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补中益气汤在糖尿病科的应用体会
补中益气汤为金元时期医家李东垣创立,首载于《内外伤辨惑论》,由黄芪,人参,白术,升麻,柴胡,当归,炙甘草,橘皮组成,功效补中益气,升阳举陷.药理研究认为,补中益气汤对脾虚模型大鼠胃壁细胞超微结构的异常改变有恢复作用,并可升高脾虚大鼠胃泌素含量,其益气健脾作用机制可能涉及改善消化道组织结构及影响消化道信号转导等方面[1].笔者应用补中益气汤治疗糖尿病并发症取得满意效果,举例如下.
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脾虚大鼠模型脑内胆囊收缩素、P物质、血管活性肠肽变化及归脾汤的影响
目的:探讨脾藏意理论.方法:采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,以免疫组化方法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层胆囊收缩素(CCK)、P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)变化.结果:模型组在上述脑区CCK、SP免疫阳性反应物显著降低,治疗组CCK、SP免疫阳性反应物显著增加;模型组VIP免疫阳性反应物在海马CA1区、前额叶皮层显著减少;治疗组则明显增加.结论:脾虚模型脑内对学习记忆有促进作用的神经肽CCK、SP、VIP有变化,归脾汤对上述脑区的CCK、SP、VIP变化有调节作用.
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健脾与补肾对脑内精氨酸加压素水平和基因表达的影响
目的:比较健脾与补肾对脑内精氨酸加压素(AVP)水平和基因表达的影响.方法:采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,以免疫组化和原位杂交法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层精氨酸加压素(AVP)基因表达变化.结果:模型组上述脑区AVP免疫阳性反应物明显降低;健脾组与补肾组上述脑区的AVP免疫阳性反应物明显升高.模型组下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层AVP mRNA表达显著下降;健脾组与补肾组AVP mRNA表达明显升高.结论:脾虚模型脑内对学习记忆有促进作用的AVP水平和基因表达有变化,健脾与补肾可能通过调节AVP水平和基因表达而影响学习记忆能力.
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健脾与补肾对脾虚模型大鼠脑内生长抑素水平和受体基因表达的影响
目的 比较健脾与补肾对脾虚模型大鼠脑内生长抑素(SS)水平和受体基因表达的影响.方法 采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,以免疫组化和原位杂交法检测下丘脑腹侧核、海马CA1 区、前额叶皮层SS及生长抑素受体1(SSR1)mRNA基因表达变化.结果 模型组上述脑区SS免疫阳性反应物及SSR1 mRNA表达阳性反应物明显降低,与正常组比较差异显著;健脾组与补肾组上述脑区的SS免疫阳性反应物及SSR1 mRNA表达阳性反应物明显升高,与模型组比较差异显著,与正常组比较无显著差异.结论 脾虚模型大鼠脑内对学习记忆有促进作用的SS水平和SSR1 mRNA基因表达有变化,健脾与补肾可能通过调节SS水平和SSR1基因表达而影响学习记忆能力.
关键词： 脾虚模型 生长抑素 生长抑素受体1 mRNA基因表达 大鼠 -
脾虚模型实验研究方法概述
自1979年北京师范大学首家报道脾虚动物模型研制以来,脾虚动物模型的实验研究工作取得了较丰富的经验.从早的大黄致腹泻模型到近常用的多因素模型,以及病证结合模型,虽然思路不同、方法有异,但其研究方法在脾虚动物模型的不同研究阶段都起到一定的推动作用,为脾虚证的认识积累了宝贵资料[1].
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补脾方药血清对离体脾虚大鼠壁细胞胞内[Ca2+]i的影响
目的:探讨脾虚状态的分子病理机制及补脾方药对其的影响.方法:采用血清药理学方法对分离后的大鼠壁细胞在体外给药,并用荧光指示剂Fura-2/AM负载细胞,使用双波长荧光分光光度计分别检测静息状态下壁细胞内的[Ca2+]i及胃泌素负荷后[Ca2+]i动态变化情况.结果:静息状态下,脾虚模型组大鼠壁细胞胞内[Ca2+]i(64.32±12.82)明显低于正常组(76.64±14.21)(P＜0.05),加入胃泌素(终浓度100 nM)后,胞内[Ca2+]i的增高幅度模型组(13.43±2.70)明显大于正常组(9.80±2.12)(P＜0.01);脾虚大鼠经补脾方药血清作用后各组的静息状态下[Ca2+]i均介于正常组与模型组之间,胃泌素刺激后胞内[Ca2+]i的增高幅度也有不同程度的减小,其中党参治疗组的增高幅度(11.13±2.46)与模型组(13.43±2.70)相比差异显著(P＜0.05).结论:脾虚大鼠壁细胞胞内静息状态下[Ca2+]i降低和胃泌素刺激后胞内[Ca2+]i的异常变化可能是脾虚证病理机制之一,Ca2+可能在分子水平上参与了脾虚证的形成.
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复方菟丝子口服液药理作用的实验研究
目的:利用,肾阳虚、脾虚、血虚动物模型研制复方菟丝子口服液的药理作用.方法 建立大鼠、小鼠肾阳虚、脾虚、血虚模型,观察造模后和给药后的症状.结果 给药的在肾阳虚模型中可显著增强动物耐寒能力,促进萎缩的胸腺、肾上腺恢复,脾虚模型中可促进动物体重恢复,增强体力,延长游泳时间,在失血性血虚模型中可促进红细胞和血红蛋白的恢复.结论 复方菟丝子口服液对肾阳虚、脾虚、血虚动物模型均有治疗作用.
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脾虚模型脑内神经肽Y水平和基因表达变化及归脾汤的影响
目的 研究脾虚模型脑内神经肽Y基因表达变化及归脾汤的影响作用.方法 采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层神经肽Y水平和基因表达变化.结果 模型组NPY免疫阳性反应物在下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层明显降低;给予归脾汤的治疗组上述脑区的NPY免疫阳性反应物明显增加.模型组NPY mRNA表达在下丘脑腹侧核、前额叶皮层明显降低;治疗组上述脑区的NPY mRNA表达明显增加.结论 脾虚模型学习记忆下降与脑内学习记忆有促进影响作用的神经肽Y水平和基因表达有变化,归脾汤对其有调节作用.
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脾虚大鼠模型脑内精氨酸加压素水平和基因表达变化及归脾汤的影响
目的观察脾虚模型脑内对学习记忆有促进作用的精氨酸加压素(AVP)水平和基因表达变化及归脾汤的影响作用.方法采用苦降泻下、饮食失节和劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,以免疫组化和原位杂交法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层AVP水平和基因表达变化.结果模型组上述脑区AVP免疫阳性反应物水平明显降低,治疗组明显升高;模型组海马CA1区、前额叶皮层AVPmRNA表达显著下降;治疗组表达明显升高.结论脾虚模型脑内对学习记忆有促进作用的AVP水平和基因表达有变化,归脾汤可能通过调节AVP水平和基因表达而影响其学习记忆.
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实验性脾虚证结肠动力学与胃肠调节肽的相关性研究
依据苦寒伤胃、饮食不节,加以耗气破气的理论,用大黄、厚朴、枳实煎剂及隔日饥饿致成大鼠实验性脾虚模型,并用四君子汤治疗.另以束缚加冷水应激造成急性虚证模型.
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"开胃消食合剂"对饮食失节型脾虚大鼠的影响
目的 探讨本院制剂"开胃消食合剂"对饮食失节型脾虚大鼠的影响.方法 健康SD 大鼠60 只,雌雄各半,随机分为6 组:正常对照组,脾虚模型组,阳性对照(多潘立酮2mg/kg)组,开胃消食合剂大剂量组(3mL/100g)、中剂量组(1.5mL/100g)、小剂量组(0.5mL/100g),每组10 只,脾虚模型通过精炼猪油(1mL/100g)灌胃制备,正常对照组给予等容量水灌胃,正常喂养,模型制备后连续给药14d,记录大鼠体质量变化,检测胃液成分、血清胃泌素、血清胃动素.结果 模型组较正常对照组在体质量、胃液成分分析、血清胃泌素、血清胃动素几项指标显著恶化,而给药组显著改善这些指标,且开胃消食合剂呈现出剂量依赖,开胃消食合剂大剂量组与多潘立酮阳性对照组疗效相似.结论 开胃消食合剂通过改善胃肠消化内环境、促进胃肠动力增加食欲,具有"开胃消食"助消化之功效.
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冷水束缚应激下脾虚大鼠胃黏膜H+,K+-ATP酶活性及mRNA的表达变化
目的 观察脾虚大鼠模型在冷水束缚应激负荷下,胃黏膜损伤程度与H+,K+-ATP酶活性及基因表达的变化.方法 SD大鼠随机分为正常组、脾虚组、应激组、脾虚应激组.采用100%大黄水煎液灌胃10d造成脾虚模型.冷水束缚应激负荷6h后观察各组大鼠胃黏膜损伤指数,用无机磷法测定胃黏膜H+,K+-ATP酶的活性;用RT-PCR法检测胃黏膜H+,K+-ATP酶mRNA的表达.结果 脾虚大鼠胃黏膜肉眼未见明显损伤,应激及脾虚应激组大鼠胃黏膜均出现点状及条索状损伤,且脾虚应激组损伤程度更为显著.脾虚组H+,K+-ATP酶活性及mRNA的表达率较正常组低(P均<0.05);应激及脾虚应激组H+,K+-ATP酶活性及mRNA的表达较正常组高(P均<0.05);且脾虚应激组大鼠H+,K+-ATP酶活性及mRNA的表达增高幅度有所增大.结论 脾虚大鼠在冷水束缚应激状态下胃黏膜易损伤性增高,其机制之一可能与脾虚应激后胃黏膜H+,K+-ATP酶功能升高有关.
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山药莲子饼对小鼠脾虚模型的影响
目的 探讨山药莲子饼对脾虚模型小鼠游泳耐力及某些生理指标的影响.方法 将60只Km小白鼠随机分为空白对照组(A组)、脾虚模型组(B组)和脾虚用药组(C组)各20只.B、C组均灌喂大承气汤及加味大承气汤0.6g/d,连续15d,建立脾虚模型.第16天开始,C组给予自制的山药莲子饼饲料,A、B组给予正常饲料,连续15d.第30天进行力竭游泳试验、耐寒试验,观察并记录力竭游泳和耐寒时间,后断头处死,并称小鼠脾脏、胸腺质量,计算相关脏器指数.结果 与B组比较,C组力竭游泳时间显著延长(P<0.05)、耐寒时间延长(P<0.05),胸腺、脾脏指数上升(P<0.05).结论 山药莲子饼可以改善脾虚小鼠的游泳耐力和耐寒时间,证实了山药莲子饼的健脾益气作用,为药膳山药莲子饼的上市推广提供了试验基础.
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苍术中三种单体化合物对脾虚模型大鼠疗效研究
目的:通过研究苍术中三种单体化合物对痰湿困脾模型大鼠的疗效,来明确这3种化合物的药效.方法:以给大鼠灌服大剂量番泻叶为造模方法,再以脾虚模型大鼠为给药对象,分别给以不同剂量的苍术素、β-桉叶油醇以及5-羟甲基糠醛等,并测量不同组别大鼠的血清胃泌素(GAS)、血管活性肠肽(vIP)、一氧化氮(NO)、淀粉酶活性(AMS)、胃动素(MTL)等生理指标.结果:大鼠在灌服3种单体化合物后其胃泌素、血管活性肠肽、一氧化氮、淀粉酶活性、胃动素等生理指标均出现了不同程度的恢复,其中灌服高剂量5-羟甲基糠醛的大鼠血某些指标好于阳性药物组大鼠.结论:苍术素、β-桉叶油醇以及5-羟甲基糠醛这3种单体化合物均对脾虚模型大鼠有一定的治疗作用,提示这3种单体化合物可能是苍术健脾的物质基础.
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脾虚模型脑内脑源性神经营养因子表达变化及归脾汤的影响
目的:研究脾虚模型脑内脑源性神经营养因子(BDNF)表达变化及归脾汤的影响作用.方法:采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,采用免疫组化法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层BDNF变化及归脾汤的影响作用.结果:模型组BDNF免疫阳性反应物在下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层明显降低;归脾汤治疗组上述脑区的BDNF免疫阳性反应物明显增加.结论:脾虚模型脑内BDNF表达有变化,提示归脾汤可能通过对BDNF调节作用而影响学习记忆.
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四神茶对小鼠脾虚的预防与治疗作用的研究
目的:探讨四神茶对小鼠脾虚的预防和治疗作用.方法:用番泻叶致小鼠脾虚模型,观察四神茶对小鼠脾虚模型的预防和治疗作用;观察了四神茶对正常小鼠和肠功能亢进小鼠小肠推进功能的影响.结果:四神茶可明显对抗番泻叶致脾虚小鼠的小肠推进功能减弱和体重减轻,明显增强脾虚小鼠的小肠推进功能和恢复体重,对小鼠脾虚出现的便溏、泄泻、纳呆、畏寒等症也有较好的预防和治疗作用;可明显增强正常小鼠的小肠推进功能,抑制新斯的明致小鼠小肠推进功能亢进.结论:四神茶对小鼠脾虚有较好的预防和治疗作用.
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脾虚模型脑内C-fos水平与C-JUNmRNA表达变化及归脾汤的影响
目的:研究脾虚模型脑内即早基因C-fos水平与C-JUNmRNA表达变化及归脾汤的影响.方法:采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立睥虚大鼠模型,免疫组化法、原住杂交法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层C-fos水平与C-JUNmRNA表达变化及归脾汤的治疗作用.结果:模型组C-fos免疫阳性反应物与C-JUNmRNA表达在下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层明显降低;治疗组上述脑区的C-fos免疫阳性反应物C-JUNmRNA表达明显增加.结论:脾虚模型脑内C-fos水平与C-JUNmRNA表达有变化,提示归脾汤可能通过影响C-fos水平与c-JUNmRNA表达而调节学习记忆功能.
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黄芪建中冲剂对实验动物脾虚模型影响
1实验材料动物昆明种小鼠,由吉林省药检所动物室提供;药物黄芪建中冲剂、100%大黄煎剂由本院药理实验室提供;仪器电子温度计,中国大连制造.
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益脾汤对脾虚模型大鼠血浆中胃肠激素的影响
胃肠激素存在于胃肠道粘膜内,现已分离提纯,并已测知其成分有胃泌素(Gas)、胃动素(Mot)、生长抑素(Sst)等,这些激素与早已知道的胰岛素、胰高糖素等,在迷走神经的参与下共同调节消化系统的协调活动,对食物的消化、吸收和代谢有重要作用.本文通过益脾汤对脾虚模型大鼠血浆中胃泌素、胃动素和生长抑素的影响,以进一步证明胃肠激素的变化与脾虚证有关,以及中医益气健脾方药可以调整胃肠激素的紊乱从而治疗脾虚证.
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豆豉姜对脾虚模型小鼠的药理学研究
本实验运用大黄煎剂小鼠腹腔注射造成脾虚模型后,给予不同剂量的豆豉姜煎剂,观察其对脾虚小鼠体重、毛发、外观、脾指数及血液流变学方面的影响,结果显示,豆豉姜煎剂具健脾益气作用,与民间用法相一致.
