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对2010年版《中国药典》中黄蜀葵花含量测定方法的改进
目的 研究改进《中国药典》黄蜀葵花的含量测定方法 ,并建立同时测定黄蜀葵花中金丝桃苷、槲皮苷含量的方法 . 方法 采用月旭XB-C18(250mm ×4.6mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液进行梯度洗脱,检测波长360nm,柱温30℃,流速1.0mL· min -1. 结果 对含量测定进行方法 学考察,结果 表明均符合含量测定要求,金丝桃苷进样量在 0.21 ~6.31μg ( r =0.9998 )、槲皮苷进样量在0.21 ~6.38μg ( r =0.9995)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.70%(RSD=0.92%)、97.46%(RSD=1.74%). 结论 改进了《中国药典》黄蜀葵花的含量测定方法 ,解决金丝桃苷与相邻峰难以分离和分析时间过长的问题. 并建立了同时测定金丝桃苷、槲皮苷的方法 ,本方法 结果 准确,重现性好,专属性强,可用于黄蜀葵花的质量控制.
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养心草中槲皮苷的含量测定
目的 建立养心草中槲皮苷含量的测定方法. 方法 用反相高效液相色谱法,色谱柱:AQ-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:甲醇-乙腈-0.1％磷酸溶液梯度洗脱;检测波长:254nm;流速:0.8 ml/min;柱温:30℃. 结果 槲皮苷在8.16～816 μg/mL有良好的线性关系. 结论 反相高效液相色谱法操作简便,检测灵敏,有良好的重复性和稳定性,可测定养心草中槲皮苷的含量.
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HPLC测定侧柏叶颗粒中槲皮苷含量
侧柏叶颗粒饮片为柏科植物侧柏Platycladus orientalis(L.)Franco的干燥枝梢及叶经加工炮制后经提取浓缩而成的配方颗粒.具有凉血止血、生发乌发等功效.临床用于吐血衄血、咯血、便血、崩漏下血、血热脱发、须发早白等症状.本方法采用高效液相色谱法对侧柏叶颗粒饮片中槲皮苷的含量进行测定,有利于质量控制,确保用药的安全有效.
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槲皮苷抑制RANKL诱导的破骨细胞形成及骨吸收
[目的]探讨槲皮苷对核因子κB受体激动剂配体(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)诱导的破骨细胞形成及骨吸收功能的影响.[方法]通过CCK-8法观察不同浓度槲皮苷(0～800μmol/L)干预不同时间(48 h、96 h)对RAW 264.7细胞的生存影响,确定合适的体外用药浓度;利用体外RANKL诱导RAW 264.7细胞形成破骨细胞体系,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色计数评价槲皮苷(200、400 μmol/L)对破骨细胞形成和生存的影响;通过骨片吸收实验对骨凹陷和骨吸收面积统计分析评价槲皮苷(200、400 μmol/L)3 d内对成熟破骨细胞骨吸收功能的影响;采用实时定量(Real-Time) PCR技术,检测槲皮苷(200、400μmol/L)对RANKL诱导的破骨细胞特异性基因NFATc1、TRAP和c-fos表达水平的影响.[结果]细胞生存实验发现槲皮苷干预96 h后,槲皮苷(0～800 μmol/L)对RAW 264.7细胞4d内生存未发现显著影响;通过TRAP染色发现200、400.μmol/L槲皮苷能显著抑制体外RANKL诱导的破骨细胞形成;通过骨片吸收实验发现200、400 μmol/L槲皮苷3d内能显著降低骨吸收面积,提示其抑制成熟破骨细胞骨吸收功能;同时,槲皮苷能呈剂量依赖性抑制RANKL诱导活化T细胞核因子(nuclear factor of activated T cells,NFAT) c1、TRAP和c-fos基因表达.[结论]槲皮苷通过抑制NFATc1,TRAP和c-fos的表达,来抑制体外RANKL诱导的破骨细胞形成和骨吸收功能,是一种潜在治疗骨质疏松药物.
关键词： 槲皮苷 Raw 264.7细胞 破骨细胞形成 破骨细胞骨吸收 骨质疏松 -
HPLC法测定铁扫帚药材中槲皮苷含量的方法研究
目的 建立铁扫帚药材中槲皮苷含量的高效液相色谱测定法.方法 采用C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),以甲醇-0.01 mol·L-1磷酸二氢钾-冰醋酸(35:63.5:1.5)为流动相,流速1.0 mL·min-1,柱温30 ℃,检测波长254 nm.结果 槲皮苷进样量在0.084 2～0.842 μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999 9),该方法平均回收率为97.8%,RSD为1.2%(n=6).结论该方法具有简便、准确、重复性好的特点,可用于测定铁扫帚药材中槲皮苷的含量.
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不同寄主来源的桑寄生药材槲皮苷与槲皮素含量分析
目的 了解不同寄主植物来源的桑寄生药材槲皮苷与槲皮素含量.方法 采用RP-HPLC法对桑寄生槲皮苷与槲皮素含量进行测定,槲皮苷采用甲醇超声提取,用Agilent Eclipse XDB-C<,18>柱,乙腈-水(18:82)为流动相,流速1.0ml/min,检测波长254 nm;槲皮素采用甲醇-盐酸(4:1)回流提取,用Agilent Eclipse XDB-C<,18>柱,甲醇-0.05%磷酸溶液(45:55)为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长254 nm.结果 槲皮苷与槲皮素的线性范围0.35～3.5μg(r=0.999 9)与0.41-4.1 μg(r=0.9999),平均回收率分别为101.2%与100.4%,寄主植物不同,桑寄生药材茎枝槲皮苷与槲皮素含量为0～0.14 mg/g与0～0.85 mg/g不等,药材叶槲皮苷与槲皮素含量为0.41～2.48 mg/g与2.42～6.89 mg/g不等.结论 寄主植物不同桑寄生药材槲皮苷与槲皮素的含量明显不同,药材的槲皮苷与槲皮素主要存在于药材叶中,茎枝中的含量较低,有的寄主的桑寄生茎枝中甚至检测不到槲皮苷与槲皮素.
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地锦草抗真菌有效部位中芦丁及槲皮苷含量的高效液相色谱法测定
目的 建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定维吾尔医药地锦草抗真菌有效部位中芦丁及槲皮苷含量的方法.方法 色谱柱为waters symmetry C18(4.6 mm×150 mm,5μm)；流动相为甲醇-0.4％磷酸水溶液(42:58,V/V),,检测波长为360nm；流速为1.0 ml· min-1;柱温25℃；进样量10μl.结果 芦丁和槲皮苷线性范围分别在0.42～2.52 μg,0.6～3.6μg内线性关系良好(r≥0.999 5),平均加样回收率分别为99.2％,101.1％,RSD≤3.3％.结论 该方法操作简便、准确、灵敏度高、重复性好,可用于地锦草抗真菌有效部位的质量控制.
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合欢花中槲皮苷的含量测定
目的 在临床前研究中,建立合欢不同部位中槲皮苷的含量测定方法.方法 Diamonsil C_(18)(4.6 mm×250 mm)色谱柱,流动相为甲醇-水(冰醋酸调pH 3.2)=55:45,流速为1.2 ml·min~(-1),检测波长为256 nm.结果 槲皮苷在2.485～24.85 μg·ml~(-1)范围内线性关系良好(r=0.999 8,n=7),平均加样回收率为 101.2%,RSD为1.4%.结论 该方法定量简单、准确,可用于控制槲皮苷的质量.
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侧柏叶不同炮制品中槲皮苷与槲皮素的含量测定
目的 以槲皮苷、槲皮素含量为指标,考察不同炮制方法 对侧柏叶止血成分含量的影响.方法 采用RP-HPLC法测定不同炮制品中槲皮苷、槲皮素的含量,色谱柱为Lichrospher C18色谱柱(250 mm ×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇-乙腈-0.2%磷酸溶液(38:10:52);流速1.0 ml·min-1;检测波长254 nm;柱温25℃.结果 不同炮制品中槲皮苷、槲皮素的含量有显著差异,槲皮苷的含量以生品高,炭品低;槲皮素的含量变化为:炒炭品﹥炒焦品,其它炮制品未检出槲皮素.结论 随着炮制温度的升高,槲皮苷的含量逐渐减少;炒炭后止血作用增强,推测与炭品中槲皮苷部分分解生成槲皮素有关.
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高效液相色谱法测定头花蓼中没食子酸与槲皮苷的含量
目的 同时测定头花蓼中没食子酸与槲皮苷的含量.方法采用高效液相色谱[RP-HPLC(DAD)]法,梯度洗脱,测定头花蓼中没食子酸与槲皮苷的含量.结果平均回收率分别为98.92%,97.16%(n=5),RSD分别为2.85%,1.07%(n=5).结论该方法准确、简捷,可为评价头花蓼质量提供参考.
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景天三七中槲皮苷、槲皮素及山萘酚含量的高效液相色谱法同时测定
目的 建立景天三七药材中槲皮苷、槲皮素及山萘酚的含量同时测定方法.方法 采用高效液相色谱法.色谱柱为Phenomex Gimini C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇:0.4％磷酸水(梯度洗脱);流速为1 ml/min;检测波长为369nm;柱温为25℃.结果 槲皮苷、槲皮素及山萘酚的质量浓度分别在0.002859 ～0.183,0.001594 ～ 0.102,0.004514～0.260μg,/μl范围内与各自的峰面积积分呈良好的线性关系(r分别为0.99993、0.99997、0.99997);平均加样回收率分别为98.46,101.85,101.73％,RSD分别为2.80,2.15％,1.71％(n均为6).结论 通过建立同时测定多指标成分含量的方法,可对药材进行多方位精密的质量控制.
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不同提取方法提取长泰砂仁中两种黄酮苷的对比研究
目的 考察不同提取方法对长泰砂仁中两种黄酮苷含量的影响,确定佳提取方法.方法 直接回流提取,运用佳提取方法提取检测异槲皮苷和槲皮苷含量.结果 异槲皮苷进样量在0.017 ～ 0.085μg范围内有良好的线性关系,平均回收率为100.3％,RSD为0.2％;槲皮苷进样量在0.042～0.378μg范围内线性关系良好,平均回收率为100.5％,RSD为0.3％.结论 方法简便快捷,可作为长泰砂仁含量测定质量控制方法.
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槲皮苷对家兔离体主动脉环的作用及其机制探讨
目的 研究槲皮苷对家兔离体主动脉环的作用,并探讨其可能的作用机制.方法 采用家兔离体主动脉环灌流模型,观察累积浓度的槲皮苷对基础状态和去甲肾上腺素(NE)预收缩血管环的作用,并观察不同抑制剂对槲皮苷舒张血管作用的影响.结果 槲皮苷(1×10-6～1×10-3 μmol/L)对基础状态内皮完整血管环的张力无影响；对NE预收缩的血管环,槲皮苷在累积浓度(1×10-4 ～1×10-3 μmoL/L)时能剂量依赖性和非内皮依赖性的舒张血管环,并且该作用能被MB预处理所抑制,但不能被L-NAME和Indo预处理所抑制.结论 槲皮苷(1×10-4～1×10-3 μmol/L)对主动脉具有非内皮依赖性的舒张作用,其舒张机制可能是通过直接激活血管平滑肌的鸟苷酸循环.
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砂仁不同部位及近缘种中槲皮苷含量的比较
目的 探讨中药砂仁不同部位及近缘种中槲皮苷含量的差异.方法 采用高效液相色谱法测定槲皮苷的含量.结果 槲皮苷质量百分浓度线性范围为0.122 6-1.226μg,线性回归方程为:Y=316.01X-29.98,r=0.999 9(n=6),平均回收率为96.85%.结论 砂仁不同部位及近缘种中槲皮苷的含量有明显的差异.砂仁不同部位槲皮苷含量高低顺序为:种仁>果实>果皮.
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反相高效液相色谱法测定合欢不同部位中槲皮苷的含量
目的建立合欢不同部位中槲皮苷的含量测定方法.方法样品用甲醇超声提取40 min,提取物用流动相溶解.Diamonsil C18柱(4.6 mm×250 mm),甲醇-水-冰醋酸(45∶55∶1.5)为流动相,检测波长为256 nm.结果槲皮苷在2.545～20.36 μg/ml浓度范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率为98.09%,RSD为0.5%.结论此方法简便可靠,可为合欢花药材的质量控制提供借鉴.
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高效液相色谱法测定萹蓄中金丝桃苷等3种有效成分的含量
目的用高效液相色谱法测定萹蓄中金丝桃苷、槲皮苷与木樨草素的含量.方法采用Shimadzu C18柱(150 mm ×4.6 mm ,5μm),流动相为甲醇-0.2%H3PO4溶液(45:55),流速1.0 ml·min-1,检测波长350 nm,柱温室温,用外标法定量,同时测定萹蓄中金丝桃苷与槲皮苷的含量;再采用Shimadzu C18柱(150 mm×4.6 mm ,5 μm),流动相为甲醇-0.2%H3PO4溶液(50:50),流速1.0 ml·min-1,检测波长254 nm,柱温室温,用外标法定量,测定萹蓄中木樨草素的含量.结果金丝桃苷的线性范围0.50～2.50 μg,r=0.999 8 ,回收率为95.13%,RSD为2.91%;槲皮苷的线性范围0.40～2.00 μg,r=0.999 6 ,回收率为96.49%,RSD为2.77%;木樨草素的线性范围0.0325～0.39 μg,r=0.999 9 ,回收率为95.75%,RSD为2.49%.结论该方法简便,快速,线性关系良好,可作为萹蓄的含量测定.
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不同采集季节、地点侧柏叶饮片质量考察及药典相关标准的商榷
目的 对不同采集季节、地点侧柏叶饮片质量进行考察.方法 采用药典法对不同采集季节、地点侧柏叶饮片进行性状、TLC、水分、总灰分、酸不溶灰分、醇浸出物及槲皮苷含量检测.结果 不同采集季节、地点侧柏叶饮片TLC均检出槲皮素,水分含量在2.99％ ～ 6.89％之间,总灰分含量在4.57％ ～6.18％之间,酸不溶性灰分含量0.15％ ～0.60％之间,醇溶性浸出物在23.24％ ～27.12％之间,槲皮苷含量在0.289％ ～0.477％之间.结论 12批侧柏叶饮片质量均符合药典标准,但不同季节、地点采集的侧柏叶饮片质量略有差异,建议药典侧柏叶饮片炮制项下进行修订.
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反相高效液相色谱法测定美丽胡枝子根皮和茎皮中槲皮苷的含量
目的 建立美丽胡枝子根皮和茎皮中槲皮苷的含量测定方法.方法 采用反相高效液相色谱法,Alltima C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-2% 冰醋酸(22:78)为流动相, 流速:1.0 mL*min -1,检测波长:256 nm,柱温:30 ℃ ,进样量:10 μL.结果 槲皮苷在0.044 8～0.448 0 μg范围内线性关系良好(r=0.999 8),平均加样回收率为98.56%,RSD为1.40%.结论 该方法简便,准确可靠,可为美丽胡枝子的质量控制提供借鉴.
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高效液相色谱法测定假地枫皮中槲皮苷的含量
目的 建立高效液相色谱法测定假地枫皮中槲皮苷的含量.方法 Agilent C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(25:75);检测波长为256 nm;流速为1.0 mL·min-1;柱温25℃;样品进样量为10μL.结果 槲皮苷进样量在0.120 4～2.4080μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率为98.2%,RSD:0.8%(n=6).结论 该方法 快速简便,稳定可靠,专属性强.
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高效液相色谱法测定鱼腥草中槲皮苷的含量
目的 探讨鱼腥草中槲皮苷含量的测定方法.方法 采用高效液相色谱法,Agilent-C18柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(25:75),检测波长为256 nm,流速为1.0 mL·min-1.结果 槲皮苷进样量在0.1204 ～2.408 μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率98.1%,RSD＝1.0%(n＝6). 结论该方法快速简便,稳定可靠,专属性强.
