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“脊髓康”对大鼠脊髓损伤区Nogo-A表达的影响
目的:观察中药“脊髓康”对大鼠脊髓急性损伤后脊髓组织Nogo-A表达的影响.方法:选用162只SD大鼠,随机分成假手术组、模型组、强的松组、脊髓康高剂量组、脊髓康中剂量组、脊髓康低剂量组,每组27只,分别于干预后3天、7天、14天处死大鼠,以免疫组化、Western Blot及荧光定量PCR检测大鼠脊髓组织中Nogo-A的表达量.结果:脊髓损伤各组在损伤后3天时Nogo-A蛋白和mRNA表达较低,7天后迅速上升达到高峰,至14天逐渐下降.与模型组比较,脊髓康中剂量组和强的松组在损伤后3天、7天、14天时,Nogo-A蛋白和mRNA表达差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:中药“脊髓康”能有效抑制大鼠脊髓损伤区Nogo-A表达,有利于脊髓损伤修复.
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脊髓康对大鼠脊髓损伤细胞凋亡及生长相关蛋白-43的影响
目的:研究自拟中药方脊髓康对损伤脊髓神经再生和功能重建的机制.方法:采用改良Allen's法建立大鼠脊髓损伤(SCI)动物模型,随机分为模型组、强的松组、脊髓康高剂量组、脊髓康中剂量组、脊髓康低剂量组共5组,观测每组分别在3、7、14d时的脊髓损伤区细胞凋亡表达与生长相关蛋白-43(GAP-43)表达.结果:术后3d,各脊髓损伤组均出现大量凋亡神经细胞,模型组与其余各组相比差异显著(P＜0.01).术后7d,脊髓康高剂量组及强的松组疗效优于其余各组,两组差异无统计学意义.术后14d,强的松组与脊髓康中剂量组疗效较优,两组差异无统计学意义.各组在3个时间点GAP43蛋白表达结果均有统计学差异(P＜0.05).与模型组比较,3d时,假手术组、强的松组及脊髓康中剂量组均有统计学差异(P＜0.01);7及14d时,各组与模型组相比均有统计学差异(P＜0.01).结论:脊髓康能通过减少SCI后神经细胞的凋亡,上调损伤脊髓中GAP-43的表达,挽救受损的神经元,改善神经恢复的微环境,有利于损伤神经的轴突再生以及神经功能重建.
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脊髓康对自然混杂体系中小胶质细胞吞噬作用的影响
目的:观察中药复方脊髓康对自然混杂体系中小胶质细胞吞噬神经元碎片的影响.方法:制备脊髓康含药血清;分离、培养原代神经细胞,建立混杂细胞体系;以谷氨酸诱导混杂体系中神经元损伤,以脊髓康含药血清干预混杂体系;免疫荧光染色法标记神经元骨架、碎片以及小胶质细胞膜蛋白,观察脊髓康对小胶质细胞吞噬功能的影响.结果:脊髓康中、高剂量组吞噬百分率及吞噬指数均高于空白组(P＜0.01).结论:脊髓康可能通过促进小胶质细胞吞噬神经元碎片作用,改善神经元生长微环境,进而促进存活神经元的修复再生.
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脊髓康对脊髓损伤大鼠血清脑源性神经营养因子及神经生长因子表达的影响
目的 观察脊髓康对脊髓损伤大鼠血清脑源性神经营养因子(BDNF)及神经生长因子(NGF)蛋白表达的影响,探讨其改善损伤轴突再生微环境和抗脊髓损伤的作用机制.方法 90只SD大鼠采用改良Allen's法建立大鼠急性脊髓损伤模型,随机抽取15只作为假手术组,其余75只造模成功后随机分为模型组、强的松组及脊髓康高、中、低剂量组.各治疗组予相应药物灌胃,假手术组和模型组予等体积生理盐水灌胃.记录期间各组大鼠活动及死亡情况,于干预后3、7、14 d处死大鼠,颈动脉采血,ELISA检测血清BDNF、NGF表达.结果 模型组大鼠脊髓损伤后均出现典型的截瘫综合征.术后3 d,BDNF表达模型组与假手术组比较差异无统计学意义(P>0.05),而各治疗组均高于假手术组(P<0.05,P<0.01);术后7、14 d,各治疗组和模型组均高于假手术组(P<0.01),其中强的松组、脊髓康中剂量组高于模型组(P<0.05,P<0.01).各治疗组和模型组NGF表达均高于假手术组,术后3、7 d各治疗组明显高于模型组;术后14 d与模型组比较,强的松组和脊髓康中、低剂量组仍维持较高水平(P<0.05,P<0.01).结论 脊髓康能有效促进脊髓损伤大鼠血清 BDNF、NGF 表达,并在14 d内维持较高水平,从而改善轴突再生微环境,促进神经再生.
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脊髓康对大鼠脊髓损伤后神经功能恢复及脑源性神经营养因子表达的影响
目的：探讨脊髓康对脊髓损伤(SCI)后神经功能恢复以及脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白和mRNA表达的影响。方法144只雌性Sprague-Dawley大鼠，体质量180~220 g，随机抽取24只作为假手术组，仅咬除T9~T11段椎板、棘突。其余采用改良Allen法成功建立SCI动物模型后，随机分为5组，即模型组、醋酸泼尼松组及脊髓康高、中、低剂量组，每组24只。脊髓康高、中、低剂量组分别按生药剂量50 g/(kg?d)、25 g/(kg?d)、12.5 g/(kg?d)灌胃；醋酸泼尼松组以醋酸泼尼松0.06 g/(kg?d)灌胃；假手术组与模型组均以同体积生理盐水灌胃。分别于术后24 h、3 d、7 d、14 d，进行Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分、斜板试验，干预后3 d、7 d、14 d处死大鼠取脊髓样本，采用免疫组化、Western blotting、荧光定量PCR法检测脊髓损伤区BDNF蛋白和mRNA的表达情况。结果术后24 h假手术组大鼠BBB评分、斜板试验角度明显高于其他各组(P<0.01)。术后3~14 d脊髓康中剂量组和醋酸泼尼松组BBB评分均高于模型组(P<0.05)，且术后14 d脊髓康中剂量组BBB评分明显高于其他各组(P<0.01)。免疫组化和Western blotting显示，不同时间点醋酸泼尼松组和脊髓康中剂量组BDNF蛋白表达水平均明显高于模型组(P<0.01)，二者具有等效性(P>0.05)。荧光定量PCR显示，醋酸泼尼松、脊髓康可促进SCI后脊髓损伤区BDNF mRNA的表达，早期醋酸泼尼松效果较为明显，而干预后14 d脊髓康中剂量效果明显优于醋酸泼尼松。结论脊髓康可促进大鼠SCI后神经功能的恢复，提升SCI后脊髓内BDNF蛋白及mRNA的表达水平。
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不同浓度脊髓康对脊髓损伤大鼠诱发电位的影响
目的：观察不同浓度脊髓康对脊髓损伤大鼠诱发电位的影响。方法 SD大鼠60只，按体重随机分为6组，假手术组、模型组、对照组（强的松，0.06 g· kg－1· d－1）、高中低3个剂量（脊髓康，50，25，12.5 g· kg－1· d－1）实验组。分别于术前和术后即刻及术后3，7，14，28 d对大鼠进行体感诱发电位（ SEP）与运动诱发电位（ MEP）检测，观察潜伏期与波幅的变化。结果中剂量实验组对SEP潜伏期及波幅的改善优于高、低2个剂量实验组，但与对照组比较无明显差异。中剂量实验组对于MEP潜伏期缩短与对照组接近，优于高、低2个剂量实验组，对于波幅的提高优于其他给药组。结论中剂量脊髓康对于脊髓损伤后神经功能恢复具有良好疗效。
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脊髓康治疗脊髓损伤28例
笔者在临床中应用自拟经验方"脊髓康"治疗脊髓损伤28例,取得满意效果,现报道如下.1 临床资料本组28例中,男22例,女6例;年龄18～50岁.其中颈椎损伤2例,上胸椎损伤6例,下胸椎、腰椎损伤20例,脊髓完全性损伤5例,不完全性损伤23例.
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脊髓康对脊髓损伤大鼠Nogo-66受体NgR表达的影响
背景：研究发现，脊髓损伤后髓鞘相关抑制分子的产生是影响轴突再生微环境的重要原因。中医药具有多因素、多靶点的优点，正逐步成为改善神经再生微环境的研究热点。
目的：探索中药脊髓康对脊髓损伤后 Nogo-66受体 NgR 表达的影响。
方法：144只大鼠随机等分为6组，假手术组、模型组、强的松组、脊髓康高、中、低剂量组，每组24只。后5组以改良 Al en’s 法建立脊髓损伤动物模型。强的松组大鼠每天给予0.06 g/kg 醋酸泼尼松灌胃，1次/d。脊髓康低中高剂量组大鼠每天给予12.5，25，50 g/kg 脊髓康灌胃，1次/d。假手术组和模型组大鼠每天给予20 mL 生理盐水灌胃，1次/d。各组动物均连续给药至动物处死。
结果与结论：与模型组相比，强的松组及脊髓康低中剂量组大鼠脊髓组织中 NgR 蛋白及 mRNA 表达水平均显著降低。提示脊髓康可促进大鼠脊髓损伤后神经功能的恢复，可有效抑制脊髓损伤区 NgR蛋白的表达，从而抑制不利于神经再生的因素，进一步改善神经再生的微环境。 -
脊髓康对共培养体系中小胶质细胞吞噬及损伤神经元再生的影响
目的:观察中药复方脊髓康对共培养体系中小胶质细胞吞噬及损伤神经元修复再生的影响.方法:制备脊髓康含药血清,分离、鉴定原代海马神经元、原代小胶质细胞,谷氨酸诱导神经元损伤,含药血清预处理小胶质细胞,建立小胶质细胞/损伤神经元共培养体系,采用免疫荧光双重标记法观察混培养24 h后小胶质细胞对神经元碎片的吞噬作用及96 h后损伤神经元突起生长情况.结果:混合培养24 h后,脊髓康含药血清中、高剂量组在吞噬指数及吞噬百分率方面均高于空白组(P<0.05),中剂量组低于脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)组(P<0.05),高剂量组与 LPS组间的差异则无统计学意义(P>0.05).混合培养96 h后,脊髓康含药血清中、高剂量组一级突起数量多于空白组(P<0.05),与LPS组比较差异无统计学意义(P>0.05).脊髓康中、高剂量组平均突起较空白组长(P<0.05),与LPS对比,脊髓康中剂量组平均神经突起较短(P<0.05),而高剂量组则平均突起较长(P<0.05).结论:中药复方脊髓康可能通过促进小胶质细胞吞噬神经元碎片,改善局部微环境,从而促进损伤神经元的修复再生.
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"脊髓康"治疗脊髓损伤后排尿障碍19例
2000年以来,笔者运用自拟脊髓康治疗脊髓损伤后排尿障碍19例,取得较好疗效,现报告如下.
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王建伟
无锡市名医1963年生，江苏无锡人，医学博士，主任中医师，教授，博士生导师，骨伤科主任。中国中西医结合学会微创分会委员，江苏省中西医结合学会骨伤专业委员会副主任委员。
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"脊髓康"治疗脊髓损伤后便秘18例
脊髓损伤患者多有便秘,患者排便困难.笔者在运用"脊髓康"对18例脊髓损伤患者进行治疗,疗效满意,现报道如下.
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手术加中药"脊髓康"治疗脊髓损伤30例
作者按照中医辨证论治和辨病论治相结合的原则,在总结临床实践的基础上,研制了中药"脊髓康",配合手术治疗脊髓损伤,取得了良好的效果.现报告如下.
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中药脊髓康治疗大鼠脊髓损伤的实验研究
目的:观察脊髓康对脊髓损伤大鼠的治疗作用及其作用是否有剂量依赖性,并与强的松进行对照.方法:SD大鼠72只随机分为6组(n=12).造模后脊髓康高、中、低剂量组予脊髓康25、12.5、6.25 g生药/kg体重;强的松组予强的松0.06g/kg体重.正常组及模型组予等量蒸馏水.测定血液及损伤脊髓中IL-10、INF-α、NO、NOS、SOD、MDA含量;全血粘度;损伤脊髓病理学检查.结果:血液中TNF-α含量升高,脊髓康各剂量组相时模型组降低.血液中IL-10水平下降,强的松组和脊髓康各剂量组相对模型组有显著差异.强的松组相对模型组全血比粘度无差异.脊髓康高、中剂量组低于模型组.血液SOD活力下降,MDA、NO和NOS含量升高.脊髓康高、中剂量组SOD活力高于模型组,MDA及NO含量低于模型组.脊髓康各剂量组NOS含量低于模型组.强的松组相对模型组MDA含量下降.SOD活性无明显变化.脊髓损伤部位SOD活力下降,MDA、NO和NOS含量升高.脊髓康高剂量组SOD活力高于模型组.脊髓康高、中剂量组MDA、NOS含量低于模型组.脊髓康各剂量组NO含量低于模型组.强的松组相对模型组MDA含量下降,SOD活性无明显变化.病理结果:脊髓康高剂量组脊髓病变程度较轻.中剂量组较高剂量组稍差.低剂量组白质区水肿.强的松组与高、中剂量组相似.结论:脊髓康能抑制NOS表迭、降低NO含量;能降低MDA含量、提高SOD活性;能改善血液流变学指标;能降低TNF-α水平;能提高IL-10水平;能防止脊髓损伤的继发性改变.促进脊髓组织恢复,促进神经组织再生,高剂量较中剂量疗效更显著.
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脊髓康治疗犬脊髓损伤后痉挛性膀胱的实验研究
目的:观察脊髓康对犬脊髓损伤后痉挛性膀胱的治疗作用,并与选择性骶神经根切断术进行对照.方法:雄性家犬30只随机分为6组(n=5),A组:正常组;B组:模型组;C组:切断S1神经根;D组:切断S1、S2神经根;E组:切断S1～S3神经根;F组:脊髓康组,造模后予脊髓康.造模成功1周后行选择性骶神经根切断术.观察犬一般表现,存活率,排尿量及阴茎勃起情况;实验结束取损伤脊髓作病理学分析.结果:A组活动能力正常,B、C、D、E组双后肢无任何活动,F组活动能力较强.手术后第1、第7天A组勃起功能正常,B、F组勃起率相似;C、D、E组勃起率随骶神经根切断数量的增加而依次降低.C、D、E及F组术后排尿量高于B组而低于A组.病理结果:脊髓康组犬脊髓病理变化程度较轻.结论:脊髓康可改善脊髓损伤犬生存质量;可缓解逼尿肌、括约肌痉挛,改善脊髓损伤后痉挛性膀胱的贮尿功能及降低尿道出口阻力;可促进损伤脊髓的恢复,减轻脊髓水肿.阴茎勃起功能与S3神经关系密切,但存在个体差异.
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脊髓康治疗继发性脊髓损伤的机理研究
目的:探讨中药"脊髓康"对实验性脊髓损伤的作用和机理.方法:采用热板法、扭体法两种方法观测脊髓康对小鼠镇痛作用;通过对血管通透性、棉球肉芽肿的影响观测脊髓康的抗炎作用.结果:脊髓康能提高小鼠的热板刺激所致的痛阈值,延长醋酸引起扭体反应出现的潜伏期,能明显减少肉芽组织重量,可抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细血通透性增加,结论:显示脊髓康对化学性、物理性刺激具有一定的镇痛作用,并有一定的抗急慢性炎症的作用,能防止脊髓损伤的继发性改变,促进脊髓组织的恢复和再生.
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硫酸软骨素酶ABC联合脊髓康对大鼠脊柱脊髓损伤后的神经功能恢复、TGF-β1、HIF-1α、Nogo-NgR信号通路的影响
目的:探究硫酸软骨素酶ABC(Ch ABC)联合脊髓康对大鼠脊柱脊髓损伤后的神经功能恢复及TGF-β1、HIF-1α 、Nogo-NgR信号通路的影响.方法:60只大鼠随机分为4组,分别为对照组 、模型组 、Ch ABC组和Ch ABC+脊髓康.使用Allen's法建立大鼠脊柱脊髓损伤模型.Basso Beattie Bresnah-an(评分)和体感诱发电位(sEP)检测评估脊髓神经功能.使用RT-qPCR检测mRNA水平,Western blot检测蛋白水平.结果:建模后大鼠BBB评分显著降低(P<0.05),干预后3组的BBB评分均有提高,其中Ch ABC+脊髓康组BBB评分显著高于Ch ABC组(P<0.05).建模后大鼠SEP显著升高(P<0.05),干预后3组的BBB评分均有降低,其中Ch ABC+脊髓康组BBB评分显著低于Ch ABC组(P<0.05).干预后Ch ABC组和Ch ABC+脊髓康组TGF-β1显著高于模型组,HIF-1α 显著低于模型组(P<0.05).且干预后Ch ABC+脊髓康组TGF-β1的水平显著高于Ch ABC组而HIF-1α 显著低于Ch ABC组(P<0.05).干预后Ch ABC组和Ch ABC+脊髓康组Nog-oNgR通路表达水平显著低于模型组(P<0.05),并且干预后Ch ABC+脊髓康组的Nogo-A、NgR、LINGO-1表达水平显著低于Ch ABC组(P<0.05).结论:ChABC联合脊髓康具有更强的促进神经功能恢复的作用,脊髓康的联合使用可进一步抑制HIF-1α 水平而提高TGF-β1水平,提高预后促进脊柱愈合.并且联合用药的作用机制可能与其具有抑制Nogo-NgR信号通路促进神经元生长的作用有关.
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中药"脊髓康"治疗不全瘫患者临床疗效观察
据统计,世界范围内脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的发病率为20～40/100万,常并发于脊柱骨折,约占脊柱骨折的14%.且发生率有逐年上升的趋势,严重影响人们的身体健康."脊髓康"是笔者在近十年的中西医结合临床骨伤科工作中,筛选总结出来的治疗脊髓损伤的经验方,已被临床证实对脊髓损伤中不全瘫患者的功能恢复有明显疗效,能促进脊髓、神经功能的恢复,减少并发症,提高病人生活质量,现报道如下:
