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DNA分子标记技术在有毒植物鉴定中的应用
有毒植物中毒是对健康危害较为严重的公共卫生问题之一.由于其易获得性、传统用药习惯和误用滥用等原因,植物中毒发病率居高不下.2000-2006年我国食物中毒原因中,有毒动植物(包括有毒蘑菇)中毒病死率远高于微生物中毒与化学物中毒,居首位[1].
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DNA分子标记技术在中药品质与标准化方面的研究概况
自20世纪80年代PCR技术问世以来,现代生物技术领域进入了一个新时代,DNA分子标记技术的兴起和逐步成熟,使得中药材以形、色、味、质地为依据的传统质量评价方法和以形态组织学、解剖学、化学等客观指标为依托的现代质量评价方法得到了有益的补充,解决了上述方法所不能阐述和表达的问题.本文综述了DNA分子标记技术在中药材质量评价方面的新应用研究,并展望了今后的研究前景.
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DNA分子标记在药用植物种质资源研究中的应用
本文介绍了目前在药用植物种质资源研究中主要应用的RFLP、RAPD、AFLP、ISSR等DNA分子标记的基本原理与特点.综述了DNA分子标记在药用植物种质资源鉴定、亲缘关系和分类研究、遗传多样性评价等方面的应用及研究进展.
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蜘蛛抱蛋属药用植物分子鉴定研究
通过比较各分子标记的PCR扩增成功率、测序效率、种内与种间变异和鉴定成功率等指标,考察6个分子标记(rbcL、matK、psbA -trnH、psbK-psbI、核ITS和ITS2)及其组合对蜘蛛抱蛋属药用植物的鉴定结果,评价不同标记在蜘蛛抱蛋属药用植物中的鉴定能力,确定适合该属鉴定的DNA分子标记.结果显示,对蜘蛛抱蛋属11个种20个样本进行分析,rbcL、matK、psbA -trnH、psbK-psbI序列获得率较高,matK鉴定成功率在获得的单一序列中高(85％),多序列组合在鉴定效率方面比单一序列有所提高,其中matK +psb K-psbI的鉴定成功率为100％.因此,matK+psbK-psbI可用于蜘蛛抱蛋属药用植物的鉴定.
关键词： DNA分子标记 蜘蛛抱蛋属 鉴定 matK+psbK-psbI -
DNA分子标记技术在酸浆属药用植物中的应用研究
作为我国传统中药材,酸浆属植物具有抗炎、抗氧化及抗癌等多种药理活性,可用于疟疾、风湿、肝炎、哮喘、癌症等多种疾病的治疗.除此之外,许多酸浆属植物还是高档的营养保健水果,可以做罐头和蜜饯等.该文综述了近年来DNA分子标记技术在药用酸浆属植物研究中的应用进展,为酸浆属药用植物的药材基原鉴定、系统进化分类及种质资源合理开发和保护提供了重要的分子技术依据.
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双分子标记法的构建及在中药研究中的应用
该文针对作者之前提出的分子鉴定中真伪鉴别有余,优劣评价不足的现象,以及中药材二维分子标记法构建中功能基因研究基础薄弱的情况,提出了基于DNA分子标记和代谢标识物相结合的双分子标记法(bimolecular marking methods,简称BIMM),能满足现阶段在分子水平同时研究中药的种类和质量差异.该文系统介绍了双分子标记法的概念、原理、方法和技术流程,总结了该方法所具备的技术优势,展望了其在中药多来源药材的鉴别研究、年限鉴别研究、产地鉴别研究、优良种质研究、新的药物资源的寻找和开发及中药植物新品种保护中的重要应用.作为中药材二维分子标记法的补充,双分子标记法的提出,将进一步促进分子水平对中药的真伪鉴定及质量优劣评价研究的发展.
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进化速率不同的分子标记对微小按蚊新亲缘种的研究
目的 选择进化速率不同的核糖体rDNA-ITS2、rDNA-28S-D3基因和线粒体DNA(mtDNA)COⅡ基因作为分子标记,研究我国微小按蚊变异及新的亲缘种. 方法 用蛋白酶K消化单蚊蚊腿,提取基因组DNA,PCR特异扩增rDNA-ITS2、rDNA-28S-D3和mtDNA-COⅡ基因片段,对PCR产物进行纯化、测序和序列分析,并基于mtDNA-COⅡ基因采用大似然法构建种系发生树,分析微小按蚊变异地位和进化关系. 结果 1)云南元江微小按蚊rDNA-ITS2扩增片段约700 bp,其他微小按蚊为480 bp左右;2)ITS2和D3序列分析显示3种单倍型,其中元江微小按蚊基因长度与碱基组成显著不同;3)mtDNA-COⅡ种系发生树显示元江微小按蚊与其他微小按蚊的亲缘关系较远. 结论 我国存在微小按蚊A和C之外的新的微小按蚊亲缘种.
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中药冬虫夏草的鉴别研究
目的 对中药冬虫夏草进行鉴别研究,建立其传统生药学与现代DNA分子鉴别方法.方法 采用性状、显微鉴别方法与RAPD-SCAR标记对中药冬虫夏草进行鉴别研究.结果 在性状鉴别的基础上,详细描述了中药冬虫夏草的横切面结构与粉末特征,提供了直观、真实的药材性状及显微鉴别数码成像图谱;将冬虫夏草特异性的RAPD扩增片段转化为SCAR标记,在优化的鉴别PCR条件下可以将冬虫夏草鉴别.结论 性状、显微鉴别方法形象直观,而DNA分子标记鉴别方法简单易行,为冬虫夏草药材真伪鉴别提供了新的科学依据.
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驴皮药材RAPD分析方法建立及其与伪品马皮的鉴别
目的 建立驴皮药材RAPD分析方法并用于伪品马皮的鉴别.方法 采用化学试剂盒法确定了驴皮药材中DNA提取的佳条件,采用L16(45)正交设计方法,针对Taq酶、Mg2+、dNTP、模板DNA、引物设计了5因素4水平的正交试验,优化了RAPD-PCR反应条件.结果 驴皮药材RAPD-PCR反应体系的佳条件为25 μL反应体系中含有Taq酶1.5U、Mg2+0.15 mmol/L、dNTP 0.25 mmol/L、模板DNA 1.5 μL、引物0.5 μmol/L;PCR反应条件为95℃预变性5 min,94℃变性30 s,37℃退火30s,72℃延伸1 min,共30个循环,后72℃延伸7 min.RAPD反应结果中300～400 bp处的条带可作为鉴别驴皮及其伪品的特异性条带.结论 所建立的RAPD分析方法具有简便快捷、稳定性好、重现性高的特点,可用于驴皮药材及其伪品马皮的鉴别.
关键词： 驴皮 RAPD-PCR分析 正交设计 DNA分子标记 伪品鉴别 -
基于PCR技术的中药DNA分子标记鉴别
综述基于PCR技术的中药DNA分子鉴别研究,重点论述了RAPD法和DNA直接测序法的应用,提出了DNA分子鉴别研究的思路与实验设计.
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中药指纹图谱在药用植物开发中的应用初探
中药指纹图谱是指中药材经过适当的处理后,采用一定的分析手段和仪器检测得到的,能够标识其中各种组分群体特征的共有峰的图谱[1].主要用以鉴别真伪,区分植物药材的不同部位,评价原料药材、半成品和成品质量的均一性和稳定性.
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分子标记技术及其在药用植物中的应用
目的:介绍现代分子生物技术--分子标记技术及其分析方法在药用植物中的应用和意义.方法:查阅国内外相关文献,进行归纳分析.结果和结论:分析了分子标记技术的特点、适用范围和局限性,以及在药用植物学的研究成果和进展.分子标记技术作为一种现代分子生物技术在药用植物学中具有广阔的应用前景.
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DNA分子标记在人参属植物研究中的应用
DNA分子标记技术是近二十年来兴起并不断发展和完善的新榆测技术.近年来,DNA分子标记技术在人参属植物的许多研究中均有应用,如中药鉴定、遗传多样性与种质资源、物种进化与亲缘关系、野生类型与栽培品种的鉴别、道地性等,本文就DNA分子标记技术在人参属植物中应用的现状作以综述.
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DNA分子标记技术及其在法医学中的应用
自20世纪80年代DNA分子标记技术诞生以来,DNA作为物证材料在案件侦破、司法鉴定等方面发挥了重要的作用.随着DNA检测技术、PCR技术的发展,检验标记的增多,理论的不断完善,法医DNA检验技术向着准确、灵敏、自动化的方向发展,使得法医DNA技术能够越来越好地满足刑事侦查和司法审判的需要.
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基于RAPD分子标记技术的中药材鉴定研究进展
近年来,随着生命科学的不断发展,分子生物学技术在中药学领域日益渗透,在分子水平上检测基因多态性分子标记的中药鉴定方法得到不断的发展与应用,其中新方法、新技术不断涌现,DNA的限制性片段长度多肽性(restriction fragment length polymorphisms,简称RFLP)和随机扩增的多态DNA(random amplified polymorphic DNA,简称RAPD)是目前广泛应用的2种遗传标记,它们为解释遗传变异的性质和内容、揭示物种演化等方面提供了崭新的研究手段.
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RAPD技术分析积雪草的分子标记特征
目的:采用RAPD技术,对积雪草DNA分子标记进行研究.方法:以不同来源的积雪草为样本提取基因组DNA,通过优化PCR反应体系,选择适合的随机引物,扩增分析积雪草的特征条带.结果:经优化反应体系扩增,获得不同来源及不同生长环境的积雪草特异的种群条带,具有高度稳定的遗传特征.积雪草的种群特征带与绞股蓝、烟草、乌蔹莓等其他不同科属的植物有明显的区别.结论:所建立的RAPD分析方法扩增不同来源的积雪草显示高度的均一性,可用于积雪草真品和混淆品的鉴别.
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冬虫夏草的遗传学研究进展
冬虫夏草是传统的名贵中草药,近年来由于需求旺盛导致自然资源枯竭,故其遗传学研究日益引起重视.已经开展了冬虫夏草的全基因序列分析、基因文库构建、特征DNA区段鉴别和功能基因的克隆与表达研究等,这对冬虫夏草遗传信息的保护、菌株的鉴定和保存、人工培养技术及资源应用等具有重要的指导意义.
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DNA分子标记技术在法医植物学中的应用
法医植物学是一门研究与法律事件相关的植物证据的科学.植物物证的DNA分子标记技术是近年来法医植物学研究的主要方向.本文系统地综述了目前应用于法医植物学中的各种DNA分子标记技术.对这些方法的实际应用案例以及可能应用方向进行列举,后总结出这些分子生物学技术相较于传统植物形态分类方法的优点.
