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正交实验法优选莲子心生物碱的提取工艺
目的 优选莲子心生物碱的佳提取工艺.方法 以紫外分光光度法测定生物碱的含量,采用正交实验法对莲子心的提取工艺进行优选.结果 佳提取工艺为:药材粉碎成粗粉,用10倍量的甲醇进行回流提取.结论 佳提取工艺可以有效地提取莲子心中的生物碱,工艺操作简单、合理.
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高效液相色谱法同时测定莲子心中四种异喹啉生物碱的含量
目的:建立同时测定莲子心中四种异喹啉生物碱-莲心季铵碱、莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱含量的离子对反相高效液相色谱(RP-HPLC)法.方法:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,色谱柱:HibarTR,5μm,250 mm×4.6 mm;流动相:乙腈-水-冰醋酸(55:45:1,每1000 ml中加入4 g十二烷基磺酸钠);流速:1.2 ml/min;检测波长:282 nm;柱温:30℃.结果:莲心季铵碱在0.94～2.82μg,莲心碱在1.14～3.42μg,异莲心碱在0.7～2.1μg,甲基莲心碱在0.96～2.88μg范围内均呈良好线性关系;并均具有较好的加样回收率(＞95%).结论:该分析方法快速、准确、灵敏度高,重复性好,可用于同时对药材莲子心中四种异喹啉生物碱的含量测定.
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10种药物有效部位的净选加工
在药材净选加工时，某些有药用价值的部位往往被忽视，而被视为杂质除去，如花椒的种子、麻黄的根等。为了合理使用药材，扩大药源，现将其总结如下：1 花椒与椒目 花椒为较常用的温里药，药用部位为干燥成熟果皮，味辛、性热，有小毒，可温中、止痛、杀虫。在净选加工时，规定除去果柄、种子和杂质。花椒的种子亦有药用价值，入药称之为椒目，性味苦寒，可行水、平喘，常用于水肿胀满，痰饮喘咳等。2 麻黄与麻黄根 麻黄为辛温解表药的代表药物，功效发汗、平喘、利水，常用于治疗外感风寒表实证等。药用部位为地上草质茎。商品药材常带有根，要求除去。但根功专止汗，是较常用的收涩药，与麻黄的作用相反，应区别入药。3 诃子与诃子核 诃子的商品药材为成熟果实，但临床上要求去核用肉，诃子肉为酸涩收敛药，生用开音敛肺，煨用止泻涩肠，治久咳、久泻、久痢等。而文献记载诃子核磨白蜜注目能治风赤涩痛等，亦有药用价值。4 莲子与莲子心 莲子的商品药材为成熟种仁，中心包裹一绿色胚芽，即莲子心，净制去心后称莲子肉，心和肉作用不同，莲子心能清心热，莲子肉能补脾涩精，故应区别入药。
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莲子心中酚性与非酚性生物碱体外抗氧化活性比较
目的 比较莲子心中酚性生物碱与非酚性生物碱的体外抗氧化活性. 方法 采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)-二铵盐(ABTS)、羟基自由基清除、超氧阴离子自氧化,还原力及β-胡萝卜素漂白测试等方法评估莲子心中生物碱的抗氧化活性. 结果 总生物碱、酚性生物碱、非酚性生物碱对DPPH自由基的半数清除浓度( IC50 )分别为21.89, 27. 10, 32. 87 μg · mL-1;对 ABTS 自由基的 IC50分别为 14. 25, 20. 55, 25.94 μg·mL-1;对羟基自由基清除IC50分别为0.03,0.03,0.08 μg·mL-1;超氧阴离子自氧化速率分别为8.72×10-4, 5.87×10-4,6.68×10-4;还原力大小:总生物碱>酚性生物碱>非酚性生物碱;脂质抑制率分别为89.63%,85.85%,83.78%.结论 莲子心中酚性生物碱对自由基的清除活性、还原力、抗脂质过氧化活性强于非酚性生物碱,具有广阔的应用前景.
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气-质联用法测定莲子心中的氨基酸
目的:建立用气相色谱-质谱联用技术对中药莲子心中的氨基酸进行定性定量分析的方法.方法:莲子心采用水(1∶35)、6mol·L-1盐酸(1∶25)高温回流提取,提取液经BSTFA+ 1％ TMCS衍生后进样,采用全扫描(Scan)定性,选择离子监测(SIM)内标法定量.色谱柱为HP-5MS石英毛细管柱(30m×0.25 μm×0.25 mm),初始柱温为100℃,保持3 min,程序升温8℃·min-1至300℃,保持6 min,分流比为10∶1.结果:测得水解氨基酸15种,游离氨基酸13种,总含量分别为7.14％和0.13％.样品的平均回收率(n=5)在85.7％～109.2％之间；RSD在0.77％～4.85％之间.结论:该方法处理过程简单,灵敏度和选择性高,可用于莲子心中氨基酸的分析测定.
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莲子心中酚性生物碱3种主要成分定量分析及其特征图谱研究
目的:建立同时测定莲子心中酚性生物碱:莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱含量的RP-HPLC法以及酚性生物碱的特征图谱.方法:采用RP-HPLC法,流动相为乙腈-水-三乙胺(25∶75∶0.1,用磷酸调pH3.3),紫外检测波长282 nm,流速0.8 mL·min-1,进样量20 μL.结果:莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱线性方程显示线性关系良好.特征图谱研究确定了酚性生物碱16个共有峰.结论:本方法简便、准确,重现性好,专属性强,可为莲子心中生物碱类物质标准提取物质量控制提供参考.
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莲子心有效成分及其药理作用研究进展
莲子心(Nelumbo nucifera)为睡莲科植物莲种子中的绿色幼叶及胚根.<本划纲目>记载其性味苦寒,有清心去热之功效.本文就其有效成分及药理作用研究综述国内学者的主要研究成果.
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ICP-MS法测定不同产地莲子及莲子不同部位中5种重金属元素含量
目的:比较不同产地莲子及莲子不同部位铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)、汞(Hg)、铜(Cu)5种重金属元素的含量.方法:收集55份不同产地的莲子、去心莲子和莲子心,建立测定莲子中5种重金属含量的ICP-MS法,测定其含量,并运用ANVON单因素方差分析中多重比较法对结果进行分析.结果:55份莲子、去心莲子及莲子心样品Pb、Cd、As、Hg、Cu 5种重金属的含量均符合《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》的要求.不同产地(福建建瓯、江西广昌、湖南湘潭)的莲子中Pb的含量,福建建瓯与江西广昌存在显著性差异(P＜0.05),江西广昌与湖南湘潭存在显著性差异(P＜0.05);Cd、As、Hg、Cu的含量,三个产地均无显著性差异(P＞0.05).产自湖南湘潭的莲子不同部位中Pb的含量,莲子与去心莲子存在显著性差异(P＜0.05),去心莲子与莲子心存在显著性差异(P＜0.05);Cd、As去心莲子与莲子心存在显著性差异(P＜0.05),其余均无显著性差异(P＞0.05);Cu的含量去心莲子与莲子心存在显著性差异(P＜0.01),其余无显著性差异;Hg三者均无显著性差异.结论:建立测定Pb、Cd、Hg、Cu、As 5种重金属元素含量的ICP-MS方法准确、可靠、重现性好.无论是莲子的不同产地还是不同部位,铅元素的含量是共同的区别点,而去心莲子和莲子心5种重金属元素的含量差异很大,特别是铜元素的含量.
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莲子心的化学成分及生物活性研究进展
通过查阅文献对莲子心的化学成分和药理作用进行了归纳总结,以期为莲子心的后绪研究提供基础.其中莲子心的生物碱类化学成分研究相对不足,且药理作用主要为总提取物的活性研究,可对莲子心生物碱类成分进行深入研究,并对化合物单体进行活性筛选和活性评价,使其发挥更大的作用.
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荷叶、莲子心化学成分的薄层比较分析
作者用薄层层析法对荷叶、鲜荷叶汁、莲子心所含成分进行比较,并以芦丁、槲皮素等降脂成分作定性对照,结果荷叶、莲子心具有很多相同成分,表明荷叶、莲子心具有开发价值.
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气质联用法测定不同产地莲子心中的有机氯农药残留
目的 建立气相色谱-质谱(GC-MS)联用法检测莲子心中有机氯农药残留.方法 样品经C18小柱净化或硫酸磺化处理后用GC-MS分析.采用选择离子监测模式(SIM),以保留时间和特征离子定性,峰面积定量.色谱柱为HP-5MS石英毛细管柱(30m×0.25 mm×0.25 μm),程序升温(初始柱温为80℃,保持1 min,以30℃·min1升到175℃,保持4 min;以6℃·min-1至200℃,保持5 min;再以30℃·min-1升到300℃,保持3 min),分流比为1∶1.结果 23种农药在相应范围内线性关性良好(r2均＞0.99),平均回收率在87.9％～105.3％,RSD均＜6％(n-5).采用该法对5个不同产地莲子心中农药残留进行分析,未检测到农药残留.结论 该方法简单灵敏、结果准确可靠,可应用于莲子心中农药残留的分析.
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拮新康逆转K562/A02细胞多药耐药的机理研究
目的利用血清药理学方法探讨中药拮新康复方逆转K562/A02细胞多药耐药的机理,为临床应用提供理论和实验依据.方法分别采用MTT法、RT-PCR、Western印迹法观察含拮新康大鼠血清处理后K562/A02细胞的增殖及mdr-1/P-gp表达的改变.结果含10%拮新康血清+ADM组对K562/A02细胞的抑制率比10%正常大鼠血清+ADM组明显增加(P<0.05);含10%拮新康血清+ADM组K562/A02细胞的mdr-1及P-gp的表达比ADM组及10%正常大鼠血清+ADM组均降低(P<0.01). 结论拮新康能抑制K562/A02细胞的增殖,通过降低mdr-1/P-gp的表达逆转K562/A02细胞的多药耐药.
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固本安神合剂质量控制研究
目的:建立固本安神合剂的定性鉴别方法.方法:采用薄层色谱法(TLC)对固本安神合剂中的酸枣仁、墨旱莲、莲子心进行鉴别.结果:本研究所建立的TLC方法能较好地鉴别出酸枣仁、墨旱莲、莲子心,斑点清晰,阴性对照无干扰.结论:本研究所建立的TLC方法具有专属性,且操作简便快速,可用于固本安神合剂的质量控制.
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五参汤治愈严重褥疮感染1例报告
患者,男,46岁,工人,因高空作业不慎致双下肢瘫痪2年并发严重褥疮3个月来诊.入院查T37℃,P70次/分,BP15/8 kPa.血常规示WBC 12×109/L,于腰骶部可见约5 cm×6 cm大的皮肤软组织坏死溃烂,并感染化脓,分泌物较多,皮下组织肌肉、韧带大部分坏死并向深部发展,疮腔大而深,已侵及骶骨骨膜,并形成潜腔.入院后采用五参汤内服,处方:党参、玄参、丹参、沙参、苦参、金银花、莲子心各10 g,天冬、生黄芪、麦冬各15 g.水煎,早、晚分服.同时外用乳石膏(乳香、炉甘石、龙骨、石蜡、海螵蛸各8 g,医用凡士林14 g,调匀消毒后外用)涂在疮面处.患者经治疗15天后创面坏死组织全部液化自洁,并有大量新鲜肉芽生长,40天后创面大部分愈合,仅留下2个面积约为0.4 cm×0.5 cm、深度为0.8 cm的窦道,60天后新鲜肉芽长平,窦道闭锁愈合,褥疮痊愈出院.
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莲子心对肝纤维化大鼠的抗脂质过氧化作用研究
目的:研究莲子心的抗脂质过氧化作用及对肝纤维化的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:将SPF级雄性SD大鼠48只随机分为6组:正常对照组、模型组、秋水仙碱阳性对照组及莲子心高、中、低剂量组,每组8只.除正常对照组外,其余各组大鼠腹腔注射20％四氯化碳溶液2 mL/kg造模,首次加倍,2次/w,共8 w.同时分别给予各组大鼠按10 mL/kg灌胃相应药物,连续给药8w后称量体质量及肝质量,计算肝脏系数,检测血清ALT、AST、ALB及肝组织SOD、MDA、Hyp水平,观察肝组织肝纤维化并进行分级.结果:与模型组比较,莲子心各组肝脏系数及血清ALT、AST显著降低;肝组织中MDA、Hyp显著降低,SOD显著升高;莲子心中、高剂量组血清ALB显著升高;组织病理学观察显示莲子心各组肝纤维化程度明显改善.结论:莲子心能减轻肝细胞损伤,保护肝细胞,并具有一定的抗肝纤维化作用.清除氧自由基、抗脂质过氧化可能是其抗肝纤维化作用机制之一.
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莲子心的生物碱及酸酯类成分研究
目的:研究莲子心的生物碱及酸酯类成分.方法:采用乙酸乙酯、正丁醇对莲子心的80％乙醇提取物进行萃取,以硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析以及反相制备型高效液相色谱法等现代分离方法对其正丁醇萃取部位进行了分离纯化,利用理化性质以及现代波谱学方法对分离得到的化合物结构进行了结构鉴定.结果:从莲子心中分离鉴定了10个化合物,分别为:邻苯二甲酸二丁酯(1)、齐墩果酸(2)、小檗碱(3)、杏黄罂栗碱(4)、荷叶碱(5)、前荷叶碱(6)、去甲基乌药碱(7)、异莲心碱(8)、甲基莲心碱(9)、莲心碱(10).结论:其中,化合物1、2为首次从莲属植物中分离得到,化合物3为首次从该植物中分离得到.
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LC/MS/MS鉴定莲子心生物碱在Caco-2细胞中的代谢产物
目的:应用LC/MS/MS鉴定去甲乌药碱、莲心碱、异莲心碱、荷花碱4种莲子心生物碱在Caco-2细胞中的代谢产物,推测其代谢途径.方法:100 μmol/L生物碱作用Caco-2细胞3～12h后收集并纯化样品,采用LC/MS/MS分析鉴定代谢产物.结果:去甲乌药碱的代谢产物有甲基化去甲乌药碱和去甲乌药碱葡萄糖醛酸苷;莲心碱和异莲心碱的代谢产物分别是去甲基莲心碱和去甲基异莲心碱;荷花碱的主要代谢物为莲心碱、异莲心碱和它们的进一步去甲基产物.结论:LC/MS/MS操作简便,可快速鉴定Caco-2细胞中的莲子心生物碱的代谢产物.莲子心生物碱主要代谢途径有甲基化、去甲基化和葡萄糖醛酸化.
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前荷叶碱单体的分离鉴定
目的:分离及鉴定前荷叶碱单体.方法:采用超临界CO2萃取技术从莲子心中提取亲脂性成分,用柱层析技术进行分离纯化,对得到的单体化合物用高效液相色谱(HPLC)、薄层层析(TLC)、气相色谱-质谱分析(GC-MS)进行鉴定.结果:将莲子心超临界CO2萃取物用柱层析分离后可获得单一成分,经HPLC、TLC、GC-MS鉴定后,纯度高,为前荷叶碱单体,其总得率为0.0154‰.结论:用超临界CO2萃取技术,结合柱层析分离纯化,可从莲子心中分离得到前荷叶碱单体.
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阳离子交换树脂同步分离和富集莲子心中黄酮与生物碱
目的:研究阳离子交换树脂分离和富集莲子心中黄酮与生物碱类物质的工艺条件.方法:以Nef、黄酮Ⅳ的吸附量及洗脱率为指标,对阳离子交换树脂的静态吸附-解吸性能、动态吸附-洗脱性能进行了考察.结果:药液比为1:6的莲子心提取液经D152阳离子交换树脂吸附后,先用5BV纯化水洗去杂质,然后用10BV 70％乙醇洗脱,得黄酮类物质；用7BV 0.02 g/mL NaCl-70％乙醇洗脱,得生物碱类物质,两类物质洗脱率均在80％以上,精制倍数可分别达27.08倍及7.86倍.结论:该工艺能同时分离和富集莲子心中黄酮和生物碱类物质.
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莲心多糖的提取工艺研究
目的:优选提取莲心多糖的佳工艺.方法:以多糖的含量为考察指标,采用正交试验法优选提取莲心多糖的佳工艺.结果:莲心多糖的提取工艺为莲心加水提取2次,第一次加水8倍量,提取120 min,第二次加水6倍量,提取90 min.结论:提取时间对莲心多糖提取有显著影响,该工艺是合理可行的.
