首页 > 文献资料
-
重症监护病房产VIM-2型金属酶绿脓假单胞菌的研究
目的分析重症监护病房产金属β内酰胺酶绿脓假单胞菌的同源性、金属酶基因型及转移机制.方法用2-巯基丙酸协同试验筛选重症监护病房分离的对亚胺培南耐药的绿脓假单胞菌中的产金属酶株,聚合酶链反应(PCR)、克隆测序确定耐药基因,整合子PCR扩增,脉冲场凝胶电脉分析同源性.结果 26株绿脓假单胞菌2-巯基丙酸协同试验阳性,酶粗提液能水解亚胺培南,活性能被EDTA抑制.VIM型金属酶引物PCR扩增阳性,经克隆测序证实为VIM-2型金属酶.整合子可变区序列分析表明,blaVIM-2位于Ⅰ类整合子上,该基因上游含有1个aacA4基因,下游为aadB基因.脉冲场凝胶电脉结果证实产酶株均来自同一克隆.结论医院重症监护病房有产VIM-2型金属酶绿脓假单胞菌的流行,耐药基因位于Ⅰ类整合子上.
-
黏质沙雷菌ampC基因表达的研究
目的探讨不同耐药谱黏质沙雷菌ampC基因特点、分布及其调控基因ampR与AmpC酶表达的关系.方法采用三维试验、等电聚焦电泳和1/2 MIC β内酰胺类抗生素浓度诱导细菌耐药性,将143株黏质沙雷菌β内酰胺酶表型分成3组:诱导型组、持续低产型组和高产型组,各组菌株分别用PCR扩增ampC和ampR基因片段,测序后对ampC和ampR进行分析,同时进行接合试验.结果 143株黏质沙雷菌,检测出低产型14株、诱导型103株、高产型18株;ampC阳性125株,ampR阳性99株,高产型ampR检出率比其他组低;5株诱导型菌株和2株高产型菌株的ampC有5个位点易发生突变,ampR的ORF区域有4个位点易点突变.结论某些黏质沙雷菌诱导耐药的产生可能与编码AmpC酶分子的ampC突变和ampR的ORF区域突变有关;部分持续高产型菌株耐药与其ampR的缺失突变有关,未发现黏质沙雷菌质粒介导的AmpC酶.
-
多重耐药绿脓假单胞菌β内酰胺类氨基糖苷类耐药相关基因研究
目的明确广州地区临床分离的耐药绿脓假单胞菌各种β内酰胺酶编码基因、外膜通道蛋白oprD2基因、氨基糖苷类修饰酶基因存在状况.方法采用MicroScan微生物鉴定系统微量肉汤法测定临床分离的18株绿脓假单胞菌对12种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应及序列分析的方法分析β内酰胺酶基因型、氨基糖苷类修饰酶基因型及外膜通道蛋白oprD2基因.结果该18株菌呈现多重耐药,对氨基糖苷类抗生素的耐药率在50.0%～72.2%之间,对其他抗绿脓假单胞菌药物耐药率在16.7%～83.3%之间;14株(77.8%)检出氨基糖苷类修饰酶基因,aac(6')-Ⅱ、aac(3)-Ⅱ、ant(3")-Ⅰ、aac(6')-Ⅰ、ant(2")-Ⅰ、aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅲ、aph(3')-Ⅵ和aac(3)-Ⅳ基因的阳性率分别为50.0%、38.9%、38.9%、33.3%、27.8%、11.1%、5.6%、5.6%和0;13株(72.2%)检出β内酰胺酶编码基因,TEM、DHA、IMP和OXA基因阳性率分别为55.6%、27.8%、 22.2%和11.1%,SHV、PER、VER、GES和VIM基因阴性,3株外膜通道蛋白oprD2基因缺失.结论广州地区临床分离的绿脓假单胞菌多重耐药严重,氨基糖苷类修饰酶基因和β内酰胺酶编码基因携带率很高.
-
我国β内酰胺酶所致细菌耐药的现状与展望
介绍2005年13省14市15家医院参加"浓度梯度法及琼脂稀释法监测医院感染耐药性项目[SEANIR项目(2005-2007)]"中的2 400株菌监测结果,强调15家医院之间,不同菌株对不同药物的敏感率有明显差异;进而指出其3点原因--用药量、用药方法和医院感染控制等值得商榷的问题.同时介绍欧洲共同体多年研究抗菌药消耗与耐药率相关性取得的重大成就、方法学的先进性、严谨性及可比性;推荐我国一定要启动这类研究,以启动控制耐药率上升的宣传教育和行政措施的实施;后介绍流行病学数学模型即抗菌药治疗过程中菌群变化的理论和结论,即如果能严格防止耐药株进入病房或医院,加上一系列有效感染控制及其他办法,一个医院或病房,可以在几个星期或1～2个月内消灭该耐药菌株.此外,目前社区的耐药株尚难以控制,需要更多投入与关注,且需要相当长的时间,甚至数十年才能消灭.
-
新型碳青霉烯酶快速检测方法:Carba NP试验
碳青酶烯耐药的革兰阴性菌在全球范围内的广泛传播已经成为了重大的公众健康问题,与其他耐药机制不同,细菌产生碳青霉烯酶的编码基因大多存在于可移动的基因元件上,极大地加速了碳青霉烯耐药菌的产生,也给临床治疗和感染控制带来了严竣的挑战.Carba NP试验是一种非常可靠,而且简单、快速、经济的碳青霉烯酶的检测方法,尤其是对Ambler A类及B类酶具有非常好的特异性.这对指导临床治疗、临床抗菌药物使用管理及控制耐药性的传播都具有非常重要的意义.
-
产超广谱β内酰胺酶细菌的耐药性研究
近年来,临床上三代头孢菌素等超广谱β内酰胺酶类抗生素广泛使用,使得产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)菌株的检出率逐年上升,给临床治疗造成很大困难.
-
自动化细菌鉴定仪和碳青霉烯酶基因OXA-51扩增在不动杆菌属细菌鉴定中的价值
目的 评价自动化细菌鉴定仪Phoenix和Vitek2 Compact以及碳青霉烯酶基因OXA-51(blaOXA-51-like扩增在不动杆菌属细菌鉴定中的价值.方法 收集2006-2007年北京协和医院临床标本中分离的非重复不动杆菌属细菌50株,以扩增性核糖体DNA限制性酶切片段分析(amplified ribosomal DNA restriction analysis,ARDRA)为参考方法,分别采用blaOXA-51-like基因扩增和Phoenix、Vitek2 Compact细菌鉴定仪进行鉴定.结果 与ARDRA分子鉴定结果进行对比,blaOXA-51-like基因扩增鉴定方法敏感度为100%,特异度为100%;细菌鉴定仪Phoenix和Vitek2 Compact鉴定到种的准确率分别为44%和56%.结论 不动杆菌属仪器表型鉴定准确率不高;对于鲍曼不动杆菌,blaOXA-51-like基因扩增为一种快速可靠的鉴定方法.在研究不动杆菌的耐药机制或同源性分析时,可采用ARDRA方法进行鉴定.
-
一种同时鉴定和检测产超广谱β内酰胺酶细菌的方法
目的 评价含64μg/ml头孢噻肟的CHROMagar尿道菌定位琼脂在检测产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)细菌中的作用.方法 以美国临床和实验室标准协会(CLSI)推荐的酶抑制剂增强试验检测产ESBLs菌株结果为标准,评价含头孢噻肟CHROMagar尿道菌定位琼脂在检测产ESBLs细菌的敏感度和特异度.菌株鉴定采用API条.结果 在上海华山医院临床分离的260株大肠埃希菌和287株肺炎克雷伯菌中,CLSI推荐的酶抑制剂增强试验检测产ESBLs菌株分别为175株、200株.含64μg/ml头孢噻肟CHROMagar尿道菌定位琼脂检测产ESBLs菌株分别为172株、197株.与CLSI推荐的酶抑制剂增强试验检测结果相比,含64μg/ml头孢噻肟CHROMagar尿道菌定位琼脂检测大肠埃希菌中产ESBLs菌株的敏感度、特异度和准确性分别为98.3%(172/175)、100%(85/85)和98.8%(257/260),肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株的敏感度、特异度和准确性分别为98.5%(197/200)、100%(87/87)和98.9%(284/287)结论 含64μg/ml头孢噻肟CHROMagar尿道菌定位琼脂在鉴定大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的同时即能检测是否为产ESBLs菌株,不失为一种简便快捷的方法,值得在临床微生物实验室推广应用.
-
肺炎克雷伯菌药敏分析及其超广谱β内酰胺酶基因分型研究
目的 对北京大学人民医院分离的肺炎克雷伯菌进行药敏分析及ESBL型别测定,为控制院内肺炎克雷伯菌感染提供依据.方法 收集北京大学人民医院2001-2007年分离的1 205株肺炎克雷伯菌,采用Vitek-2全自动药敏鉴定分析仪对菌株进行鉴定及药敏试验,采用WHONET 5.3软件进行药敏结果分析,PCR法检测ESBL基因型别,比较分析各种药物敏感率和基因型比率特征和差异.结果 2001-2007年肺炎克雷伯菌中产ESBL比例逐年增加:2001年为15.8% (40/253),2002年为20.9% (53/253),2003年为32.8% (42/128),2004年为32.8% (45/137),2005年为36.6% (60/164),2006年为45.3% (68/150),2007年为45.6% (73/160).ESBL阳性菌株中SHV基因检出比例大,2007年为83.6%(61/73).ESBL阳性菌株中CTX-M基因检出率逐年增加,2007年为54.8%(40/73).携带单一SHV基因菌株与同时携带SHV、CTX-M基因菌株对头孢他啶、头孢曲松及头孢噻肟的耐药率差异有统计学意义(χ2值分别为20.26、32.03、29.65,P均＜0.05);携带单一SHV基因菌株与同时携带SHV、TEM基因菌株对头孢他啶、头孢曲松及头孢噻肟的耐药率差异有统计学意义 (χ2值分别为7.01、9.93、11.01,P均＜0.05);携带单一SHV基因菌株与同时携带SHV、OXA基因菌株对头孢他啶、头孢曲松及头孢噻肟的耐药率有统计学差异 (χ2值分别为14.11、17.58、11.54,P均＜0.05);携带CTX-M基因菌株与同时携带SHV、CTX-M基因菌株对头孢他啶耐药率差异有统计学意义(χ2=23.61,P＜0.05);携带TEM基因菌株与同时携带SHV、TEM基因菌株对头孢他啶耐药率差异有统计学意义(P=0.01).结论 肺炎克雷伯菌产ESBL逐年增加,以SHV型为主,携带CTX-M型ESBL基因菌株逐年增多.
-
耐亚胺培南鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶及整合子分布
目的 了解耐亚胺培南鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶及整合子分布情况.方法 收集天津医科大学总医院2008年1月至2010年3月期间,103株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌临床标本.用Vitek-2系统鉴定细菌,并进行药敏试验,通过改良Hodge试验、改良三维试验和2-巯基丙酸协同试验初筛碳青霉烯酶,多重PCR同时检测4种OXA型碳青霉烯酶基因、2种金属酶基因及整合酶基因,对整合子可变区进行PCR检测及序列分析.结果 103株鲍曼不动杆菌中,改良Hodge试验检出碳青霉烯酶阳性75株(72.8%),改良三维试验检出产碳青霉烯酶菌株80株(77.7%),未检出产金属酶菌株.PCR检出blaOXA-51-like+bsaOXA-23-like+int11基因84株,blaOxA-51-like+blaOXA-23-like阳性5株,blaOXA-51-like+intll阳性8株,blaOXA-51-like+blaOXA-24-like阳性2株,仅blaOXA-51-like阳性4株,blaOXA-58-like、金属酶基因(IMP-1、VIM-2)及Ⅱ类整合酶基因(intI2)均阴性.89株(96.7%)Ⅰ类整合酶阳性株均扩增出可变区,检出2种耐药基因盒组合形式:aacA4-catB8-aadAl(2 300 bp)81株,aacCl-orfX-orfX-orfX'-aadAla(3 000 bp)8株.结论 鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药及多重耐药主要与其携带的OXA-23型碳青霉烯酶和Ⅰ类整合子有关.
-
四种碳青霉烯类抗生素筛选金属酶方法的比较
目的 以EDTA为金属酶抑制剂,比较4种碳青霉烯类抗生素对金属酶筛选的效果.方法 从浙江大学附属第二医院收集产金属β内酰胺酶革兰阴性杆菌30株(16株肠杆菌科细菌和14株非发酵菌)、产KPC肠杆菌科9株和产OXA鲍曼不动杆菌10株,用双纸片金属酶筛查试验分析IPM、MEM、PAN和ETP在加入EDTA前后抑菌环直径的变化.结果 当以抑菌环直径差值≥5 mm为假定判读标准时,PAN组的敏感度相对较高[66.7％ (20/30)],其次为MEM组[63.3％ (19/30)]和IPM组[60.0％ (18/30)],ETP组差[43.3％ (13/30)]；当以抑菌环直径差值≥4 mm为假定判读标准时,MEM组和PAN组的敏感度达到80.0％ (24/30).以抑菌环直径差值≥3 mm为假定判读标准时,IPM组和MEM组的敏感度达到90.0％ (27/30),而PAN组和ETP组的敏感度为83.3％ (25/30)；在这3类假定判读标准下,4种抗生素的特异度均达到100％.用金属酶筛查试验筛选16株产金属酶的肠杆菌科细菌,当以5 mm为假定判读标准时,PAN组的敏感度高[75.0％ (12/16)]；以4mm为假定判读标准时,PAN组的敏感度高达93.8％ (15/16),远高于IPM组[75.0％ (12/16)]、MEM组[68.8％ (11/16)]和ETP组[68.8％ (11/16)].结论 以EDTA为抑制剂的金属酶筛查试验,操作简便快捷,特异性高.不推荐使用ETP来筛查金属酶,对于革兰阴性杆菌的金属酶筛选可选择以≥4 mm为判读标准的MEM或PAN纸片；对于肠杆菌科细菌的金属酶筛选试验可选择以≥4 mm为判读标准的PAN纸片；而对于非发酵菌的金属酶筛查试验,不推荐使用PAN.
-
湖南地区CTX-M型超广谱β内酰胺酶的研究
目的 了解湖南本地区产CTX-M型超广谱β内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌的检出率,确定其基因型,并对其流行病学特征进行研究.方法 收集2004年10月至2005年7月湖南地区中南大学3家附属医院临床标本分离的多重耐药肠杆菌科细菌171株,按临床实验室标准委员会(CLSI/NCCLS)所推荐的方法进行表型确证试验,聚合酶链反应(PCR)进一步进行CTX-M酶基因型的检测,PCR产物测序并确定其基因型.结果 171株多重耐药革兰阴性杆菌中142株表型检测阳性,经多重PCR扩增109株携带CTX-M基因,其中大肠埃希菌45株,肺炎克雷伯菌29株,阴沟肠杆菌21株,其他菌株14,CTX-M酶在产ESBLs肠杆菌科细菌中检出率达76.8%(109/142),经测序25株共检出3种基因型,即7株携带CTX-M-15、7株携带CTX-M-3和11株携带CTX-M-14.RAPD共做50株菌,26株大肠埃希菌有12种RAPD类型,14株肺炎克雷伯菌有6种RAPD类型,10株阴沟肠杆菌有7种RAPD类型.结论 在湖南地区检出3种CTX-M型ESBLs基因,在一定程度上CTX-M酶存在克隆传播.
-
绿脓假单胞菌β内酰胺类耐药基因研究
目的调查湖北襄樊地区绿脓假单胞菌多重耐药菌株中β内酰胺酶编码基因及oprD2基因存在状况.方法采用PCR方法检测分离自本地区的35株绿脓假单胞菌耐药菌株各种β内酰胺酶编码基因TEM、SHV、OXA、PER、GES、IMP、VIM、质粒型AmpC酶DHA、MIR及OprD2.结果35株β内酰胺类耐药基因TEM、OXA、质粒型AmpC酶DHA的阳性率分别为51.4%、17.1%、2.9%,OprD2基因缺失率100%,而SHV、PER、GES、IMP、VIM、MIR基因检测均阴性.结论研究表明,携带TEM、OXA、质粒型AmpC酶 DHA以及OprD2基因缺失是导致本组绿脓假单胞菌多重耐药菌株对β内酰胺酶类抗生素耐药的重要机制.
-
鲍曼不动杆菌耐药性和金属β内酰胺酶的检测
目的了解本院鲍曼不动杆菌对抗菌药物的耐药性以及对碳青霉烯类抗生素和头孢他啶耐药菌株是否产金属β内酰胺酶.方法对2002年4月-2003年1月本院临床分离的101株鲍曼不动杆菌采用NCCLS推荐的琼脂双倍稀释法测定了对15种抗菌药物的低抑菌浓度(MICs),将对亚胺培南耐药或对头孢他啶高度耐药的菌株用金属螯合剂-抗生素稀释法检测是否产金属β内酰胺酶.结果101株鲍曼不动杆菌常分离自痰,分布于全院16个临床科室,但有1/3以上来自于ICU病房.这101株对抗菌药物的耐药性突出,仅对亚胺培南、美罗培南和头孢吡肟保持较高的敏感率,分别为90.1%、88.1%和81.2%;而对包括头孢他啶的其他11种抗菌药物的敏感率均低于50%;而且多重耐药菌株常见.共有19株鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药和(或)对头孢他啶高度耐药.金属螯合剂-抗生素稀释法检测出9株产金属β内酰胺酶.结论本院鲍曼不动杆菌分离率高、分布广,对抗菌药物耐药严重;仅碳青霉烯和四代头孢菌素保持较高的敏感性;存在对亚胺培南耐药和(或)对头孢他啶高度耐药的鲍曼不动杆菌,其中部分耐药株产金属β内酰胺酶.
-
纸片双抑制剂平行抑制试验有效分析阴沟肠杆菌产超广谱β内酰胺酶
目的建立一种能快速有效分析阴沟肠杆菌是否产生超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的方法.方法质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC 700603、阴沟肠杆菌029、阴沟肠杆菌O29M和阴沟肠杆菌1194E.用纸片双抑制剂平行抑制试验(DDIST)、临床和实验标准协会/美国临床实验标准化委员会(CLSI/NCCLS)推荐的用于检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs的纸片法和E-试验MIC法对本院连续的不重复的58株阴沟肠杆菌临床菌株进行ESBLs分析,用一系列ESBLs特异引物对其中27株耐头孢他啶或头孢噻肟的菌株进行扩增,以验证上述各种方法的准确性.结果PCR法从20/27株阴沟肠杆菌中扩增到ESBLs 基因,DDIST法检出20株ESBLs产株,CLSI/NCCLS法仅检出4株,E-试验MIC法检出0株.结论纸片双抑制剂平行抑制试验是一种能快速有效分析阴沟肠杆菌超广谱β内酰胺酶的方法.
-
广州地区3 500株革兰阴性杆菌TEM和SHV型超广谱β内酰胺酶基因分型研究
目的调查广州地区临床分离的革兰阴性杆菌中TEM和SHV型超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的主要基因型别及其流行情况.方法按照美国临床实验室标准化委员会2001年标准筛选广州地区临床分离菌株的ESBLs表型.用聚合酶链反应(PCR)扩增法和DNA测序法进行ESBLs基因序列分析.结果2001年7月-2003年8月本研究小组从广州地区13家大型医院中共获得3500株无重复地连续地革兰阴性杆菌分离菌株,其中ESBLs表型阳性为1084株,占31%.PCR扩增结果显示,blaTEM和blaSHV基因的总阳性率在本地区临床分离的革兰阴性杆菌中分别为24%和10.8%,同时检出TEM和SHV型ESBLs的菌株数为128株,阳性率为3.7%.序列分析进一步证实了TEM型bla均为TEM-1类非ESBLs,包括TEM-1、TEM-1B、TEM-1D和TEM-1F.而本地区的SHV型bla几乎均为SHV类ESBLs(SHV-1型仅占7.2%,获得22株),其中以SHV-12/5a阳性率高(50%,152/304).各基因型的菌株分布结果显示,TEM型基因主要分布于大肠埃希菌中,占53%(340/641);而SHV型基因则主要分布于肺炎克雷伯菌中,占57.9%(176/304).结论本地区SHV类ESBLs较为常见,其中尤以SHV-12/5a为主,本地区暂无TEM类ESBLs.本地区可能存在SHV-12/5a流行菌株.对于ESBLs的检测,临床常用方法可能存在较高的漏检率和误检率.
-
产酸克雷伯菌超广谱β内酰胺酶与AmpC酶耐药表型及基因型分析
目的 了解呼吸道感染患儿产酸克雷伯菌超广谱β内酰胺酶(ESBLs)与AmpC酶的耐药表型和基因型.方法 采用API及VITEK32鉴定菌株;琼脂稀释法检测MIC值;CLSI纸片确认实验检测ESBLs,3-氨基苯酚硼酸(APB)纸片增强法检测AmpC酶;基因芯片技术检测ESBLs与AmpC酶的基因型;并进行肠杆菌基因间共有重复序列(Enterobacterial repetitive intergenic consensus,ERIC)分型.结果 165株产酸克雷伯菌ESBLs阳性129株(78.2%),ESBLs与AmpC酶同时阳性16株(9.7%),表型及基因型均未检出AmpC单独阳性株;CTX-M型是其主要基因型(89/109),产AmpC酶株的基因型仅见DHA型;ERIC分型显示多数耐药产酸克雷伯菌具有相同的分子型.产酸克雷伯菌的产酶株及非产酶株对碳青霉烯类100%敏感,但产酶株(尤其是同时产ESBLs与AmpC酶)比非产酶株耐药率高,多重耐药性更常见.结论 儿童患者中产酸克雷伯菌产ESBLs分离率较高;ESBLs与AmpC酶的耐药基因型分别主要是CTX-M型和DHA型.
-
广州地区泛耐药铜绿假单胞菌的分子流行病学调查
目的 调查广州地区4家医院2005年3月至2007年3月泛耐药铜绿假单胞菌株之间的同源性,了解是否有该耐药株暴发流行.方法 用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对134株泛耐药铜绿假单胞菌株进行分型,明确其是否为同一菌株的克隆.结果 134株铜绿假单胞菌PFGE图谱分为56型,其中主要流行型A型有45株,主要在医院A的中心ICU传播流行.其余3家医院也存在各自的流行株,即B、C、D医院的流行株分别为B型、C型、D型,占各医院的总分离株数的22.6%(7/31)、33.3%(6/18)、31.6%(6/19).克隆株Q型同时存在于B医院与D医院,B医院和C医院分别有1株菌与A医院的A型同源性在80%以上,其余菌株在各医院问无同源性.对A医院ICU环境、纤维支气管镜、呼吸机管道采样,未发现A型克隆株存在;但有6例携带A型克隆株的患者在调查时间里多次入住ICU的情况.耐药机制分析,42株A克隆产IMP-9金属β内酰胺酶,B、C、D克隆不产金属酶.结论 在2年的调杏中,广州地区4家大型医院均存在不同规模的泛耐药铜绿假单胞菌株克隆株传播,虽然未发现优势克隆株在4家医院大规模传播,但部分医院间已有共同的克隆株存在.加强对铜绿假单胞菌定植患者的监控可能是控制克隆株继续传播的关键.
-
抑制法检测持续高产和质粒介导的AmpC β内酰胺酶
目的 探讨以苯基硼酸(Phenylboronic acid,PBA)和氟氯西林(Flucloxacillin,FCC)为抑制剂检测持续高产和质粒介导的AmpC β内酰胺酶(AmpC-BLA)的可靠性.方法 以PBA和FCC作为AmpC-BLA的抑制剂,采用双纸片增效试验、双纸片协同试验,分别检测阳性控制菌株阴沟肠杆菌(029M)、质粒介导的ACT-1型大肠埃希菌DHSa2919、MOX-1型肺炎克雷伯菌、LAT-2型大肠埃希菌,阴性控制菌株阴沟肠杆菌O29(野生型)、大肠埃希菌SHV-1、大肠埃希菌SHV-2、大肠埃希菌SHV-5、大肠埃希菌TEM-1、大肠埃希菌TEM-3、肺炎克雷伯菌SHV-18、大肠埃希菌ATCC25922和107株革兰阴性杆菌的AmpC-BLA,与头孢西丁三维试验(3-DT)进行比较,分析不同方法检测AmpC-BLA的准确度.结果 头孢西丁3-DT、PBA、FCC抑制试验检测4个阳性控制菌株和9个阴性控制菌株都获得了如期结果.检测107株肠杆菌科细菌的AmpC-BLA,3-DT阳性率24.3%(26/107),PBA、FCC双纸片增效试验阳性率分别为30.8%(33/107)、26.2%(28/107),PBA、FCC双纸片协同试验阳性率均为23.4%(25/107).接合试验有2株奇异变形杆菌和1株肺炎克雷伯菌阳性,为质粒型AmpCBLA.PBA和FCC双纸片增效试验检测诱导型AmpC-BLA有较高的假阳性,而双纸片协同试验的准确度高,与头孢西丁三维试验相比符合率均达99.1%.结论 PBA和FCC为抑制剂的双纸片协同试验,不管是检测持续高产型还是质粒介导的AmpC-BLA,均具有操作简单、实用、有效、准确等特点.
-
肺炎克雷伯菌中质粒介导的AmpC酶及相关表型研究
目的证实临床分离的部分肺炎克雷伯菌(Kp)除产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)外,还同时产AmpC酶,并探讨了AmpC酶编码基因存在方式.方法对临床分离的可疑同时产ESBLs和其他高活性广谱β内酰胺酶的8株Kp进行接合试验,并对供体菌和接合子同时采用三维试验、ESBLs试验、AmpC酶诱导试验和β内酰胺类抗生素低抑菌浓度(MIC)试验测定,并进行AmpC基因携带状态、表达方式和酶活性分析.结果 8株Kp菌通过接合试验共得到10株接合子,其中有6株供体菌均只得到同时表达AmpC和ESBLs的1种接合子;另2株供体菌,各得2株接合子,1株同时表达AmpC和ESBLs,1株仅表达ESBLs;8株供体菌均未得到单独表达AmpC的接合子.表达AmpC接合子的耐药表型与受体菌非常接近,酶的活性也必须用克拉维酸(CA)和邻氯西林(CLO)两种酶抑制剂才能完全抑制,其中有5株可被头孢西丁(FOX)诱导使某些指示药出现截平现象.结论在Kp中,已出现质粒携带的AmpC基因,有可能与编码ESBLs的基因存在于同一质粒上,并具有诱导型和非诱导型两种表达形式.
