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茉莉酸甲酯调控阳春砂HMGR、DXR和DXS基因表达
[目的]探讨茉莉酸甲酯(Methyl Jasmonate,MeJA)调控阳春砂萜类化合物生物合成途径3个关键酶基因HMGR、DXR、DXS表达的规律.[方法]用20 μmol/L和200 μmol/L高、低2个浓度的MeJA喷施阳春砂幼苗,诱导不同时间后取样,提取RNA,采用荧光定量PCR法测定AvHMGR、AvDXR、AvDXS相对表达量.[结果]MeJA对AvHMGR、AvDXR和AvDXS的表达均有促进作用,其中对AvDXR的促进作用明显,AvHMGR次之,两者高表达量分别达到处理前的9.40和3.95倍；AvDXR基因受高、低浓度MeJA的诱导表达均十分明显,而AvHMGR基因仅对低浓度MeJA敏感,AvDXS基因对高、低浓度的MeJA均不敏感；AvHMGR和AvDXR的表达量在诱导后24 h达到高峰,在72 h恢复到处理前水平.[结论]诱导子MeJA对AvDXR和AvHMGR基因表达的调控是激发式的,基因表达迅速上调到一定水平,而后逐渐回落.
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阳春砂磷酸甲羟戊酸激酶的基因克隆与表达谱分析
目的：为了了解阳春砂磷酸甲羟戊酸激酶（PMK）的功能与表达特性，根据阳春砂的转录组注释设计引物，PCR 克隆阳春砂甲羟戊酸途径中的关键酶磷酸甲羟戊酸激酶基因的编码区 cDNA，使用生物信息学方法对其编码的蛋白进行相似性检索及同源序列比对，构建进化树，预测二级及三级结构并分析其功能，探索其各器官中的表达差异．结果：获得了全长1539 bp 的编码阳春砂 PMK 的 cDNA 序列，命名为 AvPMK （GenBank 登录号：KF569902），编码由512个氨基酸组成的磷酸甲羟戊酸激酶，该蛋白含有 GHMP 激酶超家族特异的 N －保守区域、C －保守区域和 ATP 结合位点 Gly-X-Gly-XX-Ala．AvPMK 与其他植物的 PMK 氨基酸相似性达61％～69％，进化树结果显示其与二穗短柄草（Brachypodium distachyon）等单子叶植物具有较近的亲缘关系．AvPMK 蛋白包含14个α-螺旋（Alpha helix），占37.1％；16个β链（Beta strand），占15.6％；32个无规则卷曲结构，占47.3％，无跨膜结构域，其3级结构含有一个催化反应的口袋状结构域．实时荧光定量 PCR 结果显示 AvPMK 基因在叶中表达量较高，茎、根中表达量相对较低．结论：首次从阳春砂仁中扩增磷酸甲羟戊酸激酶的基因片段，为分析其基因表达特性及其在砂仁萜类生物合成中的功能奠定基础．
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药用植物阳春砂花芽分化规律研究
目的 研究了药用植物阳春砂的花芽分化规律.方法 对阳春砂根状茎网络进行分级,测量根状茎长度,并统计根状茎节数和花芽数量.结果 花芽在各级根状茎的6～10节上均有分化,但主要分化于第7、8、9节上,其中第7节上花芽多.不同阳春砂品种根状茎网络内花芽数、节数以及两者之比存在不同程度的差别.结论 单级根状茎节的数量是一个品种特征.花芽与单级根状茎节数的比值可以作为衡量阳春砂花芽分化率高低的指标,明确了阳春砂花芽分化的规律.
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砂仁及其近缘植物化学成分的气相色谱指纹图谱研究
目的建立砂仁所含挥发油的指纹图谱,以鉴别砂仁与常见混伪品的质量.方法采用GC方法,以道地产区10批药材为基准,建立砂仁挥发油的GC指纹图谱.色谱柱为HP-5非极性柱(30 m×0.32 mm,0.25 μm),进样口温度23℃,检测器(FID)温度300℃,柱温为程序升温70℃(停5min)10°C·min-1140°C(停50 min);气体流量N2 30 ml·min-1,H2 30 ml·min-1,空气100 ml·min-1;流动相为N2,流速0.54 ml·min-1;分流比为50∶1.结果建立了阳春砂挥发油成分GC指纹图谱的标准模式,并对常见商品混伪品进行相似度的比较,为建立计算机自动识别的数据库奠定了基础.结论规范化种植基地(GAP base)的砂仁药材指纹图谱较为稳定,相似程度较高,与混伪品有明显的差别.
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微波消解-原子吸收法测定广东阳春砂中的4种微量元素
目的:建立广东阳春砂中4种微量元素的定量检测方法,并对其含量水平和健康风险进行初步评价.方法:采用微波消解-原予吸收光谱法定量分析6个广东产阳春砂中铅、锌、铜、铬等4种微量元素的含量.结果:6个广东产阳春砂样品中,铜的含量高,超出国家限量标准(Cu≤20.0 mg/kg);锌含量次之,在6.5～13.2 mg/kg之间,铅和铬的含量均低于3.8 mg/kg,符合国家限量标准.结论:从微量元素含量水平来看,广东阳春砂种植基地土壤中微量元素缺乏,应该加强微肥施种的力度.阳春砂中高浓度的铜元素则从侧面反映了广东阳春砂种植基地土壤存在污染的可能性,应当引起足够重视.从人体服用后的健康风险指数来看,铅和铬对人体产生健康风险的可能性较小,铜对人体可能会产生一定的健康风险.
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云南阳春砂仁表型性状变异及其相关和通径分析
目的 调查阳春砂居群表型性状的变异范围,寻找与产量密切相关的表型性状,为今后阳春砂品种选育提供参考.方法 随机标记阳春砂仁植株,观测其表型性状,并进行表型性状变异、相关及通径分析.结果 调查的阳春砂仁3个居群10个表型性状变异较大,各表型性状变异系数从大到小依次为果数＞叶数＞分蘖茎粗＞叶舌长＞株高＞叶长＞叶宽＞茎粗＞果型指数＞果横径＞果纵径.相关性分析表明,果型指数与株高无显著相关性(P＞0.05),与叶舌长、果横径及产地环境呈极显著相关性(P＜0.01).阳春砂仁各主要性状对果型指数的作用效应依次为:果横径(0.9025)＞果纵径(0.8668)＞分蘖茎粗(0.0088)＞茎粗(0.0086)＞产地环境(0.0023)＞叶宽(0.0021)＞果数(0.0011)＞叶数(0.0003)＞叶舌长(0.0003)＞叶长(0.0002)＞株高(0).将砂仁划分为不同果型类型,大果圆粒果型性状优于大果长粒和小果圆粒.结论 西双版纳地区阳春砂仁居群表形性状变异丰富,不同果型类型挑选时,果横径对果型指数的直接贡献作用大,可以作为首选性状.茎粗、叶数、叶长也有不同程度促进作用,可以作为辅助选择性状.大果圆粒可以作为优良品种选育的首选果型.
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阳春砂的开花动态及花粉活力和柱头可授性研究
目的:研究阳春砂花粉活力和柱头可授性在开花散粉后的动态变化规律,为提高阳春砂仁坐果率提供基础资料.方法:在景洪市基诺族乡、景哈哈尼族乡和药植所云南分所园内选取10 ～ 30个花序,观察其的开花动态,并用悬滴法检测花粉活力(每次用3朵花),用MTT法测定柱头的可授性(用标记的10 ～30个花序的柱头).结果:阳春砂一个花序自第一朵开放到后一朵开完需要3 ～ 9d.单花花期一般为1d；花粉在上午11:00以前均保持较高地萌发率,到中午11:00以后花粉活力下降,18:00仍有萌发能力；不同地区柱头可授性差异明显,花序上部小花柱头可授性比下部小花的高,不同花期柱头可授性变化不大.结论:景哈乡阳春砂柱头可授性比基诺乡的高,云南分所园内橡胶树下为低.
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砂仁与益智仁的鉴别
砂仁为姜科(zingiboral eae)植物阳春砂(Amomnmuill esumlour)及缩砂Amomun.Xanthioids.Wall的干燥成熟果实,载于《开宝本草》.主要成份:阳春砂种子含挥发油3%以上,油的主要成份为龙脑、右旋樟脑、乙酸龙脑酯(Bornyl acetate)、芳樟脑(Linalool)、橙花叔醇(Neroli-dol)等.又谓含皂甙0.6%.性温味辛,行气止痛,健脾消胀,安胎止呕.
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砂仁及其伪品益智、艳山姜的鉴别
砂仁为常用中药，来源于姜科植物阳春砂Amomun Villosum Lour wo干燥成熟果实，具有化湿开胃、温脾止泻、理气安神等功能，多用于湿浊中阻、脘痞不饥、脾胃虚寒、呕吐泄泻、妊娠恶阻、胎动不安，因其具有浓烈的芳香气味，常作调味品用。近我们在市场检查中经常发现误将同种植物益智和艳山姜的干燥成熟果实当砂仁混用。本文通过薄层色谱及紫外分光光度法，……
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气相色谱法测定阳春砂及其近缘种3种成分的含量
目的:建立气相色谱法测定阳春砂及其近缘种药材中醋酸龙脑酯、樟脑、龙脑3种成分含量.方法:使用HP-INNO-WAX Polythylene Glycol非极性毛细管柱(30.0 m ×0.32 mm,0.25 μm);柱温为程序升温,进样口温度230℃,检测器(FID)温度250℃.载气为氮气(恒流),流速为0.6 mL·min~(-1).结果:样品中3种成分完全分离,线性关系良好,醋酸龙脑酯、樟脑、龙脑的加样同收率分别为101.2%,102.6%,105.8%(n=9).结论:该方法简便快速、结果准确、灵敏度高,可有效用于控制阳春砂及其近缘种药材的质量.
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砂仁的真伪鉴别
砂仁具有行气宽中,健胃消食,安胎止呕的功效.用于脘腹胀痛,食欲不振,恶心呕吐,胎动不安等症.近来发现市场上有用伪品砂仁来冒充正品入药,特鉴别如下.1 正品为姜科植物阳春砂Amomum villosum Lour.、绿壳砂Amomum villosum Lour.var.xanthioides T.L.Wu et Senjen或海南砂Amomum longiligulare T.L.Wu的干燥成熟果实.夏、秋间果实成熟时采收,晒干或低温干燥.
