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成年猪胰岛的分离纯化及体外培养
目的 探讨成年猪胰岛细胞分离纯化及体外培养方法.方法 胰管内逆行灌注胶原酶Ⅴ,分次短时间消化胰腺,Ficoll400间断密度梯度法纯化胰岛,所得胰岛进行培养鉴定.结果 猪胰腺消化后胰岛产量为8450±2216胰岛数/g胰腺,Ficoll400纯化后产量为4052±1586个胰岛/g胰腺,纯度可达83%,细胞存活率在90%以上,胰岛素释放试验显示高糖刺激后胰岛素释放量为低糖时的1.82倍,表明胰岛细胞功能良好.培养第13天,约有28%～35%胰岛存活,并具有完整的形态结构,胰岛素分泌量约降为高值的30%.结论 该方法所得胰岛产量、纯度较高,功能良好,是一种较理想的胰岛细胞分离方法.普通培养条件适合胰岛的短期培养.
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AB-8大孔树脂分离纯化苜蓿总皂苷的研究
目的 研究大孔树脂提取苜蓿总皂苷的工艺.方法 以苜蓿总皂苷的洗脱率和纯化度为指标,用不同浓度的乙醇进行洗脱,对AB-8大孔树脂吸附剂提取苜蓿总皂苷的工艺进行了筛选.结果 佳工艺为药液上样量为3BV(树脂床体积),4BV蒸馏水洗去水溶性杂质,4BV的70%乙醇洗脱.结论 经AB-8大孔树脂处理后的苜蓿总皂苷可达30%以上,而且工艺简便,分离效果好,能满足大生产的要求.
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冬凌草甲素提取工艺进一步纯化的研究
对冬凌草甲素的提取纯化工艺进行进一步的优化,以提高其粗品的收率.重点建立了冬凌草甲素粗晶的进一步纯化工艺,为高纯度冬凌草甲素的制备提供了一种有效的方法.使纯度为99.2%的结晶收率达到了9.05.
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浅谈接触DNA检验提取纯化的方法比较与法学应用
目的:探讨分析接触DNA检验提取纯化的方法比较与法学应用.方法:对接触DNA检验提取纯化的方法进行比较分析,对法学应用价值进行探讨.结果:接触DNA检验提取纯化的方法包括C-有-柱纯化法、磁珠纯化法、elean-up系统纯化法,C-有-柱纯化法是接触DNA检验提取纯化的实用性较好的方法,且检验的成功率较高.对于特殊的、疑难的、微量的、降解的生物检材据有较好的检验效果.DNA检验在法学中的应用主要体现在对刑事案件、民事纠纷、尸源的个体识别上.结论:接触DNA检验提取纯化的方法中C-有-柱纯化法实用性较好、成功率较高.DNA检验在法学中的应用价值巨大,是处理各类刑事案件的重要检验技术.
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葎草花粉蛋白质抗原的纯化及免疫性活性分析
目的:了解葎草花粉蛋白质变应原的组成并进行纯化,分析其免疫学活性.方法:对葎草花粉变应原皮内试验阳性的支气管哮喘患者,在皮试20min后采静脉血3ml,分离出血清,作为阳性血清.葎草花粉粗制液经sephadex G-75洗脱收集主要蛋白质峰段,再经sephacryl S-200 HR层析柱第2次洗脱,分段收集各组分.用SDS-PAGE法测各组分蛋白质的分子量区带,用ELISA抑制试验测试其对特异性IgG和特异性IgE的抑制率,进一步用IB检测各组分与患者血清的反应率.结果:第1峰段与特异性IgG抑制率为71%、结合率为66%,与特异性IgE抑制率为21%、结合率为25%;谷段与特异性IgG的抑制率为67%、结合率为78%,与特异性IgE的抑制率为61%、结合率为72%;第2峰段与特异性IgG抑制率为95%、结合率为88%,与特异性IgE抑制率为71%、结合率为84%;末段与特异性IgG的抑制率为5%、结合率为6%,与特异性IgE的抑制率为11%、结合率为16%.结论:葎草花粉含20多种蛋白质成分;分子量在5000-43000D的蛋白质变应原性和免疫原性均较强,为主要变应原;分子量在43000-97400D的蛋白质免疫原性强而变应原性弱,为次要变应原.
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香菇多糖的研究进展
香菇多糖（Lentinan,LNT）作为一种可从香菇中提取天然物质被学者们广泛研究,其生物活性很多,有良好的保健功能和免疫增强作用,在食用和药用方面均得到极大认可,LNT分离和纯化方法被认为是研究关键,本文综述了分离纯化方法并展望了香菇多糖的研究方向。
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NMDA受体主亚基NR1抗原表位分析
为了获得N-甲基-D-门冬氨酸受体(NMDAR,NR)主亚基NR1抗原表位信息,Protein A-Sepharose CL-4B亲和层析纯化NR1分子PreM1片段R1JHLmcAb, 以纯化后的R1JHL单抗筛淘噬菌体展示随机十二肽库,对筛选克隆进行特异性ELISA检测,提取阳性克隆噬菌体单链DNA进行序列分析,获得一阳性克隆序列HYNLSSDRKVRL,与R1JHL单克隆抗体识别序列相比,二者存在一致性序列DRK,提示DRK有可能为NR1膜蛋白PreM1片段上的一个B细胞表位,上述实验为进一步确定NR1膜蛋白PreM1片段上R1JHL单克隆抗体识表位及表位疫苗免疫干预防治兴奋毒性脑损害策略的实施提供了重要的实验依据.
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三萜类化合物提取分离、纯化、结构鉴定研究进展
目的:综述三萜类化合物提取分离、纯化、结构鉴定方法.方法:通过查阅文献,从三萜类成分传统溶剂提取法、微波提取、超临界流体提取、大孔吸附树脂纯化、高效液相色谱分离、双水相萃取技术、高速逆流色谱法、凝胶色谱法、三萜类结构鉴定等方面进行综述.结论:三萜类化合物提取分离、纯化、结构鉴定方法较为丰富.
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天然色素胭脂虫红提取纯化方法研究进展
本文从溶剂提取、超声波提取、超临界 CO2提取、大孔吸附树脂法等方面，对天然色素胭脂虫红提取、纯化研究进展进行综述，以期为胭脂虫红工业化生产及其应用提供参考。
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药用无水碳酸钠制备工艺研究
为克服目前药用级无水碳酸钠制备方法使用的试剂不能产业化，成本高，纯化得到的无水碳酸钠不能达到药用级质量标准的问题，本研究提出一种试剂廉价易得，工艺过程简单，适合大规模生产的药用级无水碳酸钠纯化方法。经过溶解结晶、过滤除杂、减压干燥等步骤，制备出符合药用无水碳酸钠的产品。
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重组人野生型P53融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达与纯化
目的研究wtP53蛋白对肿瘤的治疗效果,提供药用wtP53融合蛋白.方法在本室构建的人野生型P53融合蛋白的原核细胞表达载体PGEX-3X-P53的基础上,IPTG诱导大肠杆菌表达wtP53融合蛋白,通过亲和层析柱纯化和因子Xa处理,SDS-PAGE分离.结果通过IPTG诱导后,在大肠杆菌中获得人野生型P53融合蛋白的高效表达,经过亲和层析纯化和Western印迹实验,表明获得重组人野生型P53融合蛋白.结论原核细胞表达的人wtP53融合蛋白具有天然P53蛋白的抗原性,可用于P53蛋白的体内外活性鉴定,以进一步应用于临床.
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猪肾二胺氧化酶的纯化
目的获得高活性的二胺氧化酶制品.方法分离猪肾皮质、匀浆、加热、(NH4)2SO4沉淀、透析、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephacryl S-200凝胶层析.结果猪肾皮质经上述方法后可以获得比Sigma公司比活高10倍的二胺氧化酶制剂.结论猪肾皮质经匀浆、加热、(NH4)2SO4沉淀、透析、离子交换层析、凝胶层析可以获得高活性的二胺氧化酶.
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重组人促红素中试纯化工艺的探索研究
目的：采用中试规模生物反应器进行EPO 的工程细胞株的培养，并对其中试规模纯化工艺进行摸索。方法应用无血清培养基进行EPO工程细胞株的培养，收集培养液上清经过离子交换层析、反相和分子筛层析纯化后。结果获得EPO原液纯度达99%以上，比活性为1.4×105I U/mg。整个纯化全过程的EPO体内活性回收率为46.7%。免疫印迹证明其有天然 EPO 的免疫原性， N 端15个氨基酸序列分析与文献报道一致。结论本纯化工艺方案简单，耗时短，重复性好，比较适合应用于中试规模生产。
