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白英提取物诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡及其对凋亡相关基因表达的影响
目的 探讨白英提取物(Solanum lyratum Thunb extract,STE)对乳腺癌MCF-7细胞凋亡及凋亡相关基因survivin和caspase-3表达的影响.方法 体外培养MCF-7细胞,以2.5、5、10 mg/L STE处理MCF-7细胞48小时,并以2.5 mg/L顺铂(DDP)作为阳性对照.用MTT法检测细胞抑制率,TUNEL法检测凋亡率,半定量RT-PCR检测survivin和caspase-3 mRNA表达.结果 与正常对照组比较,STE各浓度组细胞抑制率显著上升(P＜0.001),细胞凋亡率明显升高(P＜0.001),caspase-3 mRNA表达显著上升(P＜0.001),survivin mRNA表达明显下降(P＜0.05或P＜0.01).结论 STE具有诱导MCF-7细胞凋亡作用,其分子机制可能与上调caspase-3及下调survivin基因表达有关.
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白英化学成分和抗肿瘤药理作用的研究进展
目的:为白英的深层次开发和利用提供参考.方法:查阅国内外有关白英的化学成分、抗肿瘤药理作用的文献,对其进行分析和综述.结果:白英的化学成分主要包括:甾体类、生物碱类、黄酮类、萜类、蒽醌类、香豆素类和其他类.在药理活性方面,白英的抗肿瘤作用在肝癌、肺癌、宫颈癌、胃癌等方面均有研究.结论:可为白英进一步的研究和开发新的抗肿瘤药物奠定基础.
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白英乙醇提取物诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡的实验研究
目的:探讨白英乙醇提取物对人肺癌SPC-A-1细胞凋亡及凋亡相关基因fas和caspase-3表达的影响.方法:采用体外培养人肺癌SPC-A-1细胞,随机分为正常对照组、白英乙醇提取物处理组(浓度分别为2.5、5、10 mg·L-1)和阳性对照组(顺铂);药物处理48 h后,用MTT法检测细胞增殖抑制率,转移酶介导脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记法检测细胞凋亡率,半定量反转录-聚合酶链反应检测fas和caspase-3mRNA表达水平.结果:与正常对照组比较,白英各浓度组细胞抑制率显著上升(P<0.001),细胞凋亡率明显升高(P<0.05或P<0.01),fas和easpase-3 mRNA表达显著上升(P<0.05或P<0.01).结论:白英乙醇提取物可能通过上调fas和easpase-3基因表达,诱导细胞凋亡,从而抑制SPC-A-1细胞增殖.
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白英不同药用部位不同生长期薯蓣皂苷元含量分布规律的研究
目的:探讨白英不同药用部位不同生长期薯蓣皂苷元的含量分布规律.方法:分别于5、6、7、8、9、10、11月份采集白英的根、茎、叶、果等药用部位作为样品,采用高效液相色谱法测定样品中薯蓣皂苷元的含量.色谱柱为Agilent Zorbax ODSC18(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(93∶7,V/V),流速为1.0 mL· min-1,柱温为30℃,检测波长为203nm.结果:薯蓣皂苷元的检测浓度在0.0525～1.0500 mg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9994)；平均加样回收率为100.53％,RSD=1.62％(n=6).白英根中薯蓣皂苷元的含量高,平均为1.216 mg·g-1,其次依次为果实、下部茎、叶、上部茎；白英根、叶中的薯蓣皂苷元含量8月份高,上、下部茎含量9月份高,果实含量10月份高.结论:白英不同药用部位不同生长期薯蓣皂苷元的含量差别较大,以8、9月份采收质量较好.
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白英乙醇提取物诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的实验研究
目的:研究白英乙醇提取物对人胃癌SGC-7901细胞凋亡及凋亡相关基因Fas和caspase-3表达的影响.方法:体外培养人胃癌SGC-7901细胞;实验分正常对照、顺铂及白英乙醇提取物高、中、低剂量(10、5、2.5mg·mL~(-1))组.采用MTT法检测细胞增殖抑制率,荧光显微镜观察SGC-7901细胞凋亡及形态变化,半定量RT-PCR法分析基因Fas和caspase-3 mRNA的表达情况.结果:与正常对照组比较,白英乙醇提取物高、中、低剂量组对SGC-7901细胞增殖抑制均有促进作用(P<0.01),且呈明显的时效和量效关系,细胞凋亡显著增多,表现为细胞核固缩、染色质凝集、边聚等;基因Fas和caspase-3 mRNA表达显著升高(P<0.01或P<0.05),并随白英乙醇提取物浓度增加而加强.结论:白英乙醇提取物能剂量依赖性地抑制SGC-7901细胞增殖和诱导细胞凋亡,其作用可能与调控Fas和caspase-3 mRNA表达相关.
关键词： 白英 乙醇提取物 人胃癌SGC-7901细胞 凋亡 基因表达 -
白英正丁醇萃取部位的化学成分研究
目的：研究白英正丁醇萃取部位的化学成分。方法：采用葡聚糖LH-20柱层析、硅胶柱层析、薄层色谱对白英正丁醇萃取部位的化学成分进行分离纯化，根据理化性质和波谱数据分析鉴定化合物结构。结果：从白英正丁醇萃取部位分离得到10个化合物，分别为芹菜素-7-O-β-D-芹糖（1→2）-β-D-葡萄糖（1）、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖（2）、腺苷（3）、E-苯丙烯醇-3-甲氧基-5-[（8′S）-3′-甲氧基-4′-羟基-苯丙醇]-4-O-β-D-葡萄糖苷（4）、N-（4-氨基正丁基）-3-（3-羟基-4-甲氧基-苯基）-E-丙烯酰胺（5）、N-（4-氨基正丁基）-3-（3-羟基-4-甲氧基-苯基）-Z-丙烯酰胺（6）、白藜芦醇（7）、柚皮素（8）、槲皮素（9）、薯蓣皂苷元（10）。结论：化合物1～8均为首次从白英中分离得到，该研究为白英质量评价奠定了一定基础。
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白英乙醇提取物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其对凋亡相关基因表达的影响
目的:探讨白英乙醇提取物对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及凋亡相关基因survivin和caspase-3表达的影响.方法:用MTT法检测细胞增殖抑制率,TUNEL法检测细胞凋亡率,半定量RT-PCR检测survivin和caspase-3 mRNA表达.结果:与正常对照组相比,白英提取物各浓度组细胞抑制率显著上升(P＜0.001),细胞凋亡率明显升高(P＜0.01),Caspase-3 mRNA表达显著上升(P＜0.05或P＜0.01),Survivin mRNA表达显著下降(P＜0.05或P＜0.01).结论:白英乙醇提取物通过上调caspase-3和下调survivin基因表达,诱导细胞凋亡,从而抑制SMMC-7721细胞增殖.
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全国不同产地白英总生物碱的含量测定
目的:建立白英总生物碱含量测定方法.方法:紫外-可见分光光度法,以澳洲茄胺为对照品,测定波长为414nm.结果:澳洲茄胺在0.016mg～0.096mg范围内有良好的线性关系,计算得回归方程:Y=0.1466X+0.133,R=0.9998;加样回收率为100.05%(RSD=1.281%);供试品溶液在0～2h内稳定(RSD=0.354%).全国不同产地白英药材26个样品中甾体总生物碱的含量在0.08%～0.24%之间.结论:该方法简便、快速、测定结果准确,可用于白英总生物碱的含量测定.
关键词： 白英 总生物碱 紫外-可见分分光光度法 -
中药白英化学成分的初步探讨
目的 利用简便快速的方法确定白英所含大类化学成分,为白英质量控制指标的建立和相关研究提供帮助.方法 化学成分系统预试法,包括试管预试和薄层预试,分别对白英的水提取液、醇提取液及石油醚提取液进行成分检验.结果 初步明确白英中含有酚性成分、生物碱、黄酮、皂苷、内酯、香豆素、多糖、有机酸、氨基酸、甾醇、三萜、鞣质等化学成分,不含蒽醌、强心苷,不含或含极少量挥发油.结论 该测定方法稳定、简便、快速、测定结果良好.
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中药白英的药效学研究进展与临床应用概况
白英是我国常用中草药,在临床上多应用于癌症治疗领域.白英的有效成分主要为生物碱类和苷类化合物,这些成分对癌细胞有明显的抑制作用,并且白英所含的其他化学成分也具有一定的抗炎、抗过敏作用,在临床上有较高的应用价值.本文对白英的药效学研究进展及临床应用概况进行了简要综述,旨在为白英的研究开发提供参考.
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白英对A2780人卵巢癌细胞增殖的抑制作用
目的:探讨白英的抗肿瘤作用.方法:以MTT法、生长曲线法、集落形成法观察白英对人卵巢癌A2780细胞的体外抑制作用.结果:白英能明显抑制体外培养的A2780细胞的生长,MTT法IC50为20.39 mg/ml;细胞生长曲线法提示其对A2780细胞的生长也有明显的抑制作用;集落形成法,当药物浓度为14.81 mg/ml、9.88 mg/ml时,抑制率均为100%;当药物浓度为6.58 mg/ml时,抑制率为41.86%.结论:白英对体外培养的A2780细胞有明显的抑制作用.
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酶法提取白英中总生物碱的工艺研究
目的 研究纤维素酶在提取白英总生物碱中的应用.方法 白英药材经纤维素酶处理后用乙醇回流提取总生物碱,通过正交实验优化酶处理工艺参数.结果 酶解反应的佳工艺条件为:温度50 ℃,酶反应时间 3 h,pH 4.5,酶质量浓度为1.6 mg·mL-1,且酶法提取率为传统提取法的5倍.结论 纤维素酶水解法适用于白英总生物碱的辅助提取.
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白英中总生物碱的含量测定
目的 建立白英中总生物碱的含量测定方法.方法 用酸性染料比色法测定白英中总生物碱的含量,以士的宁为对照,0.001 mol·L-1的溴麝香草酚蓝为酸性染料,在pH4.0缓冲液中用三氯甲烷萃取,再用0.01 mol·L-1KOH的乙醇液碱化,在600 nm处测定吸光度值.结果 士的宁在10.20～35.70mg·L-1范围内与吸光度值呈良好线性关系(r=0.999 8),方法的平均回收率为99.3%(n=9),RSD为1.3%.结论 该方法操作简便、准确、灵敏、重现性好,可用于白英药材的质量控制.
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白英水提物诱导人卵巢癌A2780细胞bcl-2基因表达的影响
目的:观察白英水提物诱导人卵巢癌A2780细胞凋亡的作用,初步探讨其分子机制.方法:常规方法制备白英水提物,体外培养人卵巢癌A2780细胞,MTT法提示其有较强的体外抑制A2780细胞作用.采用半定量RT-PCR法检测凋亡相关基因bcl-2表达.实验组设白英水提物12.5、25.0、50.0 mg/ml 3种浓度,以顺铂(25.0 μg/ml)为阳性对照组.结果:白英水提物对A2780细胞增殖有抑制作用,且呈明显的量效关系,半定量RT-PCR法检测显示bcl-2 mRNA表达下调,诱导其发生凋亡.结论:白英水提物对A2780细胞有较强的增殖抑制和诱导凋亡作用,其诱导A2780细胞凋亡的分子机制可能与下调bcl-2基因表达有关.
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气相色谱法测定不同产地白英中亚油酸的含量
目的:建立气相色谱法测定中草药白英中亚油酸的含量.方法:粉碎后的白英以氯仿为溶剂在索氏提取器中回流提取,提取液经皂化、酯化和正己烷萃取后,采用气相色谱法进行测定.气相色谱条件:HP-5毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm),氢火焰离子化检测器(FID),以高纯N2为载气.柱温:初始为150℃,保持1 min,以15℃·min-1升温到225℃,再以5℃·min-1升温到260℃,保持3 min.结果:亚油酸甲酯与其他成分分离良好.线性范围为0.02～0.14 mg·mL-1(r=0.9997).高、中、低3种浓度的平均回收率(n=3)分别为96.5%(RSD=1.9%),96.4%(RSD=1.3%),95.6%(RSD=1.8%).结论:方法简单、快速、灵敏,重复性好,可用于中草药中亚油酸的含量测定.
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白英不同药用部位不同生长期总生物碱的含量测定
目的:探讨白英不同药用部位不同生长期总生物碱含量分布规律.方法:分别于5、6、7、8、9、10、11月份采集白英的根、茎、叶、果等药用部位作为样品,用氯仿-甲醇(4∶1)混合溶剂提取总生物碱,酸性染料比色法测定提取物中生物碱含量.结果:总生物碱在4.56～13.68μg ·mL-1(r=0.9998)范围内,浓度与吸光度线性关系良好；平均加样回收率为99.80％(n =5).RSD=1.84％.白英根总生物碱含量高:平均为0.247％,其次分别为果实、叶子、下部茎、上部茎.根、下部茎、上部茎、叶中总生物碱均在八月份达到高值；果实在十月份达到高值.结论:不同药用部位不同生长期总生物碱的含量差别较大.
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白英乙醇提取物诱导消化系肿瘤细胞内源性凋亡的分子机制研究
目的:探讨白英乙醇提取物诱导消化系肿瘤细胞内源性凋亡的分子机制.方法:设置实验组、阴性对照组和阳性对照组,检测其细胞增殖抑制率、细胞凋亡率及基因 mRNA表达.结果:与阴性对照组比,白英提取物各浓度组对人肝癌SMMC-7721细胞和胃癌SGC-7901细胞抑制率和凋亡率上升(p﹤0.05).结论:白英乙醇提取物能诱导消化系肿瘤人肝癌SMMC-7721细胞和胃癌SGC-7901细胞凋亡.
