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番鸭细小病毒免疫原蛋白基因的序列测定与分析
番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus MDPV)病是近十年来在我国华南、华东等地饲养的番鸭中普遍流行的一种急性传染病。该病毒的基因组有两个阅读框架,左阅读框主要编码病毒的非结构蛋白;而右阅读框主要编码病毒结构蛋白。其中VP2结构蛋白具有免疫原性,是病毒刺激机体产生保护性抗体的重要抗原蛋白。此外,有研究报道,细小病毒具有肯定的抑瘤活性。其对人类的多种转化细胞和癌细胞有选择性地杀伤作用,而对正常的细胞无可检测的影响。这意味着通过在分子水平上对细小病毒的深入研究,将有可能为人类癌症疾病的治疗开辟一条新的途径。MDPV-Q株是从具有典型临床症状和病理变化的雏番鸭体内分离得到的野毒,经鉴定为番鸭细小病毒。为了解我国分离株与国外分离株之间的异同关系以及为今后研制开发MDPV的基因工程疫苗,我们借助于PCR引物设计软件,设计了一对引物LHMP7/LHMP8,该对引物选取位于2 885~2 900及4 618~4 604的两段序列,跨幅为1 734 bp,同时在这2条引物中分别加入2种限制性核酸内切酶SacII和 KpnI的酶切位点,使扩增后的DNA片段的两端,分别含有这两种酶的酶切位点,以利于鉴定和今后的亚克隆。应用PCR技术扩增了MDPV-Q株的VP2蛋白基因片段。将扩增后的VP2蛋白基因重组到pMD18-T载体上,并对插入片段进行序列测定。测序结果表明,我国分离的MDPV的VP2蛋白基因序列与国外分离株具有很高的同源性,达98.1%。
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比较法结合CBL在药理学中的应用
比较法是人们认识事物的基本方法 ,是鉴别事物异同关系的一种思维方式.它有助于揭示事物的相互联系,促进创造性思维.比较法是在一定的条件下,按照统一标准,对两个或两个以上的对象进行比较,以达到认识对象的目的 .比较法可以更好的揭示事物的异同,加深人们对事物本质的认识.