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二黄汤半仿生法提取液指纹图谱归属研究
目的:对二黄汤方药半仿生法(SBE法)≤1 000Da提取液的指纹图谱各特征峰的来源进行归属研究.方法:采用SBE法分别制备二黄汤全方和各单味药黄芩、黄连、甘草的提取液,绘制相应的HPLC指纹图谱,通过比对,确定其特征峰的来源;通过对照品比对,鉴定部分特征峰的成分.色谱条件:采用Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,0.02 mol·L-1乙酸铵溶液(冰乙酸调pH 4.0)(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.5 mL· min-1,检测波长265 nm,柱温25℃,进样量20 μL.结果:二黄汤的SBE法≤1 000Da提取液的HPLC指纹图谱有32个特征峰,其中峰9、11、13、16、17、25、26、27、30、31来自黄芩,峰15、20、21来自黄连,峰3、10、12、23、24、32来自甘草,峰2、18、19来自黄芩、黄连和甘草,峰14、28、29来自黄芩和甘草,峰1、4、5、6、7、8、22来自黄连和甘草.以保留时间和紫外吸收曲线为判断依据,进行对照品比对,鉴别出甘草苷、黄芩苷、巴马汀、小檗碱、甘草素、甘草酸、黄芩素、甘草次酸共8个已知成分,其中峰22是含小檗碱和甘草素的混合峰,与归属结果相同.结论:二黄汤SBE法提取液指纹图谱的建立符合要求,归属研究方法合理.与对照品比对,二黄汤SBE法≤1 000Da提取液中各特征峰的归属结果准确,可为特征峰的成分鉴定和谱效关系研究提供依据.