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蝎素组分Ⅲ对Jurkat细胞CCR5表达的影响
全蝎是中国传统医学中用于治疗肿瘤的一味重要药物,蝎毒是全蝎发挥药理作用的重要成分,其在抗肿瘤方面的研究有较多报道[1,2].近年来,蝎素作为生物应答调节剂调节免疫系统功能的研究已引起广泛重视.蝎素组分Ⅲ(Scorpion venom crude Ⅲ,SVC-Ⅲ)是从河南马氏钳蝎毒中分离纯化出来的一种活性成分,我们以前的研究显示SVC-Ⅲ能够促进T淋巴细胞的转化和肿瘤坏死因子的分泌[3].C-C趋化因子受体5(CC-chemokine receptor 5,CCR5)是一种G蛋白偶联受体,是人类免疫缺陷病毒(HIV)感染淋巴细胞的主要辅助受体,协同CD4受体促进HIV的感染,CCR5的表达水平是HIV传播和疾病进展的-个重要因素.本研究观察SVC-Ⅲ对T淋巴细胞CCR5表达及细胞活化有关的信号分子的影响,以探讨蝎素是否可能用于抗HIV病毒感染的治疗.
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蝎素组分Ⅲ对THP1细胞HMGB1表达的影响
目的:研究蝎素组分Ⅲ(Scorpion venom crude Ⅲ,SVC-Ⅲ)对THP1细胞HMGB1表达的影响,探讨蝎素与HMGB1相互作用的机制.方法:不同浓度SVC-Ⅲ(0.1、1.0、10和100 ng/ml)刺激培养THP1细胞48小时后,RT-PCR检测HMGB1 RNA水平表达差异;Western blot检测HMGB1蛋白水平表达情况;激光共聚焦检测HMGB1在细胞中的分布情况.结果:1.0 ng/ml SVC-Ⅲ刺激培养THP1细胞,HMGB1 RNA及蛋白表达水平升高显著,随着SVC-Ⅲ浓度的增加,HMGB1 RNA及蛋白的表达水平反而下降;SVC-Ⅲ刺激培养THP1细胞可引起HMGB1从胞核转移入胞浆.结论:SVC-Ⅲ可以刺激或抑制THP1细胞HMGB1的表达,其作用效果与剂量密切相关.
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蝎毒组分Ⅲ对人头颈部鳞状细胞癌细胞生长的影响
目的:观察蝎毒组分Ⅲ(SVC-Ⅲ)对人头颈部鳞状细胞癌细胞株(AGZY-973)生长的影响,试图找出SVCⅢ抑制鳞状细胞癌的佳浓度. 方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测经不同浓度SVC-Ⅲ作用下AGZY-973生长抑制率. 结果:SVCⅢ能抑制该细胞的生长, SVC-Ⅲ可导致AGZY-973细胞代谢MTT的能力显著低于对照组,生长抑制率达 68.96%(P＜0.01).当SVCⅢ的浓度<40 mgL-1时,剂量效应关系明显;而SVC-Ⅲ的浓度>40 mg*L-1时无剂量效应关系.5-Fu治疗组生长抑制率达 55.27% P＜0.01). 结论:SVC-Ⅲ是存在于东亚钳蝎蝎毒中的一种抗肿瘤成分,能够抑制AGZY-973的生长,并在一定浓度范围内存在剂量效应关系.
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蝎素组分Ⅲ对Jurkat细胞人白细胞分化抗原25表达的影响
目的 研究蝎素组分Ⅲ(SVC-Ⅲ)对Jurkat细胞人自细胞分化抗原25(CD25)表达的影响.方法 用0.1 μg·L-1、1μg·L-1和10μg·L-1的SVC-Ⅲ分别作用CD4+T淋巴细胞系Jurkat E6-1细胞,利用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测T细胞活化连接蛋白(LAT)和zeta链相关蛋白-70(ZAP-70)mRNA的表达;利用流式细胞术检测T淋巴细胞活化早期表面标志细胞分化抗原CD25分子表达变化情况.结果 与对照组比较,0.1 μg·L-1组和1μg·L-1组LAT/GAPDH比值增高(P<0.05),10μg·L-1组LAT/GAPDH比值增高,但差异无统计学意义(P>0.05),3组ZAP-70/GAPDH比值及CD25阳性细胞率均增高(P<0.05);与0.1μg·L-1组比较,1μg·L-1组LAT/GAPDH、ZAP-70/GAPDH比值和CD25阳性细胞率均增高(P<0.05),10μg·L-1组LAT/GAPDH,ZAP-70/GAPDH比值和CD25阳性细胞率均降低(P<0.05),且10μg·L-1组LAT/GAPDH、ZAP-70/GAPDH比值和CD25阳性细胞率较1μg·L-1组也降低(P<0.05).结论 SVC-Ⅲ对Jurkat细胞CD25的表达具有明显的促进作用,其中1μg·L-1SVC-Ⅲ浓度促进作用强,为蝎素在临床上的合理应用提供一定的实验基础.
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蝎素SVCⅢ对人皮肤T细胞淋巴瘤细胞系Hut-78增殖及凋亡的影响
目的探讨中药蝎素SVCⅢ对人皮肤T细胞淋巴瘤Hut-78细胞增殖的抑制作用及其诱导凋亡作用.方法将蝎素以不同浓度分别加入对数期生长的人皮肤T淋巴瘤细胞Hut-78细胞中,通过MTT法、DNA凝胶电泳和FACS分析其抑制作用和诱导凋亡作用.结果蝎素对人皮肤T淋巴瘤细胞株有明显的抑制作用,DNA电泳显示有凋亡特征的"梯状"条带出现,经FACS检测发现细胞周期被阻止在G1期.结论蝎素能够抑制人皮肤淋巴瘤细胞的增殖并能诱导凋亡,提示蝎素可能有抗皮肤肿瘤的作用.
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蝎素SCVIII对荷瘤小鼠淋巴细胞转化及TNF-α水平的影响
具有增强或调节机体有效抗病能力的药物,称为生物应答调节剂(biological response modifiers,BRM)[1].国内学者在寻找中药BRM方面已经做了大量工作.近年来,中药全蝎及蝎毒的抗肿瘤作用已引起了广泛注意,已有许多体外研究证明,蝎素对Hela细胞、Eca109细胞等多种细胞株的生长具有抑制作用.但目前关于蝎素对机体免疫功能的影响研究较少,我们通过研究蝎素对机体免疫功能的影响,证明蝎素确为一种生物应答调节剂.
