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  • 组织工程技术在人工阴道成形术的应用新进展

    作者:章艺群(综述);丁景新;华克勤(审校)

    临床上有很多疾病可表现为阴道缺如,扩张、牵引、手术是制造人工阴道的有效方法。阴道扩张已被推荐为一线治疗方案,扩张失败则进行手术治疗。以往的手术通常使用自体组织,如肠道、皮肤,手术损伤大,且人工阴道与正常阴道具有生理学差异。组织工程天然支架材料为阴道重建带来新希望。颊黏膜、阴道上皮和肌肉细胞作为种子细胞有助于恢复阴道正常解剖结构和生理功能,但仍有一定局限性。应用多能干细胞作为种子细胞结合可降解支架是一种值得探索的可行的办法。

  • 不同灭菌法对组织工程支架降解性和力学特性的影响

    作者:秦廷武;杨志明;张姝江;李秀群;刘军

    目的研究不同灭菌方法对组织工程聚合物支架的灭菌效果以及灭菌处理对聚合物支架降解性和力学特性的影响. 方法选择聚合物支架PGA编织网和PLGA纤维,经环氧乙烷、紫外线、75%酒精浸泡和γ射线照射4种方法灭菌后,用细菌培养检测灭菌效果;用粘度法测定聚合物粘度,以观察聚合物的降解性;用拉伸实验测定聚合物支架的力学特性. 结果经4种方法灭菌后,聚合物支架PGA编织网细菌检测均为阴性,都可达到灭菌目的.辐射剂量为15kGy的γ射线照射和紫外线照射灭菌都可导致PLGA粘度下降,且均具有显著性差异(P<0.05),即这两种灭菌方法使PLGA的降解明显;相反,75%酒精和环氧乙烷灭菌对PLGA粘度下降的影响没有显著性意义(P>0.05),即降解不明显.各种灭菌方法处理后支架的断裂伸长率差异无显著性意义(P>0.05);经15kGy的γ射线照射和紫外线灭菌后,支架的大载荷、断裂能量及抗拉强度均降低,差异具有显著性意义(P<0.05);经环氧乙烷和酒精浸泡灭菌方法处理的支架其大载荷、断裂能量、抗拉强度均无明显改变,差异无显著性意义(P>0.05). 结论环氧乙烷和酒精浸泡灭菌对支架降解性和力学特性影响均较小,是可降解聚合物支架较理想的灭菌方法.

  • 椎间盘组织工程支架材料研究的新进展

    作者:林舟丹;程昌志

    椎间盘突出症是骨科临床的常见病,是引起腰腿痛的主要病因,目前的治疗方法均有其局限性,且具有较高的致残率.保守治疗对早期椎间盘突出症有效,可以缓解临床症状,但不能逆转已经退行性变椎间盘组织的生物学功能.手术治疗应用广泛的是椎间盘髓核摘除术和脊柱内固定融合术,但长期随访发现大部分手术后患者术部邻近椎间盘相继出现退行性变或进一步加重.虽然人工椎间盘和人工髓核假体己应用于临床治疗多年,但其长期疗效及并发症有待进一步观察.近年来,组织工程技术置换或修复退行性变椎间盘的研究,让椎间盘突出症的治疗出现了新的希望.

  • 个体化组织工程支架CAD设计与RP制作的方法的研究

    作者:丁焕文;唐春雷;赵中岳;王迎军;尹庆水

    目的开发一种内部孔隙有规律地相互连通的组织工程支架的制作方法,避免以往通常采用的组织工程支架制作方法的缺陷.方法采用CT/MRI扫描三维重建立待修复组织的解剖模型,采用CAD软件设计支架内部结构建立解剖外形支架的实体模型,选择合适的快速成型方法精确制作组织工程支架原型.结果经CT/MRI图像三维重建、CAD设计建立模型指导立体光固化工艺成功制作了三维外形的支架.结论采用以上方法设计、制作个体化的组织工程支架是可行的.

  • 丝素蛋白支架对大鼠脊髓损伤后胶质瘢痕形成和功能改善的影响

    作者:王新宏;沈忆新;谢亮;范志海;张峰;左保齐;芦磊磊;张涛;霍伟伟

    脊髓损伤(SCI)后胶质瘢痕、空洞组织等为修复带来困难.研究结果表明丝素蛋白(SF)作为组织工程支架可支持多种细胞生长[1].本研究旨在观察SF为原料构建的多孔支架对脊髓损伤后星形胶质细胞(AS)和神经纤维再生等的影响.

  • 兔阴茎海绵体脱细胞基质的构建

    作者:冀晨阳;储海函;张金明

    组织工程支架--脱细胞海绵体基质筛选方法有待于进一步研究[1].本研究旨在检测脱细胞过程中形态学和组织学的变化,探讨阴茎海绵体脱细胞基质制备.

  • 纳米组织工程支架构建及细胞学研究进展

    作者:杨春喜;戴尅戎

    当材料颗粒或纤维等的尺度在1~100 nm范围内时会表现出与同质大尺度材料所不具有的特殊物理、化学性能,该尺度材料被称为纳米材料[1-4].纳米材料或普通材料经纳米修饰后,如:添加纳米级(1~100 nm)颗粒、纤维、凹槽、纹理等,所产生的明显有异于亚微米级以上尺度材料的理化性质我们称其为材料的纳米特性.体外实验研究表明生物材料的纳米特性对细胞的形态、行为、功能有着广泛的影响.提示我们可以利用纳米材料构建组织工程支架或对材料表面进行纳米修饰使其具有独特的纳米特性,从而在不同材料甚至材料的不同部位对细胞的排列、走行、分化方向和功能变化进行调节.

  • 芯壳型PEI/PLGA同轴电纺纤维的制备及其相关理化性能研究

    作者:徐宏宇;贾列妮;郭秋云;董瑜;胡祥刚;贾骏

    目的:利用同轴静电纺丝技术制备纳米级聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)与聚乙烯亚胺(PEI)芯壳型复合纤维,评价其相关理化性能。方法:运用同轴静电纺丝法制备壳层为PLGA,芯层为PEI的电纺纤维膜。扫描电子显微镜观察纤维膜表面形貌、激光共聚焦显微镜检测纤维同轴结构、接触角测量仪测定接触角、万能试验机测量纤维力学性能。结果:所制备的同轴芯壳型PEI/PLGA电纺纤维表面光滑、分布均匀、直径范围175~1076 nm,激光共聚焦显微镜下可见清晰的芯壳结构,接触角为72.45±2.02°,拉伸强度(3.65±0.35)Mpa、弹性模量9.0±1.70。结论:作为一种新型支架材料,采用同轴静电纺丝法可以制备PEI/PLGA芯壳结构的电纺纤维在组织工程领域有进一步的应用前景。

  • 丝素蛋白/聚己内酯三维支架:生物学性能的初步探索

    作者:李伟豪;李阳洋;董加洪;邓婕;许艳华;李松

    目的 研究丝素蛋白/聚己内酯(silk fibroin,SF/polycaprolactone,PCL)制备的三维支架的生物相容性及降解性能.方法 利用高压静电纺丝技术将SF/PCL溶液制备成三维支架式的纤维膜性结构.通过添加下颌骨髁状突软骨细胞(mandibular condylar chondrocytes,MCCs)培养液与无细胞培养液,将SF/PCL三维支架膜分为实验组、对照组.通过观测SF/PCL三维支架膜上软骨细胞的生长情况探索其生物相容性;通过体外降解实验观测1、2、3、4、5、6、7 d SF/PCL三维支架的纤维膜剩余重量,分析其降解性能.结果 扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)下观察显示,12 h时髁突软骨细胞在纤维膜上正常贴壁生长,1 d后逐渐分泌大量胞外基质.体外降解实验结果显示,无细胞添加组的剩余重量随降解时间的变化小于细胞添加组(P<0.05).结论 SF/PCL三维支架具有良好的生物相容性和可降解性,该研究为进一步研究生物支架修复软骨组织损伤或缺损提供了实验依据.

  • β-磷酸三钙/聚乳酸叠层生物材料的理化性能

    作者:汤顺清;毛萱;石海涛;牟善松;周长忍;裴国献;陈滨

    本文研究了β-磷酸三钙/聚乳酸叠层复合支架在体外37℃生理盐水中的降解过程,内容包括材料的重量、力学强度、聚乳酸分子量、材料周围环境的pH值、Ca2+浓度等参数随时间的变化,并证实材料理化特性适合于骨组织工程支架材料的要求.支架材料的生物相容性评价实验结果表明骨髓基质细胞与支架间有良好的亲和性.

  • 新型纺织技术制造生物支架效益更高

    作者:

    科技日报电,目前组织工程面临的一大难题是,如何大量生产支架材料,以满足临床病人的需求。据美国密苏里大学新消息,该校与北卡罗来纳州立大学的研究人员合作,发现3种新型纺织技术能用来生产组织工程支架,且可大规模生产,更具成本效益。

  • 2种去细胞方法制备大鼠脱细胞脊髓支架效果的对比研究

    作者:郭树章;蒋涛;任先军

    目的 比较脱氧胆酸钠+Triton X-100和脱氧胆酸钠+DNA+RNA酶2种脱细胞方法制备脱细胞的同种异体脊髓支架的效果.方法 取成年SD大鼠胸段脊髓2 cm,运用冻融+化学萃取的组织工程学方法(脱氧胆酸钠+Triton X-100和脱氧胆酸钠+DNA+RNA酶)处理大鼠脊髓组织,对处理后的脊髓支架分别进行HE染色,髓鞘染色和扫描电镜观察.结果 2种方法均较为完全地脱去了细胞和髓鞘成分,脊髓横断面上呈网状结构,未见细胞成分存留,纵切面上呈互相交错的管状通路;未见轴突、髓鞘和细胞核.结论 采用冻融+化学萃取的2种组织工程学方法均可制备出理想的天然脊髓支架,该支架与脊髓三维组织结构具有高度相似性,有望作为脊髓损伤后桥接物和神经组织工程种子细胞的支架.

  • 脱细胞脊髓支架的成分分析

    作者:郭树章;任先军;蒋涛;吴波

    目的 探讨同种异体脱细胞脊髓支架的制备方法并分析其可能含有的有效成分.方法 采用冻融+化学萃取方法制备脱细胞脊髓支架,光镜及扫描电镜观察其结构特征;用免疫组织化学法分析脱细胞支架的主要成分.结果 正常的大鼠脊髓组织经脱细胞处理后,清除了所有的细胞成分及髓鞘和轴突,扫描电镜显示保存了细胞外基质成分构成了三维支架结构.成分分析结果显示,存留的支架结构中含有层黏连蛋白(laminin, LN)、纤连蛋白(fibronectin, FN)、Ⅳ型胶原等诱导和促进神经再生、促进细胞黏附和增殖的重要成分.结论 脱细胞异体脊髓具有三维支架结构,含有诱导和促进神经再生的相关蛋白,有利于受损神经的再生及移植细胞的存活和增殖.

  • 纳米生物材料细菌纤维素在医学领域的应用研究

    作者:汤卫华;贾士儒;贾原媛

    细菌纤维素(BC)是某些细菌产生的纯度很高的纳米级纤维素,与植物纤维素相比,具有高结晶度、高纯度、高机械强度和良好生物相容性等独特的性质.BC作为一种新型的生物医学材料,在人造血管、组织工程支架材料和伤口敷料等领域具有良好的应用前景.但是BC的大规模产业化应用还存在一些问题,如成本高、产量低和机械稳定性差等需要解决.

  • 组织工程研究与开发中的冻存技术

    作者:秦廷武;杨志明

    综述了有关组织工程种子细胞、支架材料和工程化组织的冷冻保存问题.对冻存技术在组织工程研究和开发中的重要作用进行了阐述.指出低温保存可能是长时间保存有活性的组织工程产品的有效方法之一.组织工程种子细胞采用低温冷冻保存;组织工程支架材料用冷冻干燥保存;工程化组织的保存采用玻璃化冷冻保存方法.

  • 原位交联透明质酸水凝胶的制备及体外生物相容性研究

    作者:梁嘉碧;李俊;汪婷;梁雨虹;邹学农;周光前;周治宇

    目的 制备原位交联透明质酸水凝胶,并初步评价其体外生物相容性.方法 采用醇钠-酰氯法将丙烯酰氯与聚乙二醇反应,制得交联剂聚乙二醇二丙烯酸酯(polyethylene glycol acrylate,PEGDA);采用傅里叶变换红外光谱仪和核磁共振光谱仪检测其分子结构.取透明质酸经化学修饰制备巯基化透明质酸(hyaluronic acid thiolation,HA-SH),采用Ellman法检测其巯基含量并计算巯基化产率.采用PBS将HA-SH和PEGDA分别配制成一定浓度(w/v)溶液,其中HA-SH浓度为0.5%、1.0%及1.5%,PEGDA为2%、4%及6%,按照不同比例混合,获得原位交联透明质酸水凝胶,记录交联反应时间.取1.5%HA-SH、4%PEGDA制备的原位交联透明质酸水凝胶,以浸提法检测其细胞毒性;然后接种人BMSCs并培养72 h,荧光显微镜下观察细胞形态及生长情况,并行活/死细胞染色观察,评价材料生物相容性.结果 傅里叶变换红外光谱仪分析显示,PEGDA中大多数羟基被丙烯酸酯基取代;核磁共振光谱仪分析显示,PEGDA在5~7 ppm出现3组表征丙烯酸酯基的特征峰.HA-SH的巯基化产率为65.4%.2%~6%PEGDA与0.5%~1.5%HA-SH经不同比例混合后,交联反应在2~ 70 min内完成;不同浓度及比例交联形成的水凝胶均呈透明状.透明质酸水凝胶浸提液细胞毒性分级为1级,满足生物医用材料的要求.培养72 h后,BMSCs在透明质酸水凝胶中分布均匀、生长良好,活/死细胞染色显示以绿染活细胞为主.结论 原位交联透明质酸水凝胶具有细胞毒性低、体外生物相容性好、交联时间可控的优点,有望成为组织工程种子细胞载体或组织缺损填充材料.

  • 基质细胞衍生因子1与组织工程支架复合植的研究进展

    作者:高寰宇;李彦林;贾笛;余洋;王坤

    目的 综述基质细胞衍生因子1(stromal-derived factor 1,SDF-1)与组织工程支架复合移植的研究进展.方法 查阅国内外有关SDF-1与不同组织工程支架复合移植的相关文献,回顾SDF-1趋化干细胞的主要机制与作用,并综述不同类别组织工程支架与SDF-1复合修复组织或器官损伤的作用及效果.结果 SDF-1与组织工程支架复合后能发挥趋化多能干细胞作用,但作用机制尚未完全清楚;其在体内应用的效果有待继续研究.结论 SDF-1与组织工程支架复合用于原位组织或器官修复已取得一些进展,今后需在SDF-1对干细胞的趋化机制及增殖分化的影响方面进行探索.

  • 脱细胞技术及其在组织工程中的应用研究进展

    作者:赵宇;于淼;柏树令

    目的 对获取组织细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的脱细胞方法及脱细胞ECM支架在组织工程领域的应用进行综述. 方法 查阅近年国内外相关文献,对脱细胞方法进行归纳和分类,分析灭菌方法对脱细胞支架的影响,提出脱细胞程度的评价标准,总结脱细胞ECM支架在不同组织器官中的应用. 结果 脱细胞方法主要有物理法、化学试剂法和生物制剂法,不同的脱细胞方法对细胞去除程度及ECM成分的影响不同,需要根据组织和脱细胞方法的特点选择佳脱细胞方法,以达到理想效果. 结论 选择合适的脱细胞方法对制备组织工程所需的生物材料非常重要.

  • 脱钙皮质骨基质的拉伸力学性能研究

    作者:刘国明;张忆;江燕林;黄富国;秦廷武

    目的 探讨脱钙皮质骨基质厚度与拉伸力学性能的关系,为将其作为组织工程支架材料奠定实验基础. 方法 取市售新鲜小牛胫骨,常规快速脱钙制备脱钙皮质骨基质,大体观察其颜色、质地等物理性状,并进行脱钙检测.将脱钙皮质骨基质沿径向纵切成不同厚度的片材,并根据厚度分为4组(n=16),分别为A组100~300 μm,B组300~500 μm,C组500~700 μm,D组700~1 000 μm;对每组标本进行拉伸性能和组织学观测. 结果 大体观察显示脱钙皮质骨基质经H2O2处理后呈乳白色,柔韧性好,富有弹性.脱钙皮质骨基质的脱钙率达97.6%.A组强度及弹性模量明显小于B、C、D组(P<0.05),B、C、D组间比较差异均无统计学意义(P>0.05);脱钙皮质骨基质刚度随厚度增加呈逐渐增大趋势,A组刚度显著低于B、C、D组(P< 0.05),B、C组低于D组(P<0.05),B、C组间差异无统计学意义(P>0.05);各组极限应变差异均无统计学意义(P> 0.05).组织学观察各组均可见典型骨单位结构,其大直径范围为102~325 μm,平均大直径为182 μm. 结论 骨单位的完整性对脱钙皮质骨基质的力学性能有重要影响;脱钙皮质骨基质作为组织工程支架材料,在厚度> 300 μm时可保持其拉伸力学性能.

  • 脂肪干细胞及血管束植入法联合应用对组织工程支架体内血管化的影响

    作者:姬文晨;杨佩;张越林;王春生;倪建龙;张永涛;王坤正

    目的 探讨脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)及血管束植入法联合应用对组织工程支架体内血管化的影响,为临床应用组织工程支架复合物治疗股骨头缺血性坏死提供理论依据. 方法 取4月龄SD大鼠,分离培养ADSCs,并行成骨诱导鉴定.取第3代ADSCs接种于纳米羟基磷灰石/聚酰胺66 (nano-hydroxyapatide/polyamide-66,nHA/PA66)支架上制备复合支架,扫描电镜观察细胞与支架复合情况.取4月龄SD大鼠24只,体重350~400 g,随机分为3组,每组8只.A、B组分离大鼠双侧腹壁下动、静脉,分别将血管束植入培养10d的复合支架及单纯nHA/PA66支架;C组将培养10d的复合支架包埋入双侧股四头肌中.术后2、4周每组取4只大鼠支架标本行HE染色及CD34免疫组织化学染色观察,检测其血管生成情况. 结果 所分离细胞经鉴定为ADSCs.扫描电镜观察示复合培养10d,细胞数目增多,形态完全伸展,呈长梭形.术后2、4周,HE染色及免疫组织化学染色均显示A组支架植入动、静脉周围有大量血管生成,血管数量及管壁成熟度均优于同一时间点的B、C组.术后2、4周,A组血管密度和血管直径均显著大于B、C组,B组大于C组,差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 ADSCs和血管束植入法联合应用可以促进组织工程支架体内血管化程度.

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