首页 > 文献资料
-
钩藤碱抑制麻醉大鼠颈动脉窦压力感受性反射的研究
目的 研究钩藤碱(Rhy)对颈动脉窦压力感受性反射(CSB)的作用并探讨其作用机制.方法 利用隔离灌流大鼠颈动脉窦技术,确定各项功能参数,如阈压(TP)、饱和压(SP)、平衡压(EP)、工作范围(OR)、大斜率(PS)和平均动脉压反射性下降幅度(RD)等.Rhy(10、50、100 μmol/L)溶于K-H液后灌流窦区,以斜坡方式升降窦内压来观察Rhy对CSB的影响.分别预先灌流一氧化氮合酶抑制剂L-NAME,钾通道阻断剂四乙铵(TEA)和L-型钙通道开放剂Bay K8644后再给予Rhy,观察它们对Rhy作用的影响.结果 Rhy浓度依赖性地抑制了CSB, 使其各功能参数改变, TP和SP增大,PS和RD均减小.Rhy的抑制作用不能被L-NAME(300 μmol/L)和 TEA(1 mmol/L)预处理所取消,而可被Bay K8644 (500 nmol/L)明显减弱.结论 Rhy抑制了CSB,此作用可能是通过减弱压力感受器的牵张敏感性离子通道的钙内流来实现,而与NO和钾通道无关.
-
高效液相色谱-蒸发散射检测器法测定中药钩藤中钩藤碱的含量
目的：探究利用高效液相色谱-蒸发散射检测器法测定中药钩藤中钩藤碱的含量的效果。方法选择15 g钩藤药粉，将其分为两份，对照组进行高效液相色谱-紫外检测器检测，实验组进行高效液相色谱-蒸发散射检测器检测，观察两组方法检测的准确率和所需时间。结果以精密钩藤碱样品的含量为“金标准”，发现高效液相色谱-蒸发散射检测器检测可以更加准确地判定中药钩藤中钩藤碱的含量情况(P<0.05)。同时实验组检测的天数少于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论高效液相色谱-蒸发散射检测器检测的方法更有利于对中药钩藤中钩藤碱的测定，值得临床进一步研究。
关键词： 高效液相色谱-蒸发散射检测器法 钩藤 钩藤碱 含量 -
HPLC法测定中药钩藤中钩藤碱和异钩藤碱的含量
目的：建立高效液相色谱法测定中药钩藤中有效成分钩藤碱和异钩藤碱的含量。方法：色谱柱Lichrospher C18（4.0×250 mm，5μm），流动相：甲醇：水（含10 mmol/L的三乙胺，冰醋酸调节pH值为7.4~7.6）=55：45，检测波长为254 nm，加入1%盐酸10μL作为改性剂。温度为25℃，测定钩藤碱和异钩藤碱的线性关系方程。结果：钩藤碱与异钩藤碱的回归方程分别为Y=9.2×104-0.281×104，Y=7.6×104-0.375×104，线性范围分别为0.100~1.60μg/mL（r=0.9999），0.211~1.379μg/mL（r=0.9998），钩藤碱的平均回收率为99.154%，异钩藤碱的平均回收率为99.40%。结论：HPLC法测定中药钩藤中两种成分的含量，方法简单、快速，精密度及稳定性好，可以用于控制中药材钩藤的品质。
-
钩藤碱和异钩藤碱药理作用研究进展
钩藤为茜草科植物钩藤或华钩藤及其同属多种植物的带钩枝条,该药性凉、味甘苦,具有清热平肝,息风定惊,降血压之功能,用于风热头痛,头晕目眩,小儿惊厥,高血压等[1].中药药理研究表明,钩藤及钩藤碱能明显降低大脑皮层的兴奋性,具有显著的降压、镇静、安眠、解痉等作用.目前己从钩藤中分离出30多种化合物,有效成分为钩藤总生物碱,其中钩藤碱(rhynchophylline,Rhy)占总碱的28%～50%,异钩藤碱(isorhynchophylline,Isorhy)占总碱的15%,两者均为钩藤中含量大的生物碱成分和主要有效活性成分[2].近年来对钩藤药理研究报道比较多,本文对钩藤碱和异钩藤碱的药理研究进展综述如下.
-
钩藤药材中异钩藤碱含量的超高效液相色谱和高效液相色谱法的测定
目的：对超高效液相色谱和高效液相色谱法在钩藤药材中异钩藤碱含量测定中的应用情况进行分析探讨，为今后的研究工作提供可靠的参考依据。方法试验中高效液相色谱法所需色谱柱为Alltech C18柱，流动相为乙腈-水，流速为1.0 mL/min，检测波长为246 nm，柱温为25℃，超高液相色谱法色谱柱为Waters AC-QIITY UPLCTMT3 C18柱，流动相为乙腈-水，流速为0.6 mL/min，检测波长为246 nm，柱温为50℃。结果对比发现两种检测方法的检测结果一致，无明显差异。结论采取超高液相色谱法和高效液相色谱法对钩藤中钩藤碱以及异钩藤碱含量进行测定的方法简单、可靠，值得关注并推广。
-
钩藤碱对自发性高血压大鼠的降压作用及其对血管的调节机制探讨
目的 研究钩藤碱连续给药后对自发性高血压大鼠(SHR)收缩压(SBP)的影响及其对血管的调节机制.方法 取雄性SHR,随机分为模型组(等容量蒸馏水),卡托普利阳性对照组(6.25 mg/kg),钩藤碱低、中、高剂量(1.25、2.50、5.00 mg/kg)组,另取SD雄性大鼠作为对照组(等容量蒸馏水),各给药组连续ig给药21d,测定给药前和给药第7、14、21天的大鼠尾动脉SBP,末次给药后采血,检测血浆血管紧张素Ⅱ (Ang Ⅱ)、非对称二甲基精氨酸(ADMA)、血管紧张素Ⅱ 1型受体(ATlR)和血清NO、一氧化氮合酶(NOS)水平.结果 与模型组比较,钩藤碱各剂量组可显著降低SHR的SBP值;模型组大鼠血浆Ang Ⅱ、ADMA、ATlR水平显著升高,且血清中NO和NOS水平显著下降,而钩藤碱能够逆转上述指标的改变(P＜0.05、0.01).结论 钩藤碱对SHR有显著降低SBP作用,能降低血浆Ang Ⅱ、ADMA水平,升高血清NO和NOS水平,有保护血管内皮功能的作用.
-
钩藤碱增强自噬改善TNF-α介导的血管内皮细胞血栓前状态的研究
目的 基于细胞自噬探讨钩藤碱对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤时血栓前状态的影响.方法 采用TNF-α诱导HUVECs制备损伤模型,透射电镜和免疫荧光技术观察HUVECs自噬水平的变化,Western blotting法检测自噬标记蛋白人微管相关蛋白轻链3Ⅱ (LC3Ⅱ) /LC3Ⅰ、Beclin-1、p62和凝血相关因子核转录因子-κB(NF-κB)、血管假性血友病因子(vWF)和纤溶酶原活化物抑制剂-1(PAI-1)的蛋白表达水平,ELISA法检测细胞培养上清中前列环素(PGI2)和内皮素-1(ET-1)的量.结果 TNF-α上调了HUVECs中凝血相关因子NF-κB、vWF、PAI-1蛋白的表达水平,降低了细胞培养上清液中ET-1和PGI2的量(P＜0.05),使细胞中出现自噬小体,上调LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平,下调p62蛋白表达水平(P＜0.05);钩藤碱能够促进HUVECs中自噬小体的产生,并在一定程度上调LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平,下调p62蛋白表达水平(P＜0.05),下调凝血相关因子NF-κB、vWF、PAI-1蛋白的表达水平,上调细胞培养上清液中ET-1和PGI2的量(P＜0.05);自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)能够抑制钩藤碱的作用效果(P＜0.05).结论 钩藤碱能够通过增强自噬降低TNF-α介导的HUVECs细胞凝血相关因子的表达,抑制血管内皮炎性损伤时血栓前状态的发生.
-
阳离子交换树脂分离纯化钩藤总生物碱的工艺研究
目的 研究阳离子交换树脂分离纯化钩藤总生物碱的工艺条件.方法 分别以钩藤碱、钩藤总生物碱的比吸附量、洗脱率、产物质量分数为指标,优选钩藤总生物碱的佳纯化工艺.结果 佳工艺为钩藤药材提取液以6 BV/h的体积流量通过001×7氢型阳离子交换树脂柱(径高比为1∶8),树脂饱和后,水洗至中性,再用含5％氯化钠的50％乙醇溶液以8BV/h的体积流量洗脱,洗脱10倍量树脂柱体积.钩藤碱及钩藤总生物碱洗脱率分别为88.2％和89.9％,钩藤碱、钩藤总生物碱的质量分数分别为13.9％、47.6％.结论 采用001×7氢型阳离子交换树脂纯化钩藤总生物碱效率高,易实现管道化、连续化,具有广阔的工业应用前景.
-
钩藤的化学成分研究(Ⅲ)
从钩藤Uncaria rhynchopylla总碱中又分得3个氧化吲哚生物碱:柯诺辛(corynoxine,Ⅵ)、柯诺辛B(corynoxine B,Ⅶ)和钩藤碱(rhynchophyline,Ⅷ).通过光谱解析确定了其绝对构型.其中Ⅵ和Ⅶ首次从该植物中分得.
-
钩藤中不同成分降压作用的差异
目的：比较钩藤中提取的异钩藤碱、钩藤碱、钩藤总碱及非生物碱部分的降压作用。方法：大鼠麻醉后经颈总动脉插管记录外周血压和经股静脉微量输注实验用药。结果：实验表明钩藤中4种成分的降压强度为异钩藤碱(42．0％)>钩藤碱(32．1％)>钩藤总碱(21.3％)>钩藤非生物碱(12．4％)。结论：提示钩藤中主要降压成分为异钩藤碱和钩藤碱。
-
广西不同产地和不同采收期大叶钩藤中钩藤碱定量分析
目的 研究广西不同产地大叶钩藤药材质量并确定其佳采收期.方法 采用HPLC法测定21批广西不同产地和其中3个产地不同采收期大叶钩藤中钩藤碱的量.色谱柱为Gemim C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(0.002mol/L三乙胺,pH 7.5)(64∶36),体积流量1.0 mL/min,检测波长254 nm.结果 广西不同产地21批大叶钩藤药材钩藤碱量均较高,但产地间差异较大;不同采收期大叶钩藤中钩藤碱的动态积累略有差异.结论 广西不同产地大叶钩藤药材质量均较好,但质量随产地不同而异;大叶钩藤药材一年四季均可采收.
-
钩藤碱阻滞钙离子通道的药理作用研究进展
钩藤碱在传统中药中占有重要的地位，在中枢神经和心血管等系统中有较显著的药理作用，临床上可用于治疗高血压、癫痫、心律失常等疾病。多项实验研究钩藤碱的作用机制，发现钩藤碱大多是通过拮抗钙来发挥作用的。为更好地利用钩藤碱，综述了钩藤碱阻滞钙离子通道的药理作用，为推进钩藤碱深入研究提供参考。
-
钩藤茎枝不同药用部位总生物碱的含量分析
目的 比较钩藤茎枝药典规定药用部位和超出部位总生物碱的含量差异.方法 以钩藤碱为对照品,采用紫外分光光度法在检测波长243 nm处测定10批钩藤中不同用药部位总生物碱的含量.结果 钩藤碱的浓度在2～12μg/ml(r=0.9996)范围内与吸光度呈良好的线性关系,加样回收率为103.30％,RSD为2.60％.结论该方法简单,准确性、重复性良好,为钩藤药材的净选提供基础性研究.
-
钩藤碱的药理学研究进展
钩藤属茜草科植物,其带钩茎枝入药,性凉味苦甘,具有清泄肝火,平肝息风,定惊的功效.但无钩钩藤不宜入药.钩藤碱(Rhy)系钩藤的主要有效活性成分之一,近年来其药理研究报道比较多,本文对钩藤碱的药理研究进展综述如下.
-
钩藤碱治疗骶上脊髓损伤致逼尿肌反射亢进大鼠的实验研究
目的：探讨钩藤碱对骶上脊髓损伤（ SSCI ）致神经源性膀胱大鼠逼尿肌反射亢进的治疗作用及其机制。方法将10周龄健康雌性SD大鼠30只（ SPF级）按照随机数字表法分为对照组、模型组、治疗组，每组10只。对照组不做任何手术处理，模型组和治疗组采用脊髓横断法制备神经源性膀胱模型。对照组和模型组腹腔注射0.9％氯化钠溶液，治疗组注射钩藤碱（5 mg／kg ）。对照组10只大鼠全部存活，模型组8只造模成功，治疗组8只造模成功。4周后，大鼠膀胱行尿动力学检测，离体逼尿肌条电生理学指标检测，膀胱病理切片HE染色观察，蛋白质印迹法检测c-kit蛋白的表达，激光共聚焦显微镜下观察Cajal间质细胞（ ICC）数量变化，实时荧光PCR检测ICC中T型钙通道蛋白亚型α1G基因表达水平。结果与模型组相比，治疗组膀胱大容量增大（q＝8.251， P＜0.05），膀胱漏尿点压（q＝3.764， P＜0.05）和膀胱充盈压均减小（q＝5.687， P＜0.05），逼尿肌收缩频率降低（q＝9.661， P＜0.05），小张力增大（q＝5.217， P＜0.05）， c -kit 蛋白表达降低（q＝13.688， P＜0.05）， ICC 数量减少（q＝7.060， P＜0.05），α1G基因表达量降低（q＝8.762， P＜0.05），差异均有统计学意义。病理切片下观察到治疗组逼尿肌无断裂，肌间隙增宽减少。结论钩藤碱通过减少神经源性膀胱逼尿肌ICC数量，抑制ICC T型钙通道蛋白亚型α1G基因的表达来抑制ICC起搏兴奋活性，从而减轻逼尿肌的过度亢进，使逼尿肌兴奋性趋于正常。
-
钩藤碱对帕金森大鼠脑内SOD、DA、MDA表达的调节作用
目的：探讨钩藤碱在帕金森病(PD)大鼠模型中对纹状体多巴胺(DA)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平表达的调节作用。方法首先从中药钩藤中分离提取出钩藤碱。其次采用脑内定位注射6 OHDA 制备部分损伤 PD大鼠模型，大鼠随机分为3组(各组10只大鼠)，分别为正常对照组、模型对照组、钩藤碱组。用生化法对大鼠脑中DA及血清中SOD、MDA 活性进行测定，分析钩藤碱对其活性的影响。结果给药30 d后，钩藤碱组 DA水平密度明显高于模型对照组(P<0.01)。在 SOD 水平方面，钩藤碱组显著高于模型对照组(P<0.05)；而 MDA 含量，钩藤碱组与正常对照组接近，但显著低于模型对照组(P<0.05)。结论钩藤碱对帕金森大鼠脑内 SOD、DA、MDA表达的具有调节作用，提示其作为帕金森症的治疗或者预防药物具有一定的开发价值。
-
LC-MS/MS测定养血清脑颗粒中15个生物碱成分的含量
目的:建立LC-MS/MS方法,对养血清脑颗粒中15个生物碱成分进行含量测定.方法:采用HSS T3色谱柱(2.1 mm ×100 mm,1.8μm),乙腈-0.1％甲酸水为流动相,流速200 μL·min-1,柱温30℃,电喷雾离子化(ESI),多反应监测离子扫描(MRM),于正离子模式下检测目标化合物,选样量2μL.结果:小檗碱、药根碱、巴马汀、黄连碱、四氢黄连碱、四氢小檗碱、延胡索甲素、延胡索乙素、原阿片碱、钩藤碱、毛钩藤碱、帽柱木菲碱、异帽柱木菲碱、坡绕定、异坡绕定的线性关系良好(r=0.99),各成分加样回收率在89％～107％之间,准确度与精密度良好.结论:该方法操作简便、灵敏度高、分析速度快,可同时测定养血清脑颗粒中多个生物碱成分的含量,有助于快速进行该药品的多成分质量控制.
-
HPCE内标法测定中药钩藤中钩藤碱含量
目的:通过建立准确测定钩藤中钩藤碱含量的分析方法,对贵州省不同地区钩藤药材中钩藤碱的含量进行分析研究.方法:采用以二苯胍为内标物的高效毛细管电泳内标法进行含量测定.结果:在所选择的条件下钩藤样品中钩藤碱的电泳峰与杂质成分峰完全分离,钩藤碱含量得到准确测定.结论:根据测定结果,主要产于贵州或主要在贵州药材市场上流通的钩藤药材中的钩藤碱含量普遍较低,有的甚至在该分析条件下未能检出,这一研究结果可为今后对中药钩藤的研究提供参考依据.
-
响应面法优化加速溶剂萃取钩藤中钩藤碱的工艺研究
目的:采用加速溶剂萃取技术方法,利用响应面分析法对提取钩藤中钩藤碱的工艺参数进行优化.方法:采用HPLC法测定钩藤碱的含量,流动相(甲醇-0.05％醋酸水溶液),检测波长为254 nm.通过响应面法考察加速溶剂萃取法的工艺条件.结果:通过单因素实验基础筛选出钩藤中钩藤碱的加速溶剂萃取技术3个主要因素,乙醇浓度、萃取次数和萃取时间.结论:通过响应面分析得出佳组合条件为乙醇浓度50％、提取3次,萃取时间12 min.在此条件下,加速溶剂萃取法所提取的钩藤碱的含量是6.121 mg·g-1.加速溶剂萃取技术具有省时、方便、提取效率高等优点,适合于对钩藤中钩藤碱的提取.
-
钩藤碱对大鼠膀胱逼尿肌舒缩作用的影响
目的 观察钩藤碱(rhynchophylline,Rhy)对离体大鼠逼尿肌的作用并探讨其作用机制.方法 采用逼尿肌体外张力实验法检测Rhy对大鼠逼尿肌L-型钙通道(Ica-L)及大电导钙离子激活钾离子通道(BKca)作用.以维拉帕米为对照观察膀胱逼尿肌肌条的收缩及对乙酰胆碱(ACh)依赖细胞内、外钙所致肌条收缩程度的拮抗作用.结果 Rhy和BKca激动剂NS1619作用相似,亲和力指数(pD2)分别为4.78±0.17、4.53±0.22;BKca拮抗剂iberiotoxin能竞争性拮抗Rhy,使Rhy累积量效曲线平行右移,拮抗参数(pA2)为7.27±0.16;当Rhy浓度为1～20μmol·L-1时,使CaCl2累积量效曲线非平行右移,大反应降低,呈非竞争性拮抗.结论 Rhy通过离子通道(阻滞Ica-L、激活BKca)抑制膀胱逼尿肌收缩.低浓度(10 μmol·L-1)Rhy仅对细胞内钙引起的肌条收缩有抑制作用,而对细胞外钙所致的肌条收缩无影响;随着浓度的增高,Rhy对细胞内、外钙引起的肌条收缩均有抑制作用,且抑制作用逐渐增加.
