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耐多药肺结核患者血清蛋白指纹图谱测定初步研究
目的 评价血清蛋白指纹图谱技术在诊断耐多药肺结核患者中的应用价值.方法 选择痰Mtb培养阳性的肺结核患者70例,其中耐多药肺结核患者35例为A组,非耐药肺结核患者35例为B组；健康者35例为C组.以B、C组为对照组,应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱技术( SELDI-TOF- MS)和蛋白芯片技术检测血清蛋白,并应用Ciphergen protein chip 3.2.1软件进行比较,分析其相关血清蛋白峰值并进行统计学处理.结果 耐多药肺结核患者组与对照组的血清蛋白质谱数据进行比较,存在4个差异有统计学意义的蛋白峰；其中质荷比(mass to charge ratio,m/z)在1369、3400 m/z为低表达,而8700、22 794m/z为高表达；其灵敏度分别为77.1％(27/35)、71.4％(25/35)、80.0％(28/35)、74.3％(26/35),特异度分别为72.9％(51/70)、74.3％(52/70)、75.7％(53/70)、81.4％(57/70)；x2值分别为23.7、20.2、29.6、31.0,P值均＜0.01,差异有统计学意义.结论 血清蛋白质指纹图谱技术简便、快速,标本用少,可能成为筛选耐多药肺结核一种新的检查指标.
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145例复治涂阳肺结核患者血清蛋白等相关指标分析
目的 分析2012-2013年复治涂阳肺结核患者的营养相关指标,探讨营养不良与复治的相关原因.方法 对广州市胸科医院第二门诊部辖区内登记的复治涂阳肺结核患者145例和初治涂阳患者105例初诊时血清蛋白、全血红细胞数、血红蛋白进行测定,观察复治涂阳患者首次就诊时的营养状况.将初治涂阳和复治涂阳患者的血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、A/G比值、全血红细胞数、淋巴细胞数、血红蛋白数值,采用x2检验,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 105例初治涂阳患者中,总蛋白降低者占22.86％(24/105)、白蛋白降低者占20.00％(21/105)、球蛋白降低者占17.14％(18/105)、A/G比值降低者占34.29％(36/105)、红细胞计数降低者占24.76％(26/105)、血红蛋白降低者占47.62％(50/105)、淋巴细胞数降低者占2.86％(3/105);145例复治涂阳患者中,总蛋白降低者占22.76％(33/145)、白蛋白降低者占22.76％(33/145)、球蛋白降低者占24.83％(36/145)、A/G比值降低者占51.72％(75/145)、红细胞计数降低者占26.90％(39/145)、血红蛋白降低者占33.10％(48/145)、淋巴细胞数降低者占3.45％(5/145);两组患者A/G比值、血红蛋白降低的率比较,差异具有统计学意义(x2值分别为7.502、5.384,P值均＜0.05);两组患者总蛋白、白蛋白、球蛋白、红细胞计数、淋巴细胞数降低的率比较,差异无统计学意义(x2值分别为0.000、0.274、2.124、0.144、0.069,P值均＞0.05).结论 血清蛋白A/G比值的降低是结核病复治的高危因素.
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蛋白质指纹图谱技术在肺结核、肺癌鉴别诊断中的应用研究
目的 探索应用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术于肺结核、肺癌的鉴别诊断.方法 肺结核、肺癌患者及正常人各65例,收集其血清标本,采用WCX2芯片技术对血清蛋白进行捕获,用蛋白芯片阅读器PBSⅡ对芯片进行扫描、分析.结果 65例活动性肺结核与65例肺癌患者血清蛋白质谱数据的比较,4个蛋白峰(5 335 m/z、8 048 m/z、11 700 m/z、11 683 m/z)倾向于肺结核,以此鉴别肺癌差异有统计学意义(P<0.01).该诊断模型判别的总准确率为74.6%(97/130),灵敏度80.0%(52/65),特异度69.2%(45/65).结论 此方法简便、快速,标本用量少,为肺结核、肺癌患者提供了1种新的无创诊断和鉴别诊断方法.
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结直肠癌转移动物模型血清中几种蛋白变化的观察
目的 建立可视化结直肠癌转移模型,并应用血清蛋白质组学技术分析可视化结直肠癌转移模型血清蛋白质的变化.方法 用pEGFP-N1绿色荧光蛋白基因转染具有转移能力的SW480细胞株,在裸鼠皮下接种成瘤后,再原位接种于裸鼠右半结肠,利用整体荧光成像系统观察结直肠癌原位成瘤及发生转移的情况.同时采集裸鼠原位成瘤后不同转移阶段的血清,进行双向电泳联合时间飞行质谱分析差异蛋白质,观察结直肠癌转移模型裸鼠癌转移前后血清蛋白的变化.结果 获得稳定表达绿色荧光蛋白的SW480-EGFP细胞株,裸鼠皮下接种成瘤率为100%,原位种植成瘤率为10/10,区域淋巴结转移为10/10,肝转移率为4/10,肺转移率为3/10.通过血清蛋白质组学技术成功鉴定了5个在癌转移发生后血清内显著升高的血清蛋白:结合珠蛋白α链,载脂蛋白A4,载脂蛋白E,免疫球蛋白k型V区L链和转铁蛋白.结论 成功建立结直肠癌可视化转移模型,利用不同转移阶段鼠血清进行双向电泳图谱差异分析筛选出5个在癌转移发生后血清中显著升高的蛋白可能是与结直肠癌转移相关的蛋白.
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15种血清总蛋白检测方法测定结果准确性和可比性研究
目的：依据EP9－A3评价常规检测方法测定血清总蛋白的准确性，掌握EP9－A3建议的回归分析法与Bland－Altman法对血清总蛋白可比性结果判定的差异。方法方法评价性研究。收集46人份血清，分成4套血清盘，分别用于15种常规检测方法和参考方法。按EP9－A3建议的回归分析法计算常规检测方法与参考方法间的相关系数和直线回归方程，并以直线方程计算医学决定水平下（45、60、80 g／L）的相对偏差和95％可信区间。按经典Bland－Altman法或Carstensen改良Bland－Altman法计算常规检测方法与参考方法在医学决定水平下的相对偏差、95％一致限和95％可信区间。将2种方法得到的相对偏差和95％可信区间与生物学变异总误差标准5％进行比较，若都在±5％以内则在该医学决定水平下结果可比。结果（1）按回归分析法，15种常规检测方法和参考方法间的相关都＞0．975（ P＜0．001）；在医学决定水平下，15种常规检测方法和参考方法间的相对偏差和95％可信区间都在±5％以内。（2）经典和Carstensen改良Bland－Altman法处理，1种检测方法无法处理，其余14种检测方法的相对偏差和95％可信区间都在±5％以内。结论回归分析法和Bland－Altman法得到的相对偏差大小和95％可信区间大小都较一致性，15种常规血清总蛋白检测方法与参考方法在医学决定水平下检测结果差异＜5％。（中华检验医学杂志，2015，38：292－295）
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血浆肝素结合蛋白在新生儿脓毒症早期诊断中的应用价值
目的 探讨血浆肝素结合蛋白(HBP)对早期诊断新生儿脓毒症(NS)及脓毒症严重度分级的临床价值.方法 回顾性研究方法,选取2016年12月至2017年8月在湖南省儿童医院NICU住院的一般脓毒症患儿39例、严重脓毒症患儿37例、脓毒性休克患儿16例分别作为相应试验组,并选取同时期在各新生儿科住院的局部感染患儿34例及非感染患儿35例分别作为相应对照组;分别测定各组患儿入院时的HBP、降钙素原(PCT)及超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平并采用非参数统计方法比较各指标组间差异的显著性;运用受试者工作特征曲线(ROC)比较各指标对感染和脓毒症诊断的效能.结果 一般脓毒症组、严重脓毒症组及脓毒性休克组HBP(H=91.764,P<0.01)、PCT (H=51.757,P<0.01)及hs-CRP(H=28.418,P<0.01)水平均显著高于局部感染组和非感染组,差异有统计学意义;严重脓毒症[52.35(33.65,88.15)(ng/ml)]和脓毒性休克组[73.55(60.61, 145.51)(ng/ml)]血浆HBP水平明显高于一般脓毒症组[34.12(23.04,41.79)(ng/ml)],差异有统计学意义(H=24.092,P<0.01);三组患儿血清PCT 与hs-CRP水平差异无统计学意义[(HPCT=1.909,Hhs-CRP=0.292),P>0.05];HBP诊断新生儿脓毒症和新生儿感染的曲线下面积(AUC)分别为0.885和0.904,均高于PCT和hs-CRP;当诊断阈值(cut-off值)取19.8 ng/ml时,HBP诊断新生儿感染的敏感度和特异度分别为85.7%和82.9%,当cut-off值取28.0 ng/ml时,HBP诊断新生儿脓毒症的敏感度和特异度分别为80.4%和88.4%.结论 HBP在新生儿脓毒症早期诊断及临床分级方面优于PCT和hs-CRP,可能具有较好的临床应用价值.
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不同方法检测血清特定蛋白的结果一致性研究
目的 分析不同检测系统、方法间特定蛋白检测结果的差异；探讨以欧洲标准局参考物质(ERM) DA470k/IFCC赋值的定值血清能否替代ERM-DA470k/IFCC应用于临床检测以促进特定蛋白检测结果一致性.方法 方法学评价.选取2012年6月于复旦大学附属中山医院体检中心进行健康体检的表面健康人群(27 ～ 73岁,男47名,女53名)血清标本100份.我们使用罗氏和德赛试剂在日立7600全自动生化仪、西门子试剂在西门子BNⅡ特定蛋白仪和贝克曼试剂在贝克曼IMMAGE特定蛋白仪检测100份血清标本、ERM-DA470k/IFCC以及ERM-DA470k/IFCC赋值的定值血清标本中的IgA、IgG、IgM、补体3c(C3c)、补体4(C4)、转铁蛋白(TRF)和前白蛋白(PA)含量.以ERM-DA470k/IFCC为校准品对混合血清进行定值.同类方法间特定蛋白检测结果比较使用T检验和Wilcoxon非参数检验,不同方法间结果比较使用方差分析和Friedman非参数检验.两组数据相关性分析采用一元线性回归分析.结果 两种免疫散射比浊检测方法之间、两种免疫透射比浊检测方法之间以及4种免疫比浊法之间特定蛋白检测结果均存在统计学差异(P＜0.05).2种免疫透射比浊检测方法之间除C3c以外其余项目的R2均＞0.97,相关性较好.2种免疫散射比浊检测方法之间除IgM结果的R2＞ 0.96外,其余项目结果的R2均在0.90 ～0.94,相关性相对略差.不同免疫比浊法IgA、IgG和IgM结果间相关性较好,R2均＞0.95;C3c、C4、TRF和PA结果间相关性相对略差,R2为0.90～0.97.以ERM-DA470k/IFCC标定值为基准,对各检测系统的特定蛋白检测结果进行修正后,检测值可趋于一致(P＞0.05)；定值血清也可以取得相似的效果.结论 不同检测系统(方法)间特定蛋白检测结果存在明显差异.ERM-DA470k/IFCC和定值血清能够修正不同检测系统(方法)间特定蛋白检测结果,使检测值趋于一致.
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胸腔积液肝素结合蛋白检测对肺炎旁胸腔积液鉴别诊断的临床价值
目的 探讨胸腔积液肝素结合蛋白(HBP)检测在胸腔积液患者中对肺炎旁胸腔积液(PPE)鉴别诊断的应用价值.方法 病例对照研究.收集2018年2至7月在衢州市人民医院住院的189例胸腔积液患者的胸腔积液标本,其中肺炎旁胸腔积液(肺炎组)72例,结核性胸腔积液(结核组)24例,恶性胸腔积液(恶性组)46例,其他原因引起的漏出液(漏出液组)47例.对所有胸腔积液进行常规分析和胸腔积液乳酸脱氢酶(LDH)、胸腔积液腺苷脱氨酶(ADA)、胸腔积液总蛋白(TP)检测,并采用酶联免疫吸附法测定胸腔积液HBP水平.各组总体水平差异采用Kruskal-Wallis H检验,方差齐性多组比较采用单因素方差分析,方差不齐多组比较采用LSD检验,计数资料比较采用卡方检验.绘制ROC曲线评价胸腔积液中HBP、LDH、ADA、TP水平在PPE鉴别诊断中的应用.结果 胸腔积液HBP浓度在肺炎组为316.1(99.5,399.8)ng/ml,结核组为64.7(18.6,96.8)ng/ml,恶性组15.2(8.4,33.3)ng/ml,漏出液组14.1(6.5,23.0)ng/ml.肺炎组胸腔积液HBP水平与其他3组之间比较,差异有统计学意义(H=120.3,P<0.05).当cut-off值为64.2 ng/ml时受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.953,灵敏度为88.9％(64/72),特异度为89.7％(105/117),阳性预测值为84.2％(64/76),阴性预测值为92.9％(105/113),总符合率为89.4％(169/189).结论 胸腔积液HBP水平诊断效能高,能较好区分胸腔积液患者的PPE,可能是PPE鉴别诊断的生物标志物.
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肝素结合蛋白和降钙素原及C反应蛋白在脓毒症早期诊断中的价值比较
目的 探讨肝素结合蛋白(HBP)在脓毒症诊断及分级中的临床应用价值.方法 采取回顾性研究方法,选取2014年8月至2016年11月在温州医科大学附属第三医院和温州市中心医院ICU就诊的脓毒症患者31例、严重脓毒症患者16例、脓毒性休克患者12例及局部感染非脓毒症患者37例,测定各组患者HBP、降钙素原(PCT)及C反应蛋白(CRP)水平,利用非参数检验分析比较各组间检测指标的差异;通过ROC曲线分析各检测指标对脓毒症的检测效能;Spearman相关检验分析HBP、PCT及CRP与多项临床及实验室指标的相关性.结果 HBP在严重脓毒症[(100.65±58.82)ng/ml与(31.86±36.87)ng/ml,Z=-3.856,P<0.05;(100.65±58.82)ng/ml与(24.96±17.49)ng/ml,Z=-3.556,P<0.05]及脓毒性休克[(148.28±99.73)ng/ml与(31.86±36.87)ng/ml,Z=-4.432,P<0.05;(148.28±99.73)ng/ml与(24.96±17.49)ng/ml,Z=-4.157,P<0.05]患者中升高,CRP[(154.64±62.90)mg/L与(92.56±67.49)mg/L,Z=-2.749,P<0.05;(154.64±62.90)mg/L与(79.21±51.80)mg/L,Z=-3.218,P<0.05]及PCT[(32.86±39.93)ng/ml与(2.70±6.24)ng/ml,Z=-3.395,P<0.05;(32.86±39.93)ng/ml与(4.21±14.94)ng/ml,Z=-4.092,P<0.05]仅在脓毒性休克患者中升高,与对照和脓毒症组相比,差异有统计学意义;HBP的ROC曲线下面积大(AUC=0.687)且具临床诊断意义(P<0.05),佳诊断界值(18.58 ng/ml)时具有较优检测敏感度(0.729);HBP(APTT:r=0.244,P=0.016;PT:r=0.351,P<0.001;INR:r=0.314,P=0.002;D二聚体:r=0.334,P=0.001;血乳酸:r=0.394,P<0.001)、CRP(APTT:r=0.271,P=0.008;PT:r=0.348,P=0.001;INR:r=0.264,P=0.009;D二聚体:r=0.257,P=0.012;血乳酸:r=0.329,P=0.001)及PCT(APTT:r=0.375,P<0.001;PT:r=0.523,P<0.001;INR:r=0.535,P<0.001;D二聚体:r=0.254,P=0.013;血乳酸:r=0.422,P<0.001)与凝血功能、血乳酸呈正相关.结论 HBP在脓毒症临床诊断及分级中具有一定参考意义,有可能成为严重脓毒症及脓毒性休克早期诊断的生物标记物.
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肝素结合蛋白和正五聚蛋白3在新生儿细菌感染性疾病诊断中的价值
目的 探讨肝素结合蛋白(HBP)和正五聚蛋白3(PTX3)对新生儿细菌感染性疾病的临床诊断价值.方法 采用回顾性分析方法,选取2017年3月至11月武汉大学人民医院新生儿科30例新生儿脓毒症(脓毒症组)、84例局部细菌感染新生儿(一般感染组)及50例单纯高胆红素血症新生儿(对照组).一般感染组和脓毒症组的114例细菌感染新生儿中,有39例合并休克(休克组),75例未合并休克(非休克组).分别采用免疫比浊法和双位点夹心酶联免疫吸附实验测定HBP和PTX3水平,并收集血清降钙素原(PCT)及全血白细胞(WBC)计数等实验室检查数据.非正态分布数据的比较采用非参数检验,各指标诊断性能比较采用受试者工作特征曲线(ROC),各指标相关性分析采用Pearson相关系数.结果 脓毒症组、一般感染组和对照组HBP值分别为(64.41±78.51)ng/ml、(47.16±50.59)ng/ml、(31.97±20.76)ng/ml,PTX3值分别为(2.23±1.44)ng/ml、(1.76±0.94)ng/ml、(1.26±0.66)ng/ml,PCT值分别为(31.92±36.65)ng/ml、(7.72±9.28)ng/ml、(1.87±5.02)ng/ml.脓毒症组PTX3、PCT水平显著高于一般感染组(Z=3.74,Z=5.01,P均<0.05);也显著高于对照组(Z=3.98,Z=5.20,P均<0.05).脓毒症组HBP水平高于一般感染组,但差异无统计学意义(Z=1.16,P>0.05);也高于对照组,差异有统计学意义(Z=2.37,P<0.05).休克组PTX3和PCT水平显著高于非休克组(Z=2.20,Z=3.70,P均<0.05);休克组HBP水平高于非休克组,但差异无统计学意义(Z=0.37,P>0.05).HBP、PTX3、PCT诊断新生儿细菌感染性疾病曲线下面积(AUC)分别为0.683、0.802、0.869;HBP、PTX3、PCT三者联合诊断优于单指标诊断,AUC大为0.910.PTX3与PCT呈正相关(r=0.242,P<0.05).结论 PTX3和PCT能有效辅助临床诊断新生儿细菌感染性疾病,联合PTX3、PCT和HBP诊断优于单指标诊断.
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早期诊断唐氏综合征的母体血清蛋白新标志物筛选与初探验证
目的 探讨经筛选与验证的唐氏综合征(DS)相关特异性母体血清蛋白新标志物的临床应用价值.方法 选取确诊为DS胎儿的孕中期(14 ～ 20周)母体血清7份(DS组)和同期正常胎儿母体血清7份(正常对照组)行二维凝胶电泳(2-DE),建立DS胎儿母体血清蛋白表达差异图谱,提取差异表达蛋白质点进行质谱分析.免疫印迹法(WB)验证部分差异蛋白的表达差异.采用近似t检验比较分析2组间相应蛋白条带的吸光度(A)值差异.结果 经2-DE和差异蛋白图谱分析,在DS组母体血清中共发现表达差异1.5倍以上的蛋白质点29个,其中表达上调的19个,表达下调的10个.表达差异2倍以上的8个蛋白质点经质谱分析,从美国国立生物技术信息中心( NCBI)蛋白质序列数据库中搜索为dGTP酶(dGTPase)和β2-糖蛋白Ⅰ(β2-GPI)等12个蛋白质分别与之匹配的可能性较大(概率得分＞66分).WB证实GTPase和β2 -GPI的A值在DS组分别为21 567.0±3009.4和22 097.0 ± 3958.9,在正常对照组分别为3957.7±250.9和1799.7±105.5,dGTP酶和β2-GPI在DS胎儿母体血清中比正常对照组显著高表达(t ' dGTPasc=- 17.66,t’β2 CPI=- 14.83,P均＜0.0001).结论 2 -DE和质谱技术是初步筛选DS相关特异性母体血清中新蛋白标志物的有效方法,经WB验证的dGTPase和β2 -GPI可能是筛选DS的新标志物.
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炎性因子在小儿脓毒症早期的临床对比初探
目的 探讨脓毒症诊断前不同时间点的炎性因子[肝素结合蛋白(HBP)、降钙素原(PCT)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)]的临床价值对比.方法 采取回顾性研究模型,选取2014年1月至2016年10月舟山市妇幼保健院儿科病房小儿脓毒症患者24例,平均年龄(4.08±1.68)岁,男性16例,女性8例.收集患儿诊断脓毒症时刻的前72 h(A组)、前48 h(B组)、前24 h(C组)血浆;同期选取22名无器质性疾病的小儿健康体检者抽取血浆作为正常对照组,平均年龄(4.07±1.58)岁,男性12名,女性10名.酶联免疫吸附法检测肝素结合蛋白(HBP)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10),免疫荧光法检测降钙素原(PCT)和超敏C反应蛋白(hs-CRP).采用重复测量的方差分析和多重比较检验各时间点的差异,受试者工作特征曲线分析其诊断价值.结果 HBP在正常对照组、A组、B组、C组的血浆水平分别为(9.69±1.30) μg/L、(12.82±2.03) μg/L、(15.46±1.02) μg/L、(18.60±1.10)μg/L,HBP的B组、C组时间点分别高于A组和B组水平(t=5.62,P＜0.01;t=10.25,P＜0.01),A、B、C组均高于正常对照组(t=6.27,P＜0.01;t=16.82,P＜0.01;=25.16,P＜0.01).受试者工作特征曲线(ROC曲线)显示,HBP在A组的诊断效能(AUC)分别为0.823,均高于其他4种炎性因子(IL-6、IL-10、PCT、hs-CRP)(Z=2.41,P＜0.01;Z=2.02,P＜0.05;Z=0.38,P＞0.05;Z=0.32,P＞ 0.05),HBP在B组的诊断效能(AUC)分别为0.898,均高于其他4种炎性因子(IL-6、IL-10、PCT、hs-CRP)(Z =0.43,P＞0.05;Z =0.46,P＞0.05;Z =0.26,P＞0.05;Z=0.57,P＞0.05),PCT在C组的诊断效能(AUC)为0.941,高于其他4种炎性因子(IL-6、IL-10、HBP、hs-CRP)(Z=0.12,P＞ 0.05;Z=0.08,P＞ 0.05;Z=0.03,P＞0.05;Z=0.10,P＞0.05).结论 HBP具有较宽的诊断窗口期,可作为小儿脓毒症的早期预测指标之一.IL-6、IL-10、PCT及hs-CRP在小儿脓毒症的不同时期也分别具有一定的诊断价值.
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肝素结合蛋白与降钙素原和C反应蛋白及白细胞计数对呼吸道局部细菌感染诊断的应用价值
目的 探讨血液中肝素结合蛋白(HBP)、降钙素原(PCT)和C反应蛋白(CRP)水平以及白细胞(WBC)计数在呼吸道局部细菌感染中的诊断价值.方法 采用前瞻性研究模型,选取2015年10月至2017年3月在中南大学湘雅三医院收治的呼吸道细菌感染患者66例,呼吸道非细菌感染患者37例,同时选取同一时期健康体检者39名作为健康对照组.分别采用双位点夹心酶联免疫吸附试验、荧光免疫法和免疫比浊法测定样品中HBP、PCT及CRP水平;采用血细胞分析仪和其配套试剂检测外周血WBC,统计分析各组4个指标的差异,正态分布计量资料比较采用t检验,方差齐性的非正态分布计量资料比较采用单因素方差分析,方差不齐的非正态分布计量资料比较采用秩和检验.建立受试者工作特征曲线并计算曲线下面积以分析HBP、PCT、CRP及WBC计数对呼吸道局部细菌感染诊断的价值.结果 呼吸道细菌局部感染组患者、非细菌感染组患者和健康对照组中HBP值分别为36.30 (7.78 ～ 89.36) ng/ml、5.57 (4.37～8.23) ng/ml、2.84 (1.53～6.51) ng/ml,PCT值分别为0.08 (0.04 ～0.83) ng/ml、0.09 (0.04～0.30) ng/ml、0.04(0.03～0.08)ng/ml,CRP值分别为56.20(19.33 ～76.23) mg/L、34.40 (2.15～83.95) mg/L、(2.20 ±-0.99)mg/L,WBC计数值分别为(10.59±4.58)×109个/L、8.40 (5.80～11.88) ×109个/L、(6.14±1.31)×109个/L.呼吸道细菌感染组患者血液HBP水平与非细菌感染组、健康对照组比较,差异均有统计学意义(Z=-4.828,P＜0.001;Z=-5.685,P＜0.001).细菌感染组患者血液PCT、CRP及WBC计数水平与非细菌感染组比较,差异无统计学意义(F=0.045,P＞0.05;F=0.100,P＞0.05;F=2.417,P＞0.05);和对照组比较,差异有统计学意义(Z=-2.881,P＜0.05;Z=-6.595,P＜0.001;t=6.499,P＜0.001).HBP、PCT、CRP及WBC计数诊断呼吸道局部细菌感染曲线下面积分别为0.89、0.69、0.95及0.85,HBP鉴别诊断细菌感染和非细菌感染曲线下面积为0.80.结论 HBP能够快速有效地辅助诊断呼吸道局部细菌感染,其鉴别诊断价值优于PCT、CRP、WBC计数等常用手段.
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遗传性蛋白S缺陷症家系基因突变的研究
目的 对2个遗传性PS缺陷症家系进行临床表型诊断和基因突变检测.方法 PS:A测定采用发色底物法;TPS:Ag、FPS;Ag测定采用ELISA法;PS基因(PROS1基因)检测采用PCR方法 对先证者PROS1基因的15个外显子及其侧翼内含子序列进行扩增,PCR产物纯化后直接测序.结果 先证者1的PS:A为48.6%,FPS:Ag为41 mg/L,TPS:Ag为136 mg/L,PROS1基因2号外显子在c.C121T位点发生杂合碱基替换,导致编码的PS蛋白存在Arg-1 Cys(R-1C)杂合错义突变.先证者2的PS:A为29.2%,FPS;Ag为26 mg/L,TPS:Ag为83 mg/L,PROSl基因14号外显子在c.C1687T位点发生杂合碱基替换,导致编码的PS蛋白存在Gln522Stop杂合无义突变.结论 c.C121T是PROS1基因的一个新的突变位点,该杂合突变可以导致Ⅱ型遗传性PS缺陷症;c.C1687T杂合突变导致Ⅰ型遗传性PS缺陷症.
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血浆肝素结合蛋白在脓毒性休克中的研究及应用进展
脓毒性休克是脓毒症进展为严重的阶段,病死率高.目前,脓毒性休克早期诊断和疗效监测的生物标志物备受关注.肝素结合蛋白(HBP)作为一种急性期蛋白,具有增加血管内皮细胞通透性、杀菌趋化以及调节细胞凋亡等功能.当血浆HBP浓度升高时,提示患者出现严重脓毒症伴严重水肿和血管渗漏,可作为脓毒性休克的早期诊断和疗效监测的临床指标.本文着重阐述脓毒症常见炎性标志物、HBP结构与功能以及其在脓毒性休克中的临床应用等.
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结核病患者与健康人血清蛋白质谱的比较研究
目的 比较结核病患者与健康人血清蛋白质谱,寻找结核病相关特异血清蛋白质,以期发现新型结核病血清学诊断标志物.方法 应用弱阳离子交换蛋白质芯片(WCX)和表面增强激光解吸-电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术对包括54例菌阳肺结核(菌阳组)、45例菌阴肺结核(菌阴组)、18例肺外结核(肺外组)共117例结核病患者(结核组)及62例健康对照者(对照组)进行了血清蛋白质谱检测,并应用ClinProTools分析软件进行分析,找出差异蛋白质.结果 菌阳组-对照组、菌阴组-对照组、肺外组-对照组和结核组-对照组间分别存在19、14、26和30个差异血清蛋白质,其中分别有11、9、15和15个蛋白质在患者血清中表达上调；相对分子质量分别为1060、1944、2081和3954的4个血清蛋白质为各患者组与对照组间共同存在的差异血清蛋白质,其中相对分子质量为1060的蛋白质在患者血清中表达下调.结论 结核病患者与健康人之间血清蛋白质谱存在差异,有望通过血清蛋白质谱的比较分析,寻找到结核病相关特异血清蛋白质而发现新型结核病血清学诊断标志物.但尚需大样本量、多对照系的进一步研究予以确证.
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广西巴马地区与南宁市80岁及以上健康老年人的血清蛋白质谱比较
目的 了解广西巴马地区与城市(南宁市)80岁以上健康老年人的血清蛋白质谱状况,为探索巴马地区长寿的奥秘提供新的线索. 方法 运用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,采用弱阳离子交换(CM10)、金属离子螯合(IMAC30-Cu)、强阴离子交换(Q10)、疏水(H50)4种芯片分别检测巴马地区与城市80及岁以上健康老年人的血清蛋白质谱.结果 巴马地区与城市健康老年人血清中共检测到蛋白质(或多肽)峰:CM10 71个,IMAC30-Cu 46个,Q10 81个,H50 52个；巴马地区与城市健康老年人的血清蛋白质谱峰比较(P＜0.05且各蛋白质峰值的均数＞标准差),CM10芯片共检出8个差异蛋白质谱峰,其中2个表达上调、6个表达下调；IMAC-Cu芯片共检出7个差异蛋白质谱峰,其中1个表达上调,6个表达下调；Q10芯片共检出5个差异蛋白质谱峰,均为表达下调；H50芯片共检出6个差异蛋白质谱峰,其中3个表达上调,3个表达下调. 结论 巴马地区与城市健康老年人的血清蛋白质谱存在一定的差异,且表达下调者居多.
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血清蛋白指纹图谱用于建立妊娠期高血压疾病诊断模型的研究
目的 通过分析妊娠期高血压疾病患者血清蛋白指纹图谱的变化,筛选并建立妊娠期高血压疾病血清标志物诊断模型.方法 应用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术分析25例妊娠期高血压疾病患者(研究组)和30例年龄、孕次、产次相匹配的正常足月孕妇(对照组)终止妊娠前的血清蛋白,获得IMAC3-Cu蛋白芯片表达图谱.用Biomarker Wizard和Biomarker Pattern软件分析并建立蛋白指纹图谱诊断模型.盲法分析验证该诊断模型.结果 在相对分子质量2000～50 000范围内,有10个蛋白质峰差异有统计学意义(P＜0.01).分析、筛选出相对分子质量为39 837、6196、15 529、43 248和22 292的5个差异蛋白,作为妊娠期高血压疾病的诊断模型.应用该模型诊断研究组25例患者全部被正确检出,其敏感性为100%(25/25);对照组30例孕妇中有27例被正确排除,其余3例被误诊为妊娠期高血压疾病,特异性为90%(27/30).阳性预测值为89%(25/28),阴性预测值为100%(27/27).盲法验证该模型的敏感性为75%,特异性为75%.结论 妊娠期高血压疾病患者血清中有多种异常表达的蛋白质;由5个差异蛋白组成的血清蛋白指纹图谱诊断模型敏感性和特异性均较高,可作为妊娠期高血压疾病的血清标志物诊断模型.
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子宫内膜异位症患者血浆蛋白质指纹图谱诊断分类树模型的初步建立
建立内异症诊断分类树模型,并对该模型诊断内异症的敏感度和特异度进行验证.结果 与对照组比较,内异症组患者血浆中有14个异常表达的蛋白质峰(P<0.01).采用相对分子质量分别为3 956 000、11 710 000和6 986 000的3个蛋白质峰构成的内异症诊断模型,其敏感度为92%,特异度为83%;验证后其敏感度为88%,特异度为80%.结论 SELDI-TOF-MS技术对于筛选内异症的生物标志物提供了一条新的途径,其临床应用价值值得进一步研究.
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血清蛋白质谱检测在子宫颈癌手术前后的临床应用价值初步分析
目的 初步探讨血清蛋白质谱在宫颈癌患者手术前后检测的临床应用价值.方法 采用弱阳离子交换型(WCX)纳米磁珠结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术检测54例宫颈癌患者手术前后的血清样本与53例健康志愿者的血清样本.采用Biomarker Wizard软件分析蛋白质谱.结果 宫颈癌患者手术前后血清蛋白质,在质荷比1500～50 000范围内,有22个不同质荷比的蛋白质的相对含量有明显差异(P<0.01).其中,宫颈癌患者术前血清中质荷比为3981、4290、28 066的蛋白质的相对含量为(1.51±1.78)%、(2.70±2.19)%、(1.99±1.70)%,高于健康人的(0.83±0.38)%、(1.72±0.91)%、(0.92±0.95)%,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01);但在术后均显著降低,分别为(0.59±0.45)%、(1.01±0.64)%、(0.54±0.37)%,分别与术前比较,差异均有统计学意义(P<0.01).而宫颈癌患者术前血清中质荷比为11 487、11 529、11 678的蛋白质的相对含量为(0.38±1.41)%、(0.16±0.46)%、(1.02±1.67)%,术后升高为(2.74±3.67)%、(2.00±1.76)%、(7.71±9.46)%,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 血清蛋白质谱可以筛选出宫颈癌手术前后相对含量有差异的蛋白质.质荷比为3981、4290、28 066的蛋白质可能与肿瘤负荷相关,质荷比为11 487、11 529、11 678的蛋白质可能与手术应激相关.
