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镁基合金生物相容性的初步研究
目的：探讨3种镁基材料的生物相容性。方法：分别取纯镁（Mg组）、AZ31镁合金（AZ31组）和表面经过微弧氧化处理的AZ31镁合金（MAO组）3种材料，用扫描电镜进行形貌观察后，将人牙周膜干细胞（hPDLSCs）分别接种于3组材料表面进行培养；并观察细胞的增殖曲线（CCK－8实验）以及贴附形态（SEM）。然后将3组材料植入SD大鼠皮下，分别于植入1、2、4、8周处死动物并取材，用场发射扫描电镜和能谱仪观察剩余材料表面的元素变化以及形貌改变；HE染色观察各材料周围组织纤维包裹层厚度及巨噬细胞数量以评价材料所引起的异物反应。结果：3组材料均对hPDLSCs增殖有所抑制，其中以Mg组抑制大，MAO组小（P＜0．05），而且hPDLSCs在MAO组表面表现出了更好的贴附状态。3组材料在植入体内后表面元素均发生明显变化，其中以钙、磷元素变化明显，材料耐腐蚀性以MAO组强，Mg组差；其中MAO组在大鼠皮下引起的免疫反应轻，Mg组重，各组间差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论：经过表面微弧氧化（MAO）处理的镁合金在体内外具有更好的生物相容性以及耐腐蚀性。
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同一个体来源正常与炎性牙周膜干细胞生物学性能的比较
目的：比较同一个体来源正常与炎性牙周膜干细胞的生物学性能。方法：分别分离培养同一个体来源正常牙周膜干细胞（hPDLSCs）及炎性牙周膜干细胞（i－hPDLSCs）。流式细胞仪鉴定两种干细胞表面抗原标记；MTT法、克隆形成率检测并比较两者的增殖能力；茜素红染色及油红O染色检测并比较其分化能力；RT－PCR检测成骨相关基因COL－1、Runx－2、BSP－mRNA及成脂相关基因LPL与PPAR γmRNA的表达水平。结果：i－hPDLSCs及hPDLSCs均具有间充质干细胞特性，i－hPDLSCs增殖能力强于hPDLSCs，但分化能力明显弱于hPDLSCs（P＜0．05）；两者成脂能力比较无统计学差异（P＞0．05）。结论：炎症微环境对牙周膜干细胞的生物学性能有一定的影响。
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3D培养牙周膜干细胞生物学特性的初步研究
目的：研究悬滴法3D培养和2D贴壁培养的牙周膜干细胞（PDLSCs）生物学特性的差异。方法：改良酶消化组织块法分离培养PDLSCs，分别行2D贴壁培养及3D培养（3D培养按不同细胞接种数分为2．5×104，5×104及1×1053组），培养96 h后分别用Live／Dead染色法分析细胞活性；流式细胞术检测干细胞表面标记物；然后对2D、3D培养的PDLSCs进行矿化诱导，茜素红染色及荧光定量PCR检测矿化结节形成情况以及矿化相关基因ALP和OPN mRNA的表达水平。结果：3D培养的PDLSCs可形成致密的细胞聚合物，2．5×104组PDLSCs细胞聚合物中心未见坏死现象，5×104组和1×105组则有较为明显坏死现象；3D和2D培养的PDLSCs间充质干细胞表面标记物的阳性表达率均无显著差异（P＞0．05）；茜素红染色和荧光实时定量PCR结果显示，3D培养的PDLSCs形成矿化结节的数量及其矿化相关基因ALP OPN mRNA的表达水平均显著高于2D培养的细胞（P＜0．05）。结论：3D悬滴培养法是一种理想的PDLSCs培养方法。
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小型猪牙髓、牙周膜干细胞的生物学性能比较
目的:比较小型猪牙髓干细胞(DPSCs)和牙周膜干细胞(PDLSCs)的生物学性能.方法:有限稀释法克隆培养同一个体小型猪的DPSCs和PDLSCs,流式细胞仪检测细胞表面标记物,通过克隆形成率和MTT比色法检测2种细胞的增殖活性;成脂、成骨诱导培养检测细胞的分化能力,Real - Time PCR检测比较2种细胞的成骨相关基因Runx2、Col-1、OCN mRNA的表达水平.结果:小型猪DPSCs和PDLSCs均阳性表达CD146、Stro-1、CD29、CD90,阴性表达CD45;DPSCs和PDLSCs的克隆形成率分别为15.3%和14.6%(P>0.05);2种细胞均具有较强的增殖活性,都具有成脂、成骨分化的能力,成脂能力2种细胞相比无明显差异(P>0.05),体外形成钙化结节的能力PDLSCs强于DPSCs(P<0.05).PDLSCs中的各成骨相关基因Runx2、Col - 1、OCN mRNA的表达水平高于DPSCs(P<0.05).结论:小型猪恒牙DPSCs和PDLSCs均具有较强的增殖和多向分化的潜能;但DPSCs的骨向分化潜能低于PDLSCs.
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牙周慢性炎症对牙周膜干细胞生物学特性的影响
目的:探讨牙周慢性炎症对牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)生物学特性的影响.方法:体外有限稀释法克隆化培养健康个体和慢性牙周炎患者牙周膜干细胞(H-PDLSCs 和P-PDLSCs),免疫荧光染色法分析细胞表面分子;克隆形成和Edu染色检测细胞增殖能力;并通过体外成骨、成脂、成软骨诱导培养,比较两组PDLSCs多向分化能力.结果:慢性牙周炎患者牙周膜组织中可分离培养出PDLSCs,与分离自牙周健康者的H-PDLSCs相比,其增殖能力升高,但分化能力减弱(P<0.05).结论:牙周慢性炎症微环境可降低PDLSCs的分化潜能.
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正常和炎症来源的人牙周膜干细胞内皮向分化能力的比较
目的:比较炎症和正常牙周膜组来源的牙周膜干细胞(iPDLSCs和PDLSCs)体外成血管的能力.方法:组织块酶消化法培养iPDLSCs和PDLSCs,并经有限稀释法纯化和干细胞表面标记物检测鉴定后,对其进行成血管诱导,并通过免疫荧光染色、实时定量PCR、Matrigel assay检测其内皮细胞相关标记物的表达水平及毛细血管网形成状况.结果:两种细胞经纯化后均阳性表达干细胞标记物CD90、CD29、CD105、CD146;iPDLSCs比PDLCSs具有更高的克隆形成能力;两种细胞经内皮向诱导培养后其内皮细胞标记物VEGF、vWF、CD31、VE-cadherin mRNA的表达水平均较诱导前明显上调(P<0.05),并且均能在体外形成管腔样结构;iPDLSCs中CD31、VE-cadherin mRNA的表达水平和管腔长度、分支节点数等均明显高于PDLSCs(P＜0.05).结论:正常和炎症来源的人牙周膜干细胞均具有成血管能力,并且炎症来源的成血管能力更高.
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供体因素对牙周膜干细胞生物学特性影响的研究进展
牙周膜干细胞（PDLSC）是一种位于牙周膜中的成体干细胞，具有较强的自我更新能力及多向分化潜能，在组织工程研究中有较大的应用价值。但不同供体来源的 PDLSC 在增殖、分化、迁移等生物学特性上则表现出一定的差异，并与诸多供体因素如年龄、组织来源、局部炎症、高糖环境、吸烟等密切相关，从而影响其在组织再生应用中的效果。本文就供体因素对 PDLSC 生物学特性的影响作一综述。
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BMP-2对牙周膜干细胞的增殖、分化、迁移的影响
BMP-2是一种可调节具有成骨特性细胞的生物学特性（形态发生、增殖分化、迁移趋化等）的生长因子。牙周膜干细胞是存在于牙周膜中的一种具有自我增殖、多向分化潜能的成体干细胞，被誉为牙周组织工程的佳种子细胞。研究BMP-2对于牙周膜干细胞生物学特性的影响，对于联合二者应用于牙周组织再生有一定的临床意义。本文就BMP-2对牙周膜干细胞的增殖、分化和迁移特性的影响作一综述。
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牙源性干细胞的研究进展
目前已证实,牙周膜、牙髓、根尖乳头和牙囊等牙源性组织中存在间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC),即牙源性干细胞；而且能在一定条件下被成功分离、培养和扩增；并证实其具有多向分化的潜能,且可在体内实现包括牙齿、神经和骨等多种组织的再生.另外,该细胞来源广泛、容易获得,日益成为组织工程学中具有潜质的间充质干细胞.本文就牙源性干细胞的研究进展及其在组织工程学中的应用等作一综述.
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转化生长因子β1对牙周膜干细胞迁移、粘附及增殖的影响
目的：研究转化生长因子β1(TGF-β1)对牙周膜干细胞(PDLSCs)的迁移、粘附和增殖的影响,初步探讨 TGF-β1通过影响牙周组织干细胞参与牙周改建的机制。方法分离培养人 PDLSCs,鉴定其多向分化潜能。用 Transwell 法检测 TGF-β1对 PDLSCs 的迁移的影响。用粘附实验检测 TGF-β1对 PDLSCs 粘附能力的影响。用 MTT 法和生长率法检测 TGF-β1对 PDLSCs 增殖的影响。结果浓度为2.5 ng/mL 以及10 ng/mL 的 TGF-β1可促进 PDLSCs 的迁移,而且此作用呈剂量效应关系。粘附实验结果显示,在分别作用2 h 和4 h 后,浓度为10 ng/mL 的 TGF-β1可促进PDLSCs 的粘附。MTT 法的结果证实了 TGF-β1可促进 PDLSCs 的增殖,该作用呈剂量效应关系。再将细胞在含有或者不含有10 ng/mLTGF-β1的培养基中培养2、4、6 d,对细胞进行计数后发现 TGF-β1显著促进 PDLSCs 的生长。结论TGF-β1可促进 PDLSCs 的迁移、粘附和增殖。推测 TGF-β1可能通过诱导 PDLSCs 向牙周组织部位迁移并提高其粘附和增殖能力。
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苯妥英钠对大鼠牙周膜干细胞迁移及成骨分化的影响
目的 在体内微环境中研究局部应用苯妥英钠对大鼠牙周膜干细胞迁移及成骨分化的影响.方法 54只SD雄性大鼠建立下颌骨创伤模型,创伤局部使用预定浓度的苯妥英钠,将大鼠随机分为实验组和对照组.实验组于术后通过舌下静脉注入BrdU标记的大鼠牙周膜干细胞,对照组于术后通过舌下静脉注入等量的PBS,每组每个浓度分别于术后1、2、4周时腹腔麻醉后脱颈处死大鼠3只,采用免疫组织化学染色和图像分析软件测定创伤区BrdU、骨桥蛋白(OPN)、RUNX2的表达,并用SPSS 18.0统计分析软件进行多因素方差分析.结果 40μg/mL PHT+ rPDLSCs组和100μg/mL PHT+rPDLSCs组BrdU阳性细胞数明显多于20 μg/mL PHT+rPDLSCs组与rPDLSCs,差异有统计学意义(P＜0.05);40μg/mL和100 μg/mL PHT+ rPDLSCs与rPDLSCs相比、PHT和空白组相比、PHT+ rPDLSC与PHT相比差异有统计学意义(P＜0.05);40 μg/mL和100 μg/mL PHT组OPN和RUNX2的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 40μg/mL和100 μg/mL PHT在骨组织修复的早期可以促进缺损附近的牙周膜干细胞迁移至缺损区域,并增殖分化为成骨细胞,促进骨组织的愈合.
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炎性微环境对牙周膜干细胞骨向分化作用的初步研究
目的研究炎性微环境对人牙周膜干细胞(孕阅蕴杂悦泽)和骨髓间充质干细胞(月MM杂悦泽)骨向分化的效用。方法培养正常的牙周膜干细胞，在培养基中加入栽晕云-α制作炎性微环境。在炎性微环境下培养牙周膜干细胞和骨髓间充质干细胞，再对两种干细胞碱性磷酸酶染色、增殖能力和骨向分化基因表达进行检测。结果炎性微环境下，牙周膜干细胞相对于第一组正常牙周膜干细胞组孕阅蕴杂悦泽碱性磷酸酶染色减弱，而月MM杂悦泽碱性磷酸酶染色相对于正常培养环境下的骨髓间充质干细胞未见明显减弱。而细胞增殖实验显示孕阅蕴杂悦泽增殖能力较月MM杂悦泽强。结论炎症微环境下，两种干细胞骨向分化能力均减弱；在两种干细胞中，月MM杂悦泽骨向分化能力较高、对炎症刺激抵抗较强。
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牙周膜干细胞的研究进展
世界上有很多口腔疾病患者都有各种原因引起的牙用及牙体组织缺失或缺损的现象,这些原因可能是严重的牙周炎、深龋、外伤、肿瘤等,但是传统的治疗手段仅仅只能去除病因而无法完全恢复已经丧失的牙周组织,因此对已损伤的组织实现具有正常功能的再生或重建成为我们追求的终目标,而实现这一目标的一个关键因素就是干细胞.其中,牙周膜干细胞(PDLSC)因具有高度的增殖和自我复制能力,具有可分化成牙周膜、牙槽骨和牙骨质的潜能对牙周组织的再生有着密切相关的作用,及具备自体移植免疫排斥反应小、不存在伦理争议的优势,从而成为目前研究的热点之一.本文就近年来对牙周膜干细胞的研究进展作一综述.
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釉原蛋白对人牙周膜干细胞迁移、粘附及增殖能力的影响
目的：探究釉原蛋白（AML）对牙周膜干细胞（PDLSCs）迁移、粘附和增殖的影响。方法流式细胞仪分选 Stro-1＋PDLSCs，采用 Transwell 法检测 AML 对 PDLSCs 迁移的影响，粘附实验检测 AML 对 PDLSCs 粘附的影响，MTT 检测 AML 对 PDLSCs增殖能力的影响。结果Transwell 结果显示，AML 能够作用于 PDLSCs，促进其迁移，并且此影响呈正相关；粘附实验结果显示， PDLSCs 的粘附同样受 AML 的影响，该作用随培养时间延长而增加；MTT 结果显示，AML 能够促进 PDLSCs 增殖，且随着剂量增加该促进作用增强。结论体外 AML 能够作用于 PDLSCs，促进其迁移、粘附和增殖。
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体外培养牙周膜干细胞促进其增殖的研究进展
牙周膜干细胞因高度自我更新能力和多向分化潜能能形成类似于天然牙骨质牙周膜复合体的结构,使其在临床上具有广泛应用前景,目前在牙周组织工程方面的应用研究已取得一些进展,被认为是牙周组织工程的首选种子细胞,但是牙周膜组织中干细胞含量非常少,如何用成体干细胞替代牙源性干细胞,从而获得大量种子细胞.本文就目前体外培养牙周膜干细胞促进其增殖的研究做一综述.
