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不孕妇女种植窗期血小板活化因子及其受体的表达和意义
目的:探讨血小板活化因子(PAF)及其受体(PAF -R)在不孕妇女种植窗期的表达及意义.方法:在10例不孕妇女(不孕组)和10例正常非孕妇女(正常组)种植窗期及10例妊娠早期妇女(孕40+天,孕早期组),①采用ELISA法检测3组对象血清PAF的含量及血小板活化因子-乙酰水解酶(PAF - AH)的活性；②流式细胞仪检测3组对象外周血单核细胞上PAF -R的表达；③免疫组织化学技术检测种植窗期子宫内膜及早孕蜕膜组织中的PAF -R表达.结果:不孕组妇女种植窗期血清中PAF含量(7.49±0.90 ng/ml)、PAF - AH活性(15.37±2.19ng/ml)、PAF-R在外周血单核细胞上(40.79±16.10％)和在子宫内膜组织中(0.27±0.05％)的表达与正常组和孕早期组比较差异有统计学意义(P均＜0.01).不孕组妇女种植窗期PAF -R在外周血单核细胞上和在子宫内膜组织中的表达呈正相关(r =0.972,P＜0.01).结论:①不孕妇女种植窗期血清PAF水平明显降低,PAF-AH活性明显增高,PAF-R在外周血单核细胞上和子宫内膜组织中的表达降低,可能是导致不孕的因素之一,提示PAF、PAF- AH、PAF-R表达水平的变化在女性不孕症发生机制中可能起一定作用.②外周血单核细胞上PAF -R的表达可间接反映子宫内膜组织中PAF-R的表达情况.
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小儿支气管哮喘与血小板活化因子乙酰水解酶的相关性研究
为探讨血浆血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)基因多态性与我国哮喘儿童的相关性及其多态性与血浆PAF-AH酶活性的关系,我们于2001年10月至2003年3月,应用等位基因特异性聚合酶链式反应(AS-PCR)技术,对哮喘发作期儿童PAF-AH第9外显子上G994-T基因位点的突变进行了检测,同时应用酶水解底物显色法检测血浆PAF-AH活性.现报告如下.
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全脑缺血再灌注大鼠血液中血小板活化因子的变化
血小板活化因子(PAF)是目前发现的强的血小板聚集物,可能参与了脑缺血的病理过程[1].然而,由于血液中含有PAF乙酰水解酶,后者可使PAF迅速水解,使血中PAF难以捕捉,因此,我们用高效薄层层析法检测全脑缺血大鼠血液PAF,以了解PAF在脑缺血时的变化;同时检测血浆白细胞介素6(IL6)、白细胞介素8(IL8)水平,以探讨这些细胞因子的相互作用.
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银杏叶提取物防治兔心肌缺血再灌注损伤实验研究
目的探讨家兔心肌缺血再灌注损伤中血小板活化因子(Platelet-ac tivating facto r,PAF)与血小板活化因子-乙酰水解酶(PAF-Acetyl-hydrolase,PAF-AH)的变化以及银杏叶提取物(Extra Ginkgo Biloba ,EGB)对家兔心肌缺血再灌注损伤的防治效果.方法取30只家兔随机分为3组:正常家兔组(n=10);缺血再灌注对照组(n=10);EGB治疗缺血再灌注组(n=1 0),按文献建立模型,检测各组PAF、PAF-AH、丙二醛(MDA)和ATP的变化.结果 [ HTK 缺血再灌注对照组与EGB治疗缺血再灌注组PAF含量显著高于正常家兔组(P<0.01),而PAF-A H的活性显著低于正常家兔组(P<0.01);缺血再灌注对照组心肌组织MDA含量显著高于EGB 预处理组(P<0.01) ,而ATP的含量显著低于EGB预处理组(P<0.01).结论 PA F与AF-AH的变化在心肌缺血再灌注损伤中发挥重要作用,EGB对心肌缺血再灌注损伤有一定的防治作用,其机制与EGB阻断PA F-R等因素相关.
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血浆血小板活化因子乙酰水解酶的活性及其与中国人群冠状动脉疾病的关系
目的 研究血浆血小板活化因子(PAF)乙酰水解酶(PAF-AH)的活性及其与中国人群冠状动脉疾病(CAD)的关系.方法 检测918例CAD患者PAF-AH的活性、脂类的活性以及筛选基因多态性PTAFR基因.结果 ①病例组和对照组之间性别校正后PAF-AH的平均活性:无CAD者,女性比男性具有明显的PAF-AH低活性.病例组高血压者的PAF-AH活性比非高血压者明显降低.②PAF-AH在所有分组与低密度脂蛋白(LDL)和总胆固醇(TC)以及apoB-100活性有很强的相关性.③整体来看,PAF-AH的活性与CAD呈现相关性(P＜0.05).④PTAFR基因多态性在CAD患者和对照组的基因型没有显著差异.结论 血浆PAF-AH活性存在性别差异,并且与CAD呈现正相关,然而,PAF-AH活性和炎症标志物没有相关性.
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血小板活化因子乙酰水解酶基因突变(Val279-Phe)与急性脑出血的相关性研究
目的探讨血小板活化因子乙酰水解酶基因突变(Val279-Phe)与急性脑出血的关系.方法对102例急性脑出血患者、174例原发性高血压患者及225例健康对照者,分别用多聚酶链式反应分析基因组DNA的突变等位基因,用Stafforini等的方法测定血浆PAF乙酰水解酶的活性.结果脑出血组突变的发生率(47.1%)显著高于对照组(P＜0.01).高血压组突变的发生率(32.7%)与对照组(24.4%)之间无显著差异(P＞0.05).结论血浆中血小板活化因子乙酰水解酶基因突变所致的酶缺乏可能是急性脑出血的独立危险因素.
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血小板活化因子乙酰水解酶融合蛋白的表达、纯化及鉴定
目的:获得血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)全长编码基因并在GST原核表达系统中表达.方法:通过RT-PCR方法,从正常人外周血单个核细胞(PBMC)中扩增出PAF-AH全长编码基因,将其克隆至大肠杆菌表达载体pGEX-4T-3,转化大肠杆菌BL21并诱导表达,采用GST蛋白纯化系统进行纯化.所得纯化蛋白以SDS-PAGE及Western印迹方法鉴定,并进行酶活性测定.结果:获得了PAF-AH基因,序列分析与GenBank数据库中序列一致.SDS-PAGE及Westem印迹结果显示,诱导表达出可溶性的融合蛋白,其相对分子质量与预期相符.纯化蛋白经Western印迹检测能够被特异性抗体所识别,具有免疫学活性;酶活性检测证实其具有特异的水解PAF的活性.结论:本实验在大肠杆菌表达系统中高效表达了有活性的PAF-AH蛋白.
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银屑病患者血浆PAF、PAF-AH的变化及意义
目的探讨银屑病患者血浆血小板活化因子(platelet-activating factor,PAF)的含量、血小板活化因子-乙酰水解酶(PAFacetylhydrolase,PAF-AH)活性的变化及意义.方法采用生物法检测20例银屑病患者和20例正常献血者血浆中的PAF含量,同时采用酶水解底物显色法测定二者血浆中的PAF-AH活性.结果银屑病患者血浆中PAF含量为(13.56±4.32)ng/ml、PAF-AH活性为(16.68±1.42)nmol/min/ml;正常献血者血浆中PAF含量为(6.72±2.46)ng/ml、PAF-AH活性为(29.84±1.86)nmol/min/ml,两组比较差异有显著性(P＜0.01).结论银屑病患者血浆中PAF含量增高,同时伴有血浆PAF-AH活性的降低.二者在银屑病发生和发展中起重要作用.
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血小板活化因子乙酰水解酶基因突变与脑血管病的相关性研究
目的研究血小板活化因子(PAF)乙酰水解酶基因突变与中国人脑血管病(CVD)的关系.方法对153例脑血管病患者及100名健康对照者分别用多聚酶链式反应分析基因组DNA的突变等位基因,用Stafforini等的方法测定血浆PAF乙酰水解酶的活性.结果脑梗死组与脑出血组突变基因型及突变等位基因的频率显著高于对照组(P<0.01),不同危险因素间基因突变的差别无统计学意义.结论血浆PAF乙酰水解酶基因突变所致的酶缺乏可能是我国脑血管病的遗传学危险因素之一.
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变应性鼻支气管炎患者血浆血小板活化因子乙酰水解酶活性变化及临床意义
目的 观察变应性鼻支气管炎患者血浆血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)水平及临床意义.方法 选取65例变应性鼻支气管炎患者作为观察组,同时选取65名健康者作为对照组,测定并对比两组PAF-AH活性.结果 对照组PAF-AH活性(879.49±363.51) U/L,明显高于观察组(t=39.56,P＜0.05).结论 变应性鼻支气管炎患者的PAF-AH活性较低,PAF-AH活性与变应性鼻支气管炎的发病有关.
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血小板活化因子乙酰水解酶基因型与变应性鼻支气管炎的相关性
目的 探讨血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)基因型与变应性鼻支气管炎(ARB)的相关性.方法 应用等位基因特异性PCR技术检测变应性鼻支气管炎患者(病例组)及健康对照者(对照组)血浆中PAF-AH基因第9外显子994位点基因型,并计算等位基因频率.结果 病例组与对照组PAF-AH基因第9外显子994位点基因型和等位基因频率比较,P均＞0.05.变应性鼻炎(AR)并支气管哮喘(BA)患者的PAF-AH基因型频率与对照组、单纯AR患者、AR并变应性鼻炎气道高反应性(AHR)患者相比,P均＜0.05.AR并BA患者的PAF-AH等位基因频率与对照组、单纯AR患者、AR并AHR患者相比,P均＜0.05.结论 PAF-AH基因的等位基因突变和ARB病情有关.
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变应性鼻支气管炎患者PAF-AH基因型与血浆PAF-AH活性的关系
目的 探讨血小板活化因子—乙酰水解酶(PAF-AH)基因型与变应性鼻支气管炎(ARB)患者血浆PAF-AH活性的相关性.方法 根据PAF-AH基因型的不同,将ARB患者及健康对照者分别分为GG型、GT型和TT型,对其3种基因型的血浆PAF-AH活性进行统计分析.结果 在ARB患者及健康对照组中,不同基因型血浆PAF-AH活性差异有统计学意义(P均＜0.05).GG型血浆PAF-AH活性显著高于GT型及TT型,GT型血浆PAF-AH活性显著高于TT型,两两之间差异均具有统计学意义(P均＜0.05).结论 ARB患者PAF-AH不同基因型对血浆PAF-AH活性可能有明显影响.
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血小板活化因子乙酰水解酶在急性胰腺炎中的应用进展
急性胰腺炎(AP)是一种病情凶险、病死率高的外科常见急腹症.其病变常使患者处于免疫过反应状态[1],经历着局部组织坏死和全身炎症反应的双重打击.因此,首先针对其发病及进展机制的治疗显得极为重要[2].近年来,随着对AP发病机制研究的不断深入,胰腺微循环障碍在AP病程演进中所起的重要作用已日益受到关注.大量的血管活性物质如血小板活化因子(PAF)、内皮素、缓激肽等均在胰腺微循环障碍中发挥着重要作用.
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老年人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2活性与其基因型、性别和年龄的关系
目的 研究血浆脂蛋白相关磷脂酶A2活性与脂蛋白相关磷脂酶A2基因、性别和年龄等因素的关系.方法 应用聚合酶链反应技术和分光光度法,检测1867例50岁以上老年人的脂蛋白相关磷脂酶A2基因G994T的多态性及血浆脂蛋白相关磷脂酶A2活性.结果 不同的脂蛋白相关磷脂酶A2基因型血浆脂蛋白相关磷脂酶A2活性差异存在显著(P＜0.001),GG基因型活性高,GT次之,TT低;GG和GT基因型中,男性血浆脂蛋白相关磷脂酶A2活性显著高于女性(P＜0.001),吸烟者酶活性显著高于不吸烟者(GG与GT基因型中分别为P＜0.01和P＜0.05);在GG基因型中,男性脂蛋白相关磷脂酶A2活性随年龄升高,在GT基因型中随年龄降低.结论 血浆脂蛋白相关磷脂酶A2活性与基因型密切相关;男性脂蛋白相关磷脂酶A2活性高于女性,本研究中这种差异与吸烟有关;CC基因型中男性活性增高可能是一种对随年龄增长的血小板活化因子或氧化磷脂的应激反应的代偿机制,而这种代偿机制在GT中不明显.
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早期妊娠妇女血浆中血小板活化因子含量和血小板活化因子-乙酰水解酶活性的变化及意义
目的:探计早期妊娠妇女血浆中血小板活化因子(platelet-activating factor,PAF)的含量、血小板活化因子-乙酰水解酶(PAF-acetyl-hydrolase,PAF-AH)的活性变化及意义.方法:通过病史询问、妇科检查及B超确定早孕.采用生物法检测120例早期妊娠妇女和20例正常非孕妇女血浆中的PAF含量,同时采用酶水解底物显色法测定血浆中的PAF-AH活性,放射免疫法检测血清中的hCG-β.结果:早期妊娠妇女血浆中PAF含量为(12.5±4.3)ng/mL,正常非孕妇女为(6.7±2.8)ng/mL,两组比较差异有显著性(P＜0.01);早期妊娠妇女血浆中PAF-AH活性为(17±1.1)nmol/(min·mL),正常非孕妇女为(32±1.8)nmol/(min·mL),两组比较差异有显著性(P＜0.01).结论:早期妊娠妇女血浆中PAF含量和PAF-AH活性的变化在妊娠的发生和发展中起着较为重要的作用.
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海南黎族哮喘患者血浆PAF及PAF-AH活性的观察
目的 探讨血小板活化因子(PAF)及乙酰水解酶(PAF-AH)等活性变化在黎族居民支气管哮喘发病机制中的意义.方法 采用酶联免疫法等方法测定48例海南黎族支气管哮喘患者发作期和缓解期血浆PAF及PAF-AH的活性变化,同时观察总IgE和嗜酸细胞阳离子蛋白(ECP)水平. 结果 黎族哮喘发作期患者PAF、总IgE和ECP水平较正常组均明显增高,缓解期较发作期明显降低,均有显著意义(P＜0.01),缓解期仍高于正常组,但无显著意义(P＜0.05);发作期PAF-AH活性较正常组均明显降低,缓解组较发作组明显增高,均有显著意义(P＜0.01),但缓解组仍低于正常组(P＜0.05). 结论 黎族哮喘患者急性发作期血浆PAF活性明显增高、PAF-AH活性明显降低,提示PAF和PAF-AH活性变化在黎族哮喘的发生机制中可能有一定作用,其临床意义有待于进一步研究.
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不育患者精液中PAF的变化及外周血PBMC上PAF-R的表达
目的:探讨男性不育患者精液血小板活化因子(PAF)、血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)活性的变化,以及外周血中单个核细胞(PBMC)PAF受体(PAF-R)的表达.方法:对10例男性不育患者(其中5例为精液异常组,5例为不明原因不育组)采用生物法检测精液中PAF含量,酶水解底物显色法测定PAF-AH活性,流式细胞仪检测PBMC上PAF-R的表达.并与5例有正常生育功能的男性健康体检者对照.结果:精液异常组PAF含量(1.87±0.76)μg/L,PAF-AH活性(23.56±6.86)μmol/(min·L)、PBMC上PAF-R的表达与健康体检者比较差异有非常显著性意义(P＜0.01);不明原因不育组PAF含量(2.12±0.81)μg/L,PAF-AH活性(21.65±5.13)μmol/(min·L)、PBMC上PAF-R的表达与健康体检者比较差异也有非常显著性意义(P＜0.01);精液异常组与不明原因不育组相比差异无显著性.结论:男性不育患者精浆PAF降低、PAF-AH升高,PAF、PAF-AH、PAF-R三者在男性不育的发生中可能起重要作用.
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血小板活化因子乙酰水解酶基因994(G→T)突变与脑梗塞的关联性
目的研究血浆型血小板活化因子乙酰水解酶(platelet-activating factor-acetylhydrdase, PAF-AH)基因994(G→T)点突变与脑梗塞常见类型的相关性.方法应用聚合酶链反应技术,检测108例脑梗塞患者(分为动脉粥样硬化性脑梗塞组、腔隙性脑梗塞组和心源性脑梗塞组)和215名正常对照中,血浆型PAF-AH基因该突变的基因型频率和等位基因频率.结果对照组994(G→T)突变的基因型频率为20.46%(杂合子:18.60%;纯合子:1.86%).全部脑梗塞患者人群中,突变基因型频率为35.19%(杂合子:32.41%;纯合子:2.78%),明显高于对照组(P<0.01);其中动脉粥样硬化性脑梗塞组该突变基因型频率为38.10%(杂合子:34.92%;纯合子:3.18%),与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01).腔隙性脑梗塞组和心源性脑梗塞组的该突变基因型频率分别为:32.35%(杂合子:29.41%;纯合子:2.94%)和27.27%(杂合子:27.27%;纯合子:0);与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论血浆型PAF-AH基因994(G→T)T点突变与中国人脑梗塞的发生显著相关,其相关性主要来源于动脉粥样硬化性脑梗塞,而与腔隙性脑梗塞可能无明显关联.
关键词： 血小板活化因子 乙酰水解酶 腔隙性脑梗塞 动脉粥样硬化性脑梗塞 -
血小板活化因子的生物合成、分解代谢及其调节
PAF作为一种特殊类型的细胞因子,在妊娠、心血管疾病、支气管哮喘、急性胰腺炎中的作用日趋受到人们的重视,对PAF的生物合成、分解代谢及其调节研究为探讨PAF介导生物学反应的机理及其相关疾病的诊断防治提供基础.
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血小板活化因子乙酰水解酶基因突变与脑血管病的关系
①目的探讨血小板活化因子(PAF)乙酰水解酶基因突变与脑血管病发病的关系.②方法应用多聚酶链反应(PCR)技术,分析160例脑血管病病人及100例健康对照者的PAF乙酰水解酶基因型及基因组DNA突变等位基因频率,并测定血浆PAF乙酰水解酶的活性.③结果脑梗死组与脑出血组PAF乙酰水解酶突变基因型及突变等位基因的频率显著高于对照组,差异有显著性(χ2=6.397～9.758,P＜0.05、0.01);伴不同危险因素脑血管病病人基因突变的差异无统计学意义.④结论血浆PAF乙酰水解酶基因突变所致的酶缺乏可能是我国脑血管病的遗传学危险因素.
