的成瘤性和裸鼠的生存期.用RT-PCR检测IL-27基因在裸鼠体内瘤组织中的表达,用流式细胞仪检测CD204表达、细胞周期和细胞凋亡变化.结果:成功建立了表达IL-27基因的人食管癌细胞株Eca109/IL-27,该细胞培养上清中IL-27含量为(137.73±7.00)pg/ml,而Eca109/LXSN和Eca109细胞培养上清中未检出IL-27(P<0.01),但Eca109/IL-27与Eca109/LXSN和Eca109细胞周期和细胞凋亡率无明显差异(P>0.05).将Eca109/IL-27、Eca109/LXSN 和Eca109细胞分别接种裸鼠腹腔15天后,各组裸鼠均于腹腔形成多数瘤结节,Eca109/IL-27组明显少于Eca109/LXSN 和Eca109细胞组(P<0.05);Eca109/IL-27组裸鼠的生存期(35天时均无死亡)明显长于Eca109/LXSN 和Eca109细胞组[分别为(23.33±1.52)、(24.00±1.37)天](P<0.01);Eca109/IL-27组肿瘤组织中有p28和EBI3亚基基因表达,而Eca109/LXSN 和Eca109细胞组瘤组织中未见表达(P<0.01);其CD204表达水平、细胞凋亡率也明显高于接种Eca109/LXSN与Eca109细胞组(P<0.05);G0/G1和G2/M期细胞增多,S期细胞明显减少,与接种Eca109/LXSN和Eca109细胞组比较均有显著差异(P<0.05).结论:IL-27可于体内促进肿瘤细胞凋亡,阻滞细胞周期发展,提高CD204的表达,延长生存期,发挥抗肿瘤免疫活性.

  • β-榄香烯对人食管癌细胞 EC9706增殖、凋亡及 caspase-3的影响

    作者:任凌燕;徐磊;赵青;罗皓;赵怡

    目的:研究β-榄香烯对人食管癌细胞EC9706增殖、凋亡及caspase-3表达的影响。方法采用不同浓度的β-榄香烯(0、10、20、30、40、50μg/ml)处理细胞24 h,CCK-8测定细胞增殖活力。以50μg/mlβ-榄香烯处理细胞0、6、12、24 h,CCK-8测定细胞增殖活力。以不加β-榄香烯组作为对照组,选取50μg/mlβ-榄香烯处理细胞24 h,流式细胞术测定细胞凋亡率,分光光度法测定caspase-3活性。结果随着β-榄香烯浓度的增加,人食管癌细胞增殖活力逐渐下降,呈浓度依赖性(P<0.05)。以50μg/mlβ-榄香烯处理细胞0、6、12、24 h,随着时间的增加,细胞增殖活力下降,呈现时间依赖性(P<0.05)。相比对照组,50μg/ml β-榄香烯处理细胞24 h后细胞凋亡明显增加(P<0.05),caspase-3活性明显增加(P<0.05)。结论β-榄香烯可抑制食管癌细胞增殖、诱导其凋亡,并且其诱导凋亡的作用机制可能与促进caspase-3活化有关。

  • NS-398对人食管癌细胞放射增敏机制的研究

    作者:龙辉;李欢;王洁莲;吴清明

    目的 探讨人食管癌放射抗拒细胞株侧群细胞(SP细胞)表达的变化.方法 将人食管癌细胞株分为两组:对照组、实验组,对照组分别给予0、2、4、6、8 Gy的X射线放射治疗诱导抗拒细胞株;实验组给予NS-398联合上述剂量的X线照射.流式细胞技术检测各组细胞中SP细胞的表达情况,统计分析SP细胞表达的差异.结果 随着放射剂量的增加,SP细胞的表达增加,给予NS-398作用后,SP细胞的表达下降.结论 SP细胞增加人食管癌细胞的放射抗拒性,抑制SP细胞的表达,能够降低人食管癌细胞的放射抗拒性.

  • 牛蒡子苷元对人食管癌细胞增殖和凋亡的影响及机制研究

    作者:杜建新;马洪德

    目的:观察牛蒡子苷元(arctigenin,ARG)对体外培养的人食管癌细胞(esophageal cancer-1 cells,EC-1)增殖和凋亡的影响.方法:将不同浓度的ARG作用于EC-1,噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)实验检测细胞增殖抑制率、流式细胞术测定细胞周期变化,免疫组化法测定增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen,PCNA)表达水平;将不同浓度的ARG作用于EC-1,流式细胞术检测细胞凋亡率、琼脂糖凝胶电泳和DNA缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase mediated dUTP-biotin nick-end labeling technique,TUNEL)来检测细胞凋亡,免疫组化检测Bcl-2、Bax凋亡基因表达水平.结果:与对照组比较,ARG对EC-1细胞生长有抑制作用,随着时间/浓度的增加抑制作用逐渐增强(P<0.05);ARG可抑制EC-1由G0/G1向S期转换,G0/G1期细胞百分率较对照组显著增加,S期细胞百分率显著降低;随ARG浓度增加EC-1内PCNA表达水平逐渐降低.随ARG浓度增加,EC-1细胞凋亡率和凋亡指数显著增加(P<0.05);随ARG浓度增加,Bcl-2表达逐渐减弱,Bax表达逐渐增强(P<0.05).结论:ARG有抑制EC-1增殖,下调EC-1内PCNA表达水平,阻滞细胞周期的作用.ARG可明显诱导EC-1细胞凋亡可能与ARG调控Bcl-2,Bax基因表达有关.

  • 牛蒡子苷元对人食管癌细胞增殖的影响

    作者:马洪德

    目的 观察牛蒡子苷元(ARG)对人食管癌细胞(EC-1)增殖的影响.方法 将不同浓度的ARG作用于EC -1,用噻唑蓝(MTT)实验检测细胞增殖抑制率.结果 与对照组比较,ARG对EC -1细胞生长有抑制作用,随着时间/浓度的增加抑制作用逐渐增强(P<0.05).结论 ARG可明显抑制EC -1细胞增殖.

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