首页 > 文献资料
-
新疆东部地区子痫前期与AQP9的相关性分析
目的 通过检测88例新疆东部子痫前期妇女胎盘中水通道蛋白9(Aquaporin9 AQP9),为进一步揭示子痫前期病因奠定基础.方法 通过免疫组化,ELISA等方法对88例新疆东部不同病变程度的子痫前期妇女胎盘中AQP9进行定量分析,揭示AQP9的表达与病变的相关程度.结果 AQP9在88例妊娠妇女胎盘中有不同程度的表达,20例正常妊娠妇女的表达程度显著低于68例子痫前期的妇女,34例轻度子病前期的妇女AQP9的表达程度显著低于34例重度子痫前期及子痫妇女(P＜0.05).结论 AQP9在新疆东部子痫前期妇女胎盘的表达与疾病严重程度具有正相关性,为子痫前期预测研究奠定基础.
-
肠润方对功能性便秘大鼠结肠黏膜AQP3、AQP9表达的影响
目的:观察肠润方对功能性便秘模型大鼠结肠黏膜AQP3、AQP9表达的影响,探究其调控AQP3、AQP9表达的分子机制.方法:60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组(麻仁丸组)、肠润方组、肠润方联合P38MAPK抑制剂SB203580组.用复方地芬诺酯制造大鼠便秘模型,采用免疫组织化学及实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测大鼠便秘模型近端及远端结肠黏膜AQP3、AQP9的表达;Western Blot检测信号传导通路相关分子P38MAPK及P-P38MAPK的表达.结果:造模成功后,模型组近端结肠黏膜AQP3表达较空白组明显上升,而远端结肠黏膜AQP9表达较空白组明显下降(t值分别为3.148和7.069,P值均＜0.01);经肠润方及麻仁丸治疗后,近端结肠黏膜AQP3表达下降,而远端结肠黏膜AQP9表达上升,与模型组比较,差异均有统计学意义(t值分别为3.175和9.31,P值均＜0.05);各组间远端结肠黏膜AQP3表达及近端结肠黏膜AQP9表达比较,差异均无统计学意义(F值分别为1.639和2.544,P值均＞0.05).肠润方联合P38MAPK抑制剂SB203580治疗后,近端结肠黏膜AQP3 mRNA水平显著上升(t=5.922,P＜0.01);而远端结肠黏膜AQP9 mRNA水平显著下降(t=4.038,P＜0.01);P-P38/P38蛋白相对表达水平显著下降(t=19.419,P＜0.01).结论:肠润方对便秘模型大鼠的通便作用是通过抑制近端结肠AQP3表达及促进远端结肠AQP9表达来实现的,其调控机制可能与激活P38磷酸化,进而激活P38MAPK信号通路有关.
-
AQP9在As2O3联合AZT治疗肝癌中的作用探讨
目前,化疗仍然是肝癌治疗的主要手段,将三氧化二砷(As2O3)应用于肝癌的治疗虽大大地提高了疗效,但是毒副作用较大.为此,本实验组将3'-叠氮-2',3'-脱氧胸腺核苷(AZT)作为As2O3的增敏剂与As2O3联合起来用于肝癌的治疗,在保证疗效的基础上有效地减少了As2O3的用量,但AZT的增敏机制未明,水通道蛋白9 (AQP9)的深入研究为明确AZT的增敏机制提供了重要线索.
-
子痫前期患者胎盘、胎膜组织中水通道蛋白9的表达变化
目的:观察水通道蛋白9(AQP9)在子痫前期患者胎盘、胎膜组织中的定位、mRNA及表达变化,分析AQP9在子痫前期发病中发挥的作用.方法:选取本院2014年3月至2015年5月收治的100例孕妇作为研究对象,其中有50例为正常晚期妊娠孕妇,将这50例作为对照组;另外50例为子痫前期孕妇(孕周38 ～ 42周),轻度子痫前期孕妇与重度子痫前期孕妇各25例,将这50例子痫前期患者作为观察组.利用免疫组织化学增强聚合物法对AQP9的定位情况进行测定;利用逆转录-聚合酶链反应对AQP9 mRNA进行检测;利用蛋白印迹技术对蛋白的表达水平进行检测;通过使用凝胶蛋白定量分析软件对蛋白灰度值进行测定.结果:(1)AQP9在羊膜上皮细胞、绒毛膜滋养细胞和合体滋养细胞上定位;(2)两组患者的胎膜组织和胎盘中都有AQP9mRNA表达;(3)观察组胎膜组织、胎膜中AQP9的灰度值都要高于对照组,差异显著,具有统计学意义(P＜0.05),而且观察组中重度子痫前期患者胎膜组织、胎膜中AQP9的灰度值要高于轻度子痫前期患者,对比差异,具有统计学意义(P＜0.05).结论:子痫前期患者AQP9的表达水平得到较大程度的提升,AQP9是造成子痫前期发病的主要因素.
-
哺乳动物细胞中调控AQP9磷酸化的蛋白因子及对砷摄入影响的研究
目的 探讨蛋白激酶p38,蛋白激酶C对几种哺乳动物细胞中水通道蛋白9磷酸化的调控作用,以及这些蛋白因子对细胞中砷摄入含量的影响.方法 采用免疫印迹法和免疫共沉淀技术分别检测细胞株中p38,蛋白激酶C和水通道蛋白9表达水平及其磷酸化水平.电感藕合等离子体质谱法(ICP-MS)测定细胞内砷含量.结果 在ECV-304,AsRE,HepG2和L-02细胞株中,p38蛋白及其磷酸化表达水平在砷的刺激下随时间增加而有显著上升,相同条件下蛋白激酶C末见明显变化.当抑制细胞中p38活性,除了L-02细胞中水通道蛋白9的磷酸化水平受到抑制外,其余细胞中水通道蛋白9的蛋白含量及磷酸化水平都未见明显变化.砷含量也只在L-02细胞中看到有较显著的下降.结论 水通道蛋白9磷酸化水平影响砷进入细胞的速度与含量,但不同的细胞中水通道蛋白9的磷酸化调控机制有所差异.p38蛋白激酶在正常肝细胞L-02中显示对水通道蛋白9磷酸化有一定的调控作用,蛋白激酶C则在本实验条件下未见入调控砷的入胞机制.
-
注射用七叶皂苷钠联合脐带间充质干细胞移植改善脑梗死大鼠神经功能
背景:单纯的脐带间充质干细胞移植修复受损脑组织的作用并不十分理想.目的:观察脐带间充质干细胞移植联合注射用七叶皂苷钠治疗大鼠脑梗死的效果.方法:应用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞模型,随机分为对照组、细胞移植组、七叶皂苷钠+ 细胞移植组,分别尾静脉注射细胞培养液、1×1010 L-1 脐带间充质干细胞悬液、尾静脉1×1010 L-1 脐带间充质干细胞悬液同时经腹腔注射七叶皂苷钠5 mg/(kg·d),连续5 d.结果与结论:移植后1 周,七叶皂苷钠+细胞移植组大鼠神经功能障碍评分低于细胞移植组及对照组(P < 0.05);七叶皂苷钠+细胞移植组大鼠脑梗死周围组织AQP9 及AQP4 mRNA 的表达低于细胞移植组,却高于对照组(P < 0.05);七叶皂苷钠+细胞移植组CM-Dil 阳性细胞和神经元数量多于细胞移植组及对照组(P < 0.05).提示脐带间充质干细胞移植联合注射用七叶皂苷钠治疗大鼠脑梗死可明显改善大鼠的神经功能.
-
AQP4、AQP9在兔骨性关节炎软骨病变中的表达
目的 通过观察水通道蛋白4、水通道蛋白9(AQP4、AQP9)在膝骨性关节炎兔模型的膝关节软骨中的表达,从而探讨AQP4、AQP9 在膝骨性关节炎发生发展过程中的作用.方法 采用兔膝关节伸直位制动膝骨性关节炎(OA)模型,取制动2、4、6、8和10周的兔膝关节股骨髁软骨组织制作病理切片,在光学显微镜下观察病理改变,并应用免疫组化检测各组关节软骨中AQP4、AQP9的表达.结果 随着造模时间延长,兔膝关节软骨破坏程度不断加深;免疫组化染色显示膝骨性关节炎模型兔的膝软骨各时期AQP4、AQP9的表达均高于空白对照组,并且差异有统计学意义(P<0.01).结论 AQP4、AQP9在膝骨性关节炎软骨中高度表达,推测其可能影响骨性关节炎的发生发展.
-
一贯煎对荷H22肝癌小鼠AQP9及GK蛋白表达的影响
目的:通过检测水通道蛋白9(AQP9)及甘油激酶(GK)表达的变化,探讨滋肝阴方一贯煎抗肝癌的机理,并比较一贯煎、化疗及一贯煎化疗联合抗肝癌机理的异同.方法:雄性昆明小鼠40只,随机均分为模型组、化疗组、一贯煎组、一贯化疗联合组.腋下注射H22细胞建立H22荷瘤模型,一贯煎组造模前两周开始用药(剂量为23g·kg-1 ·d-1),化疗组(环磷酰胺50mg·kg-1·d-1,隔日1次)及一贯化疗联合组造模后用药,造模14d后处死小鼠称重,取瘤组织称重计算抑瘤率,取脾组织称重计算脾指数,免疫组化检测AQP9及GK蛋白的表达.结果:与模型组比较,一贯煎组、化疗组及一贯化疗联合组均具有显著抑瘤作用(P ＜0.05或P＜0.01);一贯煎组能显著提升脾指数用AQP9蛋白的表达,与模型组比较,有统计学意义(P＜0.05);一贯化疗联合组AQP9蛋白表达减少,与化疗组及一贯煎组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);一贯煎可增加GK蛋白的表达,与模型组及化疗组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);一贯化疗联合则会减少GK蛋白的表达,与一贯煎组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:一贯煎具有显著抑制肝癌细胞增殖功效,其机理可能是通过滋阴上调AQP9及GK蛋白表达,这可能与该方能增强细胞膜对水的通透性而加速细胞凋亡的速度,并可维持血糖保证重要器官的葡萄糖供给有关.但在促进AQP9及GK蛋白表达方面,一贯煎与化疗药无协同作用.
-
高压氧联合依达拉奉对大鼠脑梗死区AQP9的影响
目的 探讨高压氧联合依达拉奉对脑梗死大鼠AQP9表达及脑水肿的影响.方法 建立老年SD大鼠大脑中动脉闭塞(MCAQ)模型,随机分为4组:对照组、依达拉奉组、高压氧组和联合组,每组20只.对各组大鼠进行神经功能评分,检测大鼠脑组织内AQP9基因及蛋白的表达、梗死脑组织的含水量,并进行HE染色,观察病理学变化.结果 各组大鼠神经功能缺损评分比较显示,联合组明显低于对照组、依达拉奉组及高压氧组;RT-PCR及Western blot检测表明,联合组AQP9的mRNA蛋白表达及梗死区脑组织含水量明显低于脑梗死组、依达拉奉组及高压氧组(P＜0.05);HE染色结果显示,高压氧组、依达拉奉组较对照组炎性浸润及水肿减轻,联合组比高压氧组、依达拉奉组又有明显缓解.结论 高压氧联合依达拉奉治疗可促进脑梗死大鼠神经功能的恢复.
-
补肾养经汤对多囊卵巢模型大鼠子宫AQP9表达的影响
目的 观察补肾养经汤对多囊卵巢(PCO)模型大鼠子宫水通道蛋白9(AQP9)表达的影响,探讨补肾养经汤治疗PCOS的机制.方法 筛选未成年23日龄SD雌性大鼠64只,随机抽取16只作为对照组,其余48只用硫酸普拉睾酮钠建立PCO动物模型,造模成功后将模型动物随机分为模型对照组、克罗米芬组、补肾养经汤高剂量组、补肾养经汤中剂量组、补肾养经汤低剂量组.给药后处死动物,采用免疫组化SP法检测各组大鼠子宫中AQP9表达水平的变化.结果 模型组与正常对照组比较,AQP9的表达明显降低(P＜0.01)；补肾养经汤高、中、低剂量组及克罗米芬组与模型组比较,AQP9的表达明显增高(P＜0.05)；与补肾养经汤低剂量组比较,补肾养经汤高剂量组AQP9的表达明显增加(P＜0.01),补肾养经汤中剂量组AQP9的表达虽有增加,但两者之间差异无统计学意义(P＞0.05)；与补肾养经汤中剂量组比较,补肾养经汤高剂量组AQP9的表达明显增加(P＜0.01)；与克罗米芬组比较,补肾养经汤高剂量组AQP9的表达明显增加(P＜0.01),而补肾养经汤中、低剂量组AQP9的表达虽有增加,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 补肾养经汤可明显上调模型大鼠子宫内膜腔上皮及腺上皮细胞中AQP9的表达,可能通过调节子宫内膜容受性来治疗PCOS.
-
水通道蛋白9在培养肝细胞脂肪变性模型中的表达及意义
目的:探讨油酸诱导的脂肪变性肝细胞模型中水通道蛋白9(Aquaporin-9,AQP9)的表达及意义.方法:用油酸诱导正常肝细胞株L-02建立肝细胞脂肪变模型.采用油红O染色观察细胞内的脂滴,并检测细胞内甘油三脂,游离脂肪酸.甘油含量,RT-PCR法和Western blotting法分别检测AQP9 mRNA和蛋白的表达.结果:油红O染色显示24h开始出现脂肪变性,72h脂肪变性重;模型组TG、FFA、甘油含量均在各时相点较对照组显著升高,差异有统计学意义(P＜0.01);模型组AQP9 mRNA的表达上调,于24h开始增高,72h表达强,与对照组相比差异有统计学意义(P
-
水通道蛋白9表达与大鼠缺血性脑水肿形成的关系
目的:研究水通道蛋白9(Aquaporin9,AQP9)在大鼠缺血性脑组织中的表达及其与脑水肿形成之间的关系.方法:采用线拴法制作大鼠局灶性脑缺血模型,通过光镜、电镜技术观察脑水肿区的病理变化,干湿重法检测脑含水量,采用原位杂交、免疫组化方法观察AQP9及其mRNA在脑组织中的表达.结果:缺血后细胞及血管周围间隙明显扩大,部分细胞坏死,胶质细胞增生;大鼠穹隆下器官、脉络丛、大脑皮质、视上核、海马等部位AQP9及其mRNA的表达上调,48～72h达峰值;脑组织含水量亦在72h达高峰.结论:随缺血性脑水肿的出现,AQP9及其mRNA表达上调,提示AQP9可能在缺血性脑水肿的形成中发挥重要作用.
-
水通道蛋白9表达水平影响HepG2肝癌细胞的生物学行为及对As2O3的敏感性
目的 研究水通道蛋白9(AQP9)表达水平对三氧化二砷(As2O3)诱导HepG2肝癌细胞凋亡及对其生物学行为的影响.方法 采用MTT法筛选As2O3对肝癌细胞HepG2增殖抑制作用;将重组质粒pEGFP-N1-AQP9和pshRNA-AQP9转染肝癌细胞,反转录PCR检测AQP9 mRNA的表达,Western blot法检测AQP9蛋白表达;将As2O3加入转染后及未处理的HepG2细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术分析周期和凋亡情况;TranswellTM实验验证迁移侵袭能力的改变;酶标仪检测caspase-3活性.结果 重组质粒对AQP9有明显的过表达及抑制表达作用,转染pEGFP-N1-AQP9组肝癌细胞的增殖抑制作用明显大于单纯As2O3处理组,侵袭及迁移能力显著减弱,细胞周期停滞在G0/G1期,凋亡明显多于单纯As2O3处理组,活化的caspase-3活性高.转染pshRNA-AQP9组细胞的增殖抑制作用及caspase-3活性小于单纯As2O3处理组,侵袭迁移能力强于单纯As2O3处理组,细胞周期停滞在GO/G1期的数量及凋亡率较少.结论 调节AQP9的表达影响HepG2肝癌细胞的生物学行为并影响As2O3对HepG2肝癌细胞的敏感性.
-
AQP3、7、9在人下颌下腺的免疫组化定位
采用免疫组化ABC法检测源自10例颈淋巴清扫患者的正常下颌下腺组织AQP3、7、9蛋白的表达.AQP3在浆液性腺泡和黏液性腺泡细胞均有表达,分布于腺泡细胞的基底膜和侧膜,在浆液性腺泡细胞中的表达明显高于黏液性腺泡细胞,导管系统未见AQP3表达;AQP7在极少数肌上皮细胞有表达;AQP9在部分浆液性腺泡腔、混合性腺泡腔以及部分闰管管腔和浆液性半月体上有表达.
