血浆EBV-DNA表达水平与鼻咽癌分期的相关性分析

目的 研究血浆EBV-DNA表达水平与鼻咽癌分期的相关性. 方法 选择了55例鼻咽癌患者,同时选取同期住院治疗的55例其他类型的肿瘤患者作为其他类肿瘤对照组及55例体检健康者为健康对照组,比较分析鼻咽癌组与对照组患者的血浆EBV-DNA阳性检出情况,鼻咽癌组患者与对照组血浆EBV-DNA浓度及血浆EBV-DNA阳性的鼻咽患者早期和晚期的拷贝数. 结果 鼻咽癌组血浆EBV-DNA检出阳性率为72.7%,明显高于其他类肿瘤对照组的阳性率(23.7%)以及健康对照组(10.9%),具有统计学的意义(P<0.05). 鼻咽癌组患者的血浆EBV-DNA浓度较高,达到了13654.5 copies/mL,而其他类肿瘤对照组及健康对照组的血浆EBV-DNA浓度均为0,具有统计学的意义( P<0.05). 观察还发现血浆EBV-DNA阳性的鼻咽患者晚期血浆EBV-DNA拷贝数较高,达到了(201.48 ±176.19),明显高于早期的血浆EBV-DNA拷贝数(9.60 ±10.77),两组数据进行比较,具有统计学的意义(t=4.3312,P=0.0001). 结论 荧光定量的PCR检测血浆EBV-DNA是1种比较可靠的方法,能够有效诊断鼻咽癌,且血浆EBV-DNA与鼻咽癌的分期关系密切,该方法适合广泛地推广.

鼻咽癌患者放疗前后外周血EBV-DNA和细胞免疫水平的研究

目的 比较鼻咽癌(NPC)患者放疗前后抗EBV特异性CTL细胞免疫功能、EBV-DNA、T细胞亚群及CD4+CD25+Tr淋巴细胞水平,为临床选择免疫治疗方案及预测预后提供理论依据及客观指标.方法 收集标本105份(NPC患者放疗前35份、NPC患者放疗6月后40份和健康人30份),ELISPOT检测外周血LMP2特异性CTL;荧光定量PCR检测EBV-DNA;流式细胞术检测T细胞亚群及CD4+CD25+Tr淋巴细胞,统计分析各指标变化的特点及相互关系.结果 抗EBV-LMP2特异性细胞免疫反应大频率见于健康对照组,NPC放疗前患者中则仅少数呈阳性反应,NPC放疗后组反应率介于NPC放疗前组和健康对照组之间;NPC放疗前组血清EBV-DNA的阳性率均高于其他两组,对EBV-LMP2特异性细胞免疫反应的阳性率与血清中EBV-DNA病毒载量的阳性率呈负相关;放疗前NPC患者外周血CD3+、CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+比值降低,CD8+T细胞百分率升高,CD4+CD25+Tr细胞水平升高,放疗后情况有所缓解.结论 EBV-LMP2特异性CTL反应在NPC放疗前患者低,EBV-LMP2特异性CTL反应阳性率与血清中EBV-DNA载量相关,增强CTL应答可改善EBV相关肿瘤的治疗效果,EBV-DNA载量水平一定程度上可反映NPC患者的肿瘤负荷.NPC患者外周血CD3+、CD4+T细胞降低,而CD8+T细胞升高,CD4+CD25+Tr细胞比例升高,监测患者T细胞亚群有助于对NPC患者的治疗及预后的判断.

鼻咽癌高危人群血浆EBV-DNA检测在鼻内镜检查中的意义

目的:分析鼻咽癌高危人群血浆中EBV-DNA的定量水平和鼻内镜检查结果,探讨鼻咽癌高危人群EBV-DNA检测在鼻内镜检查中的应用价值.方法:在鼻咽癌高发区中山市健康人群中进行鼻咽癌筛查,用ELISA法检测EBV抗体,确定鼻咽癌高危人群427例.荧光定量PCR方法检测该人群血浆EBV-DNA水平,同时进行鼻内镜检查,并随访1年,比较分析高危人群血浆EBV-DNA水平与鼻内镜下鼻咽活检情况.结果:初筛427例鼻咽癌高危人群中,EBV-DNA阳性人群鼻咽活检率为90.2％(55/61),鼻咽癌检出率为60.7％(37/61);EBV-DNA阴性人群鼻咽活检率为13.9％(51/366),鼻咽癌检出率为3.3％(12/366).随访286例高危人群中,EBV-DNA阳性人群鼻咽活检率为91.2％(31/34),鼻咽癌检出率为17.6％ (6/34);EBV-DNA阴性人群鼻咽活检率为11.9％(30/252),鼻咽癌检出率为1.6％(4/252).初筛和随访EBV-DNA阳性人群鼻咽活检率和鼻咽癌检出率均显著高于EBV阴性人群,差异有统计学意义(P＜0.01).以鼻咽癌高危评定诊断鼻咽癌的阳性预测值为8.3％(59/713),而在此基础上增加EBV-DNA检测,其阳性预测值提高至45.3％(43/95).EBV-DNA阳性和阴性人群中鼻咽癌早诊率分别为79.1％(34/43)和93.8％(15/16),两者早诊率差异无统计学意义(P＞0.05).结论:鼻咽癌高危人群血浆EBV-DNA阳性可提示鼻内镜检查的重点人群,对鼻内镜下行鼻咽活检术有一定的指导意义,可大大提高鼻咽癌高危人群阳性预测值.高危人群中EBV-DNA阳性者是鼻咽癌筛查随访中需重点关注的对象.

血浆EBV-DNA水平测定在监测鼻咽癌高危人群中的临床应用意义

目的:探讨血浆EBV-DNA水平测定在监测鼻咽癌高危人群中的临床应用意义.方法:采用ELISA法对15 864例筛查者进行鼻咽癌相关EBV抗体检测,共筛检出鼻咽癌高危人群366例,同时在低危人群中随机选取262例进行研究.另外选取同期因鼻咽癌进行治疗的早期鼻咽癌患者58例.对366例鼻咽癌高危人群采用PCR法进行EBV-DNA检测,并对其进行为期1年的跟踪观察,比较分析EBV-DNA在鼻咽癌筛查中的临床应用意义.结果:初筛显示为高危人群的EBV-DNA检测阳性率为12.0％,初筛显示为低危人群的EBVDNA检测阳性率为3.4％,临床初诊为鼻咽癌的患者EBV-DNA检测阳性率为91.4％,3组阳性率比较差异有统计学意义(P＜0.01);在为期1年的跟踪随访后共267例参加复诊,其中血清学指标呈持续高危的患者阳性率高于初筛时显示高危而复诊后显示为非高危的患者,其差异有统计学意义(P＜0.05).结论:鼻咽癌筛查在常规采用血清EBV评估的基础上联合EBV-DNA检测可明显提高筛查的准确率,有效提高临床上的筛查范围,对于病理诊断具有一定的临床意义,可在一定范围内推广应用.

血浆EB病毒DNA 定量测定对鼻咽癌的诊断价值

目的 分析血浆EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)DNA定量测定对鼻咽癌的诊断价值.方法 采用荧光定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)技术,测定35例经病理确诊的鼻咽癌患者血浆EB病毒DNA含量,并与50例健康对照者比较.结果 鼻咽癌患者血浆EBV-DNA阳性率和复制量均高于健康对照者.两组阳性率和中位浓度的比较均有统计学差异.结论 血浆EBV-DNA定量分析不能作为临床上确诊鼻咽癌的方法,但对鼻咽癌的筛查有实用价值,值得进一步研究.

外周血淋巴细胞中EB病毒载量与鼻咽癌诊断及分期的关系

目的 探讨外周血淋巴细胞中EB病毒载量与鼻咽癌诊断、分期及预后的价值.方法 采用实时荧光定量基因扩增技术,抽取鼻咽癌患者静脉血2 mL,用EDTA-Na2抗凝,用淋巴细胞分离液分离血中淋巴细胞,再用DNA提取液提取淋巴细胞中的EBV-DNA为模板进行扩增检测.结果 47例鼻咽癌患者中E-BV-DNA阳性率为63.8%(30/47),对照组61例非鼻咽癌患者中EBV-DNA的阳性率为11.5%(7/61),两者差异有显著性(χ2=32.30,P＜0.01).早期(Ⅰ、Ⅱ期)14例与晚期(Ⅲ、Ⅳ期)16例鼻咽癌患者EBV-DNA含量比较差异有显著性(t=4.65,P＜0.01),晚期患者淋巴细胞中EBV-DNA含量明显高于早期患者.结论 定量检测外周血淋巴细胞中EBV-DNA对鼻咽癌的诊断、分期和预后有极高参考价值,可做为监测病情及判断疗效的一种有效手段.

IM患儿血浆EBV载量拷贝数水平与其发热及住院时间的相关性

目的 观察传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)患儿的血浆EB病毒(Epstein-Barrvirs,EBV)-DNA载量拷贝数的水平与患儿发热持续时间、发热峰值及住院时间的相关性.方法 采用回顾性研究方法,选取IM患儿51例,检测血浆EBV-DNA载量拷贝数水平,分析患儿的发热持续时间、发热峰值及住院时间.结果 IM患儿的2周内血浆EBV-DNA载量拷贝数水平的差异无统计学意义(P=0.17);以发热峰值不同(37.5～38℃、38.1～39℃、39.1～41℃)分组,其血浆EBV-DNA载量拷贝数水平的差异亦无统计学意义(P=0.87);以血浆EBV-DNA载量拷贝数水平分组(低载量组、低-中载量组、中-高载量组、高载量组),各组间患儿发热持续时间(P=0.12)及住院时间(P=0.07)差异均无统计学意义.结论 IM患儿血浆EBV-DNA载量拷贝数的高或低,不会影响患儿发热持续时间、发热峰值及住院时间.

外周血EB病毒DNA的检测在鼻咽癌治疗后监控作用的Meta分析

目的:系统评价定量PCR检测鼻咽癌患者血浆或血清中Epstein-barr(EBV-DNA)在治疗效果、治疗后复发和转移的监控作用.方法:检索1966-2009年国内外发表的定量PCR检测鼻咽癌患者外周血EBV-DNA相关文献,评价符合标准的文献并采用RevMan4.2软件进行Meta分析.结果:共纳入14个临床病例研究文献,病例总数1267.Meta分析结果显示,鼻咽癌患者治疗后残留者血浆或血清EBV-DNA的阳性率明显高于治疗后完全消退者(OR=63.34,P<0.00001),治疗后局部复发及转移者明显高于无复发及转移者(OR=49.93,P<0.00001),EBV-DNA阳性的治疗后随访者今后复发或转移率明显高于阴性者(OR=23.95,P<0.00001).结论:定量PCR检测出治疗后鼻咽癌患者血浆或血清EBV-DNA阳性,提示很有可能肿瘤未完全控制:随访的鼻咽癌患者.若EBV-DNA阳性,则复发或远处转移的风险明显增高;EBV-DNA阳性的鼻咽癌随访者今后复发或转移的机会明显高于阴性患者.

417例初诊鼻咽癌患者血浆EBV-DNA检测结果分析

目的 回顾性分析417例初诊鼻咽癌患者的血浆EB病毒(EBV)-DNA检测结果,评估血浆EBV-DNA水平对鼻咽癌的辅助诊断价值以及与TNM分期的关系.方法 以2013年8月-2015年8月间在中山市人民医院肿瘤科住院的初诊鼻咽癌患者417例为研究对象,同时选取95例鼻咽炎症及健康人群211例为对照,抽取外周血分离血浆,提取EBV-DNA,采用定量PCR方法测定EBV-DNA水平.分析初诊鼻咽癌的EBV-DNA阳性检出率及其与TNM分期的关系.结果 初诊鼻咽癌患者EBV-DNA总阳性检出率为82.97%.临床早期(Ⅰ期+Ⅱ期)EBV-DNA阳性检出率只有61.00%,临床中晚期(Ⅲ期+Ⅳ期)可达到89.91%.Ⅰ期+Ⅱ期EBV-DNA含量低于Ⅲ期+Ⅳ期(P<0.01).T1期、T2期与T3期、T4期比较,EBV-DNA含量差异也具有统计学意义(P<0.01).N0期、N1期和N2期之间EBV-DNA中位值并无明显差异,而前三者中位值则显著低于N3期中位值(P<0.05).M0期和M1期的EBV-DNA中位值之间差异有统计学意义(P<0.05).结论 血浆EBV-DNA水平与鼻咽癌临床分期密切相关,可作为鼻咽癌诊断和临床分期的分子指标.

监测血浆EBV-DNA含量在鼻咽癌诊疗中的意义

目的 探讨鼻咽癌患者放化疗过程中血浆EBV-DNA含量在临床诊疗中的意义.方法 采用荧光定量PCR法检测50例NPC患者在不同的诊疗阶段血浆EBV-DNA的含量,同时设50例健康体检者为阴性对照组.结果 50例NPC组中EBV-DNA检测阳性率为92.0％ (46/50),健康对照组阳性率为8.0％ (4/50);46例EBV-DNA阳性的患者中,26例患者从第一周治疗开始,DNA水平就开始明显下降,至治疗结束前已检测不到DNA的复制;14例患者开始几周DNA水平变化并不明显,至治疗结束前,基本检测不到DNA的复制;6例患者在治疗过程中均可检测到较高水平的EBV-DNA.结论 采用荧光定量PCR方法检测NPC患者血浆中游离的EBV-DNA是一种敏感可靠的方法,对于NPC的早期诊断及预后具有非常重要的临床意义.

不同保存温度和时间对EBV-DNA载量检测结果的影响

目的 了解不同保存温度和时间对EBV-DNA载量检测结果的影响.方法 搜集15份EBV-DNA载量检测阳性的标本,高、中、低载量各5份,分成两管,分别在室温和4℃保存3、5、7、9d,然后进行检测.结果 在不同的保存温度下,高、中、低载量组EBV-DNA载量结果比较,差异有统计学意义(分别为P＜0.001、P＜0.05、P＜0.05).在相同的保存温度不同保存时间里,随着时间的延长,EBV-DNA载量有所减少,但是其差异无统计学意义(P＞0.05).结论 检测EBV-DNA载量的样本,4℃保存、1周内检测完效果较佳.

血浆EBV-DNA检测--PTLD早期诊断指标

鼻咽癌患者血清中VCA-IgA、EA-IgA、EBV-DNA评价的比较

目的 比较分析外周血EB病毒衣壳抗原抗体(VCA-IgA)、早期抗原抗体(EA-IgA)和EB病毒DNA(EBV-DNA)在鼻咽癌(NPC)诊断中的意义.方法 对123例鼻咽癌患者、50例鼻炎患者、40例健康成人血清用酶联免疫吸附反应(ELISA)法检测VCA-IgA、EA-IgA抗体,荧光定量PCR法检测EBV-DNA,分析比较这3种检验方法的灵敏度与特异性.结果 VCA-IgA、EA-IgA、EBV-DNA的灵敏度和特异性分别是35.77%和97.78%,71.54%和95.56%,26.83%和97.78%.EA-IgA的灵敏度高,其次是VCA-IgA.VCA-IgA和EBV-DNA的特异性均稍高于EA-IgA.结论 VCA-IgA和EA-IgA抗体测定与EBV-DNA联合检测可作为筛查鼻咽癌患者、观察鼻咽癌治疗效果和预测预后的辅助手段.

血浆EBV-DNA定量分析用于NPC患者放疗预后评估的研究

[目的]探讨血浆EBV-DNA定量分析用于NPC患者放疗预后评估的价值.[方法]选取50例初诊NPC患者为研究对象,50例健康者为健康对照组,20例头颈部其他癌瘤患者为病例对照组.采用实时荧光定量PCR检测血浆EBV-DNA,并对放疗后NPC患者进行随访.对所得数据进行统计学分析.[结果]NPC患者中EB病毒游离DNA的阳性率为84.0％ (42/50),健康对照人群中阳性率为10.0％ (5/50),其他头颈部肿瘤患者全部阴性(0/20),NPC患者与其他各组间EB病毒DNA的阳性率差异有统计学意义(P＜0.01).NPC病人治疗前血浆EBV-DNA检出率显著高于治疗后(P＜ 0.001)和健康人（P＜0.001）.NPC病人治疗后血浆EBV-DNA水平和检出率与健康人差异均无统计学意义(P= 0.243; P= 0.262).放疗后随访发现,12例患者血浆EBV-DNA阳性,其中有8例在随后的6个月随访中分别出现复发或转移（5例局部复发,2例肺转移,1例骨转移）,38例未检测出血浆EBV-DNA阳性者,在随后的6个月随访中有7出现复发或转移.[结论]血浆EBV-DNA在NPC患者中高表达,同时也是NPC放疗后监测复发和转移的可靠指标.

鼻咽癌组织中FOXQ1的表达及其临床意义

目的:检测鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)中叉头框蛋白Q1(forkhead box Q1,FOXQ1)的表达,分析其与临床病理因素和预后的关系.方法:回顾性分析127例NPC患者临床及随访资料,采用免疫组织化学检测和分析NPC组织中FOXQ1的表达,并分析与临床病理特征及预后的关系.结果:NPC组织中FOXQ1显著高表达(P<0.001);FOXQ1的表达在病理类型、T分期以及临床分期方面有显著差异,与性别、年龄、N分期和M分期无关;FOXQ1高表达组血浆EBV-DNA拷贝数显著高于低表达组(P=0.040);FOXQ1高表达组的无进展生存率显著差于低表达组(χ2=11.305,P=0.001),而两组间患者总生存率无显著性差异(χ2=0.378,P=0.539).结论:FOXQ1高表达于NPC且与病理类型、T分期、临床分期及血浆EBV-DNA有关,高表达FOXQ1的NPC患者更容易出现肿瘤进展.

吸烟对鼻咽癌患者治疗前血浆EBV-DNA表达和预后的影响

目的:研究吸烟与鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者治疗前血浆EB病毒DNA(Epstein-Barr virus DNA,EBV-DNA)表达情况和预后的关系.方法:选取首次确诊的477例男性NPC患者并留存治疗前静脉血,qRT-PCR检测NPC患者血浆EBV-DNA并计算吸烟指数,比较分析吸烟与NPC患者治疗前血浆EBV-DNA表达和预后的关系.结果:NPC患者的吸烟指数在治疗前T分期、N分期、M分期、 临床分期等方面差异均无统计学意义(P>0.05).不吸烟组与吸烟组EBV-DNA阳性率和EBV-DNA拷贝数均无显著性差异(P=0.585,P=0.528);同时,不吸烟组与少量吸烟组和大量吸烟组EBV-DNA阳性率和EBV-DNA拷贝数均无显著性差异(P=0.665,P=0.694);NPC患者的吸烟指数与治疗前血浆EBV-DNA拷贝数无显著相关性(P=0.536).不吸烟组与吸烟组的肿瘤复发率和死亡率均无显著性差异(P=0.820,P=0.896),两组患者的无复发生存率和总生存率均无统计学差异(P=0.394,P=0.721);不吸烟组与少量吸烟组和大量吸烟组的肿瘤复发率和死亡率均无显著性差异(P=0.450,P=0.799),3组患者在无复发生存率和总生存率均无统计学差异(P=0.458,P=0.551).Cox比例风险模型分析显示:T分期、N分期、M分期和治疗前EBV-DNA≥1500 copies/mL是影响NPC患者无复发生存期的危险因素(P<0.05);年龄≥46岁、T分期、N分期、M分期和治疗前EBV-DNA≥1500 copies/mL是影响NPC患者总生存期的危险因素(P<0.05);吸烟并不是影响NPC患者无复发生存期和总生存期的危险因素(P=0.946,P=0.673).结论:吸烟对NPC患者治疗前血浆EBV-DNA表达和预后无显著影响.

鼻咽癌患者血浆EBV-DNA、血清CYFRA21-1、TSGF的检测及临床应用

目的:探讨和比较血浆EBV-DNA、血清CYFRA21-1、TSGF在鼻咽癌诊断、近期疗效判断及监测复发和转移等方面的临床意义.方法:分别采用荧光定量PCR、电化学发光免疫测定法及比色法检测46例鼻咽癌患者及15例健康对照的血浆EBV-DNA、血清CYFRA21-1及TSGF.结果:初诊患者血浆EBV-DNA、血清CYFRA21-1、TSGF检测的阳性率及浓度均明显高于健康对照组(P＜0.05),其中血浆EBV-DNA检测的敏感性高95.2%(20/21).治疗后有肿瘤残余的患者血浆EBV-DNA及血清TSGF浓度明显高于肿瘤完全消退的患者(P＜0.05).局部复发和远处转移的患者三种指标阳性率及浓度均明显高于持续缓解患者(P＜0.05).结论:血浆EBV-DNA、血清CYFRA21-1及TSGF的检测对鼻咽癌的诊断、近期疗效判断及监测局部复发或远处转移都有重要价值,其中血浆EBV-DNA检测的作用更佳.

EBV-IgM 与 EBV-DNA 检测在小儿传染性单核细胞增多症诊治中的应用价值

目的：探讨ELISA和荧光定量PCR方法检测EB病毒在小儿传染性单核细胞增多症诊断和治疗中的临床意义。方法：采用ELISA 和荧光定量PCR方法检测182例疑似小儿传染性单核细胞增多症患儿EBV-IgM 抗体与EBV-DNA。结果：182例疑似传染性单核细胞增多症患儿治疗前EBV-DNA检测阳性率显著高于 EBV-IgM 抗体检测阳性率（ P＜0．01）。对84例 EBV-IgM 抗体与EBV-DNA 阳性患儿应用更昔洛韦进行治疗，治疗后7 d及治疗后10 d 患儿 EBV-DNA检测阳性率显著高于EBV-IgM 检测阳性率（P＜0．05），而治疗后14 d患儿EBV-DNA检测阳性率与EBV-IgM 检测阳性率差异无统计学意义（P＞0．05）。结论：EBV-IgM 和EBV-DNA 检测对小儿传染性单核细胞增多症诊断和治疗具有重要价值，尤其是EBV-DNA检测更为敏感。

探讨血清EB病毒基因、癌胚抗原、铁蛋白联合检测在鼻咽癌诊断中的 临床应用价值

目的 探讨在鼻咽癌(NPC)诊断中联合检测血清EB病毒基因(EBV-DNA)、癌胚抗原(CEA)、铁蛋白(SF)的临床价值.方法 将我院2016年7月-2017年7月接收的40例NPC患者作为A组,另选同期收治的40例良性鼻炎患者作为B组,再抽取40例健康体检者作为C组,对三组的EBV-DNA、CEA以及SF进行检测,分析这三项指标联合检测对鼻咽癌的诊断价值.结果 A组的三项指标水平高于B组与C组(P<0.05);三种指标联合检测的敏感度显著高于两种指标联合检测,有统计学差异(P<0.05).结论 对NPC采取血清EB病毒基因、CEA、SF联合检测的敏感度高,值得推广.