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尿液中草酸、枸橼酸和尿酸测定方法的研究
目的探讨毛细管电泳分析法同时测定尿液中草酸、构橼酸和尿酸含量的可行性.方法选取60cm×75μm规格的毛细管,40mmol/L的Na\-2HPO\-4和20mmol/L的硼砂配成的混合溶液作为背景电解质,加入0.5mmol/L电渗流改性剂,在恒压为-15kV、恒温为25℃、波长为185nm紫外检测器等条件下,采取负极进样,阳极检测,进行方法的定量线性范围、灵敏度、准确度及检出限等试验.结果在浓度范围分别为草酸1.0mg/L～50mg/L,柠檬酸1.0mg/L～100mg/L,尿酸1.0mg/L～200mg/L内,3种物质浓度与峰面积的相关系数均在0.999以上,出峰时间的变异系数＜1%,峰面积的变异系数＜4%.结论所建立的分析方法准确度和精密度都符合分析方法的要求,有较高的实用价值.
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二妙丸对痛风症大鼠血清炎症介质的影响研究
目的:在二妙丸降低血尿酸抗痛风的作用基础上,探讨二妙丸对痛风症大鼠血清中炎症介质的影响.方法:采用乙胺丁醇和腺嘌呤造模法,开展二妙丸抗痛风的药理药效的研究.同时采用高效毛细管电泳法,对大鼠血清蛋白含量进行测定.结果:二妙丸具有降低血尿酸抗痛风的药效,并初步探究二妙丸治疗痛风的作用与血清蛋白含量有关.结论:通过研究二妙丸对痛风大鼠炎症介质的影响,为二妙丸抗痛风作用机制的研究提供科学依据.
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人工神经原网络处理PCR数据在细菌鉴定中的应用
目的 16S rRNA和16S-23S rRNA间区片段是常用细菌分类鉴定靶点,本研究探讨人工神经原网络(ANN)对上述位点PCR扩增产物数据分析在细菌快速鉴定方面的价值.方法 2对16S rRNA基因荧光引物和1对16S-23S rRNA区间基因引物用于扩增血液标本中分离出的317株细菌.相关毛细管电泳(CE)限制性片段长度多态性(RFLP)和单链构象多态性(SSCP)数据进行人工神经原网络分析.结果 16S-23S rRNA基因的RFLP数据对未知菌鉴定的准确率高于16S rRNA基因的SSCP数据,分别为98.0%和79.6%.结论 实验证明了人工神经原网络作为一种模式识别方法对于简化细菌鉴定十分有价值.
关键词： 毛细管电泳 人工神经原网络 单链构象多态性 限制性片段长度多态性 -
16S DNA用于结核性胸膜炎的快速诊断
目的 建立聚合酶链反应-毛细管电泳(PCR-CE)的方法 直接检测结核性胸膜炎患者胸水中的结核分枝杆菌,以达到快速诊断结核性胸膜炎的目的.方法在大连市结核病医院收集2006年11月至2007年2月结核性胸膜炎患者的胸水120份,所有标本都经过结核分枝杆菌抗酸染色镜检和结合菌培养,其中115份为阴性标本,5份为阳性标本.利用16S DNA集保守性和变异性于一体的特点,设计合成通用引物G1: 5′-FAM-GGC GGA CGG GTG AGT AA-3′,G2:5′-ROX-GGA CTG CTG CCT CCC GTA G-3′,然后将标本进行DNA提取并进行PCR扩增,扩增产物用限制性内切酶HaeⅢ消化,用毛细管电泳来检测结核分枝杆菌.结果 115份阴性标本中检测出结核分枝杆菌的有19份,未检测出结核分枝杆菌的有96份,其阳性率为16.52%;5份阳性标本中检测出结核分枝杆菌的有5份,阳性率为100%.结论 PCR-CE方法检测结核分枝杆菌具有快速、准确、灵敏的特点,可用于结核性胸膜炎的快速诊断.
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JAK2V617F突变分型和相对定量研究——附123例慢性骨髓增殖性疾病检测结果分析
目的 研究JAK2V617F突变在慢性骨髓增殖性疾病(CMPD)中的发生率和突变类型,并对突变转录本水平进行定量分析.方法 对2003年1月至2008年5月苏州大学附属第一医院就诊的CMPD患者采用突变特异性扩增系统(ARMS)PCR方法检测JAK2V617F的发生率及其突变类型;采用毛细管电泳方法定量分析JAK2V617F突变转录本水平.结果 123例CMPD患者共检出90例JAK2V617F阳性,其中35例真性红细胞增多症(PV)患者中JAK2V617F阳性率100%,85例原发性血小板增多症(ET)患者中JAK2V617F阳性率62.4%,低于PV患者,差异有统计学意义(P<0.05);3例慢性骨髓纤维化(IMF)患者中JAK2V617F阳性率66.7%.90例JAK2V617F突变患者中共检出纯合突变35例,其中PV患者17例(17/35),占48.6%,ET患者17例(17/85),占20.0%,低于PV患者,差异有统计学意义(P<0.05),IMF患者1例;毛细管电泳定量分析显示,纯合型突变患者JAK2V617F突变转录本水平较杂合型突变患者低,差异有统计学意义(P<0.05);杂合型PV患者JAK2V617F突变转录本水平高于杂和型ET患者,差异有统计学意义(P<0.05).93例患者进行了染色体检查,6例有核型异常,但未发现特异性染色体改变.结论 ARMS-PCR可作为JAK2V617F突变较准确的检测方法,结合毛细管电泳可用于此突变的定量分析以及临床CMPD的诊断.
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醋氯芬酸含量测定方法研究进展
目的 对非甾体抗炎药醋氯芬酸的含量测定方法进行综述.方法 查阅国内国际文献,回顾性总结醋氯芬酸的含量测定方法,通过分析其优缺点及适用条件,选择专属性强、灵敏度高且易于操作的含量分析方法.结果 目前,我国多采用高效液相色谱法(HPLC)进行醋氯芬酸相关制剂及其药代动力学的研究,并对HPLC的色谱条件进行了多次优化,提高了检测灵敏度.结论 随着HPLC技术的成熟应用和液-质联用技术和电化学法等其他分析方法的出现,药物体内外的定量分析更加精确.
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羟丙基-β-环糊精为手性选择剂分离6种手性药物
目的 以羟丙基-β环糊精(HP-β-CD)为手性选择剂,利用毛细管电泳法分离6种药物对映体.方法 采用未涂层熔融石英毛细管柱,磷酸二氢钠缓冲溶液,分离电压20 kV,考察了背景电解质pH值、环糊精浓度、缓冲盐浓度对对映体分离的影响.结果 在优的电泳条件下,托吡卡胺、氨氯地平、尼卡地平、特布他林、盐酸曲马多和盐酸酚苄明的分离度分别为2.6、3.7、1.3、4.1、2.5和1.8.结论 所建立的方法适于托吡卡胺、氨氯地平、特布他林、盐酸曲马多和盐酸酚苄明的对映体分离.
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苦碟子注射液毛细管电泳指纹图谱
目的建立苦碟子注射液的毛细管电泳指纹图谱(CEFP),为苦碟子注射液的质量控制提供新方法.方法采用高效毛细管电泳法,紫外检测波长242 nm,电压为12.5 kV,以硼砂(75 mmol·L-1,调pH值为9.52)为背景电解质进行指纹图谱研究.结果建立了苦碟子注射液CEFP,以腺苷峰为参照物峰,确定了24个共有峰,测定11批苦碟子注射液CEFP与共有模式间具有良好的相似性,以相似度和色谱指纹图谱信息量指数对其进行评价.结论所建立的CEFP具有较好的精密度和重现性,对苦碟子注射液的质量控制提供了新方法.
关键词： 毛细管电泳 指纹图谱 苦碟子注射液 指纹图谱信息量指数I 指纹图谱相对指数Ir -
环糊精与离子液体合用拆分兰索拉唑等3种质子泵抑制剂对映体
目的 联合使用磺丁基醚-β-环糊精和离子液体(SBE-β-CD),用于兰索拉唑等3种质子泵抑制剂药物对映体的毛细管电泳分离.方法 采用弹性石英毛细管柱,考察了pH值、背景电解质中缓冲盐浓度、SBE-β-CD质量浓度及电压对分离的影响.在此基础上,研究了手性离子液体与环糊精联合使用,即二元手性选择剂体系对兰索拉唑、泮托拉唑和雷贝拉唑对映体分离的影响.结果 在优的电泳条件下,兰索拉唑和泮托拉唑对映体达到了完全分离,雷贝拉唑对映体达到部分分离,分离度分别为2.28、1.96和1.12.结论 离子液体与SBE-β-CD组成二元体系的协同作用对提高兰索拉唑、泮托拉唑和雷贝拉唑对映体的分离度有明显的作用.
关键词： 磺丁基醚-β-环糊精 毛细管电泳 离子液体 质子泵抑制剂 对映体分离 -
毛细管电泳法快速测定桑叶中芦丁、绿原酸和槲皮素的含量
目的 建立能快速同时分离检测桑叶中芦丁、绿原酸和槲皮素的毛细管电泳法.方法 采用未涂层毛细管柱(50 μm×56 cm,有效长度47.5 cm),以含体积分数15％甲醇的12 mmol·L-1硼砂(pH值9.0)为运行缓冲溶液,工作电压25 kV,检测波长350 nm,柱温25℃.结果 芦丁、绿原酸和槲皮素质量浓度分别在3.92 ～39.2 mg·L-1、5.52 ～55.2 mg·L-1和2.12 ～21.2 mg·L-1内线性关系良好,回收率和重复性良好.结论 该法快速准确,适合于桑叶药材的质量控制.
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羧甲基-β-环糊精用于6种抗胆碱类药物的毛细管电泳拆分
目的 建立高效毛细管电泳法分离6种抗胆碱类药物对映体.方法 采用未涂层熔融石英毛细管柱,以羧甲基-β-环糊精(carboxymethy-β-cyclodextrin,CM-β-CD)为手性选择剂,磷酸盐缓冲液作为背景电解质.结果 在佳条件下,托吡卡胺、氢溴酸后马托品、甲溴后马托品、阿托品和溴甲阿托品的分离度(R)分别为5.13、6.29、4.67、4.85和4.59,消旋山莨菪碱的分离度(R)分别为1.13、6.92和2.58.结论 CM-β-CD对6种抗胆碱类药物对映体均有较好的对映体选择性.
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磺化-β-环糊精为手性选择剂拆分文拉法辛等5种碱性药物
目的 以磺化-β-环糊精(S-β-CD)为手性选择剂,建立毛细管区带电泳法分离文拉法辛、奥昔布宁、维拉帕米、萘哌地尔、氟西汀对映体.方法 采用未涂壁熔融石英毛细管柱,磷酸二氢钠缓冲溶液为背景电解质,分离电压为-15 kV,考察了环糊精质量浓度、缓冲溶液的pH值、缓冲盐浓度对对映体分离的影响.结果 在优的电泳条件下5种药物均达到基线分离.结论 S-β-CD是一种具有较强分离选择性的手性选择剂.
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基于正交设计的毛细管电泳法分离尼卡地平等5种手性药物对映体
目的 建立高效毛细管电泳法分离尼卡地平、氧氟沙星、卡维地洛、佐匹克隆和普萘洛尔5种碱性药物对映体.方法 采用正交试验设计法,以羧甲基-β-环糊精(carboxymethyl-β-cyclodextrin,CM-β-CD)为手性选择剂,使用未涂层熔融石英毛细管柱,以NaH2PO4缓冲溶液为背景电解质,运行电压为20 kV.结果 在佳条件下,尼卡地平、氧氟沙星、卡维地洛、佐匹克隆和普萘洛尔的对映体分离度分别为3.8、9.8、6.2、5.7和5.0.结论 CM-β-CD对尼卡地平等5种手性药物有较高的对映体选择性.该方法简便、高效、灵敏、重现性好.
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2-甲基-β-环糊精作为手性选择剂对5种药物对映体的毛细管电泳拆分研究
目的 以2-甲基-β-环糊精(2-O-methylated-β-cyclodextrin,2-O-M-β-CD)为手性添加剂,利用毛细管电泳法(capillary electrophoresis,CE)对消旋体药物甲溴后马托品、氧氟沙星、酮康唑、利阿唑和卡维地洛进行拆分研究.方法 考察了背景电解质溶液的pH值、2-O-M-β-CD浓度、缓冲盐浓度对分离的影响,优化了分离条件.结果 在佳分离条件下,甲溴后马托品、氧氟沙星、酮康唑、利阿唑对映体达到完全分离,分离度分别为3.6、2.8、1.7、1.5；卡维地洛对映体分离度达到1.4.结论所建立的毛细管电泳法适于除卡维地洛外其余4种药物的对映体分离.
关键词： 2-甲基-β-环糊精 毛细管电泳 对映体分离 -
新生儿干血斑β地中海贫血筛查方法的研究
目的：探讨全自动毛细管微量血红蛋白电泳技术在新生儿β地中海贫血筛查中的应用价值，并寻求有效的筛查方法。方法使用 Sebia 全自动毛细管电泳仪对145904例新生儿滤纸干血斑标本进行血红蛋白（Hb）电泳；对95059例标本的电泳分析结果以 HbA 界值法判读β地贫筛查结果，对50845例标本的电泳分析结果以 HbA 值结合HbA2／HbA 比值的综合分析法判读β地贫筛查结果，召回筛查阳性者进行地贫基因诊断；随机对600份标本的电泳结果同时以上述两种方法判读β地贫筛查结果，同时进行基因检测作为β地贫诊断的金标准，统计比较两种判读方法的差异。结果HbA 界值法筛查出的1580例阳性标本中经基因检测确诊为β地贫的有716例，确诊符合率45.32％，假阳性率为54．68％；综合分析法筛查出的1266例 阳 性 标 本 中 930例经基因检测确诊为β地贫，符合率73.46％，假阳性率为26．54％。同时对600例新生儿干血斑分析结果表明，HbA 界值法和综合分析法的敏感度和特异度分别是54．55％、90．91％和97．58％、99．31％，两者的筛查准确性分别为96％和99％。统计结果表明，综合分析法的敏感度、阳性预测值和筛查的准确性显著高于 HbA 界值法．结论新生儿干血斑标本经毛细管血红蛋白电泳后，利用包含 HbA、HbA2组分的含量及 HbA2／HbA 比值的综合分析法判读电泳结果，筛查新生儿β地贫，灵敏度和准确性显著提高，假阳性率明显降低，值得推广应用。
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利用毛细管电泳测定血清中维生素K的含量
目的建立毛细管电泳定量检测血清中维生素K1和K2的方法.方法利用固相萃取方法提纯血清中维生素K,将20 mmol/L的四硼酸钠、10 mmol/L的SDS加入到含有80%甲醇、10%去离子水、10%乙腈的溶液中配置成缓冲液,在254 nm波长条件下对样本进行分离.结果利用这种方法对血清中维生素K1和K2进行了有效的分离,该方法的线性低于病理状态下血清中维生素K的浓度,回收率为97%～103%,日内精密度(CVs)和日间精密度分别为7.16%～8.03%和10.08%～11.3%.结论毛细管电泳方法测定血清中维生素K1和K2,具有快速、灵敏、定量检测等优点,可能成为测定人类血清中维生素K状态的有效检测方法.
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毛细管电泳技术在中草药分析中的应用
高效毛细管电泳(HPCE)是离子或荷电粒子以电场为驱动力,在毛细管中按其淌度和分配系数不同进行高效、快速分析分离的一种新技术,是近三十年来发展迅速的分离技术.HPCE在分析的各个领域得到广泛的应用,尤其是在中草药分析中,已成为不可替代的重要分析手段.中药成分的分析具有复杂性,而HPCE利用高压电场为驱动力,根据中药成分的差异进行分离,可以扩大中药分析的研究范围,进而推动中医药事业的发展.
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毛细管电泳技术在中药研究方面的应用情况分析
目的：总结近年来毛细管电泳技术在中药研究方面的应用情况。方法：查阅近年来国内外文献及相关专业论文期刊，对毛细管电泳技术在中药研究方面的应用情况进行分析、归纳和总结，将毛细管电泳技术与高效液相色谱法的基本原理进行简要的对比，总结毛细管电泳技术在中药有效成分的测定、指纹图谱、中药材鉴定等方面的应用情况。结果与结论：毛细管电泳技术具有高效、快速、简便且柱不易受污染的特点，在临床上的应用越来越广泛。该法在中药分析方面的应用极大地拓展了中药分析的研究范围。
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康复新液质量鉴定毛细管电泳指纹图谱法的建立
目的 建立用于中成药康复新液质量检测的毛细管电泳(CE)指纹图谱法.方法 样品分离采用弹性未涂层毛细管(75 μm×60cm,有效长度为49.5 cm),通过运行缓冲液,在一定的pH及运行电压下进行分析,检测波长为214 nm,操作温度为25℃,压力进样3.0Psi×8s.对分离条件中的缓冲液类型、缓冲液浓度、pH及分离电压进行优化.采用佳分离条件测定不同厂家生产的10批康复新液,并通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)进行指纹图谱分析.结果 佳分离条件为:缓冲液为80 mmol/L乙酸-80 mmol/L乙酸铵,pH3.0,分离电压20 kV.10批康复新液标定了8个共有峰,相似度均＞0.99.结论 本研究建立的CE指纹图谱新方法简单快速、分离度高、精密度好,可较为全面地反映和评价康复新液的整体质量.
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现代仪器与中草药指纹图谱
阐述了中草药指纹图谱及其发展方向,综述了薄层色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法以及核磁共振谱法等几种先进方法在指纹图谱及质量标准中的应用.
