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Th17、Th22/Treg细胞及相关细胞因子在儿童哮喘患者外周血中变化及意义
目的 探讨儿童哮喘患者外周血Th17、Th22及Treg细胞及其细胞因子在儿童哮喘发病中的作用.方法 收集本院2015年1月-2016年6月收治的儿童哮喘初发患者58例(BA初诊组),缓解患者45例(BA缓解组),以同期健康体检儿童30例作为正常对照组(HC组),采用流式细胞仪检测3组外周血Th17、Th22细胞及调节性T细胞频数.酶标法检测患者血浆中相关细胞因子IL-17、IL-21、IL-22及IL-35.结果 BA初诊组外周血Th17、Th22细胞比例及其相关细胞因子IL-17、IL-21、IL-22较HC组、BA缓解组均明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);BA初诊组外周血嗜酸性粒细胞绝对计数高于BA缓解组及HC组,差异均有统计学意义(P＜0.05).BA患儿嗜酸性粒细胞绝对计数与Th17呈正相关,而与Treg细胞呈负相关.结论 Th17、Th22和Treg细胞及相关细胞因子变化可能参与了儿童支气管哮喘的发病.
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Th17、Th22、Treg细胞及相关细胞因子在宫颈癌患者外周血中变化及意义
目的 探讨宫颈癌患者外周血Th17、Th22及Treg细胞频数及相关细胞因子水平变化在UCC发病中的作用.方法 连续收集本院2013年1月-2016年6月收治的UCC患者68例(UCC组),CIN患者55例(CIN组),另选取同期健康体检者30例作为正常对照组(HC组),采用流式细胞仪检测3组外周血Th17、Th22细胞及调节性T细胞频数,以酶标仪检测患者血浆中相关细胞因子IL-17、IL-21、IL-22及IL-35.结果 UCC患者外周血Th17、Th22、Treg细胞比例及其相关细胞因子IL-17、IL-22、IL-21、IL-35较CIN组、HC组均明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05),而CIN患者Th17、Th22及Treg细胞及相关细胞因子较HC组亦明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Th22、Th17、Treg可能在UCC的发病中起着重要作用.
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Th17、Th22/Treg细胞及相关细胞因子在儿童噬血细胞综合征外周血中的变化及意义
目的 探讨噬血细胞综合征患儿外周血Th17、Th22及Treg细胞频数及相关细胞因子变化在HPS发生发展中的作用.方法 收集本院自2014年收治的HPS初发患儿68例,其中缓解患儿55例,死亡13例,以同期健康体检儿童30例作为对照组,以流式细胞仪检测3组外周血Th17、Th22细胞及Treg细胞频数,以酶标仪检测患几血浆中细胞因子IL-17、IL-21、IL-22及IL-35.结果 HPS初诊组外周血Th17、Th22细胞比例及其相关细胞因子IL-17、IL-21、IL-22较对照组、HPS缓解组均明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05),而Treg细胞频数及其相关细胞因子IL-35较对照组、HPS缓解组均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Th22、Th17细胞及其相关细胞因子IL-22、IL-17及IL-21在HPS患儿外周血中增高,而Treg细胞及其相关细胞因子IL-35比例下降,在HPS的发生发展中可能起着重要作用.
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Th17/Treg细胞在儿童支原体肺炎发病中的作用
目的 探讨Th17/Treg细胞在儿童支原体肺炎发病机制中的作用.方法 流式细胞术检测35例急性期、30例恢复期的支原体肺炎患儿和20例同期健康体检儿童外周静脉血Th17/Treg细胞频数,采用ELISA双抗体夹心法检测血清中IL-17、IL-10和TGF-β细胞因子的表达水平.结果 MPP患儿急性期组外周血的Th17细胞百分率均明显高于恢复期组和对照组;而Treg细胞的百分率明显低于恢复期组和对照组;MPP患儿急性期组外周血的IL-17A表达均明显高于恢复期组和对照组;而TGF-β和IL-10表达明显低于恢复期组和对照组,上述差异均有统计学意义(P＜0.01).MPP急性期组和恢复期组的外周血Th17细胞百分率和血清细胞因子IL-17的表达水平呈正相关(r=0.724,r=0.738,P＜0.01);Treg细胞百分率与TGF-β表达水平呈正相关(r=0.826,r =0.814,P＜0.01).结论 Th17/Treg细胞及其细胞因子失衡可能是儿童支原体肺炎发病的重要原因.
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Th17、Th22/Treg细胞及相关细胞因子在儿童过敏性紫癜患者外周血中变化及意义
目的 观察儿童过敏性紫癜(HSP)患儿初发及缓解期Th17、Th22及Treg细胞频数及相关细胞因子水平变化,以探讨HSP发病的免疫学机制.方法 收集本院2014年-2016年收治的HSP初发患儿68例HSP初诊组,缓解期患儿68例为HSP缓解组,另选择同期健康儿童35例为健康对照(HC组)组,流式细胞仪检测3组外周血Th17、Th22细胞及Treg细胞频数;ELISA法检测患儿血浆中细胞因子IL-17、IL-35、IL-22及IL-6.结果 HSP初诊组外周血Th17、Th22细胞比例较HC组、HSP缓解组均明显升高,差异均有统计学意义(P ＜0.05);Treg细胞比例较HC组、HSP缓解组均明显下降;HSP初诊组细胞因子IL-17、IL-22、IL-35、IL-6较HSP缓解组及HC组均明显升高,上述差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 Treg细胞频数下降、Th22、Th17等促炎细胞及相关细胞因子高表达可能是HSP发生的免疫学机制.
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辅助T细胞与宫颈癌临床分期关系探讨
目的 探讨Th17/Treg细胞及其细胞因子与宫颈癌临床分期关系.方法 选择本院2014年1月-2016年12月收治的宫颈癌患者60例,其中Ⅰ期15例、Ⅱ期20例、Ⅲ期12例、Ⅳ期13例.采用流式细胞术检测外周血Th17/Treg细胞表达频率,ELISA法检测IL-17和IFN-γ表达水平.结果 Th17细胞和Treg细胞百分率随临床分期增加而增加,其中Ⅰ期＜Ⅱ期＜Ⅲ期＜Ⅳ期.IL-17表达水平随临床分期增加而增加,其中Ⅰ期＜Ⅱ期＜Ⅲ期＜Ⅳ期.经Pearson相关分析,外周血Th17细胞百分率和细胞因子IL-17的表达水平与FIGO分期呈正相关(r=0.746,r =0.714,P＜0.01).Treg细胞百分率和IFN-y表达水平与FIGO分期无相关性.结论 宫颈癌患者外周血中Th17/Treg细胞的高表达参与了官颈癌的发生、发展过程,有可能作为宫颈癌预后评估的新指标.
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Th17/Treg细胞在噬血细胞综合征患者外周血中的变化及意义
目的 分析噬血细胞综合征患者外周血Th1、Th2、Th17及CD4+ CD25+ CD1271owTreg细胞频数变化,探讨Th1/Th2、Th1 7/Treg细胞失衡在HPS患儿发病机制中作用.方法 收集本院自2013年9月-2015年12月收治的60例HPS初发患者(HPS初诊组),其中缓解患者54例(HPS缓解组),以30例健康体检者作为正常对照组,采用流式细胞仪检测其外周血Th1、Th2、Th17细胞及调节性T细胞频数,比较患者初发时、缓解后以及与正常对照组之间T细胞亚群频数变化.结果 HPS初诊组患者Th1、Th17细胞百分比高于HPS缓解组、正常对照组,而Th2细胞百分比低于正常对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05),与正常对照组相比,HPS组Th1/Th2、Th17 /Treg比值均显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Th1/Th2、Th17/Treg失衡可能参与HPS发病,并且与HPS病程进展有关.
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Th1、Th17、Th22/Treg细胞在儿童免疫性血小板减少性紫癜中的表达及意义
目的 检测儿童免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血中Th1、Th17、Th22及Treg细胞的比例,以期为ITP的免疫治疗提供实验和理论依据.方法 选取来本院就诊的儿童ITP患者48例,同期健康体检儿童30例作为正常对照组.采用流式细胞术检测外周血Th1、Th17、Th22细胞和Treg细胞百分比,分析儿童ITP患者外周血Th1、Th2、Th17、Th22细胞和Treg细胞比例变化与疾病发生的关系.结果 ITP初诊组患者Th2、Th17、Th22细胞百分比高于HC组,而Th1细胞、外周血CD4+ CD25+ FoxP3+ Treg细胞百分比低于正常对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 外周血中Th1/rh2、Th17、Th22细胞和Treg细胞比例失衡可能与儿童ITP患者的发病有关.
关键词： 免疫性血小板减少性紫癜 Th17细胞 Th22细胞 调节T细胞 -
CD4+/CD25+T细胞与旋毛虫急性感染后大鼠的肠道免疫活化
目的 研究不同时间点旋毛虫肠道急性感染后外周血及肠道黏膜内调节T细胞(CD 4+/CD 25+ Treg)的变化规律.方法 研究分为旋毛虫急性感染组(感染后2周,4周及8周)、对照组(与感染组相应年龄及饲养环境).测定肠道病理损伤程度,外周血中及肠道黏膜固有层淋巴细胞中CD 4 +/CD 25+T细胞占CD 4+淋巴细胞的百分比.结果 (1)模型动物感染后2周肠道各部位炎症评分明显高于正常组(回肠末端2.85±0.22,近端结肠2.66±0.27,远端结肠2.43±0.19,P＜0.05)；4周组炎症评分较2周组降低,但仍高于正常组；至感染后8周大致恢复正常.(2)感染2周后外周血Treg百分比明显下降(3.91±0.15 vs 2.28±0.13,P＜0.01),下降比例41.7％.造模后4周,外周血Treg百分比仍低于正常对照组(3.91±0.15 vs 3.01±0.14,P＜0.01).而至模型诱导成功的8周后,血Treg的比例(CD4+ CD25+/CD4+)趋于正常(3,48±0.15,0.01＜P＜0.05).(3)在急性旋毛虫感染2周后LPL- Treg百分比明显下降(8.32±0.70 vs 3.2±0.29,P＜0.01),下降比例60.4％.造模后4周,LPL-Treg百分比仍低于正常对照组(8.32±0.7 vs 4.67±0.36,P＜0.01).而至模型诱导成功的8周后,LPL- Treg的比例(CD 4+CD 25+/CD 4+)大致恢复正常(7.86±0.38,P＞0,05).结论 旋毛虫急性感染诱导感染后肠易激综合征模型中,调节T细胞水平下降.Treg的参与可能与PI-IBS的发生有关.
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旋毛虫感染后肠易激综合征大鼠内脏敏感性及CD4+/CD25+T细胞的变化特征
[目的]观察旋毛虫感染后肠易激综合征(PHBS)不同造模时间点小鼠内脏敏感性的变化及调节T细胞的变化特征,探讨两者在PI-IBS发病机制中的作用及相关性.[方法]旋毛虫幼虫囊泡(350～400条)感染成年SD大鼠,分别于感染后2、8周后行结直肠扩张(CRD),记录腹壁肌电图(EMG),评价内脏感觉功能的变化.取大鼠外周血经流式细胞仪检测CD4+ CD25+细胞比例,评价不同时间点调节T细胞比例变化特征.[结果]①CRD联合EMG腹外斜肌放电次数可以反映内脏感觉功能.②3组不同扩张压力(20、40、60 mmHg)下,旋毛虫急性感染2、8周后(以相同年龄及相同饲养环境的大鼠为对照)腹壁肌电放电次数均显著增加,80 mmHg组差异无统计学意义；提示旋毛虫急性感染后可导致内脏高敏感性,该效应可持续至少8周.③在急性感染后2周,外周血CD4+CD25+/CD4+明显减少,而至模型诱导成功8周后,血CD4+ CD25+/CD4+比例趋于正常.[结论]旋毛虫PI-IBS早期存在内脏敏感性增高及调节性T细胞下调增高,晚期调节性T细胞趋于正常,而内脏高敏感性持续存在.
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TLR8受体的配体逆转NSCLC患者CD4+CD25+Treg 功能的机制研究
目的 初步探讨TLR8激动剂CpG-A对非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CD4+CD25+Treg功能的影响及Foxp3表达的调控.方法 ①MACS分离CD4+CD25+Treg及CD4+CD25-Teff并体外培养;流式细胞术检测CpG-A处理后CD4+CD25+Treg的功能变化.②RT-PCR检测CpG-A处理后CD4+CD25+Treg细胞的TLR8及Foxp3基因的转录和表达.③采用激光共聚焦技术检测CD4+CD25+Treg细胞Foxp3蛋白表达及定位变化.结果 ①CD4+CD25+Treg和CD4+CD25-Teff共培养,加入CpG-A后CD4+CD25-Teff细胞增殖比率增高,平均荧光强度(MFI)明显降低,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).②CpG-A能够明显下调Foxp3 mRNA相对表达量.③CpG-A处理后CD4+CD25+Treg细胞Foxp3蛋白荧光强度较对照组明显减弱.结论 CpG-A激活TRL8信号可以逆转NSCLC患者体外培养的CD4+CD25+Treg对CD4+CD25-Teff的抑制能力,其机制可能与下调Foxp3的表达相关.
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类风湿性关节炎急性期患者外周血Treg/Th17细胞平衡变化的探讨
目的 观察类风湿性关节炎(RA)活动期患者外周血调节T细胞(Treg)和Th17细胞的数量,探讨RA患者Treg/Th17细胞平衡变化的特点.方法 用流式细胞技术检测RA活动期患者外周血中CD4+CD25+FoxP3+的Treg细胞和CD4+IL-17+的Th17细胞数量,并计算Treg/Th17比值.同时检测健康志愿者作为对照.结果 RA活动期患者外周血Treg细胞低于健康对照(P<0.001),Th17细胞高于健康对照(P=0.002),Treg/Th17比值低于健康对照(P<0.001).结论 RA活动期患者外周血Treg/Th17细胞比值减低,提示Treg/Th17细胞失衡在RA的发病机制中具有重要作用.
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调节T细胞和1型糖尿病
1型糖尿病是一种T细胞介导的胰岛β细胞进行性损伤的自身免疫病.在自身免疫过程中不仅有自身反应性T细胞的参与,也有可抑制免疫反应的自身反应调节性T细胞(Tregs)的参与,因而提高Tregs的反应性抑制自身免疫从而治疗糖尿病是很有希望的治疗策略.Tregs存在不同类型,它们的作用方式和表型还需进一步界定.其中抗原特异的诱导型Tregs可以在病变器官内发挥作用,通过细胞因子介导的"抑制旁观者"机制不依赖于抗原特异性地抑制自身反应性T细胞.而无抗原特异性的自然生成CD4+CD25+Tregs的应用将导致全身性的免疫调节和抑制,可能更适用于全身性而非器官特异性的自身免疫紊乱.因此应用抗原特异的诱导型Tregs治疗1型糖尿病可能更可取,但其成功尚有赖于对其适诱导抗原、精确表型及体内作用机制的进一步了解.
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Th17/Treg细胞对自身免疫性肝病的活动性及预后的影响
目的 探讨自身免疫性肝病(AILD)患者外周血中辅助性T细胞(Th17)和调节性T细胞(Treg)的表达情况及临床意义.方法 选择42例AILD患者为实验组,11例健康体检者作为对照组,采用流式细胞术检测实验组和对照组外周血单个核细胞中Th17和Treg细胞在淋巴细胞亚群中所占百分率,同时检测AILD患者的肝功能生物化学指标.结果 AILD组患者Th17细胞百分率、Th17/Treg比值水平均高于健康对照组(中位数分布为0.73％比0.23％、0.23比0.07),差异有统计学意义(Z=-3.664,P＜0.01;Z=-4.014,P＜0.01),Treg细胞百分率低于健康对照组[(3.04±1.10)％比(4.75±2.45)％],差异有统计学意义(t=-2.255,P＜0.05);AILD活动期患者Th17细胞百分率及Th17/Treg比值高于缓解期患者(中位数分别为0.79％比0.29％、0.31比0.14),差异有统计学意义(Z=-2.189,P＜0.05;Z=-2.560,P＜0.05);活动期患者中治疗后未愈患者基线Th17细胞百分率和Th 17/Treg比值高于治疗后好转患者(中位数分别为1.22％比0.69％、0.52比0.24),差异有统计学意义(Z=-1.968,P＜0.05;Z=-2.028,P＜0.05).结论 Th17/Treg比例失调在AILD发病及发展中发挥重要作用,且与活动期患者短期内预后不良有一定关系.
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孟鲁司特钠对小儿毛细支气管炎TH17/Treg的调节作用及疗效研究
目的:观察孟鲁司特钠对小儿毛细支气管炎Th17/Treg的调节作用及疗效.方法:选取2013年6月至2015年4月我院儿科治疗的毛细支气管炎患儿124例,随机分为对照组和观察组各62例.对照组给予常规综合治疗,包括吸氧、利巴韦林抗病毒、沙丁胺醇气雾剂平喘、合并细菌感染时抗感染、氯丙嗪镇静等;观察组在对照组治疗基础上加用孟鲁司特钠片4 mg/d,每天睡前顿服,连续治疗7d.流式细胞仪检测Th17和Treg细胞水平,ELISA法测定IL-17和IL-10表达水平,评价疗效.结果:治疗前,两组Th17、Treg、IL-17、IL-10水平比较差异无统计学意义(P均＞0.05);治疗后,两组Th17、IL-17水平均降低且观察组低于对照组,Treg、IL-10水平均升高且观察组高于对照组(P均＜0.05).观察组总有效率为90.32％,高于对照组的72.58％,且症状消失时间和住院时间均短于对照组(P均＜0.05).结论:孟鲁司特钠可以调节毛细支气管炎患儿体内Th17/Treg平衡,对小儿毛细支气管炎具有一定的临床应用价值.
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关节置换术后患者外周血调节T细胞水平变化及其临床意义
目的 探讨关节置换术后患者外周血调节T细胞水平变化及其临床意义.方法 入选2008年7月～2011年8月在某院行关节置换术患者278例,同时入选该院采用关节镜治疗非关节置换手术患者263例作为对照组,采用流式细胞术检测两组患者手术前后CD+4 CD25+T细胞比例.结果 关节置换手术组患者手术后CD+4 CD25+T细胞占CD+4T细胞百分比显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05)；对照组手术前后差异无统计学意义(P＞0.05)；关节置换手术组患者手术前后CD4 CD25+T细胞比例变化为(1.69±1.23)％显著高于对照组(0.15±1.27)％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 关节置换术后患者发生的感染与假体植入引起的免疫反应有关,外周血调节T细胞水平可能成为感染存在及其严重程度的指标之一.
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慢性丙型肝炎抗病毒治疗过程中CD4+的Treg细胞与Th17细胞动态变化
目的 观察慢性丙型肝炎在抗病毒治疗过程中CD4+的Treg细胞与Th17细胞动态变化,分析与抗病毒疗效相关的免疫因素.方法 收集20名健康受试者(对照组)进行肝功能和CD4+的Treg细胞与Th17细胞检测;收集19例慢性丙型肝炎患者(慢性丙肝组)给予聚乙二醇干扰素(PEG-IFN)α-2a 180 μg/周,联合利巴韦林15mg· kg-1·d-1,口服,疗程48周,分别于治疗前与治疗后的第4周,第12周,第24周,第48周,进行HCV-RNA、肝功能和CD4+的Treg细胞与Th 17细胞检测.两组数据进行比较,分析慢性丙型肝炎在抗病毒治疗过程中的CD4+的Treg细胞与Th17细胞动态变化与抗病毒疗效相关的免疫因素.结果 慢性丙肝组中19例患者经抗病毒治疗HCV-RNA检测均为阴性,肝功能恢复正常,Treg细胞百分率与Th17细胞百分率于12周均恢复正常,与对照组比较无显著性差异(P＞0.05),其两者比值于4周恢复正常,与对照组比较无显著性差异(P＞0.05),并且病毒的载量与两种细胞百分率呈负相关.结论 本实验结果能够反映出慢性丙型肝炎患者治疗过程中机体两种免疫细胞的变化,对治疗的监控及预后的判读有着积极的作用.
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新风胶囊通过BTLA-HVEM诱导Treg免疫耐受改善膝骨关节炎大鼠心肺功能
目的:观察膝骨关节炎(KOA)大鼠心肺功能的变化及新风胶囊(XFC)对其影响,探讨可能的分子机制.方法:按随机数字表将40只大鼠随机分为正常对照(NC)组,模型对照(MC)组,氨基葡萄糖对照(GS)组,XFC组,每组10只.除NC组外,采用关节腔注射木瓜蛋白酶和L-半胱氨酸方法复制成KOA大鼠模型,造模后第14天开始给药.NC组及MC组均给予生理盐水,剂量为0.01 g/kg,其余2组分别给予GS、XFC混悬液,剂量分别为0.098 g/kg、0.375 g/kg.采用超声诊断仪检测大鼠心功能,动物肺功能仪检测大鼠肺功能,ELISA法检测BTLA、HVEM、IL-17、IL-4、TGF-β1；流式细胞术检测大鼠外周血CD4+ CD25+Treg、CD4+ CD25+Foxp3+ Treg的表达.结果:与NC组比较,MC组体质量、E、E/A、FVC、FEV1、FEF25、FEF50、FEF75、MMF、PEF,BTLA、HVEM、IL-4、CD4+ CD25+ Treg、CD4+ CD25+ Foxp3+Treg明显降低,TGF-β1、IL-17明显升高(P＜0.01或P＜0.05).与MC组比较,各组大鼠体质量,心功能参数E峰、E/A,肺功能参数FEV1、FEF5O、FEF75、PEF,BTLA、HVEM、IL-4、CD4+ CD25+ Treg、CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg明显升高,关节软骨Mankin评分、心系数、肺系数、TGF-β1、IL-17明显降低(P＜0.01或P＜0.05)；与GS组相比,XFC组体质量、Treg升高为明显(P＜0.01或P＜O.05).结论:新风胶囊改善KOA大鼠关节软骨Mankin评分,改善其心肺功能,其机制可能是促进BTLA-HVEM负调共刺激信号作用,诱导Treg免疫耐受,上调IL-4表达,下调IL-17、TGF-β1表达,抑制异常免疫炎症反应.
关键词： 骨关节炎 心肺功能 B、T淋巴细胞弱化因子 调节T细胞 新风胶囊 -
2型糖尿病外周血调节性T细胞和脂肪因子水平与下肢动脉病变的关系
2型糖尿病(type 2 diabetes,T2D)是一种伴有自身免疫反应、慢性低度炎症性疾病;免疫功能紊乱及脂肪细胞因子参与了T2D的发生发展.T2D患者中有5％～20％出现周围动脉病变(peripheral arterial disease,PAD),而PAD的主要病理变化是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS).CD4+ CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)是一类具有免疫调节功能的T淋巴细胞,在维持机体免疫自稳、调控免疫应答方面起重要作用.Foxp3作为Treg发育关键的核转录因子[1],是目前公认的Treg特异性标记物.研究表明,CD4+ CD25+ Treg在AS的发生、发展过程中,可以抑制Thl和Th2病理反应,控制多种免疫炎症疾病的发展,在免疫耐受的维持中起重要作用[2].
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调节性T细胞治疗系统性红斑狼疮的研究进展
系统性红斑狼疮(SLE)作为一种典型的自身免疫性疾病,SLE患者体内免疫稳态被打破:T、B细胞功能紊乱,促炎因子过度释放,导致全身自身免疫反应的发生.然而调节T细胞(Treg)是一类具有免疫抑制和维持免疫稳态功能的细胞群,已被用于肿瘤、感染、炎症性疾病和1型糖尿病的治疗中.本文以Foxp3+ Treg为代表,阐述了Treg的分类、免疫抑制机制及其可塑性研究和调控机制,总结了Treg体内诱导的进展及培养扩增纯化技术,以期探索基于调节细胞的疗法(regulatory cell-based therapy)重建免疫耐受的治疗策略,达到治疗或治愈SLE的目的.
