首页 > 文献资料
-
雌激素类药物对去卵巢大鼠认知功能的影响
目的：观察去卵巢(OVX)成年雌鼠的认知功能、脑内神经生化学改变及补充雌激素的影响。方法：通过跳台法测试动物被动及主动回避反应，神经生化学手段测定相关酶及受体活性。结果：OVX组大鼠的学习记忆能力明显下降；大脑皮层和海马部位的胆碱乙酰化转移酶(ChAT)活性显著低下；大脑皮层胆碱能M受体和N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体结合活性明显降低而单胺氧化酶B(MAO-B)活性增加。经补充苯甲酸雌二醇(EB)或植物雌激素NH1996 6周后，其学习记忆明显改善，上述生化指标均接近正常。结论：推测雌激素和NH1996可通过影响中枢胆碱能，谷氨酸能和单胺能神经系统的功能参与学习记忆的调节过程。
-
微波辐照对大鼠海马脑区NMDA受体亚基基因表达的影响
目的 从亚基基因表达方面探讨NMDA受体在微波辐照所致的学习记忆功能障碍中的作用.方法 采用平均功率密度为65mW/cm2的微波全身一次辐照大鼠20min(SAR 12.0W/ks),在辐照后0h、3h、12h、24h和3d时相点,大鼠腹腔麻醉断头,分离海马,用RT-PCR技术分别检测NMDA受体功能亚基NR1和调节亚基NR2A、NR2B、NR2C、NR2D在基因表达水平上的变化.结果 微波辐照后大鼠海马脑区NMDA受体功能亚基NR1和调节亚基NR2A、NR2C、NR2D基因表达异常.表现为功能亚基NR1 mRNA表达在辐照后3h、24h、3d时相分别比对照组下降21.1%(P<0.05)、14.2%(P<0.05)、30.3%(P<0.01);辐照后0h、3h、12h,NR2A mRNA表达较对照组分剐降低37.0%(P<0.01)、35.9%(P<0.05)、35.3%(P<0.05);NR2B mRNA表达与对照组比无统计学差异;辐照后0h和24h,NR2C mRNA表达较对照组分别降低24.3%(P<0.05)和27.1%(P<0.05);辐照后0h、12h、24h、3d,NR2D mRNA表达较对照组分别升高67.9%(P<0.05)、45.7%(P<0.05)、49.7%(P<0.01)、75.4%(P<0.01).结论 微渡辐照后大鼠海马脑区NMDA受体结构组成发生改变,NMDA受体自身的复杂调节功能下降,从而影响受体介导的LTP的产生.
-
软骨藻酸和谷氨酸受体
软骨藻酸是由硅藻产生的一种神经毒素,可以通过食物链蓄积,对环境和人类健康造成了严重危害.它能激活NMDA受体和KA/AMPA受体,提高神经细胞内Ca2+浓度,引起机体内一系列生理、生化反应的改变.本文介绍了软骨藻酸通过谷氨酸受体发挥神经毒作用的可能机制.
-
确诊为抗NMDA受体脑炎的难治性癫痫持续状态1例
癫痫持续状态是神经科的急危重症之一,以难治性癫痫持续状态为主要表现的抗NMDA受体脑炎并不多见,本文报道确诊为抗NMDA受体脑炎的难治性癫痫持续状态1例.
-
急性脑缺血再灌注大鼠NMDA受体NR2A/B表达的变化及其作用机制分析
目的 探讨急性脑缺血再灌注大鼠NMDA受体NR2A/B表达的变化及其作用机制分析.方法 2016年8月-2017年9月选取60只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、假手术组、脑缺血再灌注组,每组20只.采用动脉引流法进行7 min全脑缺血,再灌注造模,术后在不同时间段对大鼠进行取脑,对脑组织进行切片,放于恒冷箱中保存,进行免疫细胞化学ABC反应与利用图像分析系统进行免疫阳性监测.结果 对照组大鼠的NR2A阳细胞数、平均灰度、平均光密度优于假手术组、脑出血再灌注组(P＜0.05).脑出血再灌注组大鼠阳细胞数、平均灰度、平均光密分别为(74.3±12.4)、(134.4±6.8)、(0.28±0.02),脑出血再灌注组大鼠NR2A、NR2B免疫阳性面积6h后高于对照组,假手术组6h后免疫阳性面积高于对照组(P＜0.05),72h3组大鼠免疫阳性面积差异无统计学意义(P＞0.05).结论 脑缺血再灌注可以导致NR2B、NR2A蛋白表达产生变化,调节NMDA受体的整体功能活性,减轻脑缺血再灌注引起的局灶性脑损伤,对脑神经起到保护作用.
-
扣带回前部NMDA受体与睡眠剥夺模型大鼠外周疼痛感受阈值的相关性研究
目的 通过建立失眠大鼠模型观察外周疼痛感阈值及中枢痛觉扣带回前部谷氨酸受体(NMDA)表达水平.方法 将80只成年雄性WISTAR大鼠随机分为对照组,睡眠剥夺24h组(A组)、睡眠剥夺48h组(B组)及睡眠剥夺72h组(C组),每组各20只WISTAR大鼠,通过小平台环境法建立睡眠剥夺大鼠模型,采用Weatem bloting测定各组大鼠扣带回前部NR2A及NR2B蛋白表达水平,采用热敏测试仪测定各组大鼠足部热痛阈值变化.结果 A组大鼠热刺激足潜伏期为(7.92±4.39)s与对照组(8.02±3.12)s相比无统计学差异(P＞0.05),而B组、C组大鼠热刺激足潜伏期分别为(6.58±1.05)s和(5.12±0.96)s,B、C组热刺激足潜伏期显著短于对照组及A组,差异有统计学意义(P＜0.05).B组、C组大鼠脑组织中NR2A、NR2B表达水平显著高于对照组及A组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 大鼠足部痛阈随睡眠剥夺时间的延长而显著下降,而脑皮质扣带回前部中NMRA受体及NR2B受体随剥夺时间的延长表达水平显著上调.
-
加味四逆散对睡眠剥夺大鼠PFC和海马CA3区NMDA受体表达的调节作用
目的:研究睡眠剥夺大鼠PFC和海马CA3区NMDAR 2B和NMDAR 2B(Tyr1472)表达的变化,并观察加味四逆散对其影响.方法:采用多平台法,进行连续睡眠剥夺168h,使用Western blot技术分析大鼠PFC和海马CA3区NMDAR 2B和NMDAR 2B(Tyr1472)表达的变化.结果:与对照组比较,模型组大鼠PFC和海马CA3区NMDA受体NMDAR 2B和NMDAR 2B( Tyr1472)蛋白质的表达明显减少(P＜0.05).与模型组比较,加味四逆散组大鼠PFC和海马CA3区NMDAR 2B和NMDAR 2B( Tyr1472)蛋白质的表达均明显增加(P＜0.05).结论:加味四逆散能上调睡眠剥夺导致PFC区NMDAR2B、NMDAR2B(Tyt1472)表达的降低；也能上调睡眠剥夺导致海马CA3区NMDAR2B表达的降低.
-
脑通胶囊对VD大鼠海马NMDA受体mRNA表达及锥体细胞的影响
目的:观察脑通胶囊对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆、海马N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体及锥体细胞的影响.方法:随机抽取大鼠19只作为假手术组,其余采用改良的四血管法(4-VO)制备VD模型并随机分为模型组、尼莫地平组( 12 mg·kg-1·d-1)、脑通胶囊高剂量组(1 200 mg· kg-1·d-1)、脑通胶囊中剂量组(600 mg·kg-1·d-1)、脑通胶囊低剂量组(300mg·kg-1·d-1).Morris水迷宫测定各组大鼠学习记忆能力,实时荧光定量PCR检测NMDA受体1亚基和2B亚基mRNA的表达情况,光镜观察海马CA1区锥体细胞形态及数量变化.结果:与模型组比较,脑通胶囊高、中剂量组逃避潜伏期缩短(P＜0.01),穿越原平台次数增加(P＜0.01,P＜0.05),NMDA受体1亚基mRNA表达降低(P＜0.01),2B亚基mRNA表达升高(P＜0.01,P＜0.05)；海马CA1区锥体细胞形态未见明显病变现象,锥体细胞数量增多,锥体细胞丢失比率减少.与尼莫地平组比较,脑通胶囊高、中剂量组穿越原平台次数增加(P＜0.01),NMDA受体1亚基mRNA相对表达量降低(P＜0.01),高剂量组NMDA受体2B亚基mRNA相对表达量增加(P＜0.05),CA1区锥体细胞增多(P＜0.01).结论:脑通胶囊可降低海马NMDA受体1亚基mRNA的表达,提高2B亚基mRNA的表达,减轻海马CA1区锥体细胞损伤,减少锥体细胞丢失比率,从而改善VD大鼠学习记忆能力,这可能是其治疗VD的作用机制之一.
-
脑尔康对AD模型小鼠脑内NMDA受体亚单位NR2B表达的影响
目的:观察复方中药脑尔康对慢性铝中毒AD(Alzheimer's disease)模型小鼠学习记忆及脑内NMDA受体亚单位NR2B蛋白表达的影响.方法:采用跳台法检测AD模型小鼠学习记忆成绩,用免疫组织化学方法观察脑尔康对AD模型小鼠脑皮层及海马结构区域NMDA受体亚单位NR2B蛋白表达的影响.结果:模型组与空白组比较,学习记忆成绩明显下降(P＜0.01);各用药组分别与模型组比较,学习记忆成绩明显提高(P＜0.01);中药组比脑复康组改善效果更好;模型组与空白组比较,皮层和海马内NR2B的表达明显减少(P＜0.01),各用药组小鼠脑内NR2B的表达均不同程度增加(P＜0.05或P＜0.01);中药组与脑复康组比较,NR2B的表达增加更明显(P＜0.01).结论:脑尔康可能通过对 NMDA受体亚单位NR2B蛋白表达的保护作用而发挥抗痴呆作用.
-
补肾活血复方对成骨细胞谷氨酸NMDA(N-methyl-D-aspartate)受体信号通路的影响
目的:观察补肾活血复方含药血清OB增殖、ALP活性、NR1、NR2a、NR2d蛋白表达的影响.方法:(1)取1d龄、5d龄SD大鼠OB、OC,建立OB-OC共育体系;(2) MTT法检测OB增殖;ALP检测试剂盒检测ALP活性;Western-blot检测NR1、NAR2a、NR2d蛋白含量的情况.结果:补肾活血复方血清可增强OB增殖、提高ALP活性、促使OB NR1、NR2a、NR2d蛋白的含量增加.加入MK801降低OB增殖、ALP活性、OB NR1、NR2a、NR2d蛋白的含量.结论:补肾活血复方含药血清可通过谷氨酸NR信号通路促进OB的骨形成作用.
-
丹参酮IIA对大鼠脊髓神经细胞NMDA受体的影响
目的:研究丹参酮IIA磺酸钠对大鼠脊髓神经细胞谷氨酸损伤模型NMDA受体结合率、受体含量及受体亚基基因表达的影响,为脊髓缺血再灌注损伤治疗提供实验依据.方法:切取胎鼠脊髓,培养脊髓神经细胞,将培养的脊髓神经细胞随机分为3组,即对照组、模型组及丹参酮组,每组12孔细胞.对照组细胞正常培养,模型组采用谷氨酸制作缺血再灌注损伤模型,丹参酮组在造模前予丹参酮IIA磺酸钠预处理.采用放射性配基法测量各组细胞NMDA受体含量及结合力,采用Weston-boltting法测量各组细胞NMDA受体各亚基的基因表达.结果:模型组NMDA受体的含量及亲和力较对照组明显增高(P<0.05),丹参酮组NMDA受体的含量及亲和力较对照组增高(P<0.05),但明显低于模型组(P<0.05).模型组较对照组NMDA受体NR1亚基的表达增高(P<0.05),NR2、NR3亚基表达无明显差异(P>0.05);丹参酮组与对照组相比,NMDA受体NR1、NR2亚基表达增高(P<0.05),NR3亚基表达无明显差异(P>0.05).丹参酮组NR1亚基表达低于模型组(P<0.05),NR2亚基表达高于模型组(P<0.05).结论:丹参酮IIA能通过降低NMDA受体结合力、受体含量及NR1亚基的表达,提高NR2亚基表达,从而起到减少脊髓缺血再灌注损伤的作用.
-
bFGF对神经病理性疼痛大鼠脊髓NMDA受体表达的影响
目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在大鼠神经病理性疼痛中的作用及对脊髓N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体表达的影响.方法 48只雄性SD大鼠随机分为假手术组(A组)、假手术+bFGF抗体组(B组)、SNI组(C组)、SNI+bFGF抗体组(D组),每组12只.采用坐骨神经分支选择性损伤(SNI)方法制备神经病理性疼痛模型.其中B组和D组于建模后1、6、9、13、16、20天鞘内注射bFGF抗体18 μg,注射药物容量为40 μL.A、C组则在相同时间点注射相同体积磷酸盐缓冲液(PBS).分别于术前1天和术后1、4、7、14、21天测定机械刺激缩足反射阈值(PWMT).术后第21天处死大鼠取L4-6节段脊髓,免疫组化测定胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达,RT-PCR及Westem blot检测NMDA受体亚基NR1、NR2A、和NR2B表达变化.结果 与A组和B组比较,C、D组PWMT降低,脊髓GFAP、NR1和NR2B表达升高(P＜0.05).与C组比较,D组PWMT升高,脊髓GFAP、NR1和NR2B表达降低(P＜0.05).结论 鞘内注射bFGF能缓解SNI大鼠神经病理性疼痛,其机制可能与其调节NMDA受体表达有关.
关键词： 碱性成纤维细胞生长因子 NMDA受体 神经病理性疼痛 -
NR2B反义寡核苷酸对大鼠海马CA1区NR2B mRNA表达的影响
目的:观察NMDA受体2B亚单位(NR2B)反义寡核苷酸(ANR2B)对海马CA1区NR2B mRNA表达的影响,筛选有效的ANR2B,探讨改变NR2B mRNA表达的新方法.方法:正常SD大鼠,海马CA1区立体定位注射ANR2B,灌注取脑,连续冰冻切片,原位杂交组织化学方法染色,光镜下观察NR2B mRNA在ANB2B作用下的表达变化.结果:正常大鼠海马CA1区立体定位注射ANR2B后,注射点及其周围NR2B mRNA原位杂交染色强度明显下降,仅有少量锥体细胞和颗粒细胞散在分布;而在注射NR2B正义寡核苷酸(SNR2B)、生理盐水(NS)及NS插针不注射(NSNO)的海马切片上,海马CA1区的染色特征与注射ANR2B有明显差别,其作用区锥体细胞、颗粒细胞及顶树突的NR2B原位杂交染色强度无明显变化.结论:ANR2B能够降低NR2B mRNA在正常大鼠海马CA1区的基础性高表达.
-
NR2A亚单位C末端的部分缺失对 NMDA受体功能和表达的影响
目的研究NMDA受体NR2A亚单位羧基末端(以下简称为C末端)不同部位缺失对该受体表面表达和功能的影响.方法以GFP-NR2A为起始质粒构建了4个依次缺失部分C末端的GFP标记的NR2A亚单位表达载体:NR2A-△C1(缺失897L至1017S)、NR2A-△C2(缺失1024D至1142P)、NR2A-△C3(缺失1149D至1347G)及NR2A-△C4(缺失1354S至1464V);通过活细胞免疫化学染色分析这些载体与NR1-1a亚单位共转染后在HEK293细胞和海马神经元的表面表达,并通过电生理检测转染HEK293细胞NMDA受体的功能. 结果当NR2A-△C1、NR2A-△C2、NR2A△C3、NR2A-△C4分别与NR1-1a共转染HEK293细胞时,均可获得细胞膜表面表达,其表面染色阳性的细胞在绿色荧光蛋白细胞中的百分比与共转染NR1-1a/GFP-NR2A时的百分比相比均无显著性降低;并且NR1-1a/NR2A-△C2或NR1-1a/NR2A-△C4转染的HEK293细胞均能记录到谷氨酸诱发的NMDA受体通道电流.在海马神经元中,当转染NR2A-△C1、NR2A-△C2或NR2A-△C3时,单位长度树突表面表达的受体簇数量均显著低于转染GFP-NR2A的神经元,而转染NR2A-△C4的树突表面表达的受体簇数量却无显著性降低.结论在HEK293细胞中,C末端部分缺失的NR2A亚单位不影响含NR2A亚单位的NMDA受体在膜表面表达;而在海马神经元中,含NR2A的NMDA受体的表面表达数量受NR2AC末端的调控.
-
NMDA受体在培养海马神经元树突树上的表面表达及定位
目的研究NMDA受体在不同发育阶段的培养大鼠海马神经元的表面表达以及在树突结构上的定位. 方法构建绿荧光蛋白(GFP)标记的NMDA受体NR1a亚单位的表达载体(GFP-NR1a),转染原代培养5d的大鼠海马神经元,用抗GFP抗体和Cy3交联的二抗染色活细胞表面的受体簇.结合青荧光蛋白(CFP)的共表达突出神经元的结构细节,观察表面NMDA受体簇的分布. 结果 GFP-NR1a转染的神经元能表达点状、且分布于全细胞的绿荧光NMDA受体簇,在成熟神经元的树突上多为表面受体簇.培养7 d和培养17 d的转染神经元树突表面的NMDA受体簇密度并无显著差异.另外,培养7 d的海马神经元,表面NMDA受体簇几乎都位于树突干上,而树突丝上则罕见;培养2周后,约一半的NMDA受体簇分布于树突棘. 结论表面NMDA受体簇的分布具有树突结构相关的特异性,尤其是发现在发育早期NMDA受体簇罕见于树突丝,却已广泛分布于树突干上,且密度相当于成熟神经元.提示在突触形成过程中NMDA受体可能是以预先表达于树突干表面的受体簇形式被新形成的突触所征募.
-
MK-801和L-NA对成年仓鼠视网膜节细胞轴突损伤后存活与再生的影响
目的研究NMDA受体阻断剂MK-801和一氧化氮合酶抑制剂L-NA对成年仓鼠视网膜节细胞(下称节细胞)轴突切断后存活和再生的影响. 方法切断动物左侧视神经后分两组:存活组存活2、7或14d;再生组视神经眶侧断端同一段坐骨神经吻合后存活28d.所有实验动物自视神经切断前1d开始,每日接受腹腔注射MK-801和/或L-NA直至处死. 结果存活节细胞均数在MK-801组与对照组间无显著性差异,但L-NA组在术后2和7d节细胞数较对照组显著增加,合用MK-801/L-NA较单用MK-801或L-NA使更多节细胞存活.而MK-801或L-NA对节细胞轴突在周围神经移植物内的再生均无明显作用. 结论 1mg/kg剂量的MK-801对节细胞的存活无明显作用,但同时阻断NMDA受体和抑制一氧化氮合酶比单纯抑制一氧化氮合酶对节细胞有更强的神经保护作用.1.0mg/kg MK-801或4.5mg/kg L-NA对节细胞轴突的再生无明显促进作用.
-
高湿热环境下谷氨酸及其受体在大鼠下丘脑的表达变化
目的 探讨高湿热环境下大鼠的耐热极限时间和下丘脑内谷氨酸(Glu)和N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体2(NMDAR2)的表达及其意义.方法 将大鼠置于仿真气候舱[干球温度(40.0±0.5)℃,相对湿度(60±5)%]内,观察动物的行为反应,动物出现昏迷或抽搐则立即取出动物,常规固定、取脑制片,用免疫组织化学方法显示Glu、NMDAR2和加压素(VP)在下丘脑的室旁核(PVN)和视上核(SON)的表达.结果 动物在高湿热环境下表现躁动不安、呼吸加快、前爪抓挠面部,持续120min左右时部分动物死亡.切片观察湿热刺激组的下丘脑PVN和SON中Glu、NMDAR2以及VP表达比对照组明显上调(P＜0.01).结论 高湿热环境下大鼠的耐热极限时间约是120 min.下丘脑内的谷氨酸代谢参与机体对高湿热刺激的反应及其调节过程.
-
在发育过程中小鼠脑N-甲基-D-门冬氨酸受体亚单位蛋白的表达
为了测定新生小鼠发育过程中脑组织中NMDA受体亚单位蛋白的表达水平,用NMDA受体亚单位特异的抗体,通过引入成年小鼠皮层组织系列稀释的样品作标准,建立了定量的免疫印迹分析法.并对出生后不同日龄(2～35d)新生小鼠前脑和小脑组织中NMDA受体ζ1、ε1和ε2亚单位蛋白进行了测定.结果表明,ζ1、ε1和ε2三个亚单位在大鼠前脑组织中呈相似的增加趋势,只是ε1的表达明显的滞后.而小脑此3种亚单位的表达绝对量均明显低于前脑组织,并且趋势各不相同:ζ1经明显的下降后维持在一定的水平,ε1呈增加趋势,ε2出生后5d即有相当的表达,以后下降,3周后几乎不能测出.上述结果与相应的mRNA半定量分析结果基本一致,并且与大鼠同类研究结果大致吻合.
-
NMDA受体靶向拮抗剂的研究进展
N-甲基-D-天冬氨酸受体( N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)是中枢神经系统兴奋性氨基酸-谷氨酸的重要受体,被激活后产生一种缓慢而持久的兴奋性反应,对神经元突触传递、神经系统发育具有重要作用.在病理状态下,可导致NMDAR过度激活,是受体兴奋毒性的重要发病机制.受体的拮抗剂包括离子通道孔拮抗剂、NR2B选择性拮抗剂、甘氨酸位点拮抗剂、甘氨酸位点部分激动剂等. NMDAR靶向拮抗剂在减轻兴奋毒性过程中的作用已得到重视,其为预防和减缓神经元的损害提供了新的途径.本文综述了 NMDAR 靶向拮抗剂的新研究进展,以期阐明NMDAR拮抗剂的临床应用前景.
-
Homer蛋白介导谷氨酸受体信号转导
Homer蛋白是一类联系突触内细胞骨架蛋白、信号蛋白的重要物质.Homer家族蛋白可和mGluRI 、IP3R、Shank、RyR中富含脯氨酸的序列结合.Homer蛋白可以自我交联形成同聚或异聚体,此多聚体通过与多种蛋白、受体形成复合体并相互作用,在信号转导、突触形成、受体在细胞定位起重要作用.
关键词： Homer 代谢型谷氨酸受体I亚型 Shank 三磷酸肌醇受体 NMDA受体
