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剪切诱导血小板聚集及其机理研究
导言在动脉血栓性疾病的病理过程中,血小板活化是重要的始动因素.有许多物质,如凝血酶、肾上腺素等可导致血小板的活化和聚集.近年来研究发现,血流中单纯的高剪切应力也可以诱导血小板聚集.这不但对于存在高剪切应力的血管,如小动脉,动脉痉挛和动脉硬化造成的局部狭窄区的血栓形成有特别重要的意义,还可在其下游形成微血栓,堵塞微血管,造成微循环障碍.因此,研究剪切诱导血小板聚集(Shear induced platelet aggregation,SIPA)的机理有十分重要的意义.
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039 当归对高剪切应力致血管内皮细胞ICAM-1分布异常的逆转作用
目的: 一定程度的剪切应力对于维持血管的正常结构和功能十分重要, 但过高的剪切应力会导致血管内皮细胞ICAM-1的分布和表达异常. 当归是传统的活血化瘀中药, 对于某些血流动力学异常的心脑血管疾病具有肯定的疗效. 本实验研究当归对高剪切应力作用下血管内皮细胞ICAM-1异常分布的逆转作用. 方法: 将ECV304细胞常规培养在长方形的玻片上, 然后分别置于剪切应力为2 Pa的流场中(当归组: 在流场液体中加入当归提取液20 mg/ml), 温度37 ℃. 4 h后取出玻片, 先用鼠抗人ICAM-1单克隆抗体(1∶20)孵育20 min, PBS冲洗, 再用标记有AlexaR荧光的羊抗鼠IgG(1∶50)作为二抗标记, 1%多聚甲醛和0.5% Triton-X100渗透和固定后, 在Olympus IX70荧光显微镜下观察ICAM-1的分布状况. 结果: 高剪切应力会导致血管内皮细胞表面ICAM-1沿细胞表面呈散在分布, 而当归作用后可以使ICAM-1的分布和表达趋于正常. 结论: 当归可以有效地逆转这种异常分布, 具有显著的保护效应.
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038 不同剪切应力对血管内皮细胞ICAM-1分布的影响
目的: 剪切应力是血液在血管内流动时对内皮细胞产生的一种机械刺激, 一定程度的剪切应力对于维持血管的正常结构和功能十分重要. ICAM-1是血管内皮细胞等产生的一类免疫球蛋白超家族粘附分子, 除介导免疫、炎症反应及细胞间粘附和连接外, 还能传递多种细胞信号, 引起细胞内骨架蛋白结构与功能的改变. 故此, 研究在不同剪切应力的作用下, 血管内皮细胞表面粘附分子ICAM-1分布的改变及其机制. 方法: 将ECV304细胞常规培养在长方形的玻片上, 然后分别置于剪切应力为0.2 Pa、 1 Pa(相当于正常状况下动脉血管内的剪切应力)、 2 Pa的流场中, 温度37 ℃. 4 h后取出玻片, 先用鼠抗人ICAM-1单克隆抗体(1∶20)孵育20 min, PBS冲洗, 再用标记有AlexaR荧光的羊抗鼠IgG(1∶50)作为二抗标记, 1%多聚甲醛和0.5% Triton-X100渗透和固定后, 在Olympus IX70荧光显微镜下观察ICAM-1的分布状况. 结果: 在正常状态下(1 Pa), ICAM-1主要分布在细胞间连接处, 而在较低剪切应力(0.2 Pa)和较高剪切应力(2 Pa)作用下, ICAM-1则呈现出细胞表面散在分布的特征. 结论: 过低或过高的剪切应力都会引起血管内皮细胞表面ICAM-1分布的改变.
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较高剪切应力致血管内皮细胞ICAM-1分布异常及当归的逆转作用
目的:研究表明,一定程度的剪切应力对于维持血管的正常结构和功能十分重要,但过高的剪切应力会导致血管内皮细胞ICAM-1的分布和表达异常.当归是传统的活血化淤中药,对于某些血流动力学异常的心脑血管疾病具有肯定的疗效.本实验研究当归对高剪切应力作用下血管内皮细胞ICAM-1异常分布的逆转作用.方法:将ECV304细胞常规培养在长方形的玻片上,然后分别置于剪切应力为20 dyn/cm2的流场中(当归组:在流场液体中加入当归提取液20 mg/mL),温度37℃.4 h后取出玻片,先用鼠抗人ICAM-1单克隆抗体(1∶20)孵育20 min,PBS冲洗,再用标记有Alexa(R)荧光的羊抗鼠IgG(1∶50)作为二抗标记,1%多聚甲醛和0.5% Triton-X100渗透和固定后,在Olympus IX70荧光显微镜下观察ICAM-1的分布状况.结果:高剪切应力会导致血管内皮细胞表面ICAM-1沿细胞表面呈散在分布,而当归作用后可以使ICAM-1的分布和表达趋于正常.结论:当归可以有效地逆转这种异常分布,具有显著的保护效应.
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流体剪力致导致血管内皮细胞ICAM-1分布异常的实验研究
目的:剪切应力是血液在血管内流动时对内皮细胞产生的一种机械刺激,一定程度的剪切应力对于维持血管的正常结构和功能十分重要.ICAM-1是血管内皮细胞等产生的一类免疫球蛋白超家族粘附分子,除介导免疫、炎症反应及细胞间粘附和连接外,还能传递多种细胞信号,引起细胞内骨架蛋白结构与功能的改变.本实验研究在不同剪切应力的作用下,血管内皮细胞表面粘附分子ICAM-1分布的改变及其机制.方法:将ECV304细胞常规培养在长方形的玻片上,然后分别置于剪切应力为2 dyn/cm2、10 dyn/cm2(相当于正常状况下动脉血管内的剪切应力)、20 dyn/cm2的流场中,温度37℃.4 h后取出玻片,先用鼠抗人ICAM-1单克隆抗体(1∶20)孵育20 min, PBS冲洗,再用标记有Alexa(R)荧光的羊抗鼠IgG(1∶50)作为二抗标记,1%多聚甲醛和0.5% Triton-X100渗透和固定后,在Olympus IX70荧光显微镜下观察ICAM-1的分布状况.结果:在正常状态下(10 dyn/cm2),ICAM-1主要分布在细胞间连接处,而在较低剪切应力(2 dyn/cm2)和较高剪切应力(20 dyn/cm2)作用下,ICAM-1则呈现出沿细胞表面散在分布的特征.结论:过低或过高的剪切应力都会引起血管内皮细胞表面ICAM-1分布的改变.
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人工踝关节的研究与应用
人工髋、膝关节蓬勃发展于20世纪80年代.随后,人工踝关节由于较高的松动率和半脱位率而陷入困境,悲观论弥漫多年.至90年代初,加强了踝关节生物力学研究和认识,摒弃早年的限制性或半限制性踝假体两构件设计,发展到非限制性三构件套,消除假体与骨质间的高剪切应力,改进安装技术,特别是采用生物固定技术,制订了踝关节功能评分的Kofoed系统,从而完善了人工踝关节的各个环节,为开展这项技术奠定了基础.
