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脾虚模型大鼠学习记忆障碍及归脾汤的改善作用
目的探讨脾虚模型大鼠学习记忆的变化及归脾汤的改善作用.方法采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,检测其学习记忆等行为.结果水迷宫实验:学习期,模型组游全程时间较长[(52.91±15.98)s],错误次数较多[(5.60±1.90)次],与正常组[(39.0±15.72)次;(3.50±1.18)次]比较,差异有显著性(P <0.01);治疗组游全程时间较短,错误次数较少,与正常组比较差异无显著性;A方对照组游全程的时间较长,错误次数较多,与正常组比较差异有显著性(P <0.01);B方对照组游全程的时间较长,与正常组、治疗组比较,差异有显著性(P <0.01),错误次数较少,与正常组、治疗组比较差异无显著性.记忆期,模型组游全程时间较长,错误次数较多,与正常组比较,差异有显著性(P <0.01);治疗组游全程时间较短,错误次数较少,与正常组比较差异无显著性;A方对照组游全程的时间较长,错误次数较多,与正常组、治疗组比较差异有显著性(P <0.01);B方对照组游全程的时间较短,错误次数较少,与正常组、治疗组比较,差异无显著性.跳台实验:学习期和记忆期,模型组错误次数较多,潜伏期短,与正常组比较,差异有显著性(P <0.01);治疗组错误次数较少,潜伏期长,记忆期成绩与正常组比较,差异无显著性;A方对照组错误次数较多,潜伏期短,与正常组、治疗组比较差异显著;B方对照组错误次数较少,潜伏期较长,与正常组、治疗组比较差异无显著性.旷野实验、自发活动:模型组探究活动及自发活动也有变化;治疗组上述行为有明显改善.结论脾虚模型大鼠学习记忆能力下降,归脾汤对上述症状有明显改善作用.
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脾虚状态下乌头炮制减毒药效对比实验研究
目的 研究虚证状态下乌头属药用植物炮制减毒对药效的影响.方法采用喂食肥甘生冷食物造成脾失健运的虚证模型.观察虚证状态下药物炮制减毒后对药效的影响.结果在给予相同剂量的前提下,药物经过炮制后毒性降低明显,与炮制后化学成分变化密切相关,而在毒性降低的同时,药效没有降低.结论脾虚状态下乌头属植物经过炮制后镇痛作用没有降低,有的药品经过炮制后镇痛作用略有增强.
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三种脾虚证建模方法建模效果的比较研究
目的 研究脾虚证不同建模方法建模效果的异同,为脾虚证大鼠模型的建立奠定基础.方法 利用三种方法建立脾虚证大鼠模型,观察各组大鼠的体重、食量、粪便质地、毛发光泽、活动情况等一般特征指标,测定各组大鼠的血清D-木糖含量和淀粉酶活力.结果 与空白组大鼠比较,三种模型组大鼠体重、食量、粪便质地、毛色等一般特征与血清D-木糖含量和淀粉酶活力等生化指标均出现不同程度的差异.结论 三种脾虚证建模方法的建模效果具有明显的差异性.
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温补培元方对脾虚大鼠胆碱能神经终末超微结构变化的影响
目的:研究温补培元方治疗脾虚证作用机制.方法:利用大黄制成的大鼠脾虚模型,并用从新安著名温补培元医家案中总结出的温补培元方进行治疗,在电镜下观察其小肠肌间神经丛胆碱能神经终末的清亮小泡的数量,运用立体定量分析法进行计算.结果:发现用药组ACh终末的清亮小泡数明显低于对照组(P＜0.05).结论:提示该方有明显减少清亮小泡的数量,抑制胆碱能神经功能亢进作用,从而改善大鼠的脾虚证候.
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五指毛桃水提液对脾虚模型大鼠胃肠功能的影响
目的 探讨五指毛桃水提液对脾虚模型大鼠胃肠功能的影响.方法 将60只大鼠随机分为6组:正常对照组,脾虚模型组,黄芪水提液对照组,五指毛桃水提液高、中、低剂量组,每组10只.除正常对照组外,其余各组大鼠均每天皮下注射利血平1 mg·kg-1复制脾虚模型,脾虚模型组给予纯化水灌胃10 mL·kg-1,黄芪水提液组及五指毛桃水提液高、中、低剂量组同时按上述剂量灌胃给予相应药物.治疗结束后,观察各组大鼠体质量及饮食量变化,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血浆中β-内啡肽(β-EP)、胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)浓度.结果 与脾虚模型对照组比较,不同剂量五指毛桃水提液均能明显增加脾虚模型大鼠体质量及饮食量;与正常对照组比较,脾虚模型组大鼠血浆β-EP、MTL、GAS浓度均明显降低(P＜0.01);与脾虚模型对照组比较,五指毛桃水提液高、中剂量组大鼠血浆β-EP浓度水平明显上升(P＜0.01或P＜0.05),五指毛桃水提液高剂量组大鼠血浆MTL浓度水平明显上升(P＜0.05),五指毛桃水提液高、低剂量组大鼠血浆GAS浓度水平均明显上升(P＜0.05).结论 五指毛桃水提液可能通过调节血浆中β-EP、MTL、GAS浓度水平,有效改善大鼠脾虚证候,这可能是其益气健脾和胃功效治疗脾虚证候的作用机制之一.
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生晒参超微饮片对脾虚小鼠小肠黏膜形态学的影响
目的 观察生晒参超微饮片对脾虚小鼠小肠黏膜形态学的影响.方法 选用雄性昆明种小鼠,随机分为正常组、空白对照组、生晒参汤剂组、生晒参超微饮片全剂量组(含生药2.5 g/kg)及生晒参超微饮片1/2剂量组(含生药1.25 g/kg),采用利血平法制备脾虚动物模型,分别给予生理盐水、生晒参超微滤液及生晒参传统汤剂,造模及给药后处死小鼠,取小肠空肠段作光镜HE染色观察小鼠小肠黏膜形态改变,电镜观察小肠超微结构变化.结果 用药后生晒参超微饮片全剂量组能明显改善脾虚小鼠小肠上皮微绒毛.改善细胞质和细胞器结构,有显著的修复作用.结论 生晒参超微饮片对脾虚小鼠小肠黏膜的修复作用优于生晒参传统汤荆.
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枳实及其主要活性成分促进脾虚模型大鼠胃肠运动的机制研究
目的:研究枳实及其主要活性成分促进脾虚模型大鼠胃肠运动的机制.方法:将170只大鼠随机分为空白组(10只)和造模组(160只),造模组大鼠以苦寒泻下+饥饱失常法复制脾虚模型.造模后,将大鼠随机分为模型组,柚皮苷低、中、高剂量组(3.267、6.535、13.070 mg/mL),新橙皮苷低、中、高剂量组(3.865、7.730、15.460 mg/mL),辛弗林低、中、高剂量组(0.252、0.504、1.008 mg/mL),3个单体成分(即柚-新-辛)低、中、高剂量配伍组和枳实水煎液低、中、高剂量组(0.104、0.208、0.416 g/mL,以生药计),每天ig给药1次,10 mL/kg,连续7 d.末次给药后,检测大鼠血清胃泌素(GAS)和血浆乙酰胆碱(ACh)、胃动素(MTL)、P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)水平.结果:与空白组比较,模型组大鼠血清GAS水平和血浆ACh、MTL、SP水平降低(P<0.01),血浆VIP水平升高(P<0.05).与模型组比较,除柚皮苷高剂量组和辛弗林各剂量组大鼠血清GAS水平外,其余各给药组均明显升高(P<0.05或P<0.01);新橙皮苷高剂量组、辛弗林高剂量组和枳实水煎液低剂量组大鼠血浆ACh水平显著升高(P<0.01);新橙皮苷中、高剂量组,辛弗林高剂量组,低、中剂量配伍组和枳实水煎液中、高剂量组大鼠血浆MTL水平显著升高(P<0.05);柚皮苷低、中剂量组和新橙皮苷各剂量组大鼠血浆SP水平显著升高(P<0.05或P<0.01);柚皮苷低剂量组,辛弗林高剂量组和枳实水煎液低、中剂量组大鼠血浆VIP水平显著降低(P<0.05).结论:枳实可能通过促进GAS、ACh、MTL的分泌和抑制VIP的分泌来促进脾虚模型大鼠的胃肠运动;其与3个单体成分对胃肠激素的调节作用有差异.
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生脉饮多糖提取工艺优化及对脾虚模型大鼠肠道功能调节作用的研究
目的:优化生脉饮多糖的提取工艺,并探讨生脉饮及其多糖对脾虚模型大鼠肠道功能的调节作用.方法:采用硫酸苯酚法测定多糖含量,并计算多糖提取率;以此为考察指标,采用单因素试验和正交试验,对生脉饮多糖提取工艺的料液比、提取时间、提取温度、提取次数进行优化,并进行验证试验.将80只雄性SD大鼠随机分为空白组,模型组,生脉饮低、中、高剂量组(350、700、1400 g/L,按生药量计)和生脉饮多糖低、中、高剂量组(24.5、49、98 g/L,按生药量计),每组10只.除空白组外,其余各组大鼠均灌胃大黄水煎液10 mL/kg复制脾虚模型,每天1次,连续15 d.自第16天起,空白组和模型组大鼠均灌胃等容水,其余各组大鼠均灌胃相应药液,每天1次,连续10 d.观察各组大鼠的一般情况,记录体质量,并采用间苯三酚法或酶联免疫吸附测定法检测其血清D-木糖、胃泌素(GAS)、血管活性肠肽(VIP)含量.结果:生脉饮多糖优提取工艺为料液比1:10(g/mL)、提取时间45 min、提取温度80℃、提取次数1次.验证试验结果显示,3次提取的多糖提取率分别为7.43％、7.64％、7.80％(RSD=1.01％,n=3).造模后,除空白组外的其余各组大鼠均出现了大便溏稀、体形消瘦、食量减小等症状,且其体质量和血清D-木糖含量均较空白组显著降低(P<0.01).末次给药后,各给药组大鼠上述症状均有不同程度的改善,且除模型组外的其余各组大鼠的体质量以及各组大鼠血清D-木糖含量均较同组造模前或给药前显著增加(P<0.05或P<0.01);与空白组比较,模型组大鼠体质量和血清GAS含量均显著降低,血清VIP含量显著增加(P<0.01);与模型组比较,生脉饮中剂量组和生脉饮多糖低、高剂量组大鼠体质量以及生脉饮中、高剂量组和生脉饮多糖低、中剂量组大鼠血清D-木糖、GAS含量均显著增加,生脉饮各剂量组和生脉饮多糖低、中剂量组大鼠血清VIP含量均显著降低(P<0.05或P<0.01).结论:优化的生脉饮多糖提取工艺稳定、可行.生脉饮及其多糖可有助于恢复脾虚模型大鼠的肠道功能,这种作用可能与其调节肠道GAS、VIP等因子分泌有关.
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参苓白术散治疗脾虚泄泻模型小鼠肠道局部免疫机制研究
目的 探讨参苓白术散治疗脾虚泄泻模型小鼠肠道局部免疫机制.方法SPF级昆明小鼠40只按随机对照的原则分为:A组 (正常对照组) 、B组 (模型组) 、C组 (参苓白术散治疗组) 、D组 (思密达阳性对照组), 每组10只.计算每组小鼠脾/胸腺指数, 光镜检测小鼠肠微绒毛和固有层的病理变化, 用ELISA法检测小鼠血清IL-2、IL-12、TNF-α及肠组织s Ig A水平.结果模型组脾/胸腺指数显著降低 (P<0.05), 小鼠肠上皮固有层、微绒毛损伤明显, 血清IL-2、IL-12、TNF-α及肠组织s Ig A水平显著下调 (P<0.05), 参苓白术散治疗组以上各种指标较脾虚模型组显著恢复.结论 参苓白术散能够显著升高脾虚模型组小鼠脾/胸腺指数, 上调其血清IL-2、IL-12、TNF-α及肠组织s Ig A水平, 增强小鼠免疫功能, 进而修复小鼠肠黏膜损伤, 达到治疗脾虚泄泻的作用.
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脾虚动物模型实验研究的现状及展望
本文综述了近年来用建立的脾虚动物模型,将其分为四类:泻下法、饥饱失常法、偏食苦味法、偏食酸味法、过食肥甘法、劳倦法、利血平法及复合法建立的脾气虚动物模型;应用泻下法和伤湿法建立的脾阳虚动物模型;过酸法、醇酒法、破血法建立的脾气虚脾不统血动物模型;甲状腺素加番泻叶法建立的脾阴虚动物模型.还概述了脾虚的病证结合动物模型 ,并从一般表现、形态学、免疫、生化、神经内分泌等指标对各种脾虚模型的研究概况进行了介绍.指出虽然有较多的造模方法,也建立了多种脾虚模型并其进行了较深入的研究,但仍需对模型复制的各环节作进一步规范;理论上还应有脾气下陷病机的动物模型,但少有报道:现代分子生物学发现,大多数的临床表现都可以归结到基因的异常表达上,而脾虚动物模型的研究在这方面还很欠缺;临床疾病均是病证统一的,而病证结合的脾虚动物模型的研究也才刚开始.这些都应该是脾虚动物模型的发展方向.
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四君子汤药效物质基础与作用机理研究
中药复方是中医用药的主要形式,中药复方药效物质基础和作用机理研究是中药复方研究的核心环节.本文在中医理论指导下,首次采用方证、药证、有效部位与证、有效成分与证的中药复方研究新模式,应用化学提取分离纯化技术和现代药理实验方法,对四君子汤全方、拆方、组成药物,有机溶剂系统分离提取部位,不同分离组分进行了研究.结果:①四君子汤、四君子汤益气药组、四君子汤健脾药组均能改善脾虚症状,纠正胃肠病理损害,促进胃肠蠕动,提高消化吸收功能,恢复胃肠细胞形态结构,增加细胞表面微绒毛,细胞颗粒及细胞器数量,具有健脾益气、保护胃肠细胞作用.②四君子汤组成药物人参、白术、茯苓、甘草及人参替代品党参均有健脾益气作用,但各有特点.人参健脾益气作用较强,提高特异性和非特异性免疫功能优,综合疗效优于党参,从理论和实验两方面,证实了四君子汤君药用人参,非<药典>四君子丸君药用党参;白术健脾益气作用较强,尤其能够明显升高血清总蛋白;茯苓有健脾益气作用,但无增加脾虚模型动物体重和自发活动的作用;甘草健脾益气作用较强.③四君子汤复方整体有机溶剂系统分离提取部位中石油醚部位、正丁醇部位、水提部位能明显增加食醋脾虚证大鼠的摄食量、自发活动、体重,纠正大便异常,消除胃肠病理损伤,重建胃肠细胞正常结构,与脾虚模型组或脾虚模型自然恢复组比较,有显著性.四君子汤乙酸乙酯部位、乙醇部位对食醋脾虚动物症状和病理变化无明显影响.④人参皂甙、人参多糖、白术挥发油是四君子汤治疗脾气虚证的主要有效部位,白术多糖、茯苓多糖、甘草皂甙是四君子汤治疗脾气虚证的次要有效部位,人参去皂甙多糖、白术去挥发油多糖、茯苓去多糖、甘草去皂甙是四君子汤治疗脾气虚证的无效部位.⑤四君子汤、四君子汤主要有效组分是通过增加胃肠循环血量、增加胃肠粘液、重建胃肠细胞和亚细胞结构、促进胃肠细胞更新、提高细胞内线粒体SHD和细胞膜Na+-K+-ATP酶活性、消除自由基、升高PGE2含量,达到保护胃肠细胞、治疗脾气虚证胃炎的目的.结果提示,四君子汤的主要药效部位是人参皂甙、人参多糖、白术挥发油通过保护胃肠细胞,达到治疗脾气虚证的目的.
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补虚药对脾虚模型小鼠抗应激功能的影响
目的:探讨补虚药对脾虚模型小鼠抗应激功能的影响.方法:将小鼠随机分为空白对照组、人参组、黄芪组、四君子汤组,各组小鼠均灌胃生大黄水煎液7天,确定脾虚模型成立后,除空白对照组灌胃蒸馏水,其余各组均灌胃药液,7～9天后,测定小鼠体重、蹬轮时间、游泳时间、常压耐缺氧时问和脾重等指标.结果:灌胃人参、黄芪、四君子汤的小鼠体重、脾重、蹬轮次数、游泳时间、耐缺氧时闻与模型对照组相比差异有统计学意义.结论:补虚药对脾虚模型小鼠抗应激功能有明显改善作用.
