首页 > 文献资料
-
血清/血浆microRNA检测方法探讨与建立
目的:观察实时荧光定量PCR技术检测血清/血浆microRNA表达水平的影响因素.方法:从样本来源、抗凝剂选择、样本储存时间等方面探讨实时荧光定量PCR技术检测血清/血浆miRNA表达的影响因素.结果:miRNA表达在血清和血浆中没有明显差异,样本储存时间对miRNA的表达没有明显影响,但使用肝素抗凝会明显抑制miRNA的表达.结论:成功建立了一套标准化的血清/血浆miRNA表达检测方法.
-
肝硬化患者血中NO、ox-LDL及ET-1的水平
目的探讨NO、ox-LDL及ET-1在肝硬化时的变化及其与肝功能的关系.方法采用分光光度法和酶联免疫吸附法以及放射免疫分析法分别测定了54例肝硬化患者血中的NO、ox-LDL和ET-1水平,并与68名正常人进行了对比分析.结果表明肝硬化组NO、ox-LDL、ET-1分别为(1.34±0.25)μmol/L、(0.48±0.08)mg/L、(17.51±3.56)ng/L均显著高于正常人组的(0.66±0.18)μmol/L、(0.32±0.07)μmol/L、(6.07±1.45)ng/L(P<0.05).且NO、ox-LDL及ET-1的含量与肝功能分级相平行.结论提示NO、ox-LDL和ET-1水平的变化可作为评估肝硬化患者病情轻重的指标.
关键词: 血清/血浆 肝硬化 一氧化氮 氧化修饰低密度脂蛋白 内皮素-1 -
血清/血浆microRNA及其应用
微小核糖核酸(microRNA,miRNA)在生物体的生长、发育及疾病的发生发展等过程中起着十分重要的作用.目前,人们关注的主要是miRNA在组织细胞内的功能.然而,近的研究发现血清/血浆中存在一些循环的miRNA,血清/血浆miRNA在肿瘤、糖尿病等多种疾病中呈特异性表达,提示血清miRNA可作为潜在的生物标记物用于疾病的诊断和治疗.
-
实时荧光定量PCR检测血清/血浆microRNAs临床应用前的准备
现已证明血清/血浆 microRNAs(miRNAs)表达谱的变化与多种疾病的发生、发展相关。血清/血浆miRNAs分子稳定,不易降解,且标本采集创伤小、便捷,非常适合应用于临床实验室检测。因此miRNAs极有可能成为未来疾病诊断和预后评估的分子标志物乃至治疗靶标。实时荧光定量 PCR 检测法(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)操作简便,需要的 RNA 量较少,灵敏度极高,能在短时间内获得结果,并可同时检测多种miRNAs 表达,有良好的应用前景。本文将详细探讨现阶段用于血清/血浆miRNAs 定量检测的RT-qPCR方法,以及总结血清/血浆miRNAs 定量检测应用于临床检验应注意的问题。
-
循环血中肿瘤特征性游离DNA的研究
正常人循环血中(血清或血桨)有微量的DNA存在,常小于10ng/ml,其来源主要为细胞核DNA和线粒体DNA.肿瘤组织中存在肿瘤特征性DNA物质已有较多研究,而肿瘤患者循环血中是否也存在相应的DNA特征性物质倍受研究者关注.直到1977年Leon等[1]才证实肿瘤患者血清DNA水平大大高于正常人,后来许多[2~17]研究表明肿瘤患者循环血中DNA水平不仅远远高于正常人,而且还具有肿瘤特征性的DNA改变,并和肿瘤组织中表达的同一基因一致,这些实验证据为循环DNA用于肿瘤的早期诊断、疗效评估、发生机制等研究提供了新的简便途径.