首页 > 文献资料
-
鸭乙型肝炎病毒Ⅹ样开放读码框架及其表达蛋白
随着鸭乙型肝炎模型越来越广泛地应用于嗜肝病毒的生命周期、慢性乙型肝炎病毒感染的规律和抗病毒药物筛选等研究,鸭乙型肝炎病毒也得到了更深入的认识,尤其是在鸭乙型肝炎病毒的基因结构上.目前已经知道鸭乙型肝炎病毒在跟哺乳动物嗜肝DNA病毒X基因相似的区域存在X样开放读码框架,也可以表达一种跟X蛋白功能相近的X样蛋白.本文就X样开放读码框架和X样蛋白的发现过程,X样蛋白的组织学定位,以及X样蛋白功能的研究进展作一综述.
-
改良菌落PCR法筛选、鉴定DHBV部分核衣壳蛋白基因的重组隆
[目的]优化并验证改良菌落PCR程序的有效性.[方法]经常规PCR扩增DHBV编码核衣壳蛋白与DNA多聚酶重叠区的部分核苷酸片段(DHBc-dp),纯化特异性扩增产物并连入pMD 18-T载体,转化DH5α感受态细胞后涂布于Amp加倍的LB平板,记为亲代样品(PS),37℃培养12h,室温放置4h～8h.无菌操作挑取细菌转入优化的PCR反应液扩增、鉴定；余菌体室温放置完成二次生长.PS剩余PCR鉴定产物继代转化并涂布LB平板,记为继1代样品(F1S),同样进行菌落PCR鉴定.选取PS和F1S中PCR强阳性样品进行扩增及菌液PCR、质粒PCR、质粒酶切和测序鉴定.[结果]挑菌后的菌落二次生长成面积扩大的菌苔；优化菌落PCR反应体系保持、甚或提高了原有方法的高度特应性和稳定性；携外源目的片段的重组质粒在菌落PCR反应过程中能保持结构完整,并能在继代转化宿主细胞中忠实复制与扩增.[结论]改进的菌落PCR程序,继承了既有菌落PCR程序鉴定重组克隆的特异性和高效性,并能有效预防阳性转化子的丢失；同时,在增加优势抗性菌落生长量的前提下有效地抑制了卫星菌落的生长.
-
HBV与HCV感染及相关标志物
一、HBVHBV是嗜肝DNA病毒科(hepadnaviridae)正嗜肝DNA病毒属(orthohepadnavirus)的一员,该属其他成员包括土拨鼠肝炎病毒(woodchuck hepatitis virus,WHV)及地松鼠肝炎病毒(dround squirrel hepatitis virus,GSHV).鸭乙型肝炎病毒(duck hepatitis B virus,DHBV)则属于同科中禽嗜肝DNA病毒属(avihepadnavirus).
-
鸭乙肝模型氧化应激反应及金丝桃苷的干预
目的:观察鸭乙肝病毒感染所致稚鸭血清及肝脏氧化应激状态的改变及金丝桃苷的干预作用.方法:实验于2006-03/07在中国医学科学院生物技术研究所以及解放军第三○一医院老年医学研究所进行.①实验分组:44只1日龄北京稚鸭随机分为7组:正常组,模型组,金丝桃苷15,30,60 mg/(kg·d)剂量组,拉米夫定50 mg/(kg·d)组和恩替卡韦0.25 mg/(kg·d)组.其中正常组5只,金丝桃苷15.30,60 mg/(kg·d)剂量组各7只,其余各组6只.②实验干预:除正常组外,其余6组每只动物经胫静脉注射鸭乙肝病毒阳性血清0.2 mL,第7天开始灌胃给药,2次/d,给药10 d,正常组和模型组给予等量生理盐水.停药后第3天处死动物检测相关指标.③实验评估:黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶活性、非酶促反应法检测谷胱甘肽过氧化物酶活性,硫代巴比妥酸法检测丙二醛含量.结果:纳入稚鸭44只,在模型制备及后期干预中无动物死亡,全部纳入统计分析.与正常组相比,模型组肝匀浆超氧化物岐化酶活性、谷胱甘肽过氧化物酶活性及丙二醛含量显著降低(P＜0.01,P＜0.05),而血清谷胱甘肽过氧化物酶活力及丙二醛含量显著升高(P＜0.01,P＜0.05);与模型组相比,金丝桃苷治疗组肝匀浆超氧化物岐化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性及丙二醛含量显著升高(P＜0.01,P＜0.05),然而血清谷胱甘肽过氧化物酶活性及丙二醛含量显著降低(P＜0.01,P＜0.05).结论:鸭乙肝病毒感染引起稚鸭肝脏氧化应激损伤,金丝桃苷可有效的逆转肝损伤.
-
芒果苷对DHBV感染鸭脾细胞内cAMP,cGMP水平影响的实验研究
目的:观察芒果苷对DHBV感染鸭脾细胞内cAMP,cGMP含量的影响.方法:建立DHBV感染的鸭乙肝动物模型,模型鸭随机分为芒果苷高、中、低剂量组及模型组,同时另设正常对照组,采用ELISA法检测各组DHBV感染鸭脾细胞内CAMP及cGMP的含量.结果:DHBV感染后,鸭脾细胞内cAMP含量明显降低(p<0.05),而cGMP含量无明显变化;芒果苷各剂量均可显著增加DHBV感染鸭脾细胞内CAMP的含量(P<0.05),但对cGMP含量的影响不明显;芒果苷中、低剂量明显提高DHBV感染鸭脾细胞内cAMP/cGMP比值(P<0.05).结论:芒果苷可以调节DHBV感染鸭脾细胞CAMP的含量及cAMP/cGMP比值,这可能是芒果苷调节DHBV感染鸭机体免疫亢进、维持机体免疫稳定及降低肝细胞炎症发生的一条途径.
-
金丝桃苷对鸭乙肝病毒感染的保肝作用
目的:观测金丝桃苷(Hyp) 对鸭乙肝病毒(DHBV)感染所致肝损伤的保护作用. 方法:一日龄北京雏鸭接种DHBV阳性血清,7d后灌胃给药10日,停药后第3天检测肝匀浆和血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)及血清中总胆红素(TBil)、白蛋白(ALB)、碱性磷酸酶(ALP)、胆碱酯酶(ChE)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量,另行肝组织病理学检查.结果:模型组血中TBil 、ALP、LDH和 ALB及肝匀浆中ALT和AST活力显著升高,肝脏病理改变明显,肝索紊乱,肝细胞桥接坏死,汇管区大量炎细胞浸润.Hyp组血清中TBil和ALP及肝匀浆ALT均显著降低,肝病理改变较轻.结论:雏鸭感染DHBV模型可见肝细胞严重受损,肝功能异常,肝脏和血中各种酶含量明显升高.Hyp对DHBV感染所致雏鸭肝损伤有较好的保护作用.
