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miRNA-21在宫颈癌患者组织中的表达及其与临床病理特征的关系
目的 :探讨宫颈癌患者miRNA-21组织表达情况及其同临床病理特征的联系.方法:选取41例宫颈癌病患为研究对象,取得患者肿瘤组织及临近非肿瘤组织标本,采用定量PCR分析的方式,测定样品中miR-21-3P、miR-21-5P表达情况及同患者临床病理特征的联系.结果:同临近非肿瘤组织对比,宫颈癌组织样本中的miR-21-3P、miR-21-5P水平表达高(P<0.05);宫颈癌病患中miRNA-21表达病理因素包括肿瘤大小及淋巴结转移.结论:宫颈癌病患中,miRNA-21表达明显上调,且与肿瘤大小及淋巴结转移,因此可将miRNA-21作为检测宫颈癌患者预后的重要标志物.
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心复康丸对压力超负荷大鼠心肌miRNA-21的影响
目的:观察心复康丸对压力超负荷大鼠所致的心肌肥厚和心室重构的干预作用,并研究其作用机制是否影响心肌组织miRNA-21的表达.方法:雄性Wistar健康大鼠采用腹主动脉缩窄的方法,复制大鼠心肌肥厚和心室重构的模型,随机分为模型组,依那普利组(1.04 mg·kg-1 ·d-1),心复康丸低、高剂量组(52,208 mg·kg-1 ·d-1)和假手术组,每组20只.分别于术后8,12周采用超声心动评价心功能二尖瓣水平收缩期左室后壁厚度(LVPWs),收缩末期左室容积(LV Vols)及左心室射血分数(LVEF);免疫组织化学法检测心肌组织中Fas,FasL蛋白表达的变化;实时荧光定量-聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测心肌组织miRNA-21 mRNA表达的改变.结果:术后8周,与正常组比较,各手术模型组大鼠LVPWs水平显著升高,LVV.ls,LVEF水平显著降低,心脏肥大指数显著增加,心肌组织Fas与FasL蛋白含量显著增加,miRNA-21 mRNA的表达显著升高(P＜0.01);与模型组比较,心复康丸低、高剂量组和依那普利组能明显降低LVPWs水平,明显升高LV Vols,LVEF水平,明显降低心脏肥大指数,明显降低心肌组织Fas与FasL蛋白的表达,显著提高miRNA-21 mRNA的表达,心复康丸高剂量较为显著(P ＜0.05,P＜0.01).术后12周,与正常组比较,各手术模型组大鼠LVPWs水平显著升高,LV Vols,LVEF水平显著降低,心脏肥大指数显著增加,心肌组织Fas与FasL蛋白含量显著增加,miRNA-21 mRNA的表达显著升高(P＜0.01);与模型组比较,心复康丸低、高剂量组和依那普利组能明显降低LVPWs水平,明显升高LV Vols,LVEF水平,明显降低心脏肥大指数,明显降低心肌组织Fas与FasL蛋白的表达,显著提高miRNA-21 mRNA的表达(P ＜0.05,P＜0.01).结论:心复康丸改善压力超负荷大鼠心功能的作用可能与促进miRNA-21 mRNA的表达,调控Fas,FasL蛋白,抑制细胞凋亡有关.
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三七总皂苷对大鼠乳腺癌变进程及miRNA-21表达影响的研究
目的:通过观察三七总皂苷对二甲基苯并蒽(DMBA)诱导大鼠的乳腺组织病理学改变,观察其对乳腺癌变进程的影响及探讨其可能机制.方法:将34只SD雌性大鼠随机分为空白对照组(N组)、模型对照组(M组)、三苯氧胺组(T组)、三七低剂量组(S-L组)、三七中剂量组(S-M组)、三七高剂量组(S-H组),后五组均采用DMBA造模并分组干预,12周后将乳腺组织标本进行检测,比较不同组间乳腺组织病变情况、癌变率、miRNA-21的表达情况.结果:后五组大鼠乳腺组织均有不同程度的成瘤癌变,且T组、S-L组、S-M组、S-H组大鼠乳腺癌发率较M组明显降低(P<0.05),五组分别是36.67％,40.00％,26.67％,16.67％ 与91.67％.S-M组、S-H组miRNA-21的表达显著低于T组、S-L组和M组,略高于N组的大鼠正常乳腺组织.结论:三七总皂苷在一定程度上能够减慢癌变进程,且疗效与剂量成正比,可能与miRNA-21下调相关.
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miRNA-21在周围神经损伤和修复中的调控作用
周围神经损伤(PNI)后miRNA-21表达发生变化,参与神经再生的调控.本文从miRNA-21对神经元、施万细胞、神经营养因子等方面的影响进行探讨,对PNI及其修复阶段miRNA-21的表达变化和可能的作用机制作一综述,将有助于我们从分子水平进一步了解PNI的病理过程,并为miRNA-21成为一种潜在的PNI的诊断标志物和治疗靶点提供基础.
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甲醛对肝脏miRNA-21及其下游TIMP-3和RECK蛋白的影响
目的:探讨甲醛对小鼠肝脏miRNA-21及其下游基质金属蛋白酶组织抑制因子-3(the tissue inhibitors of metalloproteinase 3,TIMP-3)和伴有Kazal基序富含半胱氨酸的逆转诱导蛋白(reversion-inducing cysteine-rich protein with Kazal motifs,RECK)的影响.方法:将40只♀昆明小鼠随机分为甲醛染毒组(高浓度组、中浓度组、低浓度组)和对照组,每组10只.每日上午10时给予染毒组腹腔注射不同浓度的甲醛溶液,给予对照组注射等量的生理盐水,持续30 d.应用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(RT-PCR)检测各组小鼠肝组织中miRNA-21的表达量,同时用Western blot、免疫组织化学二步法检测各组小鼠肝组织中TIMP-3和RECK蛋白的表达情况.结果:低浓度组、中浓度组、高浓度组中的miRNA-21相对于对照组的表达量分别是1.16±0.18、1.61±0.29、2.48±0.49,组间有明显差异(F=38.02,P＜O.0001).对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组中的TIMP-3蛋白的相对表达量分别是1.30±0.058、1.04±0.083、0.85±0.070、0.23±0.067,组间有明显差异(F=125.8,P＜0.0001).对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组中的RECK蛋白的相对表达量分别是1.24±0.057、1.11±0.056、0.68±0.042、0.35±0.066,组间有明显差异(F=158.7,P＜0.0001).随着染毒溶液浓度的增加,miRNA-21相对表达量与TIMP-3相对表达量呈负相关(r=-0.990,P=0.01),与RECK相对表达量亦呈负相关(r=-0.974,P=0.026).结论:甲醛染毒可以升高miRNA-21在肝脏中的表达,且呈浓度依赖关系.同时可降低TIMP-3和RECK蛋白的表达,亦呈浓度依赖关系.
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心肌miRNA-1和miRNA-21在七氟醚后处理老龄大鼠心肌效果中的差异性表达及意义
目的 初步探索心肌miRNA-1和miRNA-21在七氟醚后处理(SevoPoC)老龄心肌缺血/再灌注损伤(VRI)效果中的表达及其潜在作用.方法 建立年轻(3～4月龄)和老龄(22～24月龄)大鼠在体心梗模型(30 min冠脉结扎,恢复血流120 min),给予SevoPoC(1.0 MAC),采用TTC法检测心梗面积、TUNEL法检测心肌细胞凋亡和TaqMan探针法检测心肌miRNA-1和miRNA-21表达水平,并分别行miRNA-1和miRNA-21与细胞凋亡的相关性分析.结果 SevoPoC可明显降低年轻大鼠心肌I/RI引起的心肌梗死面积增加、凋亡水平升高(所有P＜0.05),但此效果在老龄大鼠中消失(所有P＞0.05).大鼠心肌I/RI可导致心肌miRNA-1和miRNA-21升高,但老龄较年轻组增幅更为明显(P＜0.05);SevoPoC能使年轻大鼠心肌miRNA-1和miRNA-21降至基础水平(P＜0.05),但老龄大鼠经SevoPoC后这两种水平仍较高(P＜0.05).相关分析结果显示,miRNA-1和miRNA-21均与凋亡水平呈现较强的正相关(P＜0.05).结论 SevoPoC并不能对在体老龄大鼠心肌I/RI发挥保护作用,表现为心肌梗死面积和细胞凋亡水平不下降,其机制可能与缺血后老龄心肌miRNA-1和miRNA-21过度激活有关.
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miRNA-21调控PDCD4在恶性黑素瘤组织中的表达及意义探究
目的探究miRNA-21调控PDCD4在恶性黑素瘤组织中的表达及意义探究.方法选取2016年01月-2016年8月山东大学齐鲁医院皮肤外科手术切除的20例恶性黑素瘤组织及20例健康对照皮肤组织;采用real-time PCR法检测恶性黑色素瘤组织及健康皮肤组织中miRNA-21、PDCD4 mRNA的表达;采用western blot法检测恶性黑色素瘤组织及健康皮肤组织中PDCD4蛋白的表达.结果与健康对照皮肤组织相比,恶性黑素瘤组织中miRNA-21表达水平上调(P<0.05),PDCD4 mRNA的表达水平下调(P<0.05);PDCD4蛋白的表达水平显著下调(P<0.05).结论恶性黑素瘤组织中miRNA-21水平显著增加,而PDCD4 mRNA水平及蛋白水平显著降低,可能参与了皮肤恶性黑色素瘤的发病过程.
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抑制miRNA-21表达对胆管癌细胞凋亡、侵袭的影响及其靶基因探讨
目的 探讨抑制miRNA-21表达对胆管癌细胞株凋亡、侵袭的影响及其可能调控的靶基因。方法通过RNAi技术抑制胆管癌细胞株RBE中miRNA-21的表达并加以验证。通过荧光定量PCR技术及蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测RBE细胞中RECK基因表达的改变。应用流式细胞仪检测细胞凋亡的变化。用体外侵袭实验分析胆管癌细胞侵袭能力的改变。结果miRNA-21在胆管癌细胞株RBE中的表达得到有效抑制，并且RECK基因及其蛋白的表达明显上调。流式细胞仪显示RBE细胞凋亡率明显增高，且抑制miRNA-21的表达后胆管癌细胞的侵袭性明显下降。结论抑制miRNA-21的表达可促进RBE细胞的凋亡，并降低其侵袭能力，RECK作为miRNA-21的靶基因参与调控过程。
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MicroRNA-21在宫颈癌组织中的表达及与宫颈癌恶性程度的相关性研究
目的 探讨miR-21在宫颈癌组织中的表达情况及与宫颈癌恶性程度的相关性.方法 选择宫颈上皮内瘤变3级和宫颈癌各20例患者作为观察组,宫颈良性病变患者20例作为对照组,采用Trizol法提取宫颈样本组织总mRNA,实时定量PCR方法分析miR-21在各组患者组织中的表达情况.结果 宫颈癌组及CIN3组中miR-21的表达较对照组升高(P＜0.05); miR-21在宫颈癌高、中分化与低分化组的表达差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 miR-21在宫颈鳞癌组织及宫颈上皮内瘤样病变3级中存在异常表达,提示其与宫颈癌的发生可能有关.
关键词： miRNA-21 宫颈癌 宫颈上皮内瘤样病变 实时荧光定量PCR法 -
肝细胞癌侧群/非侧群细胞中miRNA-21表达差异的检测
目的 采用流式细胞仪优化Hoechst33342染料浓度,检测肝细胞癌(HCC) MHCC-97H细胞中侧群(SP)细胞与非侧群(NSP)细胞中微小RNA-21(miRNA-21)的表达情况.方法 常规制备MHCC-97H单细胞悬液,采用不同浓度(5、6、7、8、9、10、11、12 mg/L)的荧光染料Hoechst33342染色,以维拉帕米拮抗组为对照,优化适合的Hoechst33342染料浓度,通过流式细胞仪分离SP、NSP细胞;采用RT-PCR法检测SP、NSP细胞中miRNA-21的表达情况.结果 优化Hoechst33342浓度为10 mg/L,活细胞比例较高,是适染色的浓度,此时MHCC-97H中SP细胞比例为(8.4±0.7)％;从SP、NSP细胞中提取的总RNA纯度为1.8～2.0,其中没有DNA和蛋白质混杂;SP细胞的miRNA-21表达水平是NSP细胞的(7.30±0.78)倍,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 优化的Hoechst33342浓度可以提高SP细胞的纯度,同时miRNA-21表达可能与HCC干细胞分化有关.
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胃癌患者手术前后miRNA-101、miRNA-21表达水平及其临床意义
目的 探讨胃癌患者手术前后血浆miRNA-101、miRNA-21表达水平及其临床意义.方法 选取50例行胃癌根治术的胃癌患者为胃癌组,另选取同期健康体检者50例为健康对照组,分别于术前、术后1周及术后1个月检测胃癌患者,体检时检测健康体检者血浆中miRNA-101、miRNA-21表达水平;并比较不同临床特征胃癌患者的血浆miRNA-101、miRNA-21表达水平.结果 术前胃癌组患者血浆miRNA-101相对表达量明显低于健康对照组,miRNA-21相对表达量明显高于健康对照组(P﹤0.01).与术前比较,术后1周及术后1个月胃癌患者血浆miRNA-101相对表达量逐渐增高,血浆miRNA-21相对表达量逐渐降低(P﹤0.05).不同分化程度、TNM分期、淋巴结转移情况的胃癌患者术前血浆miRNA-101、miRNA-21相对表达量比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05).结论 胃癌患者血浆miRNA-101、miRNA-21可作为胃癌潜在的生物标志物,有望成为胃癌诊断、手术疗效评估的新手段.
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纤维支气管镜检标本微小RNA-21在非小细胞肺癌诊断中的临床应用价值
目的 探讨纤维支气管镜检标本微小RNA-21(miRNA-21)在非小细胞肺癌(NSCLC)诊断中的临床应用价值.方法 选取80例NSCLC患者作为NSCLC组,选取同期接受镜检筛查的80例肺炎或肺结核患者作为对照组.检测两组患者的镜检物miRNA-21表达水平,比较两组患者的细胞因子和肿瘤标志物水平,分析NSCLC患者镜检物miRNA-21水平与细胞因子和肿瘤标志物水平的相关性.结果 NSCLC组患者的镜检物miRNA-21水平为(8.29±1.15),明显高于对照组的(1.35±0.41),差异有统计学意义(P﹤0.001).NSCLC组患者的γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.001).NSCLC组患者的癌胚抗原(CEA)、神经元特异烯醇化酶(NSE)和角蛋白CYFRA21-1水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.001).NSCLC患者的镜检物miRNA-21表达水平与细胞因子IFN-γ、IL-1β、IL-4、IL-6、TNF-α和肿瘤标志物CEA、NSE、CYFRA21-1水平均呈正相关(P﹤0.05).结论 NSCLC患者纤维支气管镜检标本中miRNA-21的表达水平较高,且与细胞因子和肿瘤标志物水平密切相关.
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非小细胞肺癌组织miRNA-21表达及预后相关性研究
目的:探讨miRNA-21在Ⅰ期非小细胞肺癌组织中的表达及其与复发转移和预后的关系.方法:回顾性分析2002-2006年间本院48例Ⅰ期肺癌手术患者的临床资料,采用定量RT-PCR方法检测上述病例肺癌组织标本中miR-NA-21的表达水平,根据miRNA-21相对表达量进行实验分组.应用x2检验分析miRNA-21表达与肺癌患者复发转移的关系,应用Kaplan-Meier方法分析miR-21表达与生存的关系.结果:肺癌组织中miRNA-21的表达显著高于正常肺组织.以肿瘤组织与正常组织miR-21表达量比值为2作为分界值,将肺癌患者分为miRNA-21分为高表达组和低表达组.miRNA-21高表达组中,肺癌复发转移率为52.4％(11/21),miRNA-21低表达组中,复发转移率为11.1％(3/27),两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).生存分析显示miRNA-21高表达组较之miRNA-21低表达组患者生存期明显降低.结论:miRNA-21高表达与肺癌复发转移具有密切的关系,miRNA-21表达增高提示肺癌患者预后不良.
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肿瘤中miRNA-21及其对PDCD4和PTEN作用的研究进展
miRNA-21的编码基因在17号染色体的q23.2的区域内,多项研究结果表明,其主要调控肿瘤细胞增殖、凋亡和侵袭;PDCD4终抑制肿瘤生成;PTEN的机制则是参与抑制肿瘤的侵袭转移.PDCD4、PTEN均是miRNA-21的靶基因且被其负向调控.随着对miRNA-21、PDCD4、PTEN以及miRNA-21与PTEN和PDCD4关系的研究成果不断报道,有关此三者的研究也越加深入清晰,本文拟就此进行综述.
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miRNAs在原发性肝癌中的表达及临床意义分析
目的:验证miRNAs在肝癌及癌旁组织样本中的表达,并探讨miRNAs表达水平与2年乙肝相关性肝癌复发转移的相关性.方法:采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(real-time PCR)检测miR-21、miR-151、miR-96及miR-198在30例肝癌及癌旁组织样本中的表达情况,并分析miRNAs的表达水平与临床病理特征的关系.结果:与癌旁组织相比,miR-21、miR-96及miR-151肝癌组织较癌旁组织中表达上调,占总体样本的76.7％、70％、66.7％;而miR-198在肝癌组织中表达下调,占总体样本的66.7％.通过对临床资料的分析,本研究发现miRNAs在肝癌组织中的表达差异与肝癌患者肿瘤数目、分化程度、TNM分期、门静脉癌栓及2年复发转移等密切相关(P＜0.05).结论:miRNAs在肝癌及癌旁组织样本中的表达水平存在明显差异,并与肝癌的恶性表型显著相关;miR-21、miR-151和miR-96能促进肝癌的侵袭转移,而miR-198能抑制肝癌的侵袭转移;miRNAs的共同作用可影响患者的预后.
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靶向抑制miRNA-21对K562细胞增殖及PTEN-PI3K/AKT通路的影响
目的 研究靶向抑制miRNA-21表达对K562细胞生物学功能的影响,观察其对PTEN-PI3K/AKT通路相关分子表达水平的影响,探讨其在白血病发病机制中的作用.方法 将化学合成的miRNA-21抑制物电转染K562细胞,RT-PCR检测K562细胞miRNA-21表达变化,MTT法检测miRNA-21对K562细胞活力影响,流式细胞术分析miRNA-21对K562细胞凋亡的影响,应用Westernblot技术检测K562细胞中PTEN、PI3K及p-AKT蛋白表达水平.结果 转染24 h实验组miRNA-21mRNA相对表达水平为(8.070士5.138)％,低于各对照组(P＜ 0.05).转染24 h实验组K562细胞凋亡率为(13.370±0.250)％,高于各对照组(P＜0.01).实验组K562细胞的增殖抑制率由转染后24 h的(8.1±0.9)％升至60 h的(43.1士2.1)％.成功抑制miRNA-21表达后,与对照组相比,K562细胞凋亡增加(P＜0.01),细胞中PTEN蛋白表达上调(P＜0.01),PI3K及p-AKT蛋白表达下调(P＜0.01).结论 靶向抑制K562细胞miRNA-21可以上调PTEN表达而抑制PI3K/AKT信号通路,发挥其抑制K562细胞增殖及促进凋亡作用.
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miR-21调控PTEN/AKT通路影响LPS诱导下足细胞中MMP-2和MMP-9表达
目的 研究microRNA-21(miRNA-21,miR-21)在同源性磷酸酶张力蛋白(PTEN)及磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)信号通路中对脂多糖(LPS)刺激下足细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9表达的影响及调控机制.方法取传3～8代足细胞,分为LPS组和对照组,LPS组给予10 mg/L LPS,对照组给予相同剂量磷酸盐缓冲液.24 h后采用实时荧光定量PCR法和ELISA法分别检测miR-21、MMP-2及MMP-9的表达,并分析miR-21和MMP-2、MMP-9的相关性.构建外源性miR-21干扰的LPS刺激下足细胞损伤模型,采用Western blot检测外源性miR-21对MMP-2、MMP-9、PTEN和p-AKT表达的影响.结果与对照组比较,miR-21与MMP-2、MMP-9在LPS刺激下足细胞中表达升高,两者呈正相关(P<0.05).外源性上调miR-21表达,MMP-2、MMP-9和p-AKT表达升高,PTEN表达降低(P<0.05);而外源性抑制miR-21表达,MMP-2、MMP-9和p-AKT表达降低,PTEN表达升高(P<0.05).结论miR-21可通过调控PTEN/AKT通路促进LPS刺激下足细胞MMP-2和MMP-9表达.
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乳腺癌预后生物标志物研究进展
乳腺癌是世界范围内女性发病率高的恶性肿瘤，也是导致女性癌症相关死亡的主要原因。近些年乳腺癌患者数量呈逐年增加趋势，严重威胁女性的生命健康和生活质量。因此，乳腺癌预后的研究对乳腺癌患者意义深远。随着分子生物学的发展，一些分子生物学标志物被发现与乳腺癌患者预后有关，这使得更准确、有效地评估乳腺癌患者的预后成为可能。本文旨在对乳腺癌预后生物标志物的研究进展作一综述。
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子痫前期患者胎盘中 miRNA-21 及 Th17 相关因子的表达及其关系
目的 探讨胎盘中Th17细胞相关因子IL-17、IL-21、RORc、人类白细胞抗原-G(HLA-G)蛋白及胎盘中微小RNA(micro-ribonucleic acid,miRNA) -21在子痫前期发病中的作用. 方法 选择孕33~37周行剖宫产分娩的子痫前期产妇20例作为子痫前期组,选择孕38周以上自愿要求行剖宫产产妇20例作为正常对照组. 采用实时荧光定量-聚合酶链反应技术检测胎盘组织中IL-17、IL-21、RORc 、HLA-G蛋白以及miRNA-21的表达量. 结果 子痫前期组胎盘中 IL-17、IL-21及miRNA-21相对表达量均明显高于正常对照组( P均<0 .01 ) ,RORc和HLA-G相对表达量明显低于对照组( P均<0 .05 ). 2组胎盘组织中IL-17、IL-21及miRNA-21表达均呈正相关,RORc和HLA-G表达均呈负相关.结论 子痫前期患者胎盘组织中miRNA -21表达升高,促使Th17细胞激活,导致IL-17和IL-21分泌增加;同时miRNA-21表达升高, 使得RORc mRNA和HLA-G mRNA的稳定性降低,产生基因沉默影响转录,导致RORc和HLA-G表达减少. IL-17、IL-21、RORc、HLA-G蛋白以及 miRNA-21可能与子痫前期发病有关.
关键词： 子痫前期 miRNA-21 Th17细胞相关因子 -
miRNA-21在三阴性乳腺癌中的表达及临床意义
目的 探讨miRNA-21在三阴性乳腺癌中的表达及其临床病理特征之间的相关性.方法 选取自2012年1月至2013年6月于我院乳腺外科手术治疗并经过病理科免疫组化证实的30例三阴性乳腺癌及其癌旁组织,应用实时定量RT-PCR检测miRNA-21在三阻性乳腺癌及其癌旁组织中的表达情况,并分析其临床病理因素的相关性.结果 ①miRNA-21在三阴性乳腺癌中的表达明显高于其癌旁组织;②miRNA-21的表达增高与TNM分期/淋巴结转移成正相关.结论 miRNA-21在乳腺浸润性导管三阴性乳腺癌中呈高表达,可作为乳腺癌诊断及判断预后的指标.
