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  • 牙周膜干细胞与牙周膜细胞甲状旁腺激素受体表达的比较

    作者:王烟岚;王萧萧;陈天宇;杨凡巧;戴旭彬;欧乾民;戴霜叶;林雪峰

    背景:牙周膜干细胞是牙周膜细胞中一类具有自我更新及多向分化潜能的间充质干细胞,经诱导可分化为成骨样细胞或脂肪样细胞。关于牙周膜干细胞是否表达甲状旁腺激素受体以及受体表达量对牙周膜干细胞成骨能力的影响等,目前尚未见相关报道。目的:检测并比较牙周膜干细胞与牙周膜细胞中甲状旁腺激素受体表达的差异,并探讨甲状旁腺激素受体在成骨过程中的作用机制。方法:应用免疫磁珠法筛选分离牙周膜干细胞及牙周膜细胞。通过细胞免疫荧光染色、荧光定量PCR等方法检测并比较牙周膜干细胞与牙周膜细胞中甲状旁腺激素受体的表达差异。应用荧光定量PCR、碱性磷酸酶活性检测及矿化能力分析等方法评价甲状旁腺激素受体对两者成骨能力的影响。结果与结论:应用免疫磁珠法筛选的STRO-1阳性细胞,经细胞免疫荧光染色鉴定STRO-1、CD146、Vimentin等间充质干细胞表面表型均呈阳性,证明为牙周膜干细胞。细胞免疫荧光染色证明,牙周膜干细胞表达甲状旁腺激素受体,其主要分布于细胞膜与胞浆内,与牙周膜细胞及人成骨肉瘤MG63细胞系相似。荧光定量PCR结果表明,牙周膜干细胞甲状旁腺激素受体的表达量约为牙周膜细胞的3.7倍,与MG63细胞相近。经10-7 mol/L甲状旁腺激素处理30 min后,牙周膜干细胞的甲状旁腺激素受体表达量明显增加。经成骨诱导后,牙周膜干细胞的甲状旁腺激素受体表达量、成骨相关基因表达量、碱性磷酸酶活性及矿化能力均高于牙周膜细胞。上述实验结果证明,牙周膜干细胞能表达甲状旁腺激素受体,且主要分布于细胞膜和细胞浆内。牙周膜干细胞甲状旁腺激素受体的表达量明显高于牙周膜细胞,而且甲状旁腺激素受体表达量与细胞的成骨能力相关,说明牙周膜干细胞比牙周膜细胞具有更强的成骨能力,是口腔组织工程学中具有广阔应用前景的种子细胞。

  • 地塞米松诱导牙周膜干细胞的定向成骨分化及凋亡

    作者:谷子芽;翟强;吕秋峰;彭灿星;刘芳菲;彭晖

    背景:牙周膜干细胞是一类起源于牙组织的成体干细胞,具有良好的成骨分化能力,有望在骨组织工程中得到应用。
      目的:观察成骨诱导液对牙周膜干细胞成骨分化能力及细胞早期凋亡的影响。
      方法:从原代牙周膜组织中分离得到牙周膜干细胞,以1×104/cm2浓度铺板后开始诱导。利用1,10,100 nmol/L地塞米松、β-磷酸甘油钠、维生素C为成骨诱导剂,以碱性磷酸酶活性检测、茜素红矿化结节染色、荧光定量PCR等方法对细胞成骨情况进行鉴定,采用AnnexinV/PI双染法检测细胞凋亡情况。
      结果与结论:地塞米松可有效诱导牙周膜干细胞成骨分化,可显著提高碱性磷酸酶活性,促进茜素红矿化结节形成,提高成骨相关基因骨粘连蛋白及Ⅰ型胶原表达。根据碱性磷酸酶活性和矿化结节实验结果,地塞米松的成骨诱导具有浓度梯度效应,其中100 nmol/L 地塞米松具有佳成骨诱导能力。细胞凋亡结果提示,地塞米松诱导的成骨分化具有一定促凋亡作用,可诱导牙周膜细胞的早期凋亡。

  • Toll样受体4对牙周膜干细胞免疫学特性的影响

    作者:丁刚;魏立梅;张丽;汤瑞玲

    背景:Tol 样受体4及其配体脂多糖与牙周疾病的发生、发展密切相关,牙周膜干细胞的免疫学特性在牙周组织修复重建、牙周病的治疗中发挥重要作用,而Tol 样受体4及其配体对牙周膜干细胞免疫学特性的影响还不清楚。目的:探讨Tol 样受体4对牙周膜干细胞免疫学特性的影响。方法:分离、培养牙周膜干细胞,与10 mg/L的Tol 样受体4配体脂多糖共同培养3 d。以未经脂多糖处理的牙周膜干细胞作为对照,观察脂多糖处理的牙周膜干细胞能否引起同种异体淋巴细胞的增殖,以及对混合淋巴细胞反应和植物血凝素引起的淋巴细胞增殖的影响。通过建立Transwel 培养系统建立牙周膜干细胞+植物血凝素+异体外周血单个核细胞的反应体系,测定细胞上清液中的前列腺素E2浓度。在上述反应体系进行中和实验,观察被牙周膜干细胞抑制了的淋巴细胞重新发生增殖的情况。结果与结论:无论是否与脂多糖共培养,牙周膜干细胞都没有引起等量异体外周血单个核细胞增殖,都能够抑制植物血凝素引起的淋巴细胞增殖和混合淋巴细胞反应,但是脂多糖预处理牙周膜干细胞的免疫抑制作用显著低于无脂多糖组。在牙周膜干细胞+植物血凝素+异体外周血单个核细胞的反应体系中,前列腺素 E2浓度显著升高。中和实验发现,前列腺素E2的拮抗剂吲哚美辛基本恢复了被牙周膜干细胞抑制的淋巴细胞增殖。提示,脂多糖减弱了牙周膜干细胞的免疫抑制特性,该效应由前列腺素E2减少引起。

  • 人牙周膜干细胞与牙周膜细胞生物学特性的比较

    作者:封艳;粱学萍;赵今;孙玉亮;钟良军

    背景:牙周膜干细胞生物作用是目前牙周病治疗研究的热点,牙周膜成纤维细胞是其分化的终末功能细胞之一,也是其主要的支持细胞,两者生物学特性的差异研究鲜有报道。目的:比较牙周膜干细胞与牙周膜细胞生物学特性的差异。方法:用组织块法体外对牙周膜细胞以及单细胞克隆分离纯化后的人牙周膜干细胞两种细胞分别进行显微镜下形态观察,CCK8法检测并绘制2种细胞的生长曲线。流式细胞分析比较2种细胞的细胞周期以及细胞表面标记物的表达、实时PCR对2种细胞碱性磷酸酶、增殖细胞核抗原和Scleraxis基因进行检测。结果与结论:牙周膜干细胞与牙周膜成纤维细胞外观差别明显,人牙周膜干细胞的生长曲线培养前5d要低于牙周膜细胞,但在5 d后明显高于牙周膜细胞。人牙周膜干细胞与牙周膜细胞的细胞周期分别为41.1%和23.9%。表面标记物检测结果显示2种细胞虽有相似的表达,但在表达率差异有有显著性意义。实时荧光定量PCR结果显示,人牙周膜干细胞在碱性磷酸酶、增殖细胞核抗原以及Scleraxis基因的表达检测均高于牙周膜细胞。表明牙周膜干细胞在成骨增殖等生物学功能上比牙周膜细胞具有更强的潜能。

  • 根尖乳头干细胞与牙周膜干细胞的生物学行为比较

    作者:赵璐;于莉;袁萍;周春梅;吴佩玲

    背景:根尖乳头干细胞是一种新发现的间充质干细胞,其能否应用于牙根再生是目前研究的关键。目的:体外培养鼠根尖乳头干细胞与牙周膜干细胞,研究比较两者生物学行为,为根尖乳头干细胞用于牙根再生的可能性提供实验依据。方法:取幼鼠根尖尚未发育完全的健康下颌牙,用酶消化法获得根尖乳头干细胞和牙周膜干细胞,免疫荧光法鉴定干细胞表面标志物,MTT法测定细胞生长曲线,茜素红染色观察细胞矿化结节形成情况。结果与结论:①鼠根尖乳头干细胞和牙周膜干细胞均呈STRO-1强阳性表达,根尖乳头干细胞呈CD90强阳性表达而CD146阳性表达稍弱,牙周膜干细胞呈CD146强阳性表达而CD90阳性表达稍弱。②根尖乳头干细胞和牙周膜干细胞吸光度值随着时间的递增呈现出增高的状态,第8天起趋于平稳。自第4天起根尖乳头干细胞的增殖活力明显强于牙周膜干细胞,差异有显著性意义(P <0.05)。③与牙周膜干细胞相比,根尖乳头干细胞染色明显较深,可推测矿化结节形成数量较多。④结果表明与牙周膜干细胞相比,根尖乳头干细胞具有较强的增殖活性和矿化能力。

  • 人牙周膜干细胞成骨分化前后miRNA表达谱差异分析

    作者:章燕;甄蕾;郭姜莉

    目的 探讨人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)成骨分化过程中miRNA表达谱的变化,以期为揭示PDLSCs成骨分化的分子机制提供基础.方法 本研究于2012年1—12月在同济大学口腔医学院口腔生物医学及转化医学实验室、复旦大学公共实验平台完成.原代培养人PDLSCs,经流式细胞仪检测鉴定其干细胞特性(表达干细胞表面标志物STRO-1);体外诱导其往成骨方向分化,经茜素红S及碱性磷酸酶显色试剂盒染色检测其成骨特性.再采用表达谱基因芯片,分析成骨诱导前后PDLSCs的miRNA表达,筛选出分化前后差异表达的miRNA.结果 与未经成骨诱导的细胞相比,PDLSCs在成骨分化14d后,有11个miRNA的表达上调,13个miRNA的表达下调.结论 PDLSCs具有成骨潜能,其成骨分化的机制可能与miRNA表达的改变有关.

  • 两种诱导液对牙周膜干细胞膜片生物学活性影响

    作者:唐雪鹏;李适廷;王崇;管付岩;刘忠

    目的 探讨不同的诱导液对牙周膜干细胞(PDLSCs)膜片生物学活性的影响.方法 分别使用骨髓间充质细胞条件(BMMSCs-CM)诱导液与根端牙胚条件(APTG-CM)诱导液培养人PDLSCs,并制备成PDLSCs膜片.BMSCs-CM诱导液诱导的细胞设为BMSCs-CM组,APTG-CM诱导液诱导的细胞设为APTG-CM组.分别诱导PDLSCs膜片4、7、10 d.通过倒置显微镜、HE染色、免疫组化、扫描电镜检测并观察两种诱导液诱导后的PDLSCs细胞膜片形态学的变化及生物学特性的差异.结果 接种10 d后,BMSCs-CM组和APTG-CM组的克隆形成率分别为37%和24%,BMSCs-CM的克隆形成能力明显强于APTG-CM组,差异有统计学意义(P<0.05).与APTG-CM诱导液比较,经过BMMSCs诱导液诱导后的PDLSCs膜片可产生更丰富的细胞外基质.扫描电镜可见BMMSCs诱导液诱导后的细胞膜片表面有矿化沉积和胶原组织形成;APTG-CM诱导液诱导后的细胞膜片表面有大量胶原纤维状组织形成.结论 BMMSCs诱导液更适合诱导PDLSCs膜片向类牙周组织分化.

  • 牙周膜干细胞的研究进展

    作者:高东辉;李军;孙晶;曲志杰;常晓敏;李小菊

    根据干细胞的来源可分为胚胎干细胞和成体干细胞,由于利用胚胎干细胞面临复杂的伦理学问题,因而对成体干细胞的研究就具有深远的意义[1].牙周膜干细胞( PDLSC)是牙周组织中具有自我复制和高度增殖能力的一类成体干细胞.PDLSC具有分化成牙槽骨,牙骨质和牙周膜潜能,在牙周病的治疗中发挥极其重要的作用.本文就PDLSC的培养、定位、分离以及牙周膜干细胞的生物学作用、应用展望等作一综述.

  • 牙周膜干细胞的生物学特性及其作为种子细胞在牙周组织工程中应用的研究进展

    作者:殷丽华;刘琪;余占海;秦子顺

    牙周膜干细胞(PDLSCs)是牙周组织工程研究的热点问题之一.本文作者主要介绍PDLSCs的生物特性、培养分离与纯化、适合PDLSCs作为种子细胞的牙周组织工程支架材料以及其在牙周组织工程中的应用,展望PDLSCs今后的发展方向,为后续的研究提供参考依据.

  • 两种不同诱导液对人牙周膜干细胞膜片性能的影响

    作者:赵喜聪;朱斌;段妍;孙聪;冯源;王国轩;金岩;李德华

    目的:对比分析发育期根端复合体(Dental Apical Complex,DAC)诱导液和成骨诱导液对人牙周膜干细胞(Periodontal ligament Stem Cells,PDLSCs)膜片形成和分化能力的影响.方法:收集临床十名12-16岁的青少年因正畸需要拔除的健康、无龋的新鲜牙(前磨牙),刮取根面残留牙周膜进行牙周膜干细胞的分离培养,制备成牙周膜干细胞膜片,分别采用DAC诱导液和成骨诱导液对膜片进行诱导,对比分析两种诱导液对牙周膜干细胞膜片的影响.结果:DAC诱导液处理过的PDLSCs细胞膜片,细胞形态接近牙源性间充质细胞,DAC诱导液提供了良好的成牙骨质-牙周样结构诱导环境,可促进PDLSCs膜片向功能性成牙骨质细胞谱系分化,而成骨诱导液提供了良好的成骨诱导环境,可促进PDLSCs膜片向功能性成骨细胞谱系分化.结论:DAC诱导液较之于成骨诱导液更利于PDLSCs细胞膜片的成牙周样分化,利于牙周缺损修复和局部再生.

  • 两种Wnt通路抑制剂对牙周膜干细胞作用的比较研究

    作者:徐仑;聂嘉;陈冬冬;孙鹏;刘斌;李岩峰

    目的:本实验主要探讨Wnt通路抑制剂XAV-939相比DKK1在牙周膜干细胞增殖及矿化中的作用差异.方法:酶消化法培养牙周膜干细胞,鉴定后,用CCK8试剂盒检测XAV-939和DKK1对牙周膜干细胞增殖能力的影响,茜素红染色及定量检测XAV-939和DKK1对牙周膜干细胞成骨分化能力的影响,qRT-PCR检测DKK1和XAV-939对牙周膜干细胞Wnt通路相关基因GSK-3β和β-catenin及成骨分化相关基因ALP,DSPP,BSP,OCN,RUNX-2的影响.结果:XAV-939和DKK1都可以通过抑制Wnt通路来抑制牙周膜干细胞的增殖及成骨分化.当没有外源性Wnt蛋白刺激时,XAV-939作为Wnt通路抑制剂的抑制作用要强于DKK1,而加入外源性Wnt蛋白后,XAV-939与DKK1的作用效果相当.结论:XAV-939对比DKK1,具有更为广泛而稳定的抑制效果.XAV-939可以作为高效的Wnt通路抑制剂应用于未来关于牙周膜干细胞和Wnt通路相关实验研究中.

  • 细胞共培养在牙周膜干细胞相关研究中的应用

    作者:张湘宜;任娅岚;陈思思;钱丽萍;李景星;刘亚丽

    细胞共培养是一种将不同种类、不同来源的细胞在同一个体系中进行培养、增殖的技术,在细胞间的相互作用、细胞信号转导、细胞功能性间隙连接等方面的研究中有重要作用.近年来,随着组织工程学和干细胞技术的飞速发展,牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)已成为研究热点之一.将PDLSCs与不同的细胞共培养,可研究其免疫调节机制及定向分化作用;在牙周组织工程中,则可为组织修复材料的研究提供技术支持.故本文对目前细胞共培养技术在PDLSCs研究中的应用做一简要综述.

  • 人牙周膜干细胞成骨相诱导后相关基因的表达变化

    作者:赵晶蕾;江凌勇;毛丽霞;刘加强;房兵

    目的:对人牙周膜干细胞进行筛选纯化,骨向诱导后观察其成骨能力,并对成骨相分化过程中相关基因的表达变化进行检测.方法:用组织块联合磁珠分选法分离纯化人牙周膜干细胞,初步探讨其成骨性能,碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色观察其成骨情况,实时定量PCR检测其相关成骨基因的表达变化.利用SPSS12.0软件包对数据进行统计学分析.结果:组织块联合磁珠分选法能成功培养出高纯度的人牙周膜干细胞.体外培养中,PDLSCs具备成脂和成骨的双相分化能力.在成骨诱导过程中,FOXO1和RUNX2的表达先升高再降低,ALP和OCN的基因表达水平持续增高.结论:成骨相关基因ALP、RUNX2、FOXO1和OCN均参与其向成骨样组织分化的过程,其表达变化具有时间规律性,与成骨过程类似.

  • MicroRNA-125b对人牙周膜干细胞成骨分化的影响

    作者:杜莉;曹伟靖;田莹;王原明

    目的:探讨microRNA-125b (miR-125b)对人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cell,PDLSCs)成骨分化的影响.方法:利用组织块法分离培养PDLSCs,流式细胞术检测细胞表面标志分子.PDLSCs经miR-125b模拟物或miR-125b抑制剂转染后,采用MTT法和LDH试剂盒分别检测细胞活性和细胞毒性,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性和细胞内钙离子水平均以相应试剂盒检测,Western印迹法和RT-qPCR检测成骨相关基因水平.双荧光素酶基因报告实验检测miR-125b对细胞间隙连接蛋白43 (connexin43,Cx43)的靶向调控作用.采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析.结果:体外分离培养的PDLSCs呈现间充质干细胞特性.转染miR-125bmimic后,PDLSCs的活性下降,毒性上升,ALP活性、钙离子水平以及成骨相关分子水平均显著下降;相反,antimiR125b提高了PDLSCs的细胞活性、ALP活性、钙离子水平以及成骨相关分子的表达.双荧光素酶基因报告实验结果表明,miR-125b能够靶向降低Cx43基因水平.而在Cx43过表达的PDLSCs中,miR-125b模拟物对PDLSCs成骨分化的作用被反转.结论:miR-125b通过靶向下调Cx43而抑制PDLSCs的成骨分化.

  • BMP-2控释涂层对加力状态下牙周膜干细胞成骨分化的影响

    作者:侯文婕;陈静;李文星;刘月华

    目的 测试在加力状态下,层层自组装BMP-2控释涂层的缓释效果,并检测其对牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSC)的成骨诱导作用.方法 通过层层自组装技术在Flexcell加力六孔板上负载[(PAH/BMP-2)/PSS][COL/ALG] 20涂层,利用ELISA检测加力状态下缓释涂层21 d内释放的BMP-2浓度;将4~6代PDLSCs种于预置BMP-2控释涂层的BioFlex专用六孔培养板,置于FX-4000T加力系统中,加载动态张应力(10%形变牵张力,20Hz),各组作用时间均为1h/次,3次/d,间隔4h加力,分别培养3、5、7d.对照组为非预置涂层添加BMP-2培养液(100 ng/ml)的BioFlex板同条件下加力培养;使用用Real-Time PCR和Westem印迹法分析PDLSCs在不同张应力作用前后,其表型标志Runx2,ALP和OCN在mRNA和蛋白水平的表达变化情况.结果 实验结果显示,与对照组相比,实验组加力3、5、7d后,Runx2、ALP和OCN标志物mRNA与蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05).结论 [(PAH/BMP-2) PSS]/[COL/ALG]20涂层对hPDLSCs在加力状态下成骨向分化能力具有显著增强作用.

  • 炎症状态下牙周膜干细胞生物学行为的变化

    作者:孔祥伟;陈博;程义成;刘向辉

    目的:探讨慢性牙周炎症状态下牙周膜干细胞(PDLSCs)生物学行为的变化.方法:通过有限稀释法从正常和炎症牙周组织中分离、培养牙周膜干细胞,流式细胞仪鉴定细胞表型;细胞周期检测、MTT分析和克隆形成率检测细胞增殖能力;成骨、成脂诱导检测细胞分化能力.结果:在炎症感染的牙周组织中同样含有牙周膜干细胞,两种PDLSCs的细胞表面分子表达基本一致.流式细胞仪检测两种PDLSCs均表达间充质干细胞的表面标志物,且表达一致;与来自健康牙周组织的PDLSCs相比,来自牙周炎症组织的PDLSCs增殖能力增强,但成骨、成脂分化能力减弱.结论:在慢性炎症微环境的作用下,PDLSCs的生物学行为发生改变,增殖能力增强,而分化能力减弱.

  • TNF-α通过NF-κB信号通路对人牙周膜干细胞成骨分化调控作用的研究

    作者:陈小燕;丁寅;金岩

    目的:探讨肿瘤坏死因子-α( tumor necrosis factor -α,TNF-α)通过激活核转录因子-κB( nuciear factor-κB,NF-κB)信号通路调控其对人牙周膜干细胞( periodontai iigament stem ceiis ,PDLSCs)成骨分化的影响. 方法:通过组织块法体外分离培养健康牙周膜来源的PDLSCs;在hPDLSCs的正常培养液、成骨诱导培养液中分别加入10 ng/mL的TNF-α,通过碱性磷酸酶( aiha-iine phosphatase ,ALP)和茜素红染色定量检测其成骨分化功能的改变,采用实时定量RT-PCR和Western boit 检测成骨相关基因的表达和NF-κB信号通路相关因子表达差异. 将NF-κB信号通路抑制剂BAY 11-7082加入含有TNF-α的hPDLSCs成骨诱导培养液中,检测hPDLSCs生物学特性改变. 结果:在一定浓度TNF-α刺激下,hPDLSCs的成骨分化能力减弱;同时,TNF-α能激活NF-κB信号通路,从而抑制hPDLSCs的成骨分化作用,而BAY 11-7082能逆转其抑制成骨作用. 结论:炎症因子TNF-α能通过调控NF-κB信号通路调节hPDLSCs的成骨分化作用.

  • 组织特异性间充质干细胞的牙周再生对比

    作者:朱斌;赵喜聪;李楠;金岩

    目的:对比不同特异性组织来源的间充质干细胞的牙周再生能力. 方法:体外培养人牙周膜干细胞( human periodon-tai iigament stem ceiis,hPDLSCs),人颌骨来源的骨髓间充质干细胞(human jaw-derived bone marrow-derived mesenchymai stem ceiis,hJBMMSCs)和人髂骨来源的骨髓间充质干细胞(human iiiac-derived BMMSCs,hIBMMSCs),成骨诱导后进行成骨指标检测. 间接共培养JBMMSCs/IBMMSCs与PDLSCs,通过RT-PCR检测成骨相关基因,观察组织特异性来源的细胞间交互作用.构建JBMMSCs/IBMMSCs+PDLSCs细胞聚合体(ceii aggregates,CAs),检测成骨基因表达以及裸鼠皮下8 w异位牙周再生能力. 结果:经成骨诱导,hJBMMSCs的成骨相关指标表达均显著高于hIBMMSCs和hPDLSCs(P<0.05). 经JBMMSCs诱导的PDLSCs的成骨基因表达显著高于IBMMSCs(P<0.05);JBMMSCs+PDLSCs CAs成骨相关基因表达高于IBMMSCs+PDLSCs CAs(P<0.05),并且在裸鼠皮下异位再生牙周组织,前者形成排列规律的垂直于CBB表面的牙周膜样纤维,并且有更多新生骨基质沉淀. 结论:PDLSCs和JBMMSCs是具有组织特异性的间充质干细胞,是更合适牙周组织再生的种子细胞.

  • 乙酰基转移酶KAT2A调控牙周膜干细胞成骨分化的研究

    作者:袁林;孙晋;杨征毅;曹依娜;潘广嗣;钱钧;何恩亮;王涵

    目的:通过比较正常与炎症来源牙周膜干细胞(PDLSCs)中乙酰基转移酶KAT2A表达水平的差异,研究乙酰基转移酶KAT2A在PDLSCs中对成骨分化的调控. 方法:有限稀释法克隆化培养出正常与炎症来源的PDLSCs;基因与蛋白检测方法对比两种来源PDLSCs中KAT2A的表达水平;基因、蛋白检测与茜素红染色方法对比正常PDLSCs及干扰KAT2A基因后的PDLSCs成骨表达的差异. 结果:与健康来源PDLSCs相比,炎症来源PDLSCs中KAT2 A的表达显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);KAT2A基因被干扰后,PDLSCs成骨能力下降,差异有统计学意义(P<0.05). 结论:牙周炎会导致PDLSCs中KAT2A表达的下降,导致细胞成骨分化受到抑制.

  • 炎症微环境中经典Wnt信号通路对牙周膜干细胞成骨分化的调控作用

    作者:孔祥伟;叶瑞东;刘文佳;丁寅;金岩

    目的:探讨炎症微环境中经典Wnt信号通路对牙周膜干细胞(periodontai iigament stem ceiis,PDLSCs)成骨分化的调控作用. 方法:通过有限稀释法获得健康个体和慢性牙周炎患者的牙周膜干细胞( H-PDLSCs和P-PDLSCs ) ,比较两组PDLSCs成骨分化能力. 成骨诱导后Western Biot 检测经典Wnt信号通路关键分子GSK3β/p-GSK3β和β-catenin在两种细胞中的表达;TOPFiash/FOPFiash荧光素酶检测β-catenin/TCF转录活性;加入GSK3β抑制剂后,茜素红染色观察PDLSCs成骨能力的变化;小分子RNA下调β-catenin, ALP染色观察 PDLSCs 成骨分化. 结果:P-PDLSCs 的成骨分化能力低于 H-PDLSCs;在 P-PDLSCs中p-GSK3β和β-catenin的蛋白表达水平较H-PDLSCs明显增高;小分子RNA干扰下调β-catenin可减弱TNF-α引起的成骨能力下降;LiCi或Wnt3a抑制GSK3β活性后,PDLSCs成骨分化受到抑制. 结论:GSK3β的磷酸化和Wnt/β-catenin信号通路的激活是炎症环境中TNF-α抑制PDLSCs成骨分化的关键步骤.

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