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草原兔尾鼠体毛中7种元素含量的测定
采用火焰原子吸收法对25只健康草原兔尾鼠体毛中的Fe、Cu、Cd、Zn、Pb、Mn、Mg等7种元素进行测定,结果表明雄性草原兔尾鼠体毛中Fe、Cu、Cd、Pb、Mn、Mg与雌性的含量无显著差异(P>0.05),而雌性Zn的含量明显高于雄性(P＜0.05).
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草原兔尾鼠卵透明带3DNA疫苗pVAX1-sig-LTB-IZP3-C3d3的构建表达及其免疫不育的研究
目的:构建草原兔尾鼠卵透明带3 DNA疫苗pVAX1-sig-LTB-IZP3-C3d3进行小鼠的黏膜免疫,增强该疫苗的免疫不育效果.方法:将两种佐剂分子大肠杆菌不耐热肠毒素B亚基和C3d基因通过酶切鉴定,构建重组质粒pVAX1-sig-LTB-IZP3-C3 d3,采用RT-PCR和Western blot技术,检测其在mRNA和蛋白水平的表达,并通过肌肉注射、滴鼻和灌服3种途径免疫雌性C57BL/6小鼠,通过ELISA检测抗体水平及分型.结果:酶切鉴定,RT-PCR和Western blot 结果表明重组质粒构建正确并可在mRNA和蛋白水平的表达,ELISA结果表明以重组质粒pVAX1-sig-LTB-IZP3-C3d3免疫诱导的特异性IgG、IgA的水平明显高于对照组(P＜0.01)o抗生育实验表明该疫苗免疫的小鼠平均生仔数与对照组相比差异极显著(P＜0.01).结论:构建的草原兔尾鼠卵透明带3DNA疫苗重组质粒pVAX1-sig-LTB-IZP3-C3d3可高效地激发小鼠特异性免疫应答,提高抗生育的效果.
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草原兔尾鼠卵透明带3基因重组腺病毒载体的构建及表达
目的:探索制备免疫不育疫苗的新途径, 获得草原兔尾鼠卵透明带3(LZP3)重组腺病毒减毒活疫苗.方法:将LZP3基因亚克隆到穿梭质粒pShuttle-CMV上, 采用细菌内同源重组"两步转化法"构建携带LZP3基因的重组腺病毒载体.获得的重组腺病毒载体线性化后转染HEK293细胞, 包装成病毒颗粒.PCR鉴定重组腺病毒, 继而用鉴定正确的重组腺病毒感染HeLa细胞, 并以RT-PCR、 Western blot检测LZP3的转录和表达.结果:成功构建了携带LZP3基因的重组腺病毒pAd-LZP3载体, 其转染293细胞后包装出重组病毒, PCR证实LZP3基因已整合至腺病毒基因组中, 病毒的滴度可达1.2×1010 pfu/L.RT-PCR和Western blot检测表明RAd-LZP3感染的HeLa细胞中LZP3基因能够有效转录和表达.结论:制备的RAd-LZP3可成功表达LZP3基因, 为后续开展RAd-LZP3免疫动物的研究奠定了基础.
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优化密码子提高草原兔尾鼠ZP3融合蛋白的原核表达
目的: 探讨提高草原兔尾鼠(Lagurus lagurus)卵透明带3 (LZP3)基因在原核细胞中表达的水平.方法: 利用重叠PCR技术, 定点突变LZP3基因上3个稀有的密码子簇, 将LZP3基因中7个稀有的密码子更换成大肠杆菌(E.coli)常用的相应密码子.将获得的LZP3突变基因(LZP3m)插入pGEX4T-1中, 构建重组表达载体.以重组体转化E.coli BL21(DE3)菌株进行表达.结果: LZP3m基因的表达量比野生型LZP3基因明显提高.结论: 通过密码子优化, 能显著提高LZP3基因在原核细胞中的表达水平.
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抗草原兔尾鼠抗体制备及特异性检测
草原兔尾鼠(Lagurus lagurus)是一种新开发的实验动物[1],已为部分动物实验提供动物,并且取得了一定结果[2,3].制备高特异性,高效价的免疫血清是保障免疫实验的基础,抗血清质量的好坏将直接影响试验的敏感性和特异性.有关此种动物的抗血清制备和特异性测定,国内尚无报道.为此我们制备了兔抗草原兔尾鼠血清,现将报告如下.
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不同剂量婴儿利什曼原虫实验感染草原兔尾鼠的观察
按常规方法,通过培养阳性动物(金仓鼠)脏器获取婴儿利什曼原虫901株(MHON/CH/90/SS-1)前鞭毛体,按(5×106)个/0.5mL;(2×107)个/0.5mL;(4×107)个/0.5mL三组不同剂量经腹腔接种草原兔尾鼠(Lagurus lagurus,为新疆地方病防治研究所动物昆虫研究室驯化繁殖的封闭群实验动物,按体重、性别随机分成3组)23只.
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实验条件下几种灭鼠剂对草原兔尾鼠的杀灭效果
草原兔尾鼠是新疆荒漠草原所特有的害鼠之一,作者在开展城市灭鼠工作的同时,用5种常用的灭鼠剂,对本所人工驯化的草原兔尾鼠进行了适口性和毒杀试验.每一试验组试鼠10～40只,雌雄各半,每5只同性鼠为一个饲养笼.对照组10只,雌雄各半.毒饵用新鲜小麦配制.在实验室条件下用0.005%和0.01%溴敌隆、0.01%氯敌鼠钠盐、0.05%和0.1%敌鼠钠盐、0.035%和0.07%杀鼠迷、0.5%和1%甘氟5种灭鼠剂,配制成毒饵喂食草原兔尾鼠.分1天量和3天量两组,毒杀效果依次为甘氟＞敌鼠钠盐＞杀鼠迷＞溴敌隆＞氯敌鼠钠盐.灭鼠剂适口性逐次为溴敌隆＞氯敌鼠钠盐＞杀鼠迷＞敌鼠钠盐＞甘氟.
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新疆木垒县草原兔尾鼠(Lagurus lagurus)种群生命表和稳定年龄结构的研究
目的研究草原兔尾鼠(Lagurus lagurus)的种群生命表、内禀增长率和稳定年龄分布.方法 2000年9月至2001年9月在新疆木垒县分4个时段采用样方对草原兔尾鼠进行野外调查,在实验室采用数学生态学的方法.结果随着草原兔尾鼠种群数量的下降,种群的内禀增长率和周限增长率不是随着种群数量的下降而下降,而是发生了波动,2000年9月rm =-0.552,λ=0.576,2001年4月rm =0.271,λ=1.313,2001年7月rm =0.372,λ=1.451;在不同时期草原兔尾鼠种群的平均世代时间(T)基本保持不变,稳定在3.0～3.5之间.结论种群的稳定年龄分布结构不同时期并不完全相同,2000年9月和2001年7月属下降型种群结构,2001年4月属增长型种群结构,但不稳定.
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几种利什曼抗原对草原兔尾鼠婴儿利什曼原虫实验感染的保护作用
本项研究旨在确定几种利什曼表面分子抗原对婴儿利什曼原虫实验感染的免疫保护作用.用重组的利什曼原虫细胞表面糖蛋白GP63和脂磷酸聚糖(LPG)以短小棒状杆菌菌苗为佐剂免疫草原兔尾鼠.用婴儿利什曼原虫强毒株前鞭毛体攻击感染,测定其免疫保护作用.经rGP63+LPG+CP免疫的动物,在用2×107前鞭毛体攻击时,其肝脏的利什曼原虫数比对照动物降低89.79%.LPG+CP免疫组降低60.6%,rGP63/β半乳糖苷酶融合蛋白+CP免疫组降低42.25%.纯化的rGP63没有保护作用.rGP63+LPG+CP免疫后,用1×106、5×106和1×107前鞭毛体攻击时感染率也有明显的降低.
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婴儿利什曼原虫实验感染草原兔尾鼠的进一步观察
给草原兔尾鼠(Lagurus lagurus)经腹腔接种不同量的婴儿利什曼原虫(Leishmania infantum)前鞭毛体,结果表明,不同量的原虫感染对动物体重及肝重没有明显的影响,但脾重则有一定的差异.肝脏原虫负荷随感染虫量的增加而加大,实验结果进一步证明草原兔尾鼠是一种对利什曼原虫非常敏感的实验动物;同时在用级差较小的不同量的原虫接种后,可以显示感染程度的差别,这就为利什曼病的免疫学研究提供了良好的动物模型.
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实验感染利什曼原虫后草原兔尾鼠血清抗体检测结果
草原兔尾鼠(Laguruslagurus Pallas,1773)对利什曼原虫的敏感性已有报道[1],本次实验目的在于了解草原兔尾鼠感染利什曼原虫后血清抗体的变化,现将结果报告如下.
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草原兔尾鼠卵透明带3(ZP3)cDNA保守序列的克隆与序列分析
根据Gene Bank数据库中5种啮齿目动物卵透明带3(ZP3)cDNA的序列,利用DNAMAN和NIH NCBI BLAST同源性分析程序设计了特异性引物.从6周龄的未孕雌性的草原兔尾鼠卵巢中用柱离心法得到总RNA,利用反转录技术得到cDNA,通过特异性引物进行PCR扩增草原兔尾鼠的ZP3cDNA保守序列.将扩增产物连接到pMD18-T载体上,通过蓝白斑筛选得到阳性克隆,酶切鉴定后进行测序.将其与Gene Bank中啮齿目动物ZP3 cDNA进行同源性比较,获得了草原兔尾鼠ZP3cDNA的保守基因序列,与啮齿类同类基因比较,具有较高的同源性.
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草原兔尾鼠主要脏器及毛发中无机元素测定分析
用原子吸收光谱法测定了25只健康草原兔尾鼠(雌雄各半)心、肝、肾、脾、肺及毛发中无机元素铜,铁、锌、铅、镉、砷的含量,发现锌、镉、铅、砷在毛发中浓度高,铜、镁在脾脏中浓度高,铁在肝脏中浓度高,铝在心脏中浓度高.
