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磷酸化蛋白质检测技术研究进展
蛋白质的磷酸化修饰是生物体内重要的共价修饰方式之一,其磷酸化和去磷酸化这一可逆过程,受蛋白激酶和磷酸酶的协同作用控制.酶蛋白的磷酸化是在蛋白激酶的催化下,由ATP提供磷酸基及能量完成的,而去磷酸化则是由磷蛋白磷酸酶催化的水解反应.在哺乳动物细胞生命周期中,大约有1/3的蛋白质发生过磷酸化修饰;在脊椎动物基因组中,有5%的基因编码的蛋白质是参与磷酸化和去磷酸化过程的蛋白激酶和磷酸(酯)酶[1].真核细胞的蛋白质磷酸化位点主要发生在丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)和酪氨酸(Tyr)残基侧链的羟基上,不同的蛋白激酶可识别和修饰不同蛋白质的不同位点,生物体内能被磷酸化修饰的蛋白质组成磷酸化蛋白质组(phos-phoproteome),磷酸化蛋白质组将是蛋白质翻译后修饰的研究热点.
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蛋白组学中非2D-PAGE的一些新技术
1 引言人类细胞中的全部基因称为基因组,由这些基因编码和调控的蛋白质则称为蛋白质组.人类基因组中有30,000个基因,而人类蛋白组却有100,000多个蛋白质,产生这么多的蛋白质与蛋白质有着复杂的翻译后修饰有关,如磷酸化,乙酰化,糖基化等等.面对如此几倍于基因数量的蛋白质,蛋白组的研究急需高分辨率、高通量和全自动化的蛋白质在线分析和鉴定技术.目前,双相聚丙稀酰氨凝胶电泳(2D-PAGE)与质谱(MS)是分辨和鉴定蛋白质常用的方法,同时也存在许多缺点,人们正在不断改进和发展新技术,加速蛋白组的研究进展.
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转录因子FoxO1的修饰调节效应及在心血管疾病中的作用
FoxO1是FoxO亚家族中早发现的转录因子,其转录活性受到多种蛋白修饰的调节.近年研究显示,FoxO1在多种心血管疾病的发生、发展中都发挥着重要作用.本文在此对FoxO1的修饰调节效应及其在心血管疾病中的作用作一综述.
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蛋白组学在心血管方面的研究进展
蛋白组学是在基因组学之后又一"组学"其发展之迅速,是由于其能够较为全面的考察蛋白层面的表达情况,有利于获得各种蛋白,多肽,固子等信息,从而对相关机理进行更深入的研究.
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SUMO修饰在眼科的研究现状及进展
小泛素相关修饰物( small ubiquitin related modifier,SUMO)修饰是一种蛋白翻译后修饰,又称为小泛素相关修饰或类泛素修饰,与目标蛋白共价结合调控细胞进程,如蛋白与蛋白之间的相互作用、蛋白与DNA之间的相互作用、转录因子的激活等。 SUMO修饰能够升高或抑制靶蛋白转录活性,为研究真核细胞基因表达的调控提供了新线索。我们将近期SUMO修饰在眼科领域的研究进展做以综述。
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晶体蛋白与白内障发病机制研究
白内障是严重影响人类健康的常见病、多发病.研究白内障的病因学及影响因素,是预防和治疗该病的有力措施.白内障主要是因晶状体的透光性改变所引发;晶状体的透光性是由晶体蛋白的有序结构所决定的.本文综述近年来有关晶体蛋白的组成与结构、翻译后修饰及热休克蛋白与白内障发病机制的关系.
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牙本质涎磷蛋白的研究进展
牙本质涎磷蛋白及其蛋白剪切产物—牙本质涎蛋白和牙本质磷蛋白是在牙本质发育、矿化中起重要作用的非胶原蛋白.关于牙本质涎磷蛋白的结构、功能、表达以及翻译后修饰等均有大量的研究,使之对牙本质涎磷蛋白的认识不断深入.本文就近年来关于牙本质涎磷蛋白的研究现状作一综述.
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SUMO化在肿瘤发生中的作用及机制
蛋白质翻译后修饰是细胞蛋白质发挥生物学功能的重要调节机制之一,常见的修饰类型有磷酸化、甲基化、泛素化、乙酰化及SUMO化.SUMO化是指SUMO蛋白分子通过成熟、激活、结合和靶蛋白共价连接,并使靶蛋白具有特殊功能的过程,是一种重要的翻译后修饰,参与调节几乎所有的细胞功能与病理过程.SUMO化修饰通过调节肿瘤细胞增殖、迁移、衰老,以及炎症及血管生成信号影响肿瘤发生、发展及转归.异常的SUMO化修饰能够导致人类包括痛症在内的许多疾病的发生,因此SUMO化修饰的研究对癌症的预防和治疗都具有重要的意义.
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超微量蛋白分析仪在微量树突细胞中ERK蛋白及其磷酸化修饰检测中的应用研究
目的:建立利用超微量蛋白分析仪检测微量细胞样品中低丰度细胞外调节蛋白激酶(ERK)及其磷酸化修饰的应用方法,为在科研工作中应用该仪器提供实验依据。方法:采用配制样品溶液,上样、分离、固定、免疫杂交和软件定量等实验步骤,进行化学发光检测,对不同数目树突状细胞中ERK蛋白及其磷酸化修饰的定性及定量结果进行分析。结果:超微量蛋白分析仪能够检测到低至2000个细胞中的目的蛋白并获得定量数据,该仪器还能够有效分辨出20000个细胞中ERK蛋白不同形式的磷酸化修饰。结论:超微量蛋白分析仪有效完成了对低丰度细胞外调节蛋白以及蛋白质翻译后修饰检测。
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乳酸脱氢酶A水平高低成为肿瘤诊断的指标
数十年来,科学家对乳酸脱氢酶A的探索主要集中在它是如何产生的,但对如何找到"清除"或"削弱"它的作用机制则束手无策,即对乳酸脱氢酶A的基因转录水平调控比较了解,但对它翻译后修饰水平的调控却知之甚少.