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重组疫苗E.coli LLO/OVA对小鼠CD4+CD25+Treg细胞调节作用的研究
目的:探讨重组E.coli LLO/OVA对小鼠CD4+CD25+Treg细胞的调节作用.方法:E.coli LLO/OVA和E.coli OVA分别免疫小鼠后,磁珠分离脾脏CD11c、CD4+CD25+Treg和CD4+CD25-T细胞,比较两组CD11c细胞对CD4+CD25+Treg细胞分泌IL-10的影响,以及CD4+CD25+Treg细胞抑制CD4+CD25-T细胞增殖的作用;流式细胞术分析荷瘤小鼠OVA特异性CD8+T细胞比率,观察去除CD4+CD25+Treg细胞前后两组黑色素瘤B16-OVA荷瘤小鼠肺转移情况.结果:E.coli LLO/OVA免疫组小鼠脾脏CD4+CD25+Treg细胞产生IL-10水平明显低于E.coli OVA免疫组小鼠(P＜0.05),CD4+CD25+Treg细胞对CD4+CD25-T 细胞增殖的抑制作用明显减弱(P＜0.05),且OVA特异性CD8+T细胞数量明显增多(P＜0.05).在去除CD4+CD25+Treg细胞前后,E.coli LLO/OVA免疫的荷瘤小鼠肺转移结节数无明显减少(P＞0.05).结论:重组E.coli LLO/OVA可通过下调小鼠CD4+CD25+Treg细胞数量、抑制其功能而促进机体特异性抗肿瘤免疫.
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哮喘小鼠CD4+CD25+Foxp3+调节T细胞和Foxp3蛋白的变化及淫羊藿苷干预作用
目的:研究哮喘小鼠CD4+CD25+Foxp3+调节T(Treg)细胞和Foxp3蛋白的变化,探讨淫羊藿苷对哮喘干预机制.方法:将BALB/c小鼠32只随机分为正常对照组、哮喘模型组、淫羊藿苷组、地塞米松阳性对照组,每组8只.哮喘模型制备用卵白蛋白(OVA)致敏大鼠并雾化吸入刺激,治疗组采用相应药物灌胃给药,对照组用等量生理盐水代替.后一次激发24小时后,采用Buxco肺功能仪有创法检测小鼠气道反应性;HE染色评价观察小鼠肺组织病理形态学改变;流式细胞术检测脾脏CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例及Foxp3蛋白表达量;免疫印迹法测定肺组织Foxp3蛋白表达量;ELISA法测定血清及肺泡灌洗液(BALF)IL-10水平.结果:与正常对照组比较:模型组气道阻力及气道炎症指数显著增加(P< 0.05);脾Treg细胞比例无明显变化(P> 0.05);脾Foxp3蛋白表达显著下降(P< 0.05),肺组织Foxp3蛋白表达显著升高(P< 0.05),外周血IL-10水平显著下降(P< 0.05),BALF中IL-10无显著差异(P> 0.05);与模型组比较:淫羊藿苷组气道阻力和气道炎症明显减轻(P< 0.05);脾Treg细胞比例和脾Foxp3蛋白表达水平无显著变化(P> 0.05),但淫羊藿苷可进一步上调哮喘小鼠肺组织Foxp3蛋白表达量(P< 0.05),并增加外周血IL-10水平(P< 0.05).结论:哮喘小鼠脾脏CD4+CD25+Foxp3+ Treg细胞Foxp3蛋白表达水平下降,淫羊藿苷可显著改善哮喘小鼠气道炎症和气道高反应,可能与其上调肺组织Foxp3蛋白表达和增加外周血IL-10水平相关.
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自身免疫性肝病患者外周血 Th17与 Treg 细胞及其相关因子表达的研究
目的：研究自身免疫性肝病（AILD）患者外周血中辅助性 T 细胞17（Th17）、调节性 T 细胞（Treg 细胞）及其细胞因子白细胞介素-17（IL-17）、转化生长因子-β（TGF-β）的表达情况。方法选择46例 AILD 患者，分为自身免疫性肝炎患者（AIH 组）和原发性胆汁性肝硬化患者（PBC 组），采用流式细胞术检测 AIH 组、PBC 组和对照组外周血单个核细胞中 Th17和 Treg 细胞的比例；应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中 Th17的相关因子 IL-17和 Treg的相关因子 TGF-β含量。结果AIH 组和 PBC 组患者 Th17细胞比例高于对照组（P ＜0．01），Treg 细胞显著低于对照组（P ＜0．05）；AIH 组和 PBC 组患者 IL-17的含量较对照组升高（P ＜0．05），血清 TGF-β的含量较对照组降低（P＜0．01）。结论在 AILD 患者中，Th17、Treg 细胞的变化可能在 AILD 发病机制中发挥重要作用。
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术前调节性T细胞水平与肝癌肝移植术后肿瘤复发的关系
目的:探讨术前调节性T细胞(Treg)水平与肝癌肝移植术后肿瘤复发的关系.方法:搜集2006年1月至2007年2月在我院实施的32例肝癌肝移植病人术前外周血及肿瘤组织,采用流式细胞技术检测外周血CD4+D25+调节性T细胞的比例,采用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中FoxP<,3>+细胞浸润的比例,以正常人的外周血、正常肝组织及肝硬化组织作对照.对32例病人随访18个月,观察肿瘤复发时间.分析术前Treg水平与肝癌肝移植术后肿瘤复发时间的相关性,单因素回归判断术前Treg水平对肿瘤复发时间的影响.结果:肝癌病人外周血及肝脏中Treg的水平较正常人为高:术前外周血Treg水平与肝移植术后肿瘤复发时间呈负相关(r=-0.87);术前Treg水平是影响术后肿瘤复发时间的独立危险因素(P<0.01);高Treg组病人肝移植术后一年肿瘤复发率高于低Treg组者,差异有统计学意义(P<0.05).结论:术前调节性T细胞水平可作为肝癌肝移植术后肿瘤复发的预测指标之一.
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CD4+T细胞极化在单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化炎症中的作用及机制研究
目的 探究CD4+T细胞极化在肾间质纤维化炎症反应过程中的作用.方法 采用单侧输尿管结扎(UUO)大鼠模型,24只SD大鼠随机分为假手术对照组、UUO3d组和UUO7 d组.利用H-E、MASSON染色技术观察肾组织纤维化程度,采用免疫磁珠分选外周血中CD4+T细胞并在CD3/28-IL-2的刺激下培养3d,流式细胞术比较UUO大鼠和正常大鼠CD4+T细胞体外增殖、极化情况,PCR法检测转录因子的差异.结果 UUO造模后肾组织纤维化程度以及淋巴细胞的浸润程度加重,CD4+T细胞增殖增加(P＜0.05).造模组IL17A+ CD4+ T/CD4+T细胞比例和CD4+ CD25+ Foxp3 +/CD4+T比例较正常组表达增加(P＜0.05).检测CD4+T各亚群上游转录因子,发现促炎基因RORγt、T-bet随造模时间显著增加,抑炎基因Gata-3下调,调节炎症的基因Foxp3上调(P＜0.05).结论 肾间质纤维化会促使CD4+T细胞增殖并释放多种促炎因子,加重炎症反应,使病情恶化.
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移植物抗宿主病与移植物抗白血病效应研究新进展
异基因骨髓移植是治疗多种血液系统恶性肿瘤的有效方法,治疗效果主要归功于移植物抗白血病效应(graft-versus-leukemia,GVL),它可以清除残存肿瘤细胞,提高生存率.然而,GVL与骨髓移植的一大并发症——移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)紧密相连.现代科学研究揭示了急性GVHD的病理过程,在此过程中有一些机制发挥着抗肿瘤作用.曾经的观念认为,GVHD和GVL是相互关联、密不可分的,但近的研究显示,虽然尚不能采取某种方式将这两者截然分开,但合理利用一些免疫细胞、细胞因子、信号通路、组织抗原,可以达到既降低GVHD又保留GVL的目的 .
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维生素D与免疫的关系
维生素D参与钙、磷代谢,还是一类重要的免疫调节剂,对固有免疫和适应性免疫均有调节作用,维生素D不足可能导致异常反应如感染和自身免疫性疾病.有关维生素D对健康的潜在影响,正受到越来越多的关注.本文就维生素D的免疫调节作用作一概述.1 维生素D的来源维生素D是一组具有生物活性的脂溶性类固醇衍生物.主要包括维生素D2和D3.维生素D2又名麦角钙化醇,主要由植物中合成,酵母、麦角、覃类、植物油等含量较多,不能被人体吸收,经紫外线照射下可以转变为能被人体吸收的维生素D2;维生素D3又名胆钙化醇,主要存在于海鱼、动物肝脏、蛋黄和瘦肉、脱脂牛奶、鱼肝油、乳酪、坚果和海产品中,大多数高等动物的表皮和皮肤组织中都含7-脱氢胆固醇,在紫外线照射下转化成维生素D3.两种维生素D具有同样的生理作用.人体的维生素主要由人体自身合成和动物性食物中获得.
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调节T细胞及其在皮肤病中的作用
调节T细胞是一类具有免疫抑制作用的细胞群,通过细胞接触抑制或抑制性细胞因子主动抑制自身免疫性T细胞.对于维持机体免疫自稳、预防自身免疫病具有极其重要的作用.近研究表明,调节T细胞与银屑病、系统性红斑狼疮等自身免疫性皮肤病和皮肤肿瘤的发病存在相关性,综述了调节T细胞在这些皮肤病的发病机制中的作用.
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雷公藤多甙片对AA大鼠调节T细胞及Foxp3表达的影响
目的:观察雷公藤多甙片(TPT)对佐剂性关节炎(AA)大鼠的调节T细胞及Foxp3的影响.方法:将48只大鼠随机分为正常对照组(NC)、模型对照组(MC)、甲氨喋呤组(MTX)、雷公藤多苷片组(TPT),每组12只,分别向(NC除外)各组大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂(FCA)造模,造模后第19天给药,NC及MC给予生理盐水,其余2组分别给予MTX、TPT.观察各组大鼠体质量、足跖肿胀度、关节炎指数(AI)、调节T细胞(Treg)、Foxp3表达的变化.结果:1.与NC组相比,MC组大鼠的体质量明显减轻(P<0.05),足跖肿胀度、AJ明显升高(P<0.01);与MC组相比,各治疗组体质量明显升高(P<0.05),足跖肿胀度、AJ明显降低(P<0.01);与MTx组比较,TPT组大鼠体质量增加更为明显(P<0.05),足跖肿胀度减低更为明显(P<0.05).2.与NC组比较,MC组CD4+CD25+Treg显著降低(P<0.01);与MC组比较,各治疗组CD4+CIY25+Treg均升高(P<0.05或P<0.01);与MTX组比较,TPT组CD4+CD25+Treg升高(P<0.05).3.与NC组相比,MC组Foxp3蛋白染色指数、蛋白积分光密度值、Foxp3mRNA的表达水平均明显下调(P<0.01);与MC组比较,MTX组、TPT组Foxp3蛋白染色指数、蛋白积分光密度值、Foxp3mRNA的表达水平均明显升高(P<0.01或P<0.05);与MTX组比较,TPT组Foxp3蛋白染色指数、蛋白积分光密度值明显升高(P<0.05).结论:TPT能改善.AA大鼠体质量、足跖肿胀度、AI同时能够调节调节T细胞、Foxp3的表达.
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不同分期老年COPD患者Th17、Treg细胞比例及炎性因子水平研究
目的：探讨不同分期老年慢性阻塞性肺病( COPD)患者外周血Th17、调节T细胞( Treg)细胞及相关炎症因子水平的变化及其与患者肺功能的关系。方法选取2012年1月至2014年1月在本院呼吸内科就诊的68例COPD患者(其中稳定期32例,急性期36例)为研究对象,另选取30例健康体检者为对照组。应用流式细胞仪测定两组外周血CD4+ Th17、CD4+ CD2+5 Treg细胞的比率。应用ELISA法测定两组白细胞介素-6,10,17,21,22(IL-6,10,17,21,22)及转化生长因子β(TGF-β)水平。结果急性期组患者FEV1、FEV1/FVC水平显著低于稳定期及对照组(P<0．05),而稳定期组低于对照组(P<0．05)。急性期组CD4+ Th17细胞比率高于稳定期及对照组, CD4+ CD2+5 Treg细胞的比率则低于稳定期及对照组,差异有统计学意义( P<0．05)。急性期组IL-6,17,21,22水平高于稳定期及对照组,而IL-10、TGF-β水平低于稳定期及对照组,差异有统计学意义(P<0．05)。 FEV1与IL-6,17,21,22呈负相关,而与IL-10、TGF-β水平呈正相关, FEV1/FVC与IL-6,17,21,22呈负相关,而与IL-10、TGF-β水平呈正相关。结论 Th17/Treg比例失衡可导致机体促炎因子生成增多,抑制炎症作用不足,促进气道炎症反应,导致患者呼吸功能障碍,加重COPD病情。
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含表皮生长因子受体的外泌体诱导肿瘤特异性调节T细胞
目的：探讨树突状细胞( DC)能否捕获含表皮生长因子受体( EGFR)外泌体并转化为成熟DC,诱导生成肿瘤特异性调节T细胞,及后者对肿瘤特异性CD8+T细胞的作用。方法提纯 NSCLC肿瘤标本中的外泌体并验证其有EGFR成分,通过外泌体诱导DC转化为免疫耐受型,观察后者诱导生成的调节T细胞对肿瘤特异性CD8+ T细胞的影响。结果 NSCLC样本中的EGFR阳性率为80%,而对照肺组织仅为2%。与外泌体共培养7 d后,DC呈现IDO表达高于对照组(80.8%±3.2% vs 65.6%±6.4%, P <0.05)。IDO+DC 诱导生成调节T细胞亦明显超过对照组(24.1%±5.2% vs 4.2%±2.3%,P<0.01),进而明显抑制肿瘤特异性CD8+ T细胞增殖(5.4%±0.2% vs 86.7%±9.3%,P<0.01)。结论肿瘤细胞的EGFR能够通过外泌体形式排出细胞外,EGFR+外泌体能够诱导免疫耐受 IDO +DC 产生,进而诱导调节T细胞生成,后者对肿瘤特异性CD8+ T细胞有强大抑制作用。
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白细胞介素-35在类风湿关节炎中作用的研究进展
类风湿关节炎(RA)是一种慢性炎症性疾病,疾病晚期可出现关节畸形和功能障碍,严重危害人类健康.RA的确切发病机制目前尚未阐明,遗传、免疫及环境等因素均发挥了一定作用.白细胞介素-35(IL-35)是由人类疱疹病毒4型(HHV-4))又称EB病毒(EBv)诱导基因3(EBI3)和p35两个亚基所组成的异源二聚体蛋白,是白细胞介素-12(IL-12)家族细胞因子成员之一.IL-35由调节性T细胞(Treg)分泌,具有抑制效应T细胞活性的作用,参与多种自身免疫性疾病、炎症性疾病以及感染性疾病的发生和发展.研究发现IL-35与RA之间有重要关系.该文对IL-35在RA的作用方面进行综述.
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大剂量地塞米松对原发免疫性血小板减少症患者Treg/Th17细胞的影响
目的:通过检测大剂量地塞米松(HD-DXM)治疗原发免疫性血小板减少症(ITP)患者前后外周血调节T细胞(Treg)、Th17细胞比例及相关功能因子水平变化,探讨治疗ITP可能的机制.方法:纳入23例初诊ITP患者,经HD-DXM治疗,流式细胞术检测治疗前及治疗后外周血Treg、Th17细胞比例,ELISA法检测血浆中TGF-β1、IL-10、IL-17及IL-6水平,并分析Treg、Th17细胞比例与血小板(PLT)计数的相关性.结果:ITP患者Treg细胞比例明显低于HD-DXM治疗后组(1.03％±0.24 vs.4.74％±1.06)(P<0.05),Th17细胞比例明显高于HD-DXM治疗后组(2.96％±0.21％vs 2.15％±0.25)(P<0.05),ITP患者TGF-β1、IL-10水平明显低于HD-DXM治疗后组(分别为874.00 pg/ml±116.80 vs 1420 pg/ml±124.27、8.92 pg/ml±0.85 vs 10.15 pg/ml±1.08)(P<0.05),而IL-17及IL-6水平明显高于HD-DXM治疗后组(分别为29.75 pg/ml±1.63 vs 22.58 pg/ml±2.16、80.97 pg/ml±7.68 vs 61.33 pg/ml±7.47)(P<0.05).治疗前Treg、Th17细胞比例与PLT计数相关性分析结果示无统计学意义.结论:HD-DXM可上调ITP患者Treg细胞数量并改善其免疫抑制缺陷,下调Th17细胞比例并抑制Th17细胞功能.
关键词： 原发免疫性血小板减少症 大剂量地塞米松 调节T细胞 Th17细胞 -
microRNA 在系统性红斑狼疮发病中的作用研究进展
系统性红斑狼疮（ SLE）是自身免疫疾病，其发病机制尚未完全阐明。 microRNA（以下简称miRNA）是一类保守的非编码小分子RNA，在转录后水平调控基因表达。越来越多的研究表明，miRNA在SLE的发病机制中起重要作用。目前已发现29个与SLE发病有关的miRNA。本文对近年来miRNA参与SLE发病的研究进行了综述。
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T细胞亚群及相关细胞变化在急性冠脉综合征发病中的意义
目的 探讨急性冠脉综合征(ACS)患者外周血Th17、Th22及Treg细胞频数及相关细胞因子水平变化在ACS发生发展中的作用.方法 连续收集本院急诊科自2015年收治的ACS患者71例,包括急性心肌梗死(AMI)患者46例,不稳定性心绞痛(UA)25例;稳定性心绞痛(SA)22例;以同期健康体检者30例作为对照组.采用流式细胞仪检测4组外周血Th17、Th22细胞及Treg细胞频数,以酶标仪检测患者血浆中相关细胞因子IL-17、IL-21、IL-22及IL-35.结果 AMI组及UA组外周血Th17、Th22细胞比例及其相关细胞因子IL-17、IL-21、IL-22较对照组、SA组均明显升高,差异均有统计学意义(P ＜0.05);AMI组及UA组Treg细胞及IL-35均低于SA组及对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 Th22、Th17细胞比例和Treg细胞比例失衡及相关细胞因子变化可能与ACS斑块不稳定密切相关.
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Th细胞及其细胞因子在儿童吉兰-巴雷综合征外周血中的变化及意义
目的 探讨Th细胞频数及相关细胞因子在吉兰-巴雷综合征(GBS)患儿发病中的作用.方法 连续收集本院儿童神经内科2008年11月-2015年12月收治的GBS患者19例(GBS组),病毒性脑炎或脑膜炎组26例(VEM组),健康体检儿童21例作为健康对照组.应用流式细胞仪检测外周血Th17、Th22细胞及调节性T细胞频数,酶标仪检测患者血浆中细胞因子IL-17、IL-22、IL-35及TGF-β的表达水平.结果 吉兰-巴雷综合征及脑炎组患儿外周血Th17、Th22细胞百分比及细胞因子IL-17、IL-22表达水平较健康对照组明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);吉兰-巴雷综合征及脑炎组调节T细胞及细胞因子IL-35、TGF-β的表达水平均低于健康对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 Th17/Th22/Treg及其细胞因子的变化可能与GBS发病有关.
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传染性单核细胞增多症儿童外周血T细胞亚群的变化及意义
目的 分析传染性单核细胞增多症 (IM) 患儿外周血T细胞亚群的变化及意义, 为IM患者的临床诊断和治疗提供理论依据.方法 收集2016年1月-2017年1月在温州医科大学育英儿童医院就诊的IM患儿65例为IM (IM组), 以同期在本院儿童保健科体检的儿童30例作为对照组.采用流式细胞术检测患者外周血CD3+CD4+T淋巴细胞、CD3+CD8+T淋巴细胞、Treg细胞、Th17细胞频数变化.结果 IM组CD3+CD8+细胞频数、Th17细胞明显高于对照组, CD3+CD4+、CD4/CD8、Treg/Th17明显低于对照组, 差异均有统计学意义 (P＜0.05).IM患者急性期EBV-DNA病毒载量与CD3+CD8+细胞、Th17细胞频数呈正相关 (r值分别为0.722、0.797, P＜0.01);与CD3+CD4+频数、Treg细胞、CD4/CD8及Treg/Th17比值呈负相关 (r值分别为-0.421、-0.357、-0.469、-0.422, P＜0.05).结论 IM患者存在细胞免疫功能紊乱, 其免疫功能紊乱程度与EB病毒感染量有关, 调节性T细胞减少和Th17细胞增多可能参与IM发病机制.
关键词： 传染性单核细胞增多症 淋巴亚群 调节T细胞 Th17细胞 细胞因子 -
Th17、Th22/Treg细胞及相关细胞因子在儿童川崎病患者外周血中的变化及意义
目的 探讨Th17、Th22及Treg细胞频数及相关细胞因子变化在儿童川崎病(KD)发病机制中的作用.方法 收集本院自2013年收治的KD初诊患者42例(KD初诊组),缓解患者42例(KD缓解组),以同期健康体检者30例作为正常对照组(HC组),以流式细胞仪检测3组外周血Th17、Th22细胞及Treg细胞频数,以酶标仪检测血浆中细胞因子IL-17、IL-10、IL-22及IL-6.结果 KD初诊组Th17、Th22细胞比例较HC组、KD缓解组均明显升高,差异均有统计学意义(P＜ 0.05);Treg细胞比例较HC组、KD缓解组均明显下降,差异有统计学意义(P ＜0.05);KD初诊组细胞因子IL-17、IL-22、IL-10、IL-6较KD缓解组及HC组均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Th22、Th17细胞和Treg细胞及相关细胞因子变化可能参与KD的发病机制,临床上可以通过检测Th17、Th22、Treg细胞及相关细胞因子变化评估儿童KD的病情进展.
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类风湿性关节炎患者外周血的Th17/Treg细胞平衡的意义
目的 探讨Th17/Treg细胞在类风湿性关节炎发病过程中作用及意义.方法 收集本院风湿免疫科病房2015年6月-2016年12月收治的类风湿关节炎45例,按照疾病活动度DAS28积分进行分组,分为轻度RA组16例,中度RA组18例和重度RA组1 1例,另收集同期健康体检者30例为对照组,采用流式细胞术检测外周血的Th17/Treg细胞频数和ELISA检测血清中IL-17、IL-10和TGF-B1细胞因子水平.结果 Th17细胞百分率和IL-17表达随RA患病的严重程度增加而增加.Treg细胞百分比及血清中TGF-B1和IL-10的表达水平随RA疾病严重程度增加而减少.经Pearson相关分析检验,RA患者外周血Th17细胞百分率和细胞因子IL-17的表达水平与DAS28评分均呈正相关(r值分别为0.814、0.782,P＜0.01).结论 Th17/Treg细胞及细胞因子的病理性失衡可能是导致类风湿关节炎发病的重要原因.
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前列腺癌患者外周血Th17/Treg细胞的变化及意义
目的 比较前列腺癌(PCa)和前列腺增生(BPH)患者及健康体检者外周血中Th17细胞、Treg细胞的表达差异,初步探讨PCa发生的免疫学机制.方法 收集本院泌尿外科2014年1月-2016年12月收治的PCa患者45例(PCa组),42例同期BPH患者为BPH组,另选取同期32例健康体检者为对照组.采用Facs Canto Ⅱ流式细胞仪检测3组对象外周血Th17细胞和Treg细胞比例,分析PCa患者血清T-PSA与Treg细胞、Th17细胞相关性.结果 与对照组及BPH组相比,PCa组外周血中Treg、Th2均明显升高,而Th1细胞、Th17细胞比例均下降,差异均有统计学意义(P＜0.05);PCa患者外周血浆T-PSA与调节T细胞比例呈正相关(r=0.78,P＜0.05),与Th17细胞呈负相关(r=-0.63,P＜0.05).结论 Th17、Treg细胞可能参与PCa发生发展的病理过程,Th17/Treg细胞检测有助于PCa的早期诊断.
