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妊娠35-37周孕妇B族链球菌感染检测方法比较
目的 初步评价不同检测方法妊娠35-37周孕妇B族链球菌感染的效能.方法 于2017年2月——2017年7月间,收集我院妊娠35-37周孕妇阴道及直肠拭子样本,分别采用微生物学法、免疫学法(免疫层析法)、聚合酶链反应(PCR)方法,检测阴道及直肠拭子样本中的B族链球菌的感染情况,并对检测的阳性率进行比较.结果 累计采集样本1263份,细菌培养法检出阳性67份,阳性率为5.3％、免疫学法(免疫层析法)检出阳性85份,阳性率为6.7％、PCR方法检出阳性114份,阳性率为9.0％,统计发现,细菌培养法和免疫层析法无统计学差异,PCR方法要显著优于其他两种检测方法.结论 在妊娠35-37周孕妇B族链球菌感染的检测方面,PCR方法较细菌培养法和免疫层析具备更高的诊断效能.
关键词： B族链球菌 细菌培养法 免疫学法(免疫层析法) 聚合酶链反应 -
核酸提取方法在聚合酶链反应测定乙肝病毒核酸中的评价
目的 研究不同核酸提取方法在聚合酶链反应测定乙肝病毒核酸中的应用评价.方法 选取我站收集的2例乙肝患者血清样本作为研究对象,分别采用沉淀煮沸裂解法、直接煮沸裂解法、NP-40煮沸裂解法、磁珠核酸提取法等4种方法提取血清样本以及不同含量肝素的血清样本中的肝炎病毒核酸,对其提取率以及抗干扰能力进行对比.结果 磁珠核酸提取法在4种提取方法中提取率高,提取率为100％,NP-40次之为95.05％,沉淀煮沸裂解法为88.56％,而直接煮沸裂解法低为80.79％,后两者与磁珠提取法比较差异具有统计学意义(P<0.05);肝素含量为500 U/ml时,4种方法中磁珠核酸提取法HBV DNA含量抑制率低,沉淀煮沸裂解法次之、NP-40煮沸裂解法和直接煮沸裂解法相对较高,对比差异有统计学意义(P<0.05).结论 磁珠核酸提取法在乙肝肝炎病毒核酸提取中具有较高的提取率和抗干扰能力,可作为首选提取方法,值得推广.
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社区妊娠发热患者中人类疱疹病毒7型感染的研究
目的 检测社区妊娠发热患者中人类疱疹病毒7型感染状况,从而了解HHV-7感染在此类疾病中的病原学意义.方法 采用n-PCR法检测患者血浆和单核细胞中的HHV-7DNA.结果 在发热疾病组中血浆HHV-7DNA阳性率为24.00％,而在作为对照的健康组及非发热疾病组的阳性率分别为10.00％和6.00％,发热疾病组与对照组间比较有显著性差异;在发热疾病组单核细胞中HHV-7DNA阳性率为34.00％,而在作为对照的健康组及非发热疾病组的阳性率分别为12.00％和18.00％,发热疾病组与对照组间比较有显著性差异.结论 在社区妊娠发热患者中人类疱疹病毒7型具有一定的病原学意义.
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300例乙肝患者中乙肝五项指标与HBV DNA测定结果分析
目的:探讨和分析乙型五项测定结果与HBV-DNA病毒载量在临床诊疗中的指导意义.方法:采用酶联免疫吸附实验法进行对300例乙肝两对半的测定,并应用聚合酶链反应法(PCR)来检测患者血清中的的HBV-DNA病毒载量,通过统计分析软件对两者之间进行比较分析.结果:300例患者乙肝检查指标HBsAg阳性率高,92.67％(278例),HBeAg阳性率65.33％(196例),抗-HBc阳性率71.67％(215例),抗-HBe阳性率29.67％(89例),抗-HBs阳性率10.67％(32例),HBsAg阳性率高于其他四项(P均小于0.05,差异有统计学意义);HBV-DNA病毒载量阳性例数为213例,阳性率为71.0％,HBV-DNA病毒载量阴性例数87例,占29.0％(χ2=6.45,P<0.05).结论:乙肝两对半的检测结果与HBV-DNA病毒载量的结果有一定的相关性,具有各自的临床意义,在临床的乙肝患者诊断治疗过程中应两者结合才能更好的对乙肝患者的病情评估判断.
关键词： 乙型肝炎 HBV-DNA病毒载量 酶联免疫吸附法 聚合酶链反应 -
结肠癌患者粪便中端粒酶反转录酶和生存素的检测及临床意义
端粒酶反转录酶(hTERT)和生存素与结直肠癌关系密切,我们利用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及PCR技术检测了hTERT、生存素mRNA在结直肠癌组织表达及其基因在粪便中扩增情况,分析如下.
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巢氏聚合酶链反应检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染的探讨
目的 探讨1种衣原体的检测方法.方法 采用巢氏聚合酶链反应(PCR)进行衣原体的检测.结果 共检测了145份标本,巢氏PCR方法检出阳性标本31份,阳性率为21.4％;衣原体抗原检测法检出阳性标本17份,二者差异具有统计学意义.结论 衣原体巢氏PCR是一种快速、简单；且敏感性和特异性很高的检测方法.
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聚合酶链反应在医学检验中的应用和进展
随着我国医疗水平的提高,医学检验技术也得到了非常大的进步,逐渐向着合理化、科学化的方向发展.聚合酶链反应(PCR)作为一种新兴的技术,目前正在被广泛应用.聚合酶链反应是一种在体外扩增DNA的技术,一经推广,便在医学的各个领域得到了非常广泛的应用,其应用价值非常高,深受医生及专家学者的青睐.聚合酶链反应技术能够提高样品检测的真实性,较大程度地节约了成本,并且还增加了医学检验的准确性,在临床应用领域作出了极大的贡献,非常值得深入开展研究.
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西藏拉萨地区2248例乙型肝炎病毒血清学标志分析
目的:探讨西藏拉萨地区乙型肝炎病毒(HBV)血清免疫学标记的组合模式.方法共2248例HBV血清样本,均以免疫酶联技术(ELISA)法检测5项指标.以聚合酶链反应(PCR)检测HBV DNA.为表述方便,设定血清免疫学标记检测项目第1-5项的排列顺序为(1)乙肝表面抗原(HBsAg),(2)乙肝表面抗体(抗-HBs),(3)乙肝e抗原(HBeAg),(4)乙肝e抗体(抗-HBe),(5)乙肝核心抗体(抗-HBc),并以出现阳性项目的序号为该模式代码.结果本组血清HBV免疫学标记的组合模式共19种,并可分为感染期模式组和恢复期模式组.感染期模式组以"145"、"135"和"15"模式为主,占全部样本的41.5%.恢复期模式组以"2"和"245"模式为主,占全部样本的40.2%.结论本组HBV血清免疫学标记的模式较为复杂.推测HBV血清免疫学标志组合模式转换表现为e系统,s系统的转换,以及抗-HBe,抗-HBc和抗-HBs的消失等.
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探析细菌快速裂解方法
16S-23S rRNA基因是位于16S rRNA基因与23S rRNA基因之间的区间序列,具有较好的保守性和相对性,被认为是细菌鉴定的合适部位[1,2].我们认为能否快速有效地开展扩增该区间,聚合酶链反应(PCR)扩增前的标本处理是关键.故比较了3种裂解细菌的方法.
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PCR技术在检验医学中的应用
聚合酶链反应(Polymerase chaim rection,PCR)作为一项较新的科学技术检测方法,在检验医学领域中的发展及临床应用是有广阔前景的.为适应不同项目研究开发目的、不同的临床诊断对象需求,通过改变组成和反应条件及与其它先进技术相结合,PCR技术越来越被临床所重视.
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RASSF1A基因在膀胱移行细胞癌中转录表达的研究
目的:探讨RASSF1A(RAS association domain fanaly1A)基因mRNA表达水平与膀胱移行细胞癌发生、发展的关系.方法:用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测37例膀胱移行细胞癌(bladder transitional cell Carcinoma,BTCC)组织和8例正常膀胱组织中RASSFlA基因mRNA表达水平.结果:RASSF1A mRNA在8份正常膀胱组织中全部表达,在BTCC组织中的表达率为35.1%(13/37),且表达量低于正常膀胱组织,两组间表达差异有显著性(P＜0.05),但在各肿瘤分期、病理分级间的表达差异无显著性(P＞0.05).结论:RASSF1A mRNA表达缺失或下调,参与了肿瘤的发生,而与肿瘤的进展可能无关.
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乳糜血清对聚合酶链反应DNA模板制备的影响
目的探讨乳糜血清对聚合酶链反应DNA模板制备的影响.方法对29例具有乳糜血清的慢性乙型肝炎患者血清,分别进行两种方法处理.A法按照常规试剂集盒方法裂解提取DNA,B法在提取DNA前用异丙醇抽提甘油三酯,弃去抽提液加裂解液100 μ l,沉淀用70%的乙醇100 μ l漂洗两次.结果A法裂解提取DNA后发现10例HBV DNA阳性.B法提取DNA后发现26例HBV DNA阳性.结论乳糜血清可能会影响HBV DNA模板的制备.在模板制备前抽提甘油三酯,并用乙醇多次洗涤模板DNA可避免从乳糜血清中检测HBV DNA造成的假阴性.
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小儿病毒性肝炎1378例血清学及流行病学研究
目的我国是病毒性肝炎高发区,为了解昆明地区小儿病毒性肝炎的流行和分布特征,为制订病毒性肝炎的预防策略,落实防治措施提供科学依据.方法回顾性调查收住的1378例小儿病毒性肝炎病例的血清学及流行病学资料.结果1378例小儿病毒性肝炎病例中各型肝炎病毒的检出率依次为:HAV88.9%＞HBV22.4%＞HEV7.5%＞HGV3.2%＞HCV2.0%＞HDV0.0%,HAV检出率非常显著高于其他各组(均P＜0.01).共有20种感染模式,单一病毒感染1058例(76.8%),其中甲型941例(68.3%),乙型75例(5.4%),丙型5例(0.4%),戊型34例(2.5%),庚型3例(0.2%),两两相比甲型检出率非常显著高于其他各型(均P＜0.01).丁型肝炎病毒尚未发现单独感染病例.重叠感染301例(21.8%),其中二重感染263例(19.1%),三重感染27例(2.0%),四重感染11例(0.8%),二重感染率非常显著地高于三重、四重感染模式(均P＜0.01).原因不明19例(1.4%).1378例小儿病毒性肝炎中男935例,女443例,男女之比为2.1:1,各型小儿病毒性肝炎均以男性多于女性,其中乙型男女比值高(3.3:1).男女患者之中均以甲肝为多(男性中甲肝占67.0%,女性中占73.2%).患者平均年龄为10.3±3.2岁,其中乙型＞戊型＞未分型＞丙型＞庚型＞重叠型＞甲型,乙型(12.4±2.6岁)显著高于甲型(8.1±4.3岁)(P＜0.05),以8-14岁组学龄儿童高发.临床分型中急性肝炎1320例(95.8%),其中急性黄疸型1281例(93.0%),无黄疸型39例(2.8%);慢性肝炎46例(3.3%),重症肝炎6例(0.4%),肝硬化6例(0.4%).急性黄疸型肝炎明显高于急性无黄疸型及其他型肝炎(均P＜0.01).各型肝炎均以3、4、5月份和8、9、10月份为发病高发季节,未分型为散发.结论昆明地区小儿病毒性肝炎的病原学构成颇为复杂,HAV感染是小儿病毒性肝炎的主要病因,同时亦存在HBV、HCV、HEV及HGV感染,未发现HDV感染,急性黄疸型甲型病毒性肝炎是小儿病毒性肝炎的主要临床类型,其次是甲乙重叠型病毒性肝炎.通过调查还揭示了小儿病毒性肝炎不同性别、年龄、季节中的分布规律,对制订病毒性肝炎的预防策略,落实防治措施提供了科学依据.
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荧光定量聚合酶链法检测人类乳头状瘤病毒
目的:用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测婴幼儿咽喉乳头状瘤病毒DNA,以了解该病毒感染的情况.方法:用一种完全闭管式PCR和荧光探针杂交技术相结合所产生的实时定量PCR方法.结果:66例标本中HPV6、11病毒的检出率为90.91%(60/66),病毒DNA平均含量(拷贝/mg)为105.04±1.72.结论:FQ-PCR方法具有简便准确、特异性强、灵敏度高等优点,其定量范围宽,可测定病原体数目101-1010的不同程度,对婴幼儿咽喉乳头状瘤病毒的临床诊断,治疗及疗效的考察有重要指导作用.
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两组不同浓度HBsAg感染者7项血清学乙肝标志物表现模式的比较及分析
目的:分析不同浓度HBsAg感染者血清学乙肝标志物表现模式,以揭示其在人群中的分布特征.方法:采用ELISA法在日常工作中共筛选到252份低浓度和387份高浓度HBsAg血清标本;并经MEIA确证后分别采用ELISA法和PCR法对其7项血清学乙肝标志物进行检测;为表述方便,设定血清学乙肝标志物检测项目第1-5项的排列顺序分别为HBsAg、Anti-HBs、HBeAg、Anti-HBe、Anti-HBc-IgG,并以出现阳性项目的序号为该模式的代码.结果:高浓度HBsAg和低浓度HBsAg感染者在人群中的比例分别为10.2%和0.7%左右,低浓度HBsAg感染者占所有HBsAg阳性感染者的6.86%;高浓度和低浓度组血清学乙肝标志物的表现模式分别有10种和7种,各模式在两组间的检出率不完全相同(135、145、1345,P<0.05 ;13、15、1235、12345,P>0.05),且两组间各模式的Anti-HBc-IgM、HBV DNA检出率亦不尽相同(135、145,P<0.05;15、1235、1345,P>0.05),但两组各模式均以145模式为高(69.8%和55.0%),其次为135和15模式(分别为16.7%、28.2%和6.7%、7.8%);低浓度组中,约70%的145、15模式分布在1.0-2.0ug/L范围内,近65%的135模式分布在2.0-5.0ug/L范围内,其他模式(1、1235、125)及25%左右的145、15模式则分布在≤1.0ug/L以下.结论:低浓度和高浓度HBsAg感染者的血清学乙肝标志物表现模式在人群中具有不同的分布特征,低浓度HBsAg感染人群宜引起重视,应将包括Anti-HBc-IgG在内的乙肝标志物检测列为常规检查项目,对提高HBsAg检测灵敏度具有重要的流行病学意义.
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应用PCR技术检测HP感染和评价疗效
目的: 探讨PCR在HP感染的诊断及根除效果判定中的应用. 方法: 应用PCR技术检测胃粘膜HP感染,并与常规检测方法进行比较.结果:PCR阳性率(91.8%)明显高于组织培养(58.1%)、尿素酶试验(62.8%)和Warthin-Starry银染色(65.1%)(P<0.05);治疗后HP阳性率显著下降, 其根除率为95.5%; PCR可检出的小DNA量为0.1pg ,可检出常规方法不能检出的少量HP.结论: PCR是检测HP的为敏感的方法,有助于HP感染的诊断和HP根除的精确判断.
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泰州地区不同人群TTV及其抗体检测与分析
目的:研究泰州地区正常人群、职业献血员、肝炎患者、血透患者和肿瘤患者TT病毒(TTV)的感染率及临床特点.方法:用套式聚合酶链反应(Nested PCR)测定受检者血清TT病毒核酸(TTV DNA),用酶联免疫吸附(ELISA)法检测TⅣ抗体.结果:28例健康体检者,58例职业献血员,117例肝炎患者,35例血透患者,36例肿瘤患者血清TTV DNA阳性率分别为4.0%、8.6%、13.7%、48.6%和8.3%;TTV抗体阳性率分别为:3.5%、10.2%、15.6%、40.5%和7.2%.TTV的感染率分别为8.0%、10.3%、17.9%、57.1%和8.3%.结论:(1)泰州地区健康人群、献血员及不同疾病患者均存在TT病毒感染.(2)血清转氨酶活性不能作为TTV感染的敏感指标.(3)血透患者、肝炎患者和职业献血员TTV感染率明显高于普遍人群,是TTV感染的高危人群.
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荧光定量逆转录聚合酶链反应在HCV感染检测中的应用
目的了解荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)在丙型肝炎病毒(HCV)感染中的临床应用价值.方法用FQ-RT-PCR检测63份怀疑HCV感染的临床样本,并同时采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗HCV,用全自动生化检测仪测定丙氨酸转氨酶(ALT)水平,了解样本中HCV-RNA含量与抗HCV及ALT的相关性.结果63份样本中有40份HCV-RNA含量高于80拷贝/ml,57份抗HCV阳性,26例ALT异常,经统计分析每两者间具有明显相关性.结论FQ-RT-PCR技术检测HCV-RNA特异性强,灵敏度高,具有良好的应用价值.
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B族链球菌在孕晚期妇女生殖道的定植情况及其对新生儿结局的影响
目的:了解孕晚期妇女生殖道B族链球菌(group B Streptococcus,GBS)的定植情况,并探讨GBS定植对新生儿结局的影响.方法 :采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法对961例妊娠晚期(35~37周)孕妇阴道下1/3处及肛周分泌物进行GBS检测,根据检测结果 分为GBS阳性组与阴性组,对两组的新生儿结局进行统计学分析.结果:GBS在孕晚期妇女生殖道的定植率为10.41%(100/961).GBS阳性组新生儿肺炎、脑膜炎、败血症的发生率均显著高于阴性组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 :孕晚期妇女生殖道GBS定植可能会增加新生儿肺炎、脑膜炎及败血症的发生率,有必要将GBS筛查纳入孕妇常规产检项目并及时治疗,减少新生儿感染的发生.
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1号染色体异常的意义
目的:1号染色体异常在髓系疾病中及各种淋系疾病中均有较高发生率.研究对临床其意义.方法:819例患者进行核型分析,明确伴有1号染色体变异;选取30例伴有der(1;7)(q10;p10)异常核型的病例,进行细胞遗传学和实验室、临床特征分析;选取23例有保存染色体悬液标本的病例,应用聚合酶链反应(PCR)扩增基因组DNA,PCR产物纯化后进行正反向测序,分析RUNX1基因3,4,5,6,7号外显子序列的突变情况.结论:1.在髓系血液病中≤3种异常核型病例其总生存期高于＞5种异常核型病例,在淋系血液病中涉及1号染色体异常的病例均预后不良,与染色体异常数目无关. 2.1号染色体核型异常的髓系血液病中,AML、MDS的发生率明显高于MPN;1号染色体核型异常的淋系血液病中,ALL的发生率明显高于其它疾病.3.伴有der(1;7)(q10;p10)异常的MDS/AML患者有较高的转白风险;
