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DNA芯片分析HBV阅读框架多点基因突变的研究
目的检测HBV-DNA阅读框架各位点的变异,为临床诊断和治疗提供依据.方法通过基因芯片技术,将HBV-DNA进行PCR扩增,掺入荧光分子标记,与点阵列的寡核苷酸杂交,通过计算机分析,检测HBV-DNA的基因序列,观察HBV-DNA阅读框架各位点的自然变异.结果HBV-DNA阅读框架各位点的变异普遍存在,其中前C区1896、1814变异率分别为23.5%、3.9%,BCP 1762、1764变异率分别为55.9%、53.9%,P区528、552 M-I、552 M-V变异率分别为39.2%、38.2%、10.8%.结论基因芯片技术是检测基因突变、基因测序的高效方法之一,具有极高的灵敏性和可靠性.HBV-DNA位点的变异对于疾病的稳定与进展以及病情转归的预判有重要作用.
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抑癌基因PTEN与心血管疾病研究进展
1997年Li等[1]在浸润性乳腺癌的两个移植瘤中发现了10q23染色体特定区域的杂合子丢失,并通过外显子俘获分析法分离出一种新的基因,对其开放性阅读框序列分析,揭示了它可编码蛋白质酪氨酸磷酸酶(protein tyrosine phospha-tase,PTP),且与张力蛋白(tensin)、辅助蛋白(auxilin)同源,因此将其命名为PTEN(phosphatase and tensin homology dele-ted on chromosome ten).FTEN是人类发现的第一个具有磷酸化酶功能的抑癌基因,在细胞的生长发育、凋亡、迁移、信号传递等方面起着重要的调控作用,PTEN功能的缺失与肿瘤的发生密切相关.近来,国内外陆续展开对PTEN与心血管疾病关系的研究报道,下面就PTEN的结构、功能及其与心血管疾病的关系等作一综述.
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胃肠道间质瘤中POK红系髓性致癌因子和P14可变阅读框基因的表达及临床意义
胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)是一种起源于胃肠道间质组织的肿瘤,占胃肠道恶性肿瘤的0.1%~3.0%,年发病率约为20/100万[1,2].针对GIST研究中发现的高复发、低生存、易耐药等问题,深入研究GIST发生、演进、影响预后的分子机制具有重要意义,对于改进治疗方法和科学判断预后十分必要.POK红系髓性致癌因子(Pokemon)癌基因具有调控如可变阅读框基因 (ARF)、P53、Rb、核因子(NF)-κB、Bcl-6等其他多个抑癌基因和癌基因的功能,因此, Pokemon被看做是肿瘤发生、发展的"总开关"[3].作为目前已知的Pokemon的下游靶点,P14可变阅读框基因(P14-ARF)具有阻碍细胞周期的作用,并间接性活化P53从而抑制异常细胞增殖[4].
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冠状病毒致病的分子机制及其相关研究
急性呼吸窘迫综合征(the severe acute respiratory syndrome,SARS)是由冠状病毒(SARS-coronavirus,SARS-CoV)引起的一种高病死率急性呼吸系统传染病,可在发病早期便出现肺实变体征,除高热、乏力外,可伴有腹泻、肌痛等症状和体征.该病毒是一种正义、单链RNA病毒,具有29727个碱基,11个阅读框,并可编码23种不同的蛋白质[1].对其分子机制的深入研究将有助于该疾病的防治,并为可能出现的其它新的类似性病毒传染病的防治提供借鉴.本文将概要介绍SARS-CoV致病的分子生物学机制、传播途径以及相关药物和疫苗的研究进展.
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GPR30及其信号通路在乳腺癌中的研穷讲展
GPR30是一种新型的雌激素受体,许多研究表明其在雌激素依赖性肿瘤乳腺癌的发生发展中有重要作用.乳腺癌的发生是多因素作用的结果,在导致乳腺癌的众多途径中,GPR30-EGFR-STA13是非常重要的一条信号通路,本文就GPR30及GPR30-EGFR-STAT3信号传导通路在乳腺癌中的作用机制进行总结和综述.1 GPR30的结构及功能特点GPR30是一种膜结合雌激素受体(mER)[1],基因位于7p22区域,mRNA由216 kbp组成,包括1 126 by的放阅读框,编码375个氨基酸,与其他G蛋自偶联受体家族成员(GPCRs)有厂泛的同源性,7次跨膜结构域为GPCRs的高度保守区,保守肽段为DRY(Asp-Arg-Tyr)[2].嗜水性分析显示,GPR30具有经典的7次跨膜疏水区域,该区域包含链接着20~26个氨基酸的6个相互交替的细胞内外袢[3].
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番鸭细小病毒免疫原蛋白基因的序列测定与分析
番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus MDPV)病是近十年来在我国华南、华东等地饲养的番鸭中普遍流行的一种急性传染病。该病毒的基因组有两个阅读框架,左阅读框主要编码病毒的非结构蛋白;而右阅读框主要编码病毒结构蛋白。其中VP2结构蛋白具有免疫原性,是病毒刺激机体产生保护性抗体的重要抗原蛋白。此外,有研究报道,细小病毒具有肯定的抑瘤活性。其对人类的多种转化细胞和癌细胞有选择性地杀伤作用,而对正常的细胞无可检测的影响。这意味着通过在分子水平上对细小病毒的深入研究,将有可能为人类癌症疾病的治疗开辟一条新的途径。MDPV-Q株是从具有典型临床症状和病理变化的雏番鸭体内分离得到的野毒,经鉴定为番鸭细小病毒。为了解我国分离株与国外分离株之间的异同关系以及为今后研制开发MDPV的基因工程疫苗,我们借助于PCR引物设计软件,设计了一对引物LHMP7/LHMP8,该对引物选取位于2 885~2 900及4 618~4 604的两段序列,跨幅为1 734 bp,同时在这2条引物中分别加入2种限制性核酸内切酶SacII和 KpnI的酶切位点,使扩增后的DNA片段的两端,分别含有这两种酶的酶切位点,以利于鉴定和今后的亚克隆。应用PCR技术扩增了MDPV-Q株的VP2蛋白基因片段。将扩增后的VP2蛋白基因重组到pMD18-T载体上,并对插入片段进行序列测定。测序结果表明,我国分离的MDPV的VP2蛋白基因序列与国外分离株具有很高的同源性,达98.1%。
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微小RNA在非小细胞肺癌中的应用研究进展
肺癌是威胁人类健康的恶性肿瘤,其中80%肺癌病理类型为非小细胞肺癌(NSCLc).随着人类基因组学的进展,蛋白质编码的原癌基因和/或抑癌基因的改变被认为是肿瘤发生的原因[1-3].但是近年来,随着一类新的没有开放性阅读框的非蛋白质编码微小RNA(miR-NAs)的发现,证明了癌症的基因组复杂性远远超过了人们的预料.miRNAs是一类内源性非蛋白质编码的RNA分子,长约20~25个核苷酸,其表达具有组织和时期特异性,进化上有很高的保守性[4,5].这类新发现的RNA可以调节其他基因表达的活性,在生物发育过程中发挥着重要的作用[6].约1/3的蛋白编码基因受miRNA调控[7].