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遵义市及周边地区博尔纳病毒感染分子流行病学研究
目的 探讨博尔纳病毒(BDV)在遵义市及周边地区流行状况.方法 采用荧光定量巢式反转录酶聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR)检测43例病毒性脑炎(VE)患者、9例多发性硬化(MS)患者、7例急性吉兰-巴雷综合征(GBS)患者、5例帕金森病(PD)患者、98名健康人外周血液单个核细胞(PBMC)、300只山羊PBMC中BDV p24基因片段.对阳性产物进行基因序列测定,氨基酸顺序及同源性分析,并分析BDV分子流行病学特点.结果 BDV p24基肉片段阳性率VE患者为13.95%,MS患者为22.22%,而GBS和PD患者及健康人中未检出.VE和MS患者检出率明显高于健康人(0%,P<0.05),山羊BDV p24基冈片段阳性率为0.67%,与健康人对比差异尢统计学意义(P>0.05);VE和MS患者测序结果 相同与GenBank提供的strain V毒株比较同源性为96.51%,有3个位点出现一致性沉寂突变,BDV/MDCK毒株比较同源性为97.67%,有2个位点出现一致性沉寂突变,与C6BV毒株比较有2个位点出现一致性沉寂突变,其山羊中BDV p24基因片段测序结果 与GenBank提供的strain V毒株比较同源性为96.51%,有3个位点出现一致性沉寂突变,与BDV/MDCK毒株比较同源性为96.51%,有3个位点出现一致性沉寂突变,与C6BV毒株比较同源性为96.51%,有3个位点出现一致性沉寂突变,但所编码的氨基酸没有改变.结论 遵义市及周边部分地区VE、MS可能与BDV感染有关,人类感染BDV可能存在动物源性.
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博尔纳病毒感染的研究进展
博尔纳病(Borna disease,BD)早见于19世纪的德国,是一种在战马中流行的伴有神经精神症状的脑膜脑炎,致死率较高,这种疾病首次在德国萨克森州博尔纳镇暴发,后以该镇名字来命名.
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与精神疾病有关的博尔纳病毒——读者来信
编辑先生:精神分裂症等精神疾病至今病因尚未完全明了,国外有报道认为中枢神经系统病毒感染是导致精神疾病的重要因素,博尔纳病毒(BDV)即为其中之一.希望能对此作此介绍,以增加我们的知识面,谢谢.
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博尔纳病毒在宁夏的人和动物感染的检测
目的 对临床VE患者以及其本人接触动物的检测,探讨BDV在宁夏地区的感染状况及感染机制,并分析BDV核酸和转化后的氨基酸序列,构建病毒种系发生的来源.方法 应用巢式逆转录酶聚合酶链反应结合荧光定量PCR检测患者及其接触的动物的外周血单核细胞的p24和p40基因片段.对检测阳性标本进行连接测序,应用MEGA和DnaSP4.0软件对测序结果同国外的标准株HE80、H1766、strain V等进行核酸和氨基酸序列对比分析,并构建病毒基因的系统发生树.结果 在60例VE患者及其接触的710绵羊中,PCR检测发现有3例阳性,阳性检出率5%;9头绵羊阳性,阳性检出率为1.27%.基因聚合分析显示人和动物BDV的核酸序列和编码氨基酸序列与德国马源性的HE80株同源性高达100%,重构基因系统发生树可见宁夏VE患者和牛羊BDV核苷酸序列与国外的标准株形成宁夏-德国-日本的混合支系,同时宁夏绵羊BDV序列也形成了一个独立的支系.结论 宁夏地区人和牛羊存在BDV的自然感染,并且人的感染存在动物源性,其传染途径很可能是呼吸道的传播可能引起脑炎的非特异性的临床症状,病毒在种系发生中与德国马源性HE80株有极高的同源性,病毒可能由国外引入本土,不排除病毒株变异的可能,人和绵羊之间存在相互传染的可能.
关键词： 博尔纳病毒 感染 巢式逆转录实时荧光定量PCR -
贵州遵义地区82只健康蝙蝠脑组织博尔纳病毒核蛋白检测
目的 观察贵州遵义地区蝙蝠脑组织博尔纳病毒(BDV)感染情况.方法 采用Western blotting法检测贵州遵义地区82只健康蝙蝠脑组织中BDV核蛋白.结果 蝙蝠脑组织BDV核蛋白阳性率为12.2%(10/82).结论 贵州遵义地区健康蝙蝠存在BDV感染.
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江西及周边地区神经系统疾病患者博尔纳病毒感染的分子流行病学研究
目的 探索博尔纳病毒(BDV)在江西及周边地区感染,导致神经系统疾病的分子流行病学状况.方法 采用聚合酶链反应检测30例病毒性脑炎(VE)的患者、10例多发性硬化(MS)的患者、10例急性吉兰-巴雷综合征(GBS)的患者、10例帕金森病(PD)患者、60例健康受试者外周血液中的单个核细胞(PBMC)、60只山羊的PBMC中BDV p24基因片段比较,对其阳性产物进行相关的基因序列测定,氨基酸排列顺序及同源性的相关分析,并探讨其BDV分子流行病学特点.结果 PBMC BDV p24基因片段检出率比较, VE和MS患者高于健康受试者,差异有统计学意义(P <0.05),而山羊检测BDV p24的基因片段阳性率为1.67%.VE和MS患者的BDV p24基因片段测序结果相一致,且与strain V毒株同源性比较为95.73%;而与BDV/MDCK毒株同源性比较为97.89%.山羊中测序BDV p24基因片段结果与GenBank提供的strain V毒株同源性比较为95.72%,与BDV/MDCK毒株同源性比较为96.38%;且与C6BV毒株同源性比较为96.49%,但其所编码的氨基酸没有实质性改变.结论 BDV可能是新发感染性疾病中的一种病原体,与人类某些神经系统疾病(如VE、MS)的发生可能存在密切关系,江西及周边地区某些神经系统疾病患者中BDV感染可能存在动物源性,尚待进一步深入研究及分析,从而提高对该类疾病的认识,以便更有效地对其进行防治.
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PCR检测贵州遵义地区蝙蝠BDV-P40基因片段及同源性分析
目的 探讨贵州遵义地区蝙蝠是否存在博尔纳病毒(BDV)自然感染,分析比较其与国外标准株的同源性.方法 采用实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测82只蝙蝠额颞叶脑组织中BDV-P40基因片段,将阳性扩增产物测序,与国外标准株比较同源性.结果 蝙蝠额颞叶脑组织中BDV-P40基因片段阳性率为12.2％(10/82).贵州遵义地区蝙蝠自然感染的BDV-P40核苷酸序列与标准株Strain V和H1766同源性均为96.2％,与He/80比对同源性为94.9％,所编码的氨基酸无改变.结论 贵州遵义地区蝙蝠存在BDV自然感染,该地区BDV-P40核苷酸序列与Strain V和H1766存在高度同源性,人感染BDV可能为动物源性.
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博尔纳病毒核蛋白的原核表达、纯化及鉴定
目的 构建、表达、并纯化重组博尔纳病毒核蛋白(Borna disease vires,BDV),并鉴定该蛋白.方法 通过PCR反应从博尔纳病毒cDNA中扩增博尔纳病毒核蛋白P40基因,构建博尔纳病毒核蛋白P40基因重组质粒pET-14b-BD-VP40,转化大肠杆菌,IPTG诱导融合蛋白的表达,His-tag亲和层析纯化该蛋白,SDS-PAGE分析其表达量、表达形式和纯度;Western-blot法鉴定该蛋白.结果 成功构建蓖组质粒pET-14b-BDVP40,酶切鉴定、核酸序列分析正确,亲和层析纯化后纯度可达90%,Western-blot表明重组蛋白能与博尔纳病毒核蛋白单克隆抗体特异性结合.结论 在大肠杆菌中成功表达了可溶性的pET-14b-BDVP40融合蛋白,为进一步研究博尔纳病毒核蛋白作用机制及开发相应血清学检测试剂盒提供基础.
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Borna病病毒与精神分裂症的关系研究
目的 探讨贵州省部分地区博尔纳病病毒(Borna diseoce vicus)在精神分裂症患者中的感染情况及与疾病发生的相关性.方法 采用巢式逆转录荧光定量PCR法对来自于贵州省部分地区(遵义、毕节、铜仁)的30例精神分裂症(SCH)患者及100例健康人的外周血液单核细胞(PB-MC)中BDV p24基因片段进行检测,对阳性产物进行纯化、克隆、测序,用软件对所测定的序列结果进行同源性分析.结果 精神分裂症患者中BDVp24基因片段阳性率为6.7％ (2/30);健康体检者中未检出,二者检出率比较无统计学差异(P＞0.05).精神分裂症患者测序结果与GenBank提供的strain V毒株、C6BV毒株、He80/FR病毒株进行比较,突变率均为3％,均有3个位点出现一致性沉寂突变.与1 766毒株进行比较,突变率为2％,有2个位点出现一致性沉寂突变,即与1 766毒株的亲缘关系近.结论 本研究发现30例精神分裂症患者中检出BDVp24基因片段阳性2例,而健康人中未检出,说明Borna病病毒感染可能与精神分裂症有关,两组间BDV检出率无统计学差异,可能与所采标本地区较局限或标本量少有关.
