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  • 炎症微环境对牙周膜干细胞氧化应激和线粒体生成的影响

    作者:蔡川;黄也;王婧;薛芃;徐娟;张彤;徐璐璐

    目的:探讨炎症微环境对牙周膜干细胞(PDLSCs)氧化应激和线粒体生成的影响.方法:体外分离因正畸治疗需要而拔除的健康牙齿及慢性牙周炎患牙的PDLSCs,分组培养健康PDLSCs(H-PDLSCs)、炎症PDLSCs(P-PDLSCs)和肿瘤坏死因子α作用下的PDLSCs(T-PDLSCs).培养7d后,采用荧光探针和流式细胞技术检测线粒体及全细胞的活性氧簇(ROS)水平,采用实时定量PCR和Western blot技术分别检测线粒体生成及抗氧化相关基因的mRNA和蛋白表达水平.结果:与H-PDLSCs相比,P-PDLSCs和T-PDLSCs组细胞线粒体和全细胞ROS水平显著增加,线粒体生成相关基因ERRα、PGC-1α、TIMM13、MFN2和抗氧化基因PRDX3与SOD2的mRNA表达水平均显著降低,ERRα、PGC-1α、PGC-1β和SOD2蛋白表达水平均显著降低.结论:炎症微环境显著提高PDLSCs的氧化应激水平,抑制PDLSCs的线粒体生成和抗氧化反应.

  • 牙周膜干细胞用于犬牙槽嵴组织工程化增高的实验研究

    作者:贺慧霞;刘洪臣;马军利;鄂玲玲;王东胜

    目的:探讨牙周膜干细胞复合生物支架材料增高重建牙槽嵴效果,为缺牙后牙槽嵴重度萎缩的种植义齿修复奠定基础.方法:分离培养牙周膜干细胞(PDLSCs),将其分别与骨组织工程支架材料羟基磷灰石-磷酸三钙(HA/TCP)及附着龈组织工程材料脱细胞真皮基质(ADM)复合诱导后,植入犬双尖牙缺失致牙槽嵴缺损部位,PDLSCs-HA/TCP植入骨缺损区,PDLSCs-ADM植入粘骨膜缺损区.植入32周,大体测量植入前后增高牙槽嵴高度;X-线片显示牙槽嵴高度与密度变化;组织学观察边界区新生牙槽骨结构,未植入做对照.结果:细胞-材料复合体植入后牙槽嵴高度显著增高,由移植前4.15±0.20,增加到移植后9.30±0.15(P<0.05).X-线显示邻牙标记部位冠方有类骨密度硬组织形成,牙槽嵴明显增高.组织学显示:与对照组比较,细胞材料移植组可见缺损区有新生骨样组织形成,可见骨陷窝和骨细胞样结构.结论:PDLSCs分别与骨及粘骨膜组织工程支架材料HA/TCP、ADM复合后体内移植,可显著增高牙槽嵴高度,是牙槽嵴增高重建、实现无牙合种植修复的有效途径.

  • 牙髓血运重建术对延迟再植的犬牙髓、牙周膜干细胞生物学性能的影响研究

    作者:张新;刘艳丽;胡湘权

    目的 探讨牙髓血运重建术对延迟年轻犬再植恒牙再生牙髓和牙周膜干细胞生物学性能的影响.方法 选择6个月龄健康杂种犬1只,行牙髓血运重建术后采用有限稀释法克隆培养牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)和牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs),观察细胞形态,检测细胞表面标记物、克隆形成率、增殖活性,以及成骨能力.结果 低密度克隆法筛选的DPSCs、PDLSCs形态良好;流式细胞仪检测显示Stro-l、CD146、CD29、CD90均呈阳性表达,而CD45呈阴性表达;2种细胞增殖活性和克隆形成率差异无统计学意义(P>0.05),均有明显的矿化结节且PDLSCs的矿化结节形成量显著高于DPSCs(P<0.05).结论 牙髓血运重建术后新生组织内含有PDLSCs和DPSCs,为延迟再植患牙修复提供一种新思路,为该项技术的临床应用奠定基础,但其长期疗效,生物学机制,人体组织、分子生物学机制,以及可能出现的不良影响仍需继续研究.

  • 内皮素-1对牙周膜干细胞成骨分化能力的影响

    作者:梁莉;余继锋;周威;刘洪臣

    目的 研究内皮素-1 (endothelin-1,ET-1)对牙周膜干细胞(periodontal ligament stem ceils,PDLSCs)成骨分化能力的影响.方法 体外培养鉴定牙周膜干细胞,加入不同浓度(10-9 mol/L、10-8 mol/L、10-7 mol/L)的ET-1培养7d、14 d、21 d,通过实时定量PCR及Western blot检测PDLSCs成骨关键蛋白/基因(Runx2、OCN、COL1)的变化,确定ET-1在PDLSCs成骨分化中的作用.结果 在ET-1刺激下,牙周膜干细胞Runx2、OCN和COL1 mRNA及蛋白表达水平逐渐升高,在21 d时达到高值.在7d、14 d和21 d,ET-1(10-9 mol/L、10-8 mol/L、10-7 mol/L)剂量依赖性地促进牙周膜干细胞Runx2、OCN和COL1 mRNA及蛋白表达的上调.结论 内皮素-1可促进牙周膜干细胞的成骨分化能力.

  • 牙周膜干细胞培养及鉴定方法的研究进展

    作者:王冠华

    牙周组织工程是以开发促进牙槽骨、牙周膜和牙骨质再生的治疗手段为目的,利用牙周组织发生的原理来形成或再生功能性牙周组织,牙周组织再生的关键是种子细胞,自2004年国外学者首次发现牙周组织发育完成后存在于牙周膜中的未分化间充质细胞具有自我更新和多向分化等成体干细胞的特点,能形成牙骨质-牙周膜样复合体,将其命名为牙周膜干细胞后,近年来国内外学者对于牙周膜干细胞的研究逐渐增多,并且取得了一定的成果,本文着重对牙周膜干细胞的基本概念;原代培养方法:组织块贴壁法、酶消化法和酶解组织块法及干细胞纯化的方法;牙周膜干细胞的鉴定方法:包括形态学观察、细胞免疫细胞化学鉴定、细胞增殖能力的检测、多向分化潜能检测及细胞表型分析等进行了介绍。

  • 干细胞在牙周病学中的应用进展

    作者:谢军;陆玉林;曹庆堂

    牙周病是造成牙齿缺失的常见病因之一。随着对干细胞的深入研究,牙周膜干细胞得以从牙周膜提取分离,具有分化成牙周组织细胞的能力。通过分析近年的组织工程学文章,探讨牙周膜干细胞的应用前景。

  • 小型猪富血小板血浆对牙周膜干细胞的成骨诱导

    作者:张远;钟良军;张鹏涛;张源明;徐艳

    背景:组织工程技术为牙周炎致骨组织缺损的修复提供了新的思路.目的:探寻富血小板血浆在小型猪牙周膜干细胞成骨诱导中的作用.方法:采集贵州小型猪静脉血,三次离心制备富血小板血浆.采用组织块法分离培养小型猪牙周膜干细胞,分别将含体积分数0.8%,1.0%,1.2%的富血小板血浆与牙周膜干细胞共同培养3,7,14,21 d,以未添加富血小板血浆的牙周膜干细胞作为对照.结果与结论:体积分数0.8%,1.0%,1.2%的富血小板血浆成骨诱导第14天,碱性磷酸酶活性达到峰值,其中体积分数1.0%的富血小板血浆诱导的细胞碱性磷酸酶活性高,第21天时碱性磷酸酶活性降低.茜素红染色显示富血小板血浆成骨诱导第21天细胞染色呈阳性.单克隆纯化后细胞的生长曲线从第3天起进入对数生长期,第8天细胞数量达到顶峰.说明富血小板血浆具有诱导牙周膜干细胞成骨的能力,以体积分数1.0%时诱导成骨效率优.

  • 维甲酸诱导小型猪牙周膜干细胞的体外成骨

    作者:张鹏涛;钟良军;张远;张源明;徐艳

    背景:近期研究发现维甲酸对胚胎干细胞及多种成体干细胞具有成骨方向诱导的作用.目的:观察维甲酸对小型猪牙周膜干细胞体外成骨作用的影响.方法:采用组织块法获得小型猪牙周膜细胞,有限稀释法纯化小型猪牙周膜干细胞,免疫荧光法检测STRO-1、免疫细胞化学法检测波形蛋白、角蛋白鉴定小型猪牙周膜干细胞.CCK8法测定小型猪牙周膜干细胞增殖曲线,检测小型猪PDLSC克隆形成率.使用维甲酸对第3代小型猪牙周膜干细胞进行成骨诱导,茜素红染色检测矿化结节,免疫细胞化学方法检测成骨相关基因骨桥蛋白、骨钙素、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达.结果与结论:有限稀释法分离纯化小型猪牙周膜干细胞STRO-1,波形蛋白阳性表达,角蛋白阴性表达,克隆形成率为2.8%,维甲酸诱导14 d后,碱性磷酸酶染色阳性,诱导21 d后茜素红染色阳性,免疫细胞化学法检测骨桥蛋白、骨钙素、Ⅰ型胶原阳性表达,Ⅲ型胶原阴性表达.结果表明小型猪牙周膜干细胞能够被维甲酸诱导向成骨样细胞分化.

  • 组织工程牙周膜的体外构建

    作者:常秀梅;刘宏伟;金岩;陈坤;刘源;王新文

    背景:利用牙周膜干细胞的多向分化潜能修复牙周缺损是近来研究的热点课题.目的:探讨利用可吸收生物材料冻干胶原膜和犬牙周膜干细胞在体外构建组织工程牙周膜的可行性.设计、时间及地点:单一样本观察,于2003-11/2004 10在解放军第四军医大学口腔医院组织工程实验中心完成.材料:生物膜为冻干胶原膜由解放军第四军医大学口腔医院组织工程实验中心提供.从4只1周岁犬的下颌前牙中分离培养牙周膜干细胞.方法:取第3代犬牙周膜下细胞扩增至1×107数量级,种植在冻干胶原膜的表面,形成细胞-生物材料复合物,每日更换培养液,倒置相差显微镜动态观察细胞形态和黏附生长状况,体外培养1周左右,组织做扫描电镜、透射电镜和苏木精-伊红染色,观察细胞在冻干胶原膜材料中的生长、增殖以及基质分泌情况.主要观察指标:①光镜观察细胞接种后乍长状况.②电镜和组织学观察细胞支架复合结果.结果:培养6 d后,犬牙周膜干细胞分泌的基质与支架材料形成网状结构.复合物体外培养1周,细胞黏附在生物支架上,细胞增殖和生长良好,分泌大量基质并形成纤维状结构,细胞复层生长,伸入膜的内部,增殖的细胞和分泌的基质与膜交接成一整体,复合物成为纤维网状组织,基本具备牙周膜的纤维状结构.结论:利用冻干胶原膜为支架,犬牙周膜干细胞为种子细胞,可在体外成功构建组织工程化牙周膜.

  • 牙周膜干细胞分化、增殖特性与牙周组织再生

    作者:朱凌兰;许生敏

    背景:牙周膜干细胞是牙周组织再生工程中理想的种子细胞之一,有关牙周膜干细胞的来源、生物学特性及影响因素等研究成为热点问题。目的:就近年来牙周膜干细胞的研究现状、生物学特性、功能影响因素及其在再生医学中的应用等研究进展作一综述,并对其应用前景及目前存在的问题进行讨论,为相关体内研究提供理论和实验依据。方法:由第一作者在PubMed和万方数据库检索2002至2015年有关牙周膜干细胞分化、增殖特性的相关英文和中文文献。中文检索词为“牙周膜干细胞,牙周组织,增殖,分化”,英文检索词为“periodontal ligament stem cel,periodontal tissue,proliferation, differentiation”,终纳入47篇文献。结果与结论:牙周膜干细胞具有成纤维、成脂、成骨、成牙骨质分化的能力,细胞生长因子对牙周膜干细胞的增殖分化起重要作用,成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子和胰岛素样生长因子均可促进牙周膜干细胞增殖。干细胞载体生物膜材料的应用也能有效引导牙周组织再生,牙周膜干细胞的分离培养及其影响因素等还有待进一步完善,将干细胞与生物膜材料、生长因子联合应用达到理想的牙周组织功能性再生是今后的研究重点。

  • 干细胞在口腔医学中的研究与应用特点

    作者:莎日娜;吴岩

    背景:牙髓干细胞、骨髓基质干细胞和牙周膜干细胞属于口腔中的成体干细胞,具有成体干细胞的两大特征:较强的自我更新能力和分化潜能.通过对口腔中多种干细胞的深入研究,有助于人类更加深入地揭示牙齿硬组织形成过程与诱导机制,进而指导临床相关治疗与预防.目的:总结各类口腔成体干细胞的特点及在临床中的应用前景.方法:由第一作者检索1999-01/2009-12 PubMed数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed)及中国知网数据库(http://www.cnki.net).英文检索词为"stem cell,dentistry",中文检索词为"干细胞,口腔医学".检索文献量总计80篇,选择干细胞在口腔医学领域中的基础研究及临床应用,排除陈旧及重复实验文章,终纳入19篇符合标准的文献.结果与结论:随着研究的深入,口腔特有的成体干细胞将会逐渐被发现,从而建立完整的干细胞库,为口腔各组织的组织工程研究提供可能的细胞来源.

  • 淫羊藿苷促进间充质干细胞成骨分化:为治疗骨缺损提供一个良好的方向

    作者:陈震东;高辉;徐房添

    背景:近年来研究表明,淫羊藿苷能够促进间充质干细胞成骨分化,是一种良好的骨性诱导因子,给骨缺损的治疗提供了新的希望。
      目的:综述近年来淫羊藿苷对骨组织代谢的药理作用及对间充质干细胞成骨分化影响的研究成果。
      方法:由第一作者用中国知网数据库和PubMed数据库,检索词分别为“淫羊藿苷;干细胞;成骨”和“icariin,stem cel ,osteogenesis”,语言分别设定为中文和英文。纳入与“淫羊藿苷、干细胞、成骨”相关的研究。共检索到754篇文章,按纳入和排除标准文献进行筛选,共纳入41篇文章进行综述分析。结果与结论:淫羊藿苷是中国传统中药淫羊藿的主要成分,能够促进骨髓间充质干细胞成骨分化,是一种良好的骨性营养因子。近年来研究表明,淫羊藿苷亦可促进脂肪、脐带以及牙周膜等组织来源的间充质干细胞成骨分化,但是这类研究尚少。目前各间充质干细胞成骨实验效果欠佳,良好的骨性营养因子促进间充质干细胞体内成骨是一种较好的解决方法。因此,淫羊藿苷促进间充质干细胞成骨将可能为治疗骨缺损提供一个良好的方向。

  • 牙周组织工程研究进展:问题与应用

    作者:路博闻;徐璐璐;张洋;韩光

    背景:组织工程技术的出现为实现牙周组织完全再生提供了全新的思路和方法.目的:就近年来牙周组织工程种子细胞、生长因子和支架材料三大基本要素的新研究及相关进展进行简要综述.方法:由第一作者检索PubMed数据库关于牙周组织工程研究方面的文章,检索词为“periodontal tissue englneenng”,限定文献语言种类为English;同时检索CBM数据库2009年1月至2013年12月相关牙周组织工程方面的文献,检索词为“牙周组织工程”.排除重复性研究,终纳入30篇文献进行综述.结果与结论:研究证实牙周膜干细胞在牙周组织再生领域是具有良好的应用前景,骨髓基质干细胞是修复牙周组织缺损的一种较为理想的种子细胞,牙囊细胞具有多向分化潜能,可以形成牙周组织.多种生物活性分子已被证实有较强的牙周组织修复功能,与牙周组织工程相关的主要生长因子有血小板衍化生长因子、骨形态发生蛋白、转化生长因子β、胰岛素样生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、釉基质衍生物等.目前应用于牙周组织工程的支架材料主要分为天然生物材料和人工合成材料.如何选择佳的种子细胞、细胞因子以及支架材料的复合物,其研究还需进一步完善.

  • 牙源干细胞参与组织再生修复的作用

    作者:李颖;谷子芽

    背景:随着干细胞技术的不断发展,牙源性干细胞的研究也不断深入.它们是十分理想的种子细胞来源,在牙组织工程的应用上具有无可比拟的优势.目的:综述牙源干细胞的相关研究进展.方法:由第一作者检索PubMed数据库、Highwire数据库及中国知网(CNKI)数据库.英文检索词为"dental stem cells,tissue engineering,application",中文检索词为"牙源干细胞,组织工程,应用".初步检索文献量总计156篇,选择牙源性干细胞,包括牙髓干细胞和牙周膜干细胞等在组织工程中的基础研究及临床应用相关报道,排除陈旧及重复实验文章,终纳入30篇符合标准的文献.结果与结论:多种牙源干细胞,都具有较强自我更新能力和多向分化的能力,与目前研究较为深入的骨髓间充质干细胞有很大的相似性,因此在组织工程,尤其是牙组织工程上有良好的应用前景.目前虽然有关牙源干细胞在牙组织再生的应用上有一定报道,但研究不多,且仅处于动物模型阶段.相信随着科技进步,在不久的将来,各种牙源干细胞有望真正进入临床,为解决人类各种口腔疾病提供可能.

  • 牙周膜干细胞的研究进展

    作者:张瑛;宋莉

    背景:从牙周膜组织中分离出的牙周膜干细胞被认为是牙周组织工程的首选种子细胞,有自我更新能力,能分化形成牙周的3种组织:牙槽骨、牙周膜和牙骨质.目的:就近年来牙周膜干细胞的分离、鉴定、相关细胞因子等方面进行简要综述.方法:由第一作者检索Pubmed 数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed)、中国知网数据库(http://www.cnki.net/)2004-01/2010-09有关牙周膜干细胞分离、鉴定、相关细胞因子等方面的文献,英文检索词为"periodontal ligament stem cell",中文检索词为"牙周膜,干细胞".排除重复性研究,终纳入35篇文献进行综述.结果与结论:牙周膜干细胞是一种很有潜力的牙周组织工程种子细胞,能构建组织工程牙周膜,促进牙周缺损的修复.随着研究的深入,影响牙周膜干细胞生物性能的因素逐渐被发现,但其研究还有待进一步完善.

  • 牙周膜干细胞成骨分化中细胞因子的作用

    作者:宋静;何健民;李珊;闫雪萍;卢欢

    背景:牙周膜干细胞是牙周组织中的成体干细胞,具有高度增殖、自我更新能力和多分化潜能.促进牙周膜干细胞向成骨细胞分化有助于牙周疾病的治疗.目的:观察胰岛素样生长因子1和成纤维细胞生长因子2对牙周膜干细胞向成骨细胞分化的影响.方法:采用胶原酶消化人牙周膜组织,获得牙周膜干细胞,经体外鉴定、扩增后,通过倒置显微镜、苏木精-伊红染色、流式细胞仪对牙周膜干细胞进行生物学检测.分别在成骨细胞诱导培养液中加入成骨诱导液(对照组)及胰岛素样生长因子1和成纤维细胞生长因子2持续诱导7,14d后,进行碱性磷酸酶染色、碱性磷酸酶活性检测,以及茜素红染色,并用实时定量PCR法检测向成骨细胞分化的标志性基因的表达情况.结果与结论:胰岛素样生长因子1刺激组的碱性磷酸酶活性以及钙化结节明显高于对照组,Runx2、Alp、col-1的mRNA呈高表达;成纤维细胞生长因子2刺激组的碱性磷酸酶活性以及钙化结节也高于对照组,Runx2、Alp、col-1的mRNA表达量也高于对照组.提示胰岛素样生长因子1和成纤维细胞生长因子2在不同程度上促进体外培养的牙周膜干细胞向成骨细胞方向分化.

  • P2X7受体对牙周膜干细胞成骨分化的作用

    作者:孙亚男;魏建敏;孙薇;武俊杰;吴礼安

    背景:研究影响牙周膜干细胞成骨分化的相关离子通道。目的:初步观察P2X7受体在人牙周膜干细胞成骨分化中的作用。方法:分离培养人牙周膜干细胞,分为4组,分别添加成骨诱导液和100 nmol/L三磷酸腺苷、成骨诱导液、100 nmol/L三磷酸腺苷及普通培养基培养,于成骨诱导7,14 d,利用茜素红染色检测成骨效果,qRT-PCR, Western blot检测OCN、Runx2以及P2X7受体的表达。结果与结论:茜素红染色显示成骨诱导液+三磷酸腺苷组牙周膜干细胞的成骨效果在7 d时显著好于成骨诱导液组,但在14 d时成骨诱导液组成骨效果显著好于成骨诱导液+三磷酸腺苷组(P <0.05);在成骨诱导7 d时, qRT-PCR结果显示成骨诱导液+三磷酸腺苷组Runx2,OCN mRNA的表达达到峰值,而14 d时明显降低(P <0.05)。成骨诱导7 d时,成骨诱导液+三磷酸腺苷组P2X7受体mRNA的表达量明显高于三磷酸腺苷组(P <0.05),成骨诱导液组和对照组未见P2X7受体mRNA的表达,成骨诱导14 d时,成骨诱导液+三磷酸腺苷组表达量下降,明显低于三磷酸腺苷组,差异有显著性意义(P <0.05)。Western blot结果显示,成骨诱导7 d时,成骨诱导液+三磷酸腺苷组P2X7受体的表达达到峰值,高于三磷酸腺苷组,而成骨诱导液组表达量低,对照组几乎没有表达;成骨诱导14 d时,成骨诱导液+三磷酸腺苷组P2X7受体的表达比7 d时明显下降,而三磷酸腺苷组P2X7受体的表达比7 d时有所增加。结果表明外源性三磷酸腺苷可在牙周膜干细胞成骨诱导前7 d明显提高成骨效果,但在7 d后,抑制成骨诱导效果,三磷酸腺苷可以激活牙周膜干细胞P2X7受体表达,且P2X7受体的表达与牙周膜干细胞的成骨效果正相关。

  • 釉基质蛋白衍生物对人牙周膜干细胞分化、增殖的影响

    作者:王爽;丰培勋;陈悦;张海娟;李沙;鲍庆红;管丽敏

    背景:釉基质衍生物已经在临床上用于治疗严重的牙周炎,发现其可促进牙周组织修复、再生,但其中的机制还未阐明。目的:探讨釉基质衍生物对牙周膜干细胞分化和增殖的作用。方法:分离培养人牙周膜干细胞,检测其克隆形成率、表面抗原表达情况,鉴定其多向分化潜能。将不同质量浓度的釉基质衍生物(20,50或100 mg/L)作用于牙周膜干细胞培养2,4周,用Trichrome和Von Kosa’s染色法检测牙周膜干细胞胶原合成及矿化结节形成情况,Real time RT-PCR方法检测成骨分化相关基因Ⅰ型胶原、骨钙素、RUX2的表达,MTT法和生长率法检测牙周膜干细胞的增殖情况。结果与结论:牙周膜干细胞呈梭形,其克隆形成率较牙周膜细胞高,表面抗原CD105,CD29,CD45,CD44的表达率分别为99.8%,99.7%,1.26%,98.8%,具备多向分化潜能。釉基质衍生物呈现一定的时间剂量效应关系促进牙周膜干细胞胶原合成及矿化结节形成,促进成骨分化相关基因Ⅰ型胶原、骨钙素、RUX2的表达,促进牙周膜干细胞的增殖,可能在牙周组织修复、再生中发挥作用。

  • 人骨髓来源细胞外基质对人牙周膜干细胞增殖的影响

    作者:王阿娴;唐丽;梁源;季海宁;武俊杰;丁寅

    背景:研究发现人来源的骨髓细胞外基质能促进人牙周膜干细胞增殖并保持干细胞的特性。目的:初步观察人骨髓来源的细胞外基质对人牙周膜干细胞增殖能力影响。
      方法:分离人正常牙周膜细胞及颌骨骨髓细胞,制备骨髓细胞外基质膜片。采用有限稀释法克隆培养纯化人牙周膜干细胞,透射电镜观察细胞超微结构。取P2代人牙周膜干细胞与骨髓细胞来源细胞外基质共同培养,以普通培养基对照,采用CCK8法及细胞周期流式技术检测人骨髓细胞来源细胞外基质对人牙周膜干细胞增殖能力的影响。
      结果与结论:实验组人牙周膜干细胞较对照组相比细胞增殖能力显著增强(P<0.05),且细胞符合其生物学形态及生物学特性,生长状态良好。说明实验建立起的骨髓细胞外基质能够促进牙周膜干细胞的增殖,是一种扩增干细胞的有效方法。

  • 炎症微环境下人牙周膜干细胞的生物学特性

    作者:袁萍;李淑慧;赵璐;于莉;周春梅;吴佩玲

    背景:牙周膜干细胞可促进牙周组织修复再生,为牙周炎的治疗提供了新的思路。目的:观察炎症微环境对人牙周膜干细胞生物学行为的影响。方法:组织块酶消化法培养从健康个体获得的牙周膜干细胞和牙周炎患者获得的牙周膜干细胞,并经有限稀释法纯化及干细胞表面标记物CD146及牙周膜干细胞表面蛋白STRO-1鉴定后,分别取第3代健康和炎症来源的牙周膜干细胞,标注为正常组和炎性组,各加入成骨诱导液进行成骨诱导。结果与结论:①两种组织来源的细胞经纯化后均可表达间充质干细胞表面标志物STRO-1和CD146;炎性组牙周膜干细胞比健康组牙周膜干细胞具有更强的增殖能力,但炎性组牙周膜干细胞的成骨分化能力要低于健康组牙周膜干细胞。②正常组织来源的牙周膜干细胞在成骨诱导时分别加入不同的炎性因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6刺激后,经RT-PCR检测发现,与诱导组相比,肿瘤坏死因子α处理组成骨相关基因核心因子Runx2和Osterix的表达显著下降(P<0.05)。③而白细胞介素1β和白细胞介素6处理组并未对牙周膜干细胞的成骨能力产生显著影响。④在肿瘤坏死因子α质量浓度为0.1,1μg/L处理组中,成骨相关基因Runx2的表达与诱导组相比无显著影响,而在肿瘤坏死因子α质量浓度为10μg/L处理组,成骨相关基因Runx2的表达与诱导组相比明显降低(P<0.05)。⑤结果证实,炎症微环境改变了牙周膜干细胞内部的分子信号机制,使炎症来源的牙周膜干细胞分化能力低下,其中肿瘤坏死因子α是导致牙周膜干细胞成骨分化能力下降的关键因子之一,10μg/L为肿瘤坏死因子α的佳干预质量浓度。

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