首页 > 文献资料
-
吸烟对牙周病患者牙龈组织中hBD-2、hBD-3表达的影响
目的 通过观察吸烟、非吸烟牙周炎人群牙龈组织中β防御素2、3的表达,探讨吸烟与牙周炎的关系.方法 选取2018年3月～8月在我院口腔科就诊的诊断为牙周炎的患者40作为研究对象,将其分为吸烟组(吸烟者)和非吸烟组(非吸烟者),各20例,应用免疫组织化学染色及Image-Pro Plus 6.0图像处理分析系统检测牙龈组织中hBD2和hBD3的分布和表达并进行统计分析.结果 无论是吸烟还是非吸烟牙周炎患者牙龈组织中均有hBD2和hBD3的表达,且吸烟组hBD2和hBD3的表达强度均明显低于非吸烟组,差异有统计学意义(P<0.01).结论 吸烟可能会通过牙龈组织中hBD2和hBD3的表达减弱,降低机体的防御能力,促进牙周炎的进一步发展,对患者产生消极影响.
-
人β-防御素-2基因治疗大鼠泌尿系感染的实验研究
目的 观察基因重组人β-防御素-2( human beta-defensin-2,hBD2)对大鼠模型大肠埃希菌致泌尿系感染的保护作用. 方法 健康成年雌性SPF级Wistar大鼠56只,随机分为hBD2组与对照组,hBD2组大鼠经逆行膀胱灌注给予脂质体包裹的hBD2重组真核表达载体(pCAGG-hBD2)250μl,对照组同法给予等量空载体(pCAGG),48 h后2组大鼠均膀胱灌注1×108CFU/ml UTI89 200μl,制备大肠埃希菌泌尿系感染大鼠模型,分别于不同时间点处死大鼠获取膀胱组织及尿液进行菌落计数、尿液白细胞计数,观察膀胱组织病理学变化并进行炎症评分. 结果 在感染后24、48、72 h,hBD2组大鼠尿液UTI89菌落计数分别为(6.43±1.04)、(5.66±0.68)、(1.55±1.17) Log10 CFU/ml；膀胱组织UTI89菌落计数分别为(6.07±0.52)、(5.17±1.21)、(1.18±0.84) Log10 CFU/g；尿白细胞计数分别为(25.1±2.9)、(16.4±7.1)、(11.0±3.0)×104 cells/ml；膀胱组织炎症评分(2.21±0.45)、(1.30±0.40)、(1.28±0.28).对照组大鼠尿液UTI89菌落计数分别为(8.85±0.79)、(8.07±1.30)、(7.93±2.89) Log10 CFU/ml；膀胱组织UTI89菌落计数分别为(7.82±1.29)、(7.99±1.71)、(6.73±1.59) Log10 CFU/g;尿白细胞计数分别为(168.0±14.9)、(234.5 ±31.3)、(270.0±22.1)×104 cells/ml;膀胱组织炎症评分(3.30±0.41)、(4.13±0.13)、(4.72±0.24).hBD2组大鼠感染后24,48和72 h尿液及膀胱组织中大肠杆菌菌落计数、尿白细胞计数及组织炎症评分均显著低于对照组,组间差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 基因重组hBD2对大肠埃希菌致泌尿系感染有显著的预防及治疗作用,可能与其杀菌作用和抑制炎症反应有关.
-
衣原体性宫颈炎人β-防御素-2 mRNA的表达
目的 探讨衣原体感染的非淋菌性宫颈炎患者人β-防御素-2(HBD-2)mRNA的表达情况.方法 采用RT-PCR法进行HBD-2 mRNA研究,并以15例正常组织做对照.结果 正常人和患者均可检测到HBD-2 mRNA表达,但衣原体感染的非淋菌性宫颈炎患者表达明显增多.结论 HBD-2参与了衣原体性宫颈炎发病过程.
-
人β-防御素-2基因表达及其抗菌活性
目的 获得人β-防御素-2(humanβ-defensin-2,hBD2)基因并构建其真核表达载体,转染小鼠纤维母细胞(L929),检测其表达,观察hBD2的体外抗菌活性.方法 采用逆转录(RT)-PCR方法从人宫颈癌组织获取人β-防御素-2基因,然后进行克隆扩增,重组真核表达载体pCAGG-hBD2,通过磷酸钙共沉淀法将pCAGG-hBD2导入L929细胞,并用RT-PCR法检测hBD2的表达,用Kirby-Bauer纸片扩散法检测其抗菌活性.结果 RT-PCR凝胶电泳及测序分析的结果显示,所克隆的hBD2基因序列正确,并成功构建了真核表达载体pCAGG-hBD2.Kirby-Bauer纸片法显示,hBD2对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌有明显的杀灭效应.结论 转染pCAGG-hBD2的L929细胞能高效表达hBD2,其对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌有杀灭作用.
-
胎膜早破患者HBD-2、NF-κB p56的表达及其相关性
目的:探讨孕妇血清、胎盘、胎膜中人β-防御素-2(Human beta-defensins-2,HBD-2)、核因子-κB(nuclear factor-κB p56,NF-κB p56)水平相关性,以及与胎膜早破(Premature Rupture of Membrane,PROM)的关系,初步探讨 HBD-2、NF-κB p56在PROM的作用,为临床诊治PROM提供新的思路.方法:PROM组:妊娠37～42周35例,34～36+6周35例,28～33+6周25例;与胎膜早破组孕周、例数相对应的95例非胎膜早破孕妇作为对照组.根据胎膜病理诊断结果,在PROM组分为绒毛膜羊膜炎组(histological chorioamnionitis,HCA)组与非HCA组,采用ELISA两步法测定外周血HBD-2、NF-κB p56,SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测胎盘,胎膜HBD-2、NF-κB p56的mRNA表达,比较胎膜早破组与对照组,HCA组与非HCA组在不同孕周孕妇血清,胎盘,胎膜HBD-2、NF-κB p56测定结果的差异,并进行相关性分析.结果:(1)妊娠37～42周:PROM组孕妇入院血清,分娩结束血清,胎盘,胎膜HBD-2、NF-κB p56 的表达水平与对照组比较差异无统计学意义(P均>0.05);(2)妊娠34～36周+6 和妊娠28～33周+6:PROM组孕妇入院血清,分娩结束血清,胎盘,胎膜HBD-2、NF-κB p56的表达显著高于对照组(P均<0.05);PROM组分娩结束血清HBD-2、NF-κB p56的表达高于入院血清,差异有统计学意义(P均<0.05);(3)HCA组孕妇分娩结束血清,胎盘,胎膜中HBD-2、NF-κB p56的表达与非HCA组比较,差异有统计学意义(P均<0.05),而入院血清HBD-2、NF-κB p56表达差异无统计学意义(P均>0.05);(4)妊娠37～42周:入院血清,分娩结束血清,胎盘,胎膜表达HBD-2、NF-κB水平无相关关系(P>0.05),同一组织中HBD-2与NF-κB p56水平无相关关系(P>0.05);(5) 妊娠34～36周+6和妊娠28～33周+6:入院血清HBD-2,分娩结束血清HBD-2呈正相关r=0.82(P＜0.01),入院血清HBD-2,分娩结束血清HBD-2均与胎盘HBD-2水平呈正相关关系r=0.66、0.65(P＜0.01),入院血清HBD-2,分娩结束血清HBD-2与胎膜HBD-2呈正相关关系r=0.69、0.72(P＜0.01),胎盘HBD-2与胎膜HBD-2呈正相关关系r=0.79(P＜0.01).NF-κB p56在各组织中的关系与HBD-2类同,同一组织中HBD-2与NF-κB p56表达成正相关关(P＜0.01).结论:HBD-2与NF-κB p56的表达与早产PROM密切相关.其作用机制可能是多方面的因素共同启动宿主剧烈的免疫应答,通过介导NF-κB p56转导途径产生大量HBD-2等引起胎膜完整性受损可能是其主要的机制所在.
-
龈沟液β-防御素-2、β-防御素-3在慢性牙周炎与2型糖尿病中的水平研究
目的 通过检测龈沟液中β-防御素2、β-防御素3的表达水平,探讨其在慢性牙周病与2型糖尿病中的可能作用.方法 选取慢性牙周炎伴2型糖尿病组(T2DMCP组)20例,2型糖尿病组(T2DM组)20例,慢性牙周炎组(CP组)20例,健康组(H组)20例作.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测龈沟液中β-防御素-2和β-防御素-3水平.比较组间龈沟液中β-防御素-2和β-防御素-3水平的差异性,分析β-防御素-2和β-防御素-3之间的相关性与β-防御素-2和β-防御素-3与牙周指标的相关性.结果 CP组、T2DM组、T2DMCP组的临床指标PD、CAL、BI和GCF量均高于H组(P＜0.05).T2DMCP组的PD、CAL、BI和GCF量均高于T2DM组和CP组(P＜0.05).龈沟液中β-防御素-2,β-防御素-3水平在H组高于CP组、T2DM组和T2DMCP组(P＜0.05),CP组和T2DM组高于T2DMCP组(P＜0.05).龈沟液中β-防御素-2水平与β-防御素-3水平呈正相关(P＜0.05).结论 慢性牙周炎和2型糖尿病可降低龈沟液β-防御素-2和β-防御素-3的水平,提示β-防御素-2、β-防御素-3对牙周组织起保护作用.
-
人β-防御素-2基因预防感染性结石的实验研究
目的:通过对膀胱感染性结石大鼠膀胱灌注脂质体包裹的人β-防御素-2重组真核表达载体(pCAGG-hBD2),观察人β-防御素-2(hBD2)基因对感染性结石的预防作用.方法:选择健康成年雄性SD大鼠40只,随机分为实验组与对照组.实验组膀胱灌注pCAGG-hBD2 250μl,对照组经同法给予等量空载体(pCAGG).2天后,两组均随机处死3只大鼠,利用小动物成像仪观察重组hBD2在SD大鼠膀胱黏膜的表达;转染成功后,两组均膀胱内置入含菌(奇异变形杆菌)聚乙烯管异物,分别于24、48、72小时收集尿液,进行尿液菌落计数、白细胞计数.30天处死全部大鼠获取膀胱组织,观察结石的形成情况及膀胱组织病理学变化.结果:实验组大鼠置入含菌(奇异变形杆菌)聚乙烯管异物24、48、72小时后,尿液中奇异变形杆菌菌落总数、尿白细胞计数均显著低于对照组,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.001);实验组和对照组不同时间大鼠尿液中奇异变形杆菌菌落总数及尿白细胞计数差异有统计学意义.对照组大鼠的尿路组织主要表现为肾输尿管膀胱的炎症改变,膀胱内有感染性结石的形成;实验组大鼠的尿路组织病理学无明显变化,膀胱内无结石生成.结论:重组hBD2基因对奇异变形杆菌致泌尿系感染性结石有预防作用.
-
人β-防御素-2在慢性阻塞性肺疾病患者诱导痰中的表达
目的 测定慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者诱导痰中人β-防御素-2(hBD-2)的表达水平,来探讨hBD-2在COPD中的可能作用.方法 收集COPD急性加重期、稳定期患者及正常人的诱导痰各10例,处理后分别进行痰细胞的计数和分类,Western blotting analysis法检测诱导痰中hBD-2的表达水平,并以图文分析系统进行灰度的半定量对比,同时用ELISA法测定诱导痰中白细胞介素-1β(IL-1β)的表达水平,并与hBD-2的表达进行相关分析.结果 与正常组比较,COPD急性加重期组和稳定期组的中性粒细胞比例明显增多(P＜0.01),而COPD急性加重期组和稳定期组的hBD-2蛋白表达灰度值明显降低,差异有显著性(P＜0.001);与稳定期组比较,COPD急性加重期组hBD-2蛋白表达灰度值也明显降低,差异有显著性(P＜0.01).COPD稳定期组的IL-1 β表达与正常组比较升高,差异有显著性(P＜0.001);与COPD稳定期组比较,COPD急性加重期组IL-1 β表达明显升高,差异有显著性(P＜0.01).hBD-2的蛋白印迹的灰度值与IL-1 β的浓度呈显著负相关(r=-0.689,P＜0.01).结论 COPD患者诱导痰中hBD-2表达增高,并与IL-1 β有相关性,提示hBD-2可能参与了COPD的炎性过程.
-
白介素17A对口腔黏膜上皮细胞抗念珠菌黏附及β-防御素-2表达的影响
目的:探讨白介素17A(IL-17A)对白色念珠菌Candida albicans (C.a)感染的人口腔黏膜上皮细胞(OMECs)β-防御素-2(hBD-2)表达的影响.方法:将OMECs分为空白对照组、单独重组人IL-17A(rhIL-17A)处理组、单独C.a处理组(模型组)及C.a与rhIL-17A共同处理组(实验组).按菌:细胞=1∶10建立C.a感染的OMECs模型.分别将单独rhIL-17A处理组和实验组的OMECs按所加入的rhIL-17A浓度分为4个亚组:1μg/L组、10 μg/L组、100 μg/L组及1 000 μg/L组,共培养48 h.收集不同时间点(0h、12 h、24 h、48 h)的细胞培养上清液,计算C.a黏附率;分别采用荧光定量PCR(FQ-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测hBD-2 mRNA相对表达量及蛋白水平.结果:与模型组比较,实验组C.a黏附率有所降低,但差异无统计学意义(P＞0.05).不同浓度的rhIL-17A均能诱导OMECs表达hBD-2,且100 μg/L组hBD-2 mRNA相对表达量及蛋白水平升高为显著(P＜0.01).采用100 μg/L rhIL-17A刺激OMECs 12 h、24 h、48 h后,hBD-2 mRNA及蛋白水平均升高,且48 h时hBD-2 mRNA及蛋白水平显著高于0h和12 h(P＜0.05或P＜0.01).结论:IL-17A能诱导OMECs表达hBD-2,但对口腔黏膜上皮抗C.a黏附无明显作用.
-
人β-防御素-2在涎腺肿瘤及涎腺炎症中的表达及其意义
目的 研究涎腺良性肿瘤组织、恶性肿瘤组织和涎腺炎症中人β-防御素-2(HBD-2)rnRNA和蛋白的表达特征.方法 对不同涎腺组织,采用聚合酶链反应(PCR)、实时聚合酶链反应(Real-Time PCR)和免疫组化检测HBD-2的表达,并分析HBD-2 mRNA和蛋白在涎腺良性肿瘤组织、恶性肿瘤组织、炎症组织和正常涎腺组织中的表达差异.结果 与涎腺正常组织比较,良性肿瘤组HBD-2 mRNA表达量为其6.468倍,显著高于涎腺正常组织组(P＜0.05);恶性肿瘤组为其0.334倍,显著低于涎腺正常组织组(P＜0.05);涎腺炎症组为其10.563倍,显著高于涎腺正常组织组(P＜0.05).HBD-2不仅在这些组织的细胞质中有表达,而且在恶性组织中的细胞核也有表达.结论 HBD-2在涎腺良性肿瘤组织及涎腺炎症组织中高表达,在涎腺恶性肿瘤组织中低表达,其蛋白发生核转移.
-
托法替布治疗的中、重度银屑病患者血清细胞因子及人β-防御素-2的水平
目的 探讨中、重度斑块型银屑病患者接受JAK抑制剂托法替布治疗前后血清细胞因子、人β-防御素-2(hBD-2)水平变化.方法 将18例中、重度银屑病患者随机给予安慰剂、托法替布5mg,2次/d或10mg,2次/d治疗16周.在基线、第8周、第16周,评价患者的银屑病皮损面积和严重程度指数(PA-SI),同时分别采用流式微珠检测技术(CBA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,TNF-α,IFN-γ,IL-17A和血清hBD-2水平.结果 经过16周,接受托法替布5mg,2次/d和10mg,2次/d治疗的银屑病患者的PASI显著下降(P＜0.05),血清各细胞因子水平无明显差异.托法替布10mg治疗组的血清hBD-2显著降低且低于安慰剂组(P＜0.05).此外血清hBD-2与PASI显著相关(r =0.52,P＜0.01).而血清IL-6水平与PASI不相关.结论 血清hBD-2水平和银屑病严重程度相关,并可以反映托法替布的疗效.
